本发明涉及食品或保健食品技术领域，特别涉及一种酵母益生菌活性干细胞的制备及其应用。
背景技术
布拉氏酵母(saccharomycescervisiaeboulardii)是酿酒酵母(saccharomycescervisiae)的亚种菌，是法国科学家亨利(henriboulard)于1920从印尼荔枝等水果中分离的一种非致病性酵母菌。与其他酿酒酵母菌相比，布拉氏酵母菌作为一种益生菌有着明显的优势。布拉氏酵母没有病原性，能在37℃高温下良好生长，并且具有独特的活性，因此，该菌在动物体内存留的时间是普通酿酒酵母的十倍以上；其突出的耐酸，耐高温能力保证了布拉氏酵母菌能够到达作用器官，保证了其在人体内的良好活性。布拉氏酵母菌现已被公认为最为有价值的益生菌之一，被世界许多国家广泛应用于医学临床和畜牧业生产中。在欧美，s.boulardii的主要适用人群包括成人与儿童，对急性腹泻有相当显著的疗效。同时，其制剂应用于畜牧业，可有效降低病原菌和有关毒素的浓度，增强非特异性免疫功能，提高生产性能。作为饲料添加剂的应用已得到包括中国、欧盟在内的世界许多国家的认可。随着人们对健康和生态环境的高度重视及在畜禽养殖中的进一步研究，布拉氏酵母菌在医学和畜牧业中必将有更广阔的应用前景。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种水分含量低、活性酵母细胞总数高的酵母益生菌活性干细胞的制备方法及其应用。
一种酵母益生菌活性干细胞的制备方法，所述酵母益生菌活性干细胞是由酿酒酵母亚种布拉迪酵母(saccharomycescervisiaeboulardii)经发酵、分离、乳化、造粒、干燥及保藏工序制备而成，实验所用菌株分离自“ultralevure”产品，保藏于美国atcc菌库，编号mya-796。
进一步地，所述酵母益生菌活性干细胞制备的具体过程如下：
(1)发酵：
将种子液接入种子罐，控制搅拌速率150rpm，6小时后增加至300rpm，然后32℃培养10-16h；种子罐od值达od600＝7-10左右，发酵罐接种体积比2％-5％，将种子罐内的发酵液压入发酵罐中后，保持32℃培养，搅拌速率150-300rpm，6小时后增加至300-500rpm，无菌空气通气量1.5vvm，控制ph：6.5，补加氨水，培养18h后补加浓度为70％的葡萄糖，补加速度为装液体积比的0.5-1％，维持残糖浓度在0.2％-0.5％左右，发酵至40小时停止补料，菌体保持继续发酵4小时，放罐；
(2)分离：
将发酵液通过碟式离心机离心，转速3000rpm，去除总体积50％-70％的液体；
(3)乳化：
向步骤(2)分离好的发酵液中加入保护剂和乳化剂，搅拌均匀后，存入4℃冷库，过夜储藏；
(4)造粒：
向步骤(3)中的发酵液中加入干重0.5％-1.5％的淀粉，然后采用袋式离心机，滤袋过滤，去掉占总重量60-70％的水分，获得较干的泥状酵母，泥状酵母通过摇摆造粒获得颗粒状酵母泥，摇摆造粒机过筛直径1-3mm；
(5)干燥：
颗粒状酵母泥采用沸腾干燥机干燥，所述沸腾干燥机的进风温度35℃，进风湿度40％-60％，干燥时间为1-3小时。
(6)保藏
所得酵母益生菌活性干细胞粉密封常温保藏，分别在6个月与12个月后取样检测活性酵母细胞数量，检测所得6个月后酵母存活比例在80-90％左右，12个月后残留活性酵母比例在72-83％左右。
进一步地，所述种子液的培养基为：
酵母膏20g/l
酵母浸粉10g/l
葡萄糖50g/l
调节至培养基ph＝6.5。
进一步地，所述发酵液的培养基为：
调节至培养基ph＝6.5。
进一步，所述补料的培养基为：葡萄糖浆700g/l，用氨水调节ph＝6.5。
进一步，所述发酵罐中加入消泡剂：泡敌，加入量为0.1％v/v。
进一步，所述保护剂和乳化剂的比例为：海藻糖＝2.5％-5％；司盘60：＝1％-2％。
进一步，所述淀粉中包括玉米淀粉，土豆淀粉，红薯淀粉和抗性糊精的一种或几种。
进一步，所述酵母益生菌活性干细胞含水量5-7％，活性酵母细胞总数达到100-500亿/克。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
1、活菌数量高：益生菌活菌数达100-500亿/克，通过酿酒酵母(saccharomycescervisiae)的亚种菌布拉氏酵母(saccharomycescervisiaeboulardii)经本发明的发酵工艺制备而成，与其他酿酒酵母菌相比，布拉氏酵母菌在动物体内存留的时间是普通酿酒酵母的十倍以上；其突出的耐酸，耐高温能力保证了布拉氏酵母菌能够到达作用器官，保证了其在人体内的良好活性。
2、含水量较低，易于保存：酵母益生菌活性干细胞含水量低，含水量在5-7％，密封常温保藏，分别在6个月与12个月后取样检测活性酵母细胞数量，检测所得6个月后酵母存活比例在80-90％左右，12个月后残留活性酵母比例在72-83％左右，由此可见该酵母益生菌活性干细胞质量稳定，易于储存和携带服用。
3、安全性高：该酵母益生菌活性干细胞通过酿酒酵母(saccharomycescervisiae)的亚种菌布拉氏酵母(saccharomycescervisiaeboulardii)经本发明的发酵工艺制备而成，不添加任何化学合成物质，安全性高，可放心应用。
4、制备简单：该酵母益生菌活性干细胞的制备工艺方法简单，操作方便，并且没有环境污染。
具体实施方式
以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。
本发明中，实验所用菌种为saccharomycescerevisiaeboulardii，菌株分离自“ultralevure”产品，保藏于美国atcc菌库，编号mya-796；碟式离心机：南京中船绿洲机器有限公司型号drs230；离心机滤袋：200目；分光光度计：上海美普达型号uv-1100；摇摆造粒机：常州双飞制粒干燥设备有限公司型号yk160；沸腾干燥机：常州双飞制粒干燥设备有限公司。
实施例1：一种酵母益生菌活性干细胞
一种酵母益生菌活性干细胞的制备方法，酵母益生菌活性干细胞是由酿酒酵母亚种布拉迪酵母(saccharomycescervisiaeboulardii)经发酵、分离、乳化、造粒、干燥及保藏工序制备而成，实验所用菌种为saccharomycescerevisiaeboulardii，菌株分离自“ultralevure”产品，保藏于美国atcc菌库，编号mya-796，酵母益生菌活性干细胞含水量5-7％，活性酵母细胞总数达到100-500亿/克。
具体发酵过程如下：
先配制发酵过程中需要用到的各种培养基：
采用培养基：酵母膏20g/l；酵母浸粉10g/l；葡萄糖50g/l配制种子液，调节培养基至ph＝6.5。
采用培养基：葡萄糖30g/l；蛋白胨20g/l；酵母浸粉10g/l；磷酸二氢钾2g/l；硫酸铵4g/l；硫酸镁0.5g/l配制发酵液，调节培养基至ph＝6.5。
采用培养基：葡萄糖浆：700g/l以及氨水配制成补料液。
①发酵罐通气流加培养：
将种子液接入种子罐，控制搅拌速率150rpm，6小时后增加至300rpm，32℃培养10-16h。种子罐od值达od600＝7-10左右，发酵罐接种体积比2％-5％，将种子罐内的发酵液压入发酵罐中后，保持32℃培养，搅拌速率150-300rpm，6小时后增加至300-500rpm，无菌空气通气量1.5vvm，控制ph：6.5，加入消泡剂：泡敌0.1％，v/v，补加氨水，培养18h后补加葡萄糖(70％)，补加速度为装液体积比的0.5-1％，维持残糖浓度在0.2％-0.5％左右，发酵至40小时停止补料，菌体保持继续发酵4小时，放罐。
②分离、乳化工序
发酵液通过碟式离心机离心，转速3000rpm，去除总体积50％-70％的液体后，加入保护剂与乳化剂：海藻糖：2.5％-5％，司盘60：1％-2％，搅拌均匀后，存入4℃冷库，过夜储藏，最后加入干重0.5％-1.5％的淀粉，其中，淀粉包括玉米淀粉，土豆淀粉，红薯淀粉和抗性糊精的一种或几种；然后用袋式离心机，滤袋过滤，去掉占总重量60-70％的水分，获得较干的泥状酵母。
③造粒、干燥工序，及活性-时间质量检测。
通过摇摆造粒获得颗粒状酵母泥，摇摆造粒机过筛直径1-3mm。沸腾干燥采取进风温度35℃，进风湿度40％-60％，干燥过程控制在1-3小时。干燥后菌体含水量在5-7％，活性酵母细胞总数达到100-400亿/克左右，所得酵母益生菌活性干细胞粉密封常温保藏，分别在6个月与12个月后取样检测活性酵母细胞数量，检测所得6个月后酵母存活比例在80-90％左右，12个月后残留活性酵母比例在72-83％左右。
实施例2：一种活菌型酵母益生菌粉
所述活菌型酵母益生菌粉由以下组分及其重量分数组成：
结晶果糖/抗性糊精6份，脱脂乳粉8份，酵母益生菌粉15份，低聚果糖30份，麦芽糖醇5份，大米粉4份，燕麦粉5份，固体麦精2份，羧甲基纤维素钠3份，红枣粉5份，酵母β-葡聚糖10份，食用香精1份；
所述酵母益生菌粉为采用实施例1中的制备方法，由s.cerevisiae酿酒酵母发酵而得到的酵母益生菌活性干细胞，成品中添加量500亿cfu/100g。
食用方法：取一袋本品放入150ml左右温水(水温不宜超过50℃)，搅拌均匀后饮用。
产品中还有新资源食品酵母β-葡聚糖，酵母β-葡聚糖因具有最强的免疫刺激力，已成为增强免疫力的安全功能原料，广泛用于食品补充剂和添加剂，由非转基因酵母制造，不添加任何动物成分，其特殊的温和生产工艺，完好地保留了细胞壁结构，无定型葡聚糖更易被肠道中的酶降解，更容易激活巨噬细胞，从而使身体产生更积极的免疫作用，建议每天最大食用量为20袋，孕妇慎用。
该活菌型酵母益生菌粉的营养素参照表如下：
实施例3：含有酵母益生菌的养殖用饲料
含有酵母益生菌的养殖用饲料，可以在常规养殖饲料中直接添加进入酵母益生菌粉，其添加量为组合物总重量的3％-8％；也可以是自行配置营养补充剂，除酵母益生菌粉外，还包括选自微量元素、氨基酸、维生素、以及其他用于动物食品和/或保健食品中的其他添加剂的一种或多种成分。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征及本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。