利用亚胺为起始原料一步构建TNF-α抑制剂的方法与流程

本发明涉及医药、临床、细胞生物学等
技术领域：
，具体涉及到利用亚胺为起始原料一步构建tnf-α抑制剂的合成方法。
背景技术：
：类风湿性关节炎(rheumatoidarthritis，ra)是一种发病率很高的自身免疫性疾病，关于该疾病目前暂无有效的治疗手段。作为一个促炎症细胞分子，tnf-α在ra发病过程中发挥了非常重要的作用。因此，随着生物制剂的不断发展，使用tnf-α抑制剂在临床上治疗ra，得到了越来越多的应用。正是由于tnf-α抑制剂所具有的这些应用特点，使得合成tnf-α抑制剂在成为新药研发领域的一个研究热点。我们利用亚胺为起始原料一步构建了tnf-α抑制剂，其合成路线如下：本发明合成的tnf-α抑制剂，其结构式如下：该发明通过亚胺为起始原料一步构建了tnf-α抑制剂，为该类化合物的构建提供了一条高效便捷的合成手段，对该类化合物的药物研发具有积极而深远的影响。技术实现要素：本发明的目的是提供一种利用亚胺为起始原料一步构建tnf-α抑制剂的方法。具体步骤为：(1)按照以下摩尔比称取原料，催化剂:氧化剂:(e)-n-(2,6-二异丙基苯基)-1-苯基甲亚胺＝0.05～0.5:1～4:1。(2)将步骤(1)称取的(e)-n-(2,6-二异丙基苯基)-1-苯基甲亚胺、催化剂和氧化剂置于反应容器中，加入溶剂和一个当量的水，套上充有一氧化碳和氧气的气球，在40～150℃下进行羰基化反应1～72小时。(3)将步骤(2)制得的产物采用柱层析法分离纯化，柱层析洗脱液为石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂，其中石油醚和乙酸乙酯的体积比为1～40:1，分离纯化后，即制得tnf-α抑制剂。所述催化剂为二氯二乙腈钯。所述氧化剂为氧气、对苯醌、二氧化锰、碳酸银、醋酸铜、氧化铜或过硫酸钾。所述溶剂为甲苯和n,n-二甲基甲酰胺的混合溶剂，其中甲苯和n,n-二甲基甲酰胺的体积比为1:0.01～100。所述气球中一氧化碳和氧气的体积比为1:0.1～10，气球的压剂力为1～100个大气压。与现有技术相比，本发明的优势在于：该方法为tnf-α抑制的合成提供了一种高效直接的合成手段，反应条件温和，产率优良，通过亚胺为起始原料一步法即可构建目标产物，合成手段新颖独特。附图说明图1为本发明方法的合成路线图。图2为实施例1中得到的tnf-α抑制剂的核磁共振氢谱。图3为实施例1中得到的tnf-α抑制剂的核磁共振碳谱。具体实施方式下面通过具体实施例对该发明作进一步的描述。实施例1：在25ml的试管中加入(e)-n-(2,6-二异丙基苯基)-1-苯基甲亚胺0.2毫摩尔，二氯二乙腈钯0.01毫摩尔，氧化铜0.2毫摩尔，加入甲苯和n,n-二甲基甲酰胺作为混合溶剂，体积比为10:1，加入水0.2毫摩尔，然后套上含有一氧化碳和氧气的气球作为羰基源，于100摄氏度下搅拌24小时。tlc(薄层色谱法)检测反应结束后将反应液冷却到室温，取下气球，缓慢放空未反应的一氧化碳和氧气。反应液过滤，滤液减压旋蒸去除溶剂，再通过柱层析分离纯化，得到目标产物tnf-α抑制剂，所用的柱层析洗脱液为体积比为10：1的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂，产率70％。本实施例所得产品结构见图2与图3。实施例2：在25ml的试管中加入(e)-n-(2,6-二异丙基苯基)-1-苯基甲亚胺0.2毫摩尔，二氯二乙腈钯0.01毫摩尔，氧化铜0.2毫摩尔，加入甲苯作为溶剂，加入水0.2毫摩尔，然后套上含有一氧化碳和氧气的气球作为羰基源，于100摄氏度下搅拌24小时。tlc(薄层色谱法)跟踪检测，没有检测到目标产物。实施例3：在25ml的试管中加入(e)-n-(2,6-二异丙基苯基)-1-苯基甲亚胺0.2毫摩尔，二氯二乙腈钯0.01毫摩尔，氧化铜0.2毫摩尔，加入n,n-二甲基甲酰胺作为溶剂，加入水0.2毫摩尔，然后套上含有一氧化碳和氧气的气球作为羰基源，于100摄氏度下搅拌24小时。tlc(薄层色谱法)跟踪检测，没有检测到目标产物。实施例4：在25ml的试管中加入(e)-n-(2,6-二异丙基苯基)-1-苯基甲亚胺0.2毫摩尔，二氯二乙腈钯0.01毫摩尔，氧化铜0.2毫摩尔，加入乙腈作为溶剂，加入水0.2毫摩尔，然后套上含有一氧化碳和氧气的气球作为羰基源，于100摄氏度下搅拌24小时。tlc(薄层色谱法)跟踪检测，没有检测到目标产物。实施例5：在25ml的试管中加入(e)-n-(2,6-二异丙基苯基)-1-苯基甲亚胺0.2毫摩尔，二氯二乙腈钯0.01毫摩尔，氧化铜0.2毫摩尔，加入1,4-二氧六环作为溶剂，加入水0.2毫摩尔，然后套上含有一氧化碳和氧气的气球作为羰基源，于100摄氏度下搅拌24小时。tlc(薄层色谱法)跟踪检测，没有检测到目标产物。实施例6：在25ml的试管中加入(e)-n-(2,6-二异丙基苯基)-1-苯基甲亚胺0.2毫摩尔，二氯二乙腈钯0.01毫摩尔，氧化铜0.2毫摩尔，加入二甲基亚砜作为溶剂，加入水0.2毫摩尔，然后套上含有一氧化碳和氧气的气球作为羰基源，于100摄氏度下搅拌24小时。tlc(薄层色谱法)跟踪检测，没有检测到目标产物。实施例7：在25ml的试管中加入(e)-n-(2,6-二异丙基苯基)-1-苯基甲亚胺0.2毫摩尔，二氯二乙腈钯0.01毫摩尔，氧化铜0.2毫摩尔，加入甲苯和n,n-二甲基甲酰胺作为混合溶剂，体积比为5:1，加入水0.2毫摩尔，然后套上含有一氧化碳和氧气的气球作为羰基源，于100摄氏度下搅拌24小时。tlc(薄层色谱法)检测反应结束后将反应液冷却到室温，取下气球，缓慢放空未反应的一氧化碳和氧气。反应液过滤，滤液减压旋蒸去除溶剂，再通过柱层析分离纯化，得到目标产物tnf-α抑制剂，所用的柱层析洗脱液为体积比为10:1的石油醚:乙酸乙酯混合溶剂，产率降为28％。实施例8：在25ml的试管中加入(e)-n-(2,6-二异丙基苯基)-1-苯基甲亚胺0.2毫摩尔，二氯二乙腈钯0.01毫摩尔，氧化铜0.2毫摩尔，加入甲苯和n,n-二甲基甲酰胺作为混合溶剂，体积比为1:1，加入水0.2毫摩尔，然后套上含有一氧化碳和氧气的气球作为羰基源，于100摄氏度下搅拌24小时。tlc(薄层色谱法)检测反应结束后将反应液冷却到室温，取下气球，缓慢放空未反应的一氧化碳和氧气。反应液过滤，滤液减压旋蒸去除溶剂，再通过柱层析分离纯化，得到目标产物tnf-α抑制剂，所用的柱层析洗脱液为体积比为10:1的石油醚:乙酸乙酯混合溶剂，产率只有11％。实施例9：在25ml的试管中加入(e)-n-(2,6-二异丙基苯基)-1-苯基甲亚胺0.2毫摩尔，二氯二乙腈钯0.01毫摩尔，氧化铜0.2毫摩尔，加入甲苯和n,n-二甲基甲酰胺作为混合溶剂，体积比为10:1，加入水0.2毫摩尔，然后套上含有一氧化碳和氧气的气球作为羰基源，于常温下搅拌24小时。tlc(薄层色谱法)跟踪检测，没有检测到目标产物。实施例10：在25ml的试管中加入(e)-n-(2,6-二异丙基苯基)-1-苯基甲亚胺0.2毫摩尔，二氯二乙腈钯0.01毫摩尔，氧化铜0.2毫摩尔，加入甲苯和n,n-二甲基甲酰胺作为混合溶剂，体积比为10:1，加入水0.2毫摩尔，然后套上含有一氧化碳和氧气的气球作为羰基源，于80摄氏度下搅拌24小时。tlc(薄层色谱法)检测反应结束后将反应液冷却到室温，取下气球，缓慢放空未反应的一氧化碳和氧气。反应液过滤，滤液减压旋蒸去除溶剂，再通过柱层析分离纯化，得到目标产物tnf-α抑制剂，所用的柱层析洗脱液为体积比为10:1的石油醚:乙酸乙酯混合溶剂，产率为5％。实施例11：在25ml的试管中加入(e)-n-(2,6-二异丙基苯基)-1-苯基甲亚胺0.2毫摩尔，二氯二乙腈钯0.01毫摩尔，氧化铜0.2毫摩尔，加入甲苯和n,n-二甲基甲酰胺作为混合溶剂，体积比为10:1，加入水0.2毫摩尔，然后套上含有一氧化碳和氧气的气球作为羰基源，于90摄氏度下搅拌24小时。tlc(薄层色谱法)检测反应结束后将反应液冷却到室温，取下气球，缓慢放空未反应的一氧化碳和氧气。反应液过滤，滤液减压旋蒸去除溶剂，再通过柱层析分离纯化，得到目标产物tnf-α抑制剂，所用的柱层析洗脱液为体积比为10:1的石油醚:乙酸乙酯混合溶剂，产率为35％。实施例12：在25ml的试管中加入(e)-n-(2,6-二异丙基苯基)-1-苯基甲亚胺0.2毫摩尔，二氯二乙腈钯0.01毫摩尔，氧化铜0.2毫摩尔，加入甲苯和n,n-二甲基甲酰胺为混合溶剂，体积比为10:1，加入水0.2毫摩尔，然后套上含有一氧化碳和氧气的气球作为羰基源，于110摄氏度下搅拌24小时。tlc(薄层色谱法)检测反应结束后将反应液冷却到室温，取下气球，缓慢放空未反应的一氧化碳和氧气。反应液过滤，滤液减压旋蒸去除溶剂，再通过柱层析分离纯化，得到目标产物tnf-α抑制剂，所用的柱层析洗脱液为体积比为10:1的石油醚:乙酸乙酯混合溶剂，产率为30％。实施例13：在25ml的试管中加入(e)-n-(2,6-二异丙基苯基)-1-苯基甲亚胺0.2毫摩尔，二氯二乙腈钯0.01毫摩尔，氧化铜0.2毫摩尔，加入甲苯和n,n-二甲基甲酰胺作为混合溶剂，体积比为10:1，加入水0.2毫摩尔，然后套上含有一氧化碳和氧气的气球作为羰基源，于120摄氏度下搅拌24小时。tlc(薄层色谱法)检测反应结束后将反应液冷却到室温，取下气球，缓慢放空未反应的一氧化碳和氧气。反应液过滤，滤液减压旋蒸去除溶剂，再通过柱层析分离纯化，得到目标产物tnf-α抑制剂，所用的柱层析洗脱液为体积比为10:1的石油醚:乙酸乙酯混合溶剂，产率为13％。上述实施例中的测试结果见表1和表2。表1solvent(溶剂)产率(％)phme0dmf0ch3cn0dioxane0dmso0phme/dmf(10:1)70phme/dmf(5:1)28phme/dmf(1:1)11表2本发明的溶剂和温度参数设定会使反应产率明显提高。目前关于该类化合物的合成多数使用单一溶剂作为反应溶剂，但是本发明使用单一溶剂作为反应溶剂时，都检测不到目标产物，只有换用甲苯(phme)和n,n-二甲基甲酰胺(dmf)作为混合溶剂时，反应才能发生。并且溶剂的配比也对反应产率有很大影响，只有溶剂比例为phme/dmf(10:1)时，反应的效果才是最好的；除此之外，本发明的温度参数设定也会使反应产率明显提高。最重要的是该发明基于亚胺为起始原料，明显提高了反应产率，为tnf-α抑制剂的合成提供了新的合成思路。当前第1页12