一步法高效制备鱼肝蛋白和鱼肝油的方法与流程

本发明涉及海洋水产加工技术领域，具体是一种采用亚临界萃取技术一步法从高水分含量的鱼肝中获得鱼肝蛋白粉和鱼肝油的方法。

背景技术

鱼肝中富含丰富的蛋白质，是较好的动物蛋白源，并含大量的不饱和脂肪酸和超氧化物歧化酶，具有广泛的应用价值。超氧化物歧化酶是一种广泛存在于动植物及微生物体内的金属酶，是机体内对抗自由基的第一道防线。超氧化物歧化酶能促使超氧自由基分解，有明显的抗脂质过氧化作用，从而保护细胞和组织不受损伤，消除其对人体的损害。

传统的鱼肝粉的制备方法是通过酶法水解联合冷冻干燥的方式，该方式需额外添加酶，操作繁琐，且冷冻干燥成分高、时间长。

除蛋白质外，鱼肝中还含有丰富的脂肪。鱼肝油中含有丰富的维生素a和维生素d，并且含有较高的n-3系列多不饱和脂肪酸。大量研究表明，n-3系列多不饱和脂肪酸，在抗血小板聚集、抗动脉硬化、抑制肿瘤生长、改善脑功能以及视网膜功能等方面具有良好的生理功效。

传统的鱼肝油生产方法：蒸煮法，提取率较低、鱼肝油过氧化值较高；压榨法，提取率较低，提取时间长，鱼肝油品质较差；水解法，由于所需温度较高，鱼肝油易被氧化，导致品质下降；酶解法，需额外添加酶，成分较高。目前鱼肝油萃取的高新技术为超临界萃取法，但该技术由于压力大，安全性较低，且设备成分和维护成本都较高。

采用添加蛋白絮凝剂的亚临界流体萃取同时从高水分含量的鱼肝中制备鱼肝蛋白粉和油的方法尚未见报道。该技术对于开发利用鱼肝，提高产品附加值，实现零废弃生产，减少环境污染具有重要意义。

例如一种在中国专利文献上公开的一种一种鱼肝油提取物及其制备方法，其申请公布号为cn105985859a，包括萃取、盐析、酸洗、蒸馏、丙酮精制、分子蒸馏、柱层析、冷冻分离等步骤，去除鱼肝油提取物中的蛋白质、脂肪酸(游离脂肪酸、固体脂肪酸)、矿物质、不皂化物、磷脂、多肽、低沸点溶剂、胆固醇、多氯联苯、碳化物、大极性物质等杂质，脱色并提高不饱和脂肪酸的含量，从而制得高质量的鱼肝油提取物。本发明的鱼肝油提取物中的成分及其配比合理，成分之间具有协同增效作用，显著增加了鱼肝油制剂的有效性和安全性。但是其也存在着许多的问题，例如其制备方法中的步骤较多且较为复杂，因此其加工难度较大，同时经过其中的盐析、酸洗、蒸馏、丙酮精制等步骤鱼油中的有效成分有可能会变性，从而使得鱼肝油品质较差，同时对环境也不友好。

技术实现要素：

本发明目的是提供一种一步法安全高效制备鱼肝蛋白粉和鱼肝油的方法，保证产品质量稳定的同时，提高产品纯度和安全性，旨在提供一种采用新型、简单、高效的鱼肝蛋白粉和鱼肝油的制备方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一步法高效制备鱼肝蛋白和鱼肝油的方法，所述的鱼肝蛋白粉和鱼肝油是按如下方法制备得到的

（1）鱼肝原料：新鲜鱼肝或冻藏状态下的未经任何处理的原始鱼肝，解冻后用于后续步骤；

（2）压轧：将步骤（1）所得的鱼肝，利用压轧机轧成0.5mm~20mm的薄片；

（3）取步骤（2）所得鱼肝薄片，对鱼肝薄片进行加热，加热温度为45~100℃，保温1~20min，使鱼肝蛋白质热变性；

（4）超临界胶束萃取形成：在步骤（3）所得鱼肝中加入0.001~1.0wt%鱼肝质量的表面活性剂以形成超临界胶束体系；

（5）装料：将步骤（4）处理后的鱼肝装入套好网筛的支架中，所述的网筛为20~200目，密封安置在萃取设备中的萃取罐中；

（6）萃取：启动萃取设备，对鱼肝进行萃取；

（7）絮凝：打开阀门13在单次萃取5~30min后加入鱼肝质量0.001~0.3wt%的蛋白絮凝剂；

（8）超临界胶束的反萃：向萃取装置中加入0.2wt%低碳醇溶剂；

（9）萃取剂脱除：萃取结束后，脱除萃取设备中的萃取剂；

（10）循环：重复步骤（6）~（9），循环萃取0~5次；

（11）鱼肝蛋白粉的收集：经步骤（10）对萃取残留物进行脱溶后，打开萃取罐，收集萃取残留物，该残留物即为鱼肝蛋白粉；

（12）鱼肝油的分离：对步骤（9）所得油水混合产物进行离心处理，离心转速为2000~8000rpm，离心时间为0.5~20min，收集离心后所得物的上层液体，该收集物即为粗鱼肝油；

（13）粗鱼肝油精炼：经步骤（12）所得的粗鱼肝油，采用常规的脱胶、脱酸、脱色工艺，可得精炼的高品质鱼肝油。

本发明中的步骤（3）的目的是使蛋白变性，如果缺少步骤（3），步骤（8）所得产物将是乳化液，则无法通过步骤（11）获得鱼肝油。

本发明中的萃取装置包括萃取部分以及萃取剂脱除部分，其结构如说明书附图中的图1所示，所述的括萃取部分包括一个储液罐33、量液罐22、萃取罐23、第一循环热水25、夹带剂罐32以及搅拌机26，所述的萃取剂脱除部分包括一个真空泵21、蒸发罐24、第二循环热水30、缓冲罐29、第三循环热水31，所述的萃取装置还包括一个压缩机27以及冷凝器28，所述的萃取装置中的各个组件其通过第一阀门1、第二阀门2、第三阀门3、第四阀门4、第五阀门5、第六阀门6、第七阀门7、第八阀门8、第九阀门9、第十阀门10、第十一阀门11、第十二阀门12、第十三阀门13以及第十四阀门14相互之间管路连接，其连接结构如图所示。

作为优选，所述的步骤（4）中表面活性剂为聚甘油脂肪酸酯、双乙酰酒石酸单双甘油酯中的一种或两种混合物，当为混合物时其各组分构成的质量比为0.001~3:0.002~4。

作为优选，所述的步骤（4）中表面活性剂优选添加量为鱼肝质量的0.003~0.5wt%，所述表面活性剂为聚甘油脂肪酸酯与双乙酰酒石酸单双甘油酯质量比1~2:4的组合物。

作为优选，所述的步骤（5）中，网筛的目数为60~100目。

作为优选，所述的步骤（6）中的萃取步骤如下：打开第九阀门，启动真空泵，再打开第二阀门、第四阀门、第五阀门，对量液罐、萃取罐和蒸发罐进行抽真空，当萃取罐真空度降至0~0.1mpa后依次关闭第二阀门、第四阀门，同时当蒸发罐真空度降至0~0.1mpa后关闭第五阀门；最后关闭真空泵，完成量液罐、萃取罐、蒸发罐抽真空；抽真空后，缓慢打开第一阀门，萃取剂从储液罐进入量液罐，待萃取剂到达指定刻度后，关闭第一阀门；随后缓慢打开第二阀门，萃取剂从量液罐进入萃取罐后，马上关闭第二阀门；开启第一循环热水，热水流入、流出萃取罐夹层，对萃取罐进行水浴加热；同时开启搅拌机，转动搅拌桨，萃取鱼肝油。

作为优选，所述的萃取剂为丙烷、丁烷、二甲醚、二氧化碳的一种或多种气体组合；循环热水为30~60℃；萃取时间为20~60min；搅拌速度20~1500rpm。

作为优选，所述的萃取剂为二甲醚与丁烷的混合气，其体积比为3:2~9；萃取剂的质量为鱼肝的5~25倍；循环热水优选35~45℃；单次萃取时间优选30~45min；搅拌速度优选100~1000rpm。

作为优选，所述的步骤（7）中的絮凝剂为壳聚糖、单宁酸、海藻酸钠、果胶中的一种或多种以上组合物，构成质量比为6:0~15:0~10:0~8，优选为添加量为0.005wt%~0.25wt%。作为优选，所述的步骤（7）中的絮凝剂为壳聚糖、单宁酸与海藻酸钠的组合物，其各组分的质量比为6:10~15:7~10。

作为优选，所述的步骤（8）中低碳醇溶液为乙醇、异丙醇、正丙醇、正丁醇的一种。

作为优选，所述的步骤（8）中低碳醇溶液为乙醇

作为优选，所述的步骤（9）中的萃取剂脱除步骤如下：打开阀门，混有鱼肝油的萃取剂流入蒸发罐；随后开启压缩机，同时冷凝器通入冷却水；紧接着打开第十阀门、第十一阀门、第十二阀门，再缓慢打开第七阀门，使蒸发的萃取剂进入缓冲罐；压缩一段时间后，当萃取罐和蒸发罐压强小于0.1mpa后依次关闭阀门、第七阀门；然后先关闭第九阀门，再打开第八阀门，开启真空泵，打开第四阀门、第五阀门，待萃取罐与蒸发罐与大气压之间的压力差降至0mpa后，依次关闭第四阀门、第五阀门、关闭真空泵、第八阀门，压缩机再工作一段时间后，同时依次关闭第十阀门、第十一阀门、压缩机、第十二阀门，停止通入冷却水，打开第六阀门，收集油水混合萃取产物后，关闭第六阀门。

作为优选，所述的步骤（10）中的循环萃取次数为1~3次。

因此，本发明具有以下有益效果：

（1）经一次亚临界流体萃取后，可同时得到鱼肝蛋白粉和鱼肝油，大大提高生产效率；

（2）鱼肝原料无需脱水处理，直接进行油脂萃取，提高生产效率且保护原料中的营养成分；

（3）采用亚临界流体技术进行萃取，具有恒温萃取、低温脱溶的特点，属于非热加工，且在无氧的条件下完成整个萃取过程，最大限度地保持了鱼肝中维生素a、维生素d、epa和dha等热敏性成分不氧化，产品质量好；

（4）该萃取过程中，萃取压力均低于1.1mpa，安全性高且成分低。

附图说明

图1为鱼肝蛋白以及鱼肝油萃取装置简图。

图2为鱼肝蛋白以及鱼肝油萃取流程图。

其中：第一阀门1、第二阀门2、第三阀门3、第四阀门4、第五阀门5、第六阀门6、第七阀门7、第八阀门8、第九阀门9、第十阀门10、第十一阀门11、第十二阀门12、第十三阀门13、第十四阀门14、真空泵21、量液罐22、萃取罐23、蒸发罐24、第一循环热水25、搅拌机26、压缩机27、冷凝器28、缓冲罐29、第二循环热水30、第三循环热水31、夹带剂罐32、储液罐33。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步的阐述，但是本发明的保护范围并不仅限于此。

实施例1：

如图1所示，本发明中的萃取装置包括萃取部分以及萃取剂脱除部分，所述的括萃取部分包括一个储液罐33、量液罐22、萃取罐23、第一循环热水25、夹带剂罐32以及搅拌机26，所述的萃取剂脱除部分包括一个真空泵21、蒸发罐24、第二循环热水30、缓冲罐29、第三循环热水31，所述的萃取装置还包括一个压缩机27以及冷凝器28，所述的萃取装置中的各个组件其通过第一阀门1、第二阀门2、第三阀门3、第四阀门4、第五阀门5、第六阀门6、第七阀门7、第八阀门8、第九阀门9、第十阀门10、第十一阀门11、第十二阀门12、第十三阀门13以及第十四阀门14相互之间管路连接，其连接结构如图所示。

一步法高效制备鱼肝蛋白和鱼肝油的方法，所述的鱼肝蛋白粉和鱼肝油是按如图2中所示的步骤制备得到的，其具体步骤如下：

（1）鱼肝原料：取冻藏状态下的未经任何处理的原始鱼肝，进行流水解冻；

（2）压轧：将步骤（1）所得的鱼肝，利用压轧机轧成厚度为10mm的薄片；

（3）蒸煮：取步骤（2）所得鱼肝薄片，搁置于蒸箱上，设置温度80℃对鱼肝薄片进行加热保温8min，使鱼肝蛋白质热变性；

（4）超临界胶束萃取形成：在步骤（3）所得鱼肝中加入0.3%鱼肝质量的表面活性剂双乙酰酒石酸单双甘油酯以形成超临界胶束体系；

（5）装料：将步骤（4）处理后的鱼肝装入套好200目尼龙网筛的支架中，安置在萃取罐23中，盖上带有搅拌转头的萃取盖，拧紧密封；

（6）萃取：打开第九阀门9，启动真空泵21，再打开第二阀门2、第四阀门4、第五阀门5，对量液罐22、萃取罐23和蒸发罐24进行抽真空，当萃取罐23真空度降至0~0.1mpa后依次关闭第二阀门2、第四阀门4，同时当蒸发罐24真空度降至0~0.1mpa后关闭第五阀门5；最后关闭真空泵21，完成量液罐22、萃取罐23、蒸发罐24抽真空；抽真空后，缓慢打开第一阀门1，利用量液罐22量取20倍鱼肝质量的萃取剂，其组成为二甲醚与丁烷体积比为3:2的混合气，关闭第一阀门1；随后缓慢打开第二阀门2，萃取剂从量液罐22进入萃取罐23后，马上关闭第二阀门2；开启第一循环热水25，热水流入、流出萃取罐23夹层，对萃取罐23进行水浴加热的同时开启搅拌机26。分别设置转速为1500rpm、萃取的水浴温度为40℃，萃取30min；

（7）絮凝：打开第十三阀门13在单次萃取15min后加入鱼肝质量0.12wt%的蛋白絮凝剂，所述絮凝剂为壳聚糖与海藻酸钠质量比为6:5的组合物；

（8）超临界胶束的反萃：继续在夹带剂罐32中加入0.2wt%正丙醇溶剂，随后关闭第十三阀门13再缓慢打开第十四阀门14，将夹带剂罐32中的试剂流入至萃取罐23中；

（9）萃取剂脱除：萃取结束后，打开第三阀门3，混有鱼肝油的萃取剂流入蒸发罐24；随后开启压缩机27，同时冷凝器28通入冷却水；紧接着打开第十阀门10、第十一阀门11、第十二阀门12，再缓慢打开阀门7，使蒸发的萃取剂进入缓冲罐；压缩一段时间后，当萃取罐23和蒸发罐24压强小于0.1mpa后依次关闭第三阀门3、阀门7；然后先关闭第九阀门9，再打开第八阀门8，开启真空泵21，打开第四阀门4、第五阀门5，待萃取罐23与蒸发罐24与大气压之间的压力差降至0mpa后，依次关闭第四阀门4、第五阀门5、关闭真空泵21、第八阀门8，压缩机27再工作一段时间后，同时依次关闭第十阀门10、第十一阀门11、压缩机27、第十二阀门12，停止通入冷却水，打开第六阀门6，收集油水混合萃取产物后，关闭第六阀门6，所用的冷却水温度为10℃；压缩机27脱溶回收萃取剂的工作时间为45min；真空泵21与压缩机27联动脱除残留萃取剂时间为5min。所用的蒸发罐24、缓冲罐29设有夹层，分别通过开启第二循环热水30、第三循环热水31，将热水流进、流出罐夹层进行水浴加热，加速萃取剂蒸发，热水温度为45℃；

（10）循环：重复步骤6~9，循环萃取1次；

（11）鱼肝蛋白粉的收集：经步骤（10）对萃取残留物进行萃取剂脱除后，打开萃取罐23，收集萃取残留物，该残留物即为鱼肝蛋白粉，可根据不同目的进行不同的后续加工；

（12）鱼肝油的分离：对步骤9所得粗产物进行离心处理，离心转速为5000rpm，离心时间为15min，收集离心后所得物的上层液体，该收集物即为粗鱼肝油；

（13）粗鱼肝油精炼：经步骤12所得的粗鱼肝油，采用常规的脱胶、脱酸、脱色工艺，可得精炼的高品质鱼肝油。

本实施案例中，所萃取的油脂的得率为11.25%，主要的理化指标：酸价：1.76mg(koh)/g，过氧化值：2.01mmol/kg，碘值：146.46g/100g，水分及挥发物：0.81%、不皂化物：1.97%。

实施例2：

如图1所示，本发明中的萃取装置包括萃取部分以及萃取剂脱除部分，所述的括萃取部分包括一个储液罐33、量液罐22、萃取罐23、第一循环热水25、夹带剂罐32以及搅拌机26，所述的萃取剂脱除部分包括一个真空泵21、蒸发罐24、第二循环热水30、缓冲罐29、第三循环热水31，所述的萃取装置还包括一个压缩机27以及冷凝器28，所述的萃取装置中的各个组件其通过第一阀门1、第二阀门2、第三阀门3、第四阀门4、第五阀门5、第六阀门6、第七阀门7、第八阀门8、第九阀门9、第十阀门10、第十一阀门11、第十二阀门12、第十三阀门13以及第十四阀门14相互之间管路连接，其连接结构如图所示。

一步法高效制备鱼肝蛋白和鱼肝油的方法，所述的鱼肝蛋白粉和鱼肝油是按如图2中所示的步骤制备得到的，其具体步骤如下：

（1）鱼肝原料：取冻藏状态下的未经任何处理的原始鱼肝，进行流水解冻；

（2）压轧：将步骤（1）所得的鱼肝，利用压轧机轧成厚度为15mm的薄片；

（3）蒸煮：取步骤（2）所得鱼肝薄片，搁置于蒸箱上，设置温度70℃对鱼肝薄片进行加热保温16min，使鱼肝蛋白质热变性；

（4）超临界胶束萃取形成：在步骤（3）所得鱼肝中加入鱼肝质量0.5%的表面活性剂聚甘油脂肪酸酯以形成超临界胶束体系；

（5）装料：将步骤（4）处理后的鱼肝装入套好100目尼龙网筛的支架中，安置在萃取罐23中，盖上带有搅拌转头的萃取盖，拧紧密封；

（6）萃取：打开第九阀门9，启动真空泵21，再打开第二阀门2、第四阀门4、第五阀门5，对量液罐22、萃取罐23和蒸发罐24进行抽真空，当萃取罐23真空度降至0~0.1mpa后依次关闭第二阀门2、第四阀门4，同时当蒸发罐24真空度降至0~0.1mpa后关闭第五阀门5；最后关闭真空泵21，完成量液罐22、萃取罐23、蒸发罐24抽真空，抽真空后，缓慢打开第一阀门1，利用量液罐22量取30倍鱼肝质量的萃取剂，其组成为丁烷与二氧化碳体积比为9:1的混合气，关闭第一阀门1；随后缓慢打开第二阀门2，萃取剂从量液罐22进入萃取罐23后，马上关闭第二阀门2；开启第一循环热水25，热水流入、流出萃取罐23夹层，对萃取罐23进行水浴加热的同时开启搅拌机26。分别设置转速为1000rpm、萃取的水浴温度为50℃，萃取45min；

（7）絮凝：打开第十三阀门13在单次萃取15min后加鱼肝质量的0.2wt%的蛋白絮凝剂，所述絮凝剂为壳聚糖与果胶质量比为3:2的组合物；

（8）超临界胶束的反萃：继续在夹带剂罐32中加入0.2wt%异丙醇溶剂，随后关闭第十三阀门13再缓慢打开第十四阀门14，将夹带剂罐32中的试剂流入至萃取罐23中；

（9）萃取剂脱除：萃取结束后，打开第三阀门3，混有鱼肝油的萃取剂流入蒸发罐24；随后开启压缩机27，同时冷凝器28通入冷却水；紧接着打开第十阀门10、第十一阀门11、第十二阀门12，再缓慢打开阀门7，使蒸发的萃取剂进入缓冲罐29；压缩一段时间后，当萃取罐23和蒸发罐24压强小于0.1mpa后依次关闭第三阀门3、阀门7；然后先关闭第九阀门9，再打开第八阀门8，开启真空泵21，打开第四阀门4、第五阀门5，待萃取罐23与蒸发罐24与大气压之间的压力差降至0mpa后，依次关闭第四阀门4、第五阀门5、关闭真空泵21、第八阀门8。压缩机27再工作一段时间后，同时依次关闭第十阀门10、第十一阀门11、压缩机27、第十二阀门12，停止通入冷却水。打开第六阀门6，收集油水混合萃取产物后，关闭第六阀门6。所用的冷却水温度为8℃；压缩机27脱溶回收萃取剂的工作时间为50min；真空泵21与压缩机27联动脱除残留萃取剂时间为3min。所用的蒸发罐24、缓冲罐29设有夹层，分别通过开启第二循环热水30、第三循环热水31，将热水流进、流出罐夹层进行水浴加热，加速萃取剂蒸发，热水温度为40℃；

（10）循环：重复步骤6~9，循环萃取2次；

（11）鱼肝蛋白粉的收集：经步骤（10）对萃取残留物进行萃取剂脱除后，打开萃取罐23，收集萃取残留物，该残留物即为鱼肝蛋白粉，可根据不同目的可进行不同的后续加工；

（11）鱼肝油的分离：对步骤9所得粗产物进行离心处理，离心转速为8000rpm，离心时间为12min，收集离心后所得物的上层液体，该收集物即为粗鱼肝油；

（13）粗鱼肝油精炼：经步骤12所得的粗鱼肝油，采用常规的脱胶、脱酸、脱色工艺，可得精炼的高品质鱼肝油。

本实施案例中，所萃取的油脂的得率为10.07%，主要的理化指标：酸价：1.64mg(koh)/g，过氧化值：2.31mmol/kg，碘值：148.46g/100g，水分及挥发物：0.73%、不皂化物：1.64%。

实施例3：

如图1所示，本发明中的萃取装置包括萃取部分以及萃取剂脱除部分，所述的括萃取部分包括一个储液罐33、量液罐22、萃取罐23、第一循环热水25、夹带剂罐32以及搅拌机26，所述的萃取剂脱除部分包括一个真空泵21、蒸发罐24、第二循环热水30、缓冲罐29、第三循环热水31，所述的萃取装置还包括一个压缩机27以及冷凝器28，所述的萃取装置中的各个组件其通过第一阀门1、第二阀门2、第三阀门3、第四阀门4、第五阀门5、第六阀门6、第七阀门7、第八阀门8、第九阀门9、第十阀门10、第十一阀门11、第十二阀门12、第十三阀门13以及第十四阀门14相互之间管路连接，其连接结构如图所示。

一步法高效制备鱼肝蛋白和鱼肝油的方法，所述的鱼肝蛋白粉和鱼肝油是按如图2中所示的步骤制备得到的，其具体步骤如下：

（1）鱼肝原料：取冻藏状态下的未经任何处理的原始鱼肝，进行流水解冻；

（2）压轧：将步骤（1）所得的鱼肝，利用压轧机轧成厚度为5mm的薄片；

（3）蒸煮：取步骤（2）所得鱼肝薄片，搁置于蒸箱上，设置温度65℃对鱼肝薄片进行加热20min，使鱼肝蛋白质热变性；

（4）超临界胶束萃取形成：在步骤（3）所得鱼肝中加入鱼肝质量0.8%的混合表面活性剂以形成超临界胶束体系，其组成为聚甘油脂肪酸酯与双乙酰酒石酸单双甘油酯质量比为1:2的混合物；

（5）装料：将步骤（4）处理后的鱼肝装入套好80目尼龙网筛的支架中，安置在萃取罐23中，盖上带有搅拌转头的萃取盖，拧紧密封；

（6）萃取：打开第九阀门9，启动真空泵21，再打开第二阀门2、第四阀门4、第五阀门5，对量液罐22、萃取罐23和蒸发罐24进行抽真空，当萃取罐23真空度降至0~0.1mpa后依次关闭第二阀门2、第四阀门4，同时当蒸发罐24真空度降至0~0.1mpa后关闭第五阀门5；最后关闭真空泵21，完成量液罐22、萃取罐23、蒸发罐24抽真空；抽真空后，缓慢打开第一阀门1，利用量液罐22量取8倍鱼肝质量的萃取剂，其组成为二甲醚与丙烷体积比为3:5的混合气，关闭第一阀门1；随后缓慢打开第二阀门2，萃取剂从量液罐22进入萃取罐23后，马上关闭第二阀门2；开启第一循环热水25，热水流入、流出萃取罐23夹层，对萃取罐23进行水浴加热的同时开启搅拌机26。分别设置转速为750rpm、萃取的水浴温度为30℃，萃取45min；

（7）絮凝：打开第十三阀门13在单次萃取15min后加入鱼肝质量0.3wt%的蛋白絮凝剂，所述絮凝剂为壳聚糖与单宁酸质量比为2:5的组合物；

（8）超临界胶束的反萃：继续在夹带剂罐32中加入0.2wt%正丁醇溶剂，随后关闭第十三阀门13再缓慢打开第十四阀门14，将夹带剂罐32中的试剂流入至萃取罐23中；

（9）萃取剂脱除：萃取结束后，打开第三阀门3，混有鱼肝油的萃取剂流入蒸发罐24；随后开启压缩机27，同时冷凝器28通入冷却水；紧接着打开第十阀门10、第十一阀门11、第十二阀门12，再缓慢打开阀门7，使蒸发的萃取剂进入缓冲罐29；压缩一段时间后，当萃取罐23和蒸发罐24压强小于0.1mpa后依次关闭第三阀门3、阀门7；然后先关闭第九阀门9，再打开第八阀门8，开启真空泵21，打开第四阀门4、第五阀门5，待萃取罐23与蒸发罐24与大气压之间的压力差降至0mpa后，依次关闭第四阀门4、第五阀门5、关闭真空泵21、第八阀门8。压缩机27再工作一段时间后，同时依次关闭第十阀门10、第十一阀门11、压缩机27、第十二阀门12，停止通入冷却水。打开第六阀门6，收集油水混合萃取产物后，关闭第六阀门6。所用的冷却水温度为8℃；压缩机27脱溶回收萃取剂的工作时间为55min；真空泵21与压缩机27联动脱除残留萃取剂时间为2min。所用的蒸发罐24、缓冲罐29设有夹层，分别通过开启第二循环热水30、第三循环热水31，将热水流进、流出罐夹层进行水浴加热，加速萃取剂蒸发，热水温度为35℃；

（10）循环：重复步骤6~9，循环萃取2次；

（11）鱼肝蛋白粉的收集：经步骤（10）对萃取残留物进行萃取剂脱除后，打开萃取罐23，收集萃取残留物，该残留物即为鱼肝蛋白粉，可根据不同目的可进行不同的后续加工；

（12）鱼肝油的分离：对步骤（9）所得粗产物进行离心处理，离心转速为9000rpm，离心时间为10min，收集离心后所得物的上层液体，该收集物即为粗鱼肝油；

（13）粗鱼肝油精炼：经步骤（12）所得的粗鱼肝油，采用常规的脱胶、脱酸、脱色工艺，可得精炼的高品质鱼肝油。

本实施案例中，所萃取的油脂的得率为11.64%，主要的理化指标：酸价：1.96mg(koh)/g，过氧化值：2.05mmol/kg，碘值：147.52g/100g，水分及挥发物：0.81%、不皂化物：1.58%。

实施例4：

如图1所示，本发明中的萃取装置包括萃取部分以及萃取剂脱除部分，所述的括萃取部分包括一个储液罐33、量液罐22、萃取罐23、第一循环热水25、夹带剂罐32以及搅拌机26，所述的萃取剂脱除部分包括一个真空泵21、蒸发罐24、第二循环热水30、缓冲罐29、第三循环热水31，所述的萃取装置还包括一个压缩机27以及冷凝器28，所述的萃取装置中的各个组件其通过第一阀门1、第二阀门2、第三阀门3、第四阀门4、第五阀门5、第六阀门6、第七阀门7、第八阀门8、第九阀门9、第十阀门10、第十一阀门11、第十二阀门12、第十三阀门13以及第十四阀门14相互之间管路连接，其连接结构如图所示。

一步法高效制备鱼肝蛋白和鱼肝油的方法，所述的鱼肝蛋白粉和鱼肝油是按如图2中所示的步骤制备得到的，其具体步骤如下：

（1）鱼肝原料：取冻藏状态下的未经任何处理的原始鱼肝，进行流水解冻；

（2）压轧：将步骤（1）所得的鱼肝，利用压轧机轧成厚度为8mm的薄片；

（3）蒸煮：取步骤（2）所得鱼肝薄片，搁置于蒸箱上，设置温度75℃对鱼肝薄片进行加热保温10min，使鱼肝蛋白质热变性；

（4）超临界胶束萃取形成：在步骤（3）所得鱼肝加入鱼肝质量0.45%的混合表面活性剂以形成超临界胶束体系，其组成为聚甘油脂肪酸酯与双乙酰酒石酸单双甘油酯质量比为1:2的混合物；

（5）装料：将步骤（4）处理后的鱼肝装入套好60目尼龙网筛的支架中，安置在萃取罐23中，盖上带有搅拌转头的萃取盖，拧紧密封；

（6）萃取：打开第九阀门9，启动真空泵21，再打开第二阀门2、第四阀门4、第五阀门5，对量液罐22、萃取罐23和蒸发罐24进行抽真空，当萃取罐23真空度降至0~0.1mpa后依次关闭第二阀门2、第四阀门4，同时当蒸发罐24真空度降至0~0.1mpa后关闭第五阀门5；最后关闭真空泵21，完成量液罐22、萃取罐23、蒸发罐24抽真空；抽真空后，缓慢打开第一阀门1，利用量液罐22量取3鱼肝质量的萃取剂，其组成为二甲醚与二氧化碳体积比为2:3的混合气，关闭第一阀门1；随后缓慢打开第二阀门2，萃取剂从量液罐22进入萃取罐23后，马上关闭第二阀门2；开启第一循环热水25，热水流入、流出萃取罐23夹层，对萃取罐23进行水浴加热的同时开启搅拌机26。分别设置转速为1250rpm、萃取的水浴温度为60℃，萃取30min；

（7）絮凝：打开第十三阀门13在单次萃取15min后加入鱼肝质量0.25wt%的絮凝剂，所述絮凝剂为壳聚糖、单宁酸与海藻酸钠的组合物，其各组分质量比为3:6:4；

（8）超临界胶束的反萃：继续在夹带剂罐32中加入0.2wt%乙醇溶剂，随后关闭第十三阀门13再缓慢打开第十四阀门14，将夹带剂罐32中的试剂流入至萃取罐23中；

（9）萃取剂脱除：萃取结束后，打开第三阀门3，混有鱼肝油的萃取剂流入蒸发罐24；随后开启压缩机27，同时冷凝器28通入冷却水；紧接着打开第十阀门10、第十一阀门11、第十二阀门12，再缓慢打开阀门7，使蒸发的萃取剂进入缓冲罐29；压缩一段时间后，当萃取罐23和蒸发罐24压强小于0.1mpa后依次关闭第三阀门3、阀门7；然后先关闭第九阀门9，再打开第八阀门8，开启真空泵21，打开第四阀门4、第五阀门5，待萃取罐23与蒸发罐24与大气压之间的压力差降至0mpa后，依次关闭第四阀门4、第五阀门5、关闭真空泵21、第八阀门8。压缩机27再工作一段时间后，同时依次关闭第十阀门10、第十一阀门11、压缩机27、第十二阀门12，停止通入冷却水。打开第六阀门6，收集油水混合萃取产物后，关闭第六阀门6。所用的冷却水温度为12℃；压缩机27脱溶回收萃取剂的工作时间为60min；真空泵21与压缩机27联动脱除残留萃取剂时间为3.5min。所用的蒸发罐24、缓冲罐29设有夹层，分别通过开启第二循环热水30、第三循环热水31，将热水流进、流出罐夹层进行水浴加热，加速萃取剂蒸发，热水温度为30℃；

（10）循环：重复步骤6~9，循环萃取3次；

（11）鱼肝蛋白粉的收集：经步骤（10）对萃取残留物进行萃取剂脱除后，打开萃取罐23，收集萃取残留物，该残留物即为鱼肝蛋白粉，可根据不同目的可进行不同的后续加工；

（12）鱼肝油的分离：对步骤（9）所得粗产物进行离心处理，离心转速为1000rpm，离心时间为8min，收集离心后所得物的上层液体，该收集物即为粗鱼肝油；

（13）粗鱼肝油精炼：经步骤（12）所得的粗鱼肝油，采用常规的脱胶、脱酸、脱色工艺，可得精炼的高品质鱼肝油

本实施案例中，所萃取的油脂的得率为17.44%，主要的理化指标：酸价：1.96mg(koh)/g，过氧化值：2.05mmol/kg，碘值：147.52g/100g，水分及挥发物：0.81%、不皂化物：1.58%。

实施例5：

如图1所示，本发明中的萃取装置包括萃取部分以及萃取剂脱除部分，所述的括萃取部分包括一个储液罐33、量液罐22、萃取罐23、第一循环热水25、夹带剂罐32以及搅拌机26，所述的萃取剂脱除部分包括一个真空泵21、蒸发罐24、第二循环热水30、缓冲罐29、第三循环热水31，所述的萃取装置还包括一个压缩机27以及冷凝器28，所述的萃取装置中的各个组件其通过第一阀门1、第二阀门2、第三阀门3、第四阀门4、第五阀门5、第六阀门6、第七阀门7、第八阀门8、第九阀门9、第十阀门10、第十一阀门11、第十二阀门12、第十三阀门13以及第十四阀门14相互之间管路连接，其连接结构如图所示。

一步法高效制备鱼肝蛋白和鱼肝油的方法，所述的鱼肝蛋白粉和鱼肝油是按如图2中所示的步骤制备得到的，其具体步骤如下：

（1）鱼肝原料：取冻藏状态下的未经任何处理的原始鱼肝，进行流水解冻；

（2）压轧：将步骤（1）所得的鱼肝，利用压轧机轧成厚度为20mm的薄片；

（3）蒸煮：取步骤（2）所得鱼肝薄片，搁置于蒸箱上，设置温度80℃对鱼肝薄片进行加热保温8min，使鱼肝蛋白质热变性；

（4）超临界胶束萃取形成：在步骤（3）所得鱼肝中加入0.001%鱼肝质量的表面活性剂双乙酰酒石酸单双甘油酯以形成超临界胶束体系；

（5）装料：将步骤（4）处理后的鱼肝装入套好20目尼龙网筛的支架中，安置在萃取罐23中，盖上带有搅拌转头的萃取盖，拧紧密封；

（6）萃取：打开第九阀门9，启动真空泵21，再打开第二阀门2、第四阀门4、第五阀门5，对量液罐22、萃取罐23和蒸发罐24进行抽真空，当萃取罐23真空度降至0~0.1mpa后依次关闭第二阀门2、第四阀门4，同时当蒸发罐24真空度降至0~0.1mpa后关闭第五阀门5；最后关闭真空泵21，完成量液罐22、萃取罐23、蒸发罐24抽真空；抽真空后，缓慢打开第一阀门1，利用量液罐22量取20倍鱼肝质量的萃取剂，其组成为二甲醚与丁烷体积比为3:9的混合气，关闭第一阀门1；随后缓慢打开第二阀门2，萃取剂从量液罐22进入萃取罐23后，马上关闭第二阀门2；开启第一循环热水25，热水流入、流出萃取罐23夹层，对萃取罐23进行水浴加热的同时开启搅拌机26。分别设置转速为100rpm、萃取的水浴温度为45℃，萃取60min；

（7）絮凝：打开第十三阀门13在单次萃取15min后加入鱼肝质量0.001wt%的蛋白絮凝剂，所述絮凝剂为壳聚糖与海藻酸钠质量比为1:5的组合物；

（8）超临界胶束的反萃：继续在夹带剂罐32中加入0.2wt%正丁醇溶剂，随后关闭第十三阀门13再缓慢打开第十四阀门14，将夹带剂罐32中的试剂流入至萃取罐23中；

（9）萃取剂脱除：萃取结束后，打开第三阀门3，混有鱼肝油的萃取剂流入蒸发罐24；随后开启压缩机27，同时冷凝器28通入冷却水；紧接着打开第十阀门10、第十一阀门11、第十二阀门12，再缓慢打开阀门7，使蒸发的萃取剂进入缓冲罐29；压缩一段时间后，当萃取罐23和蒸发罐24压强小于0.1mpa后依次关闭第三阀门3、阀门7；然后先关闭第九阀门9，再打开第八阀门8，开启真空泵21，打开第四阀门4、第五阀门5，待萃取罐23与蒸发罐24与大气压之间的压力差降至0mpa后，依次关闭第四阀门4、第五阀门5、关闭真空泵21、第八阀门8，压缩机27再工作一段时间后，同时依次关闭第十阀门10、第十一阀门11、压缩机27、第十二阀门12，停止通入冷却水，打开第六阀门6，收集油水混合萃取产物后，关闭第六阀门6，所用的冷却水温度为10℃；压缩机27脱溶回收萃取剂的工作时间为45min；真空泵21与压缩机27联动脱除残留萃取剂时间为5min。所用的蒸发罐24、缓冲罐29设有夹层，分别通过开启第二循环热水30、第三循环热水31，将热水流进、流出罐夹层进行水浴加热，加速萃取剂蒸发，热水温度为45℃；

（10）循环：重复步骤6~9，循环萃取1次；

（11）鱼肝蛋白粉的收集：经步骤（10）对萃取残留物进行萃取剂脱除后，打开萃取罐23，收集萃取残留物，该残留物即为鱼肝蛋白粉，可根据不同目的进行不同的后续加工；

（12）鱼肝油的分离：对步骤（9）所得粗产物进行离心处理，离心转速为2000rpm，离心时间为20min，收集离心后所得物的上层液体，该收集物即为粗鱼肝油；

（13）粗鱼肝油精炼：经步骤（12）所得的粗鱼肝油，采用常规的脱胶、脱酸、脱色工艺，可得精炼的高品质鱼肝油。

本实施案例中，所萃取的油脂的得率为11.25%，主要的理化指标：酸价：1.76mg(koh)/g，过氧化值：2.08mmol/kg，碘值：146.52g/100g，水分及挥发物：0.88%、不皂化物：1.98%。

实施例6：

如图1所示，本发明中的萃取装置包括萃取部分以及萃取剂脱除部分，所述的括萃取部分包括一个储液罐33、量液罐22、萃取罐23、第一循环热水25、夹带剂罐32以及搅拌机26，所述的萃取剂脱除部分包括一个真空泵21、蒸发罐24、第二循环热水30、缓冲罐29、第三循环热水31，所述的萃取装置还包括一个压缩机27以及冷凝器28，所述的萃取装置中的各个组件其通过第一阀门1、第二阀门2、第三阀门3、第四阀门4、第五阀门5、第六阀门6、第七阀门7、第八阀门8、第九阀门9、第十阀门10、第十一阀门11、第十二阀门12、第十三阀门13以及第十四阀门14相互之间管路连接，其连接结构如图所示。

一步法高效制备鱼肝蛋白和鱼肝油的方法，所述的鱼肝蛋白粉和鱼肝油是按如图2中所示的步骤制备得到的，其具体步骤如下：

（1）鱼肝原料：取冻藏状态下的未经任何处理的原始鱼肝，进行流水解冻；

（2）压轧：将步骤（1）所得的鱼肝，利用压轧机轧成厚度为0.5mm的薄片；

（3）蒸煮：取步骤（2）所得鱼肝薄片，搁置于蒸箱上，设置温度80℃对鱼肝薄片进行加热保温8min，使鱼肝蛋白质热变性；

（4）超临界胶束萃取形成：在步骤（3）所得鱼肝中加入1%鱼肝质量的表面活性剂聚甘油脂肪酸酯、双乙酰酒石酸单双甘油酯3:0.002以形成超临界胶束体系；

（5）装料：将步骤（4）处理后的鱼肝装入套好200目尼龙网筛的支架中，安置在萃取罐23中，盖上带有搅拌转头的萃取盖，拧紧密封；

（6）萃取：打开第九阀门9，启动真空泵21，再打开第二阀门2、第四阀门4、第五阀门5，对量液罐22、萃取罐23和蒸发罐24进行抽真空，当萃取罐23真空度降至0~0.1mpa后依次关闭第二阀门2、第四阀门4，同时当蒸发罐24真空度降至0~0.1mpa后关闭第五阀门5；最后关闭真空泵21，完成量液罐22、萃取罐23、蒸发罐24抽真空；抽真空后，缓慢打开第一阀门1，利用量液罐22量取5倍鱼肝质量的萃取剂，其组成为丙烷、丁烷、二甲醚体积比为5:2:3的混合气，关闭第一阀门1；随后缓慢打开第二阀门2，萃取剂从量液罐22进入萃取罐23后，马上关闭第二阀门2；开启第一循环热水25，热水流入、流出萃取罐23夹层，对萃取罐23进行水浴加热的同时开启搅拌机26。分别设置转速为1000rpm、萃取的水浴温度为35℃，萃取20min；

（7）絮凝：打开第十三阀门13在单次萃取15min后加入鱼肝质量0.005wt%的蛋白絮凝剂，所述絮凝剂为壳聚糖与果胶质量比为3:4的组合物；

（8）超临界胶束的反萃：继续在夹带剂罐32中加入0.2wt%正丙醇溶剂，随后关闭第十三阀门13再缓慢打开第十四阀门14，将夹带剂罐32中的试剂流入至萃取罐23中；

（9）萃取剂脱除：萃取结束后，打开第三阀门3，混有鱼肝油的萃取剂流入蒸发罐24；随后开启压缩机27，同时冷凝器28通入冷却水；紧接着打开第十阀门10、第十一阀门11、第十二阀门12，再缓慢打开阀门7，使蒸发的萃取剂进入缓冲罐29；压缩一段时间后，当萃取罐23和蒸发罐24压强小于0.1mpa后依次关闭第三阀门3、阀门7；然后先关闭第九阀门9，再打开第八阀门8，开启真空泵21，打开第四阀门4、第五阀门5，待萃取罐23与蒸发罐24与大气压之间的压力差降至0mpa后，依次关闭第四阀门4、第五阀门5、关闭真空泵21、第八阀门8，压缩机27再工作一段时间后，同时依次关闭第十阀门10、第十一阀门11、压缩机27、第十二阀门12，停止通入冷却水，打开第六阀门6，收集油水混合萃取产物后，关闭第六阀门6，所用的冷却水温度为10℃；压缩机27脱溶回收萃取剂的工作时间为45min；真空泵21与压缩机27联动脱除残留萃取剂时间为5min。所用的蒸发罐24、缓冲罐29设有夹层，分别通过开启第二循环热水30、第三循环热水31，将热水流进、流出罐夹层进行水浴加热，加速萃取剂蒸发，热水温度为45℃；

（10）循环：重复步骤6~9，循环萃取2次；

（11）鱼肝蛋白粉的收集：经步骤（10）对萃取残留物进行萃取剂脱除后，打开萃取罐23，收集萃取残留物，该残留物即为鱼肝蛋白粉，可根据不同目的进行不同的后续加工；

（12）鱼肝油的分离：对步骤（9）所得粗产物进行离心处理，离心转速为8000rpm，离心时间为0.5min，收集离心后所得物的上层液体，该收集物即为粗鱼肝油；

（13）粗鱼肝油精炼：经步骤（12）所得的粗鱼肝油，采用常规的脱胶、脱酸、脱色工艺，可得精炼的高品质鱼肝油。

本实施案例中，所萃取的油脂的得率为11.86%，主要的理化指标：酸价：1.85mg(koh)/g，过氧化值：2.42mmol/kg，碘值：141.23g/100g，水分及挥发物：0.78%、不皂化物：1.95%。

实施例7：

如图1所示，本发明中的萃取装置包括萃取部分以及萃取剂脱除部分，所述的括萃取部分包括一个储液罐33、量液罐22、萃取罐23、第一循环热水25、夹带剂罐32以及搅拌机26，所述的萃取剂脱除部分包括一个真空泵21、蒸发罐24、第二循环热水30、缓冲罐29、第三循环热水31，所述的萃取装置还包括一个压缩机27以及冷凝器28，所述的萃取装置中的各个组件其通过第一阀门1、第二阀门2、第三阀门3、第四阀门4、第五阀门5、第六阀门6、第七阀门7、第八阀门8、第九阀门9、第十阀门10、第十一阀门11、第十二阀门12、第十三阀门13以及第十四阀门14相互之间管路连接，其连接结构如图所示。

一步法高效制备鱼肝蛋白和鱼肝油的方法，所述的鱼肝蛋白粉和鱼肝油是按如图2中所示的步骤制备得到的，其具体步骤如下：

（1）鱼肝原料：取冻藏状态下的未经任何处理的原始鱼肝，进行流水解冻；

（2）压轧：将步骤（1）所得的鱼肝，利用压轧机轧成厚度为20mm的薄片；

（3）蒸煮：取步骤（2）所得鱼肝薄片，搁置于蒸箱上，设置温度100℃对鱼肝薄片进行加热保温1min，使鱼肝蛋白质热变性；

（4）超临界胶束萃取形成：在步骤（3）所得鱼肝中加入0.003%鱼肝质量的表面活性剂双乙酰酒石酸单双甘油酯以形成超临界胶束体系；

（5）装料：将步骤（4）处理后的鱼肝装入套好200目尼龙网筛的支架中，安置在萃取罐23中，盖上带有搅拌转头的萃取盖，拧紧密封；

（6）萃取：打开第九阀门9，启动真空泵21，再打开第二阀门2、第四阀门4、第五阀门5，对量液罐22、萃取罐23和蒸发罐24进行抽真空，当萃取罐23真空度降至0~0.1mpa后依次关闭第二阀门2、第四阀门4，同时当蒸发罐24真空度降至0~0.1mpa后关闭第五阀门5；最后关闭真空泵21，完成量液罐22、萃取罐23、蒸发罐24抽真空；抽真空后，缓慢打开第一阀门1，利用量液罐22量取25倍鱼肝质量的萃取剂，其组成为丙烷、丁烷、二甲醚体积比为5:2:3的混合气，关闭第一阀门1；随后缓慢打开第二阀门2，萃取剂从量液罐22进入萃取罐23后，马上关闭第二阀门2；开启第一循环热水25，热水流入、流出萃取罐23夹层，对萃取罐23进行水浴加热的同时开启搅拌机26。分别设置转速为20rpm、萃取的水浴温度为35℃，萃取60min；

（7）絮凝：打开第十三阀门13在单次萃取15min后加入鱼肝质量0.25wt%的蛋白絮凝剂，所述絮凝剂为壳聚糖与果胶质量比为3:4的组合物；

（8）超临界胶束的反萃：继续在夹带剂罐32中加入0.2wt%正丙醇溶剂，随后关闭第十三阀门13再缓慢打开第十四阀门14，将夹带剂罐32中的试剂流入至萃取罐23中；

（9）萃取剂脱除：萃取结束后，打开第三阀门3，混有鱼肝油的萃取剂流入蒸发罐24；随后开启压缩机27，同时冷凝器28通入冷却水；紧接着打开第十阀门10、第十一阀门11、第十二阀门12，再缓慢打开阀门7，使蒸发的萃取剂进入缓冲罐29；压缩一段时间后，当萃取罐23和蒸发罐24压强小于0.1mpa后依次关闭第三阀门3、阀门7；然后先关闭第九阀门9，再打开第八阀门8，开启真空泵21，打开第四阀门4、第五阀门5，待萃取罐23与蒸发罐24与大气压之间的压力差降至0mpa后，依次关闭第四阀门4、第五阀门5、关闭真空泵21、第八阀门8，压缩机27再工作一段时间后，同时依次关闭第十阀门10、第十一阀门11、压缩机27、第十二阀门12，停止通入冷却水，打开第六阀门6，收集油水混合萃取产物后，关闭第六阀门6，所用的冷却水温度为10℃；压缩机27脱溶回收萃取剂的工作时间为45min；真空泵21与压缩机27联动脱除残留萃取剂时间为5min。所用的蒸发罐24、缓冲罐29设有夹层，分别通过开启第二循环热水30、第三循环热水31，将热水流进、流出罐夹层进行水浴加热，加速萃取剂蒸发，热水温度为45℃；

（10）循环：重复步骤6~9，循环萃取3次；

（11）鱼肝蛋白粉的收集：经步骤（10）对萃取残留物进行萃取剂脱除后，打开萃取罐23，收集萃取残留物，该残留物即为鱼肝蛋白粉，可根据不同目的进行不同的后续加工；

（12）鱼肝油的分离：对步骤（9）所得粗产物进行离心处理，离心转速为2000rpm，离心时间为20min，收集离心后所得物的上层液体，该收集物即为粗鱼肝油；

（13）粗鱼肝油精炼：经步骤（12）所得的粗鱼肝油，采用常规的脱胶、脱酸、脱色工艺，可得精炼的高品质鱼肝油。

本实施案例中，所萃取的油脂的得率为11.25%，主要的理化指标：酸价：1.78mg(koh)/g，过氧化值：2.31mmol/kg，碘值：151.36g/100g，水分及挥发物：0.80%、不皂化物：1.99%。

最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。