本发明涉及烟用香精香料的制备方法，具体是一种烟用紫苜蓿反应物的制备方法及其应用。
背景技术：
美拉德反应是指还原性糖类化合物与氨基酸或蛋白质经过复杂反应最终生成棕色甚至是黑色的大分子物质类黑精，又称为“非酶褐变反应”。美拉德反应是烟草特征香气形成的重要反应之一，其反应物对刺激性及烟杂气具有良好的抑制和掩盖作用，能够增进卷烟烟香及吃味。
真空冷冻干燥技术，是将物料冻结成冰后，使水分在一定真空度下不经液态直接由固态升华成气态，最终使物料脱水的干燥技术。该技术在低温低压的条件下进行，有效避免了氧化反应和热敏性成分的损失。采用真空冷冻干燥后无水乙醇冷浸，能破坏植物体重蛋白质与多糖间的连接结构，沉淀蛋白质，使多糖游离出来，易于提取。
紫苜蓿又名紫花苜蓿，产量高，来源丰富。紫苜蓿中糖类含量丰富，见报道的主要是由葡萄糖、甘露糖、鼠李糖和半乳糖等组成的多糖，具有生物活性及很显著的保健效果。本发明人经过研究发现：利用紫苜蓿中丰富的还原性糖类物质，经过美拉德反应，可制备香气量丰富的高品质天然烟用香料。目前紫苜蓿提取物在烟草制品中应用较少，其美拉德反应物的制备及应用还未见报道。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种烟用紫苜蓿反应物的制备方法及其应用，该方法所制备的紫苜蓿反应物能够增加烟气浓度，降低喉部刺激，改善烟气透发性和口腔余味，在卷烟中有较好的应用效果。
上述目的是通过以下技术方案实现的：
一种烟用紫苜蓿反应物的制备方法，包括以下步骤：
1、将现蕾期刈割的紫苜蓿，清水洗净表面浮灰，沥干，剪成3～5cm的小段；
2、将上述紫苜蓿在-45～-55℃下进行预冷冻5～7h；
3、将经过预冷冻的紫苜蓿移入真空冷冻干燥机的干燥室内，在真空室压力为30～50pa，升华温度为40～50℃条件下冷冻干燥10～12h，水分含量控制于15％～20％；
4、称取经冷冻干燥后的紫苜蓿加入其重量5～7倍的无水乙醇，在150hz条件下超声10～15min后，置于4℃冰箱中静置3～5h；
5、将上述混合物经定性滤纸过滤后，滤液回收，留下冻干紫苜蓿，并用水清洗冻干紫苜蓿2～3次，去除表面蛋白质沉淀；
6、将上述经过处理的冻干紫苜蓿置于美拉德反应容器中，加入其重量5～8倍的水和其重量1～1.5倍的氨基酸，混匀后调节反应体系的ph至8～12，温度控制为95～120℃，搅拌状态下进行美拉德反应3～4h；
7、反应结束后，将体系温度降至50℃以下，过滤除杂后即得所述紫苜蓿反应物。
进一步的，所述氨基酸为丙氨酸、甘氨酸、苏氨酸、丝氨酸中的一种或几种的混合。
进一步的，所述调节反应体系ph的物质为浓氨水、naoh、koh中的一种或几种的混合。
一种如上所述方法制备的烟用紫苜蓿反应物在烟丝中的应用，将其按照0.05％～0.1％的质量比例添加到烟丝中。
本发明具有以下有益效果：
(1)本发明首次利用紫苜蓿本身的糖源来制备美拉德反应型烟用香料，通过添加一定量的氨基酸，合理控制工艺条件，可制备香气量丰富的高品质天然烟用香料。
(2)本发明采用真空冷冻干燥后无水乙醇冷浸，能破坏蛋白质与多糖间的连接结构，沉淀蛋白质，使紫苜蓿多糖游离出来，方法具有操作简单，生产工艺稳定，多糖易于提取等特点。
(3)本发明具有原料成本低廉、可操作性强、生产工艺稳定等特点，所制备的紫苜蓿反应物香气丰富浓郁，应用于卷烟中，能够增加烟气浓度，降低喉部刺激，改善烟气透发性和口腔余味。
具体实施方式
下面将结合具体实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。
实施例1
一种烟用紫苜蓿反应物的制备方法，包括以下步骤：
1、将现蕾期刈割的紫苜蓿，清水洗净表面浮灰，沥干，剪成3cm的小段；
2、将上述紫苜蓿在-45～℃下进行预冷冻7h；
3、将经过预冷冻的紫苜蓿移入真空冷冻干燥机的干燥室内，在真空室压力为30pa，升华温度为45℃条件下冷冻干燥10h，水分含量控制于20％。
4、称取经冷冻干燥后的紫苜蓿加入其重量5倍的无水乙醇，在150hz条件下超声15min后，置于4℃冰箱中静置5h；
5、将上述混合物经定性滤纸过滤后，滤液回收，留下冻干紫苜蓿，并用水清洗冻干紫苜蓿2次，去除表面蛋白质沉淀。
6、将上述经过处理的冻干紫苜蓿置于美拉德反应容器中，加入其重量5倍的水和其重量1倍的丙氨酸，混匀后调节反应体系的ph至10，温度控制为100℃，搅拌状态下进行美拉德反应3h。
7、反应结束后，将体系温度降至50℃以下，过滤除杂后即得所述紫苜蓿反应物。
实施例2
一种烟用紫苜蓿反应物的制备方法，包括以下步骤：
1、将现蕾期刈割的紫苜蓿，清水洗净表面浮灰，沥干，剪成5cm的小段；
2、将上述紫苜蓿在55℃下进行预冷冻5h；
3、将经过预冷冻的紫苜蓿移入真空冷冻干燥机的干燥室内，在真空室压力为50pa，升华温度为50℃条件下冷冻干燥12h，水分含量控制于15％。
4、称取经冷冻干燥后的紫苜蓿加入其重量6倍的无水乙醇，在150hz条件下超声15min后，置于4℃冰箱中静置4h；
5、将上述混合物经定性滤纸过滤后，滤液回收，留下冻干紫苜蓿，并用水清洗冻干紫苜蓿3次，去除表面蛋白质沉淀。
6、将上述经过处理的冻干紫苜蓿置于美拉德反应容器中，加入其重量8倍的水和其重量1.5倍的丝氨酸，混匀后调节反应体系的ph至12，温度控制为120℃，搅拌状态下进行美拉德反应4h。
7、反应结束后，将体系温度降至50℃以下，过滤除杂后即得所述紫苜蓿反应物。
实施例3
一种烟用紫苜蓿反应物的制备方法，包括以下步骤：
1、将现蕾期刈割的紫苜蓿，清水洗净表面浮灰，沥干，剪成5cm的小段；
2、将上述紫苜蓿在-50℃下进行预冷冻6h；
3、将经过预冷冻的紫苜蓿移入真空冷冻干燥机的干燥室内，在真空室压力为40pa，升华温度为50℃条件下冷冻干燥12h，水分含量控制于18％。
4、称取经冷冻干燥后的紫苜蓿加入其重量6倍的无水乙醇，在150hz条件下超声15min后，置于4℃冰箱中静置6h；
5、将上述混合物经定性滤纸过滤后，滤液回收，留下冻干紫苜蓿，并用水清洗冻干紫苜蓿3次，去除表面蛋白质沉淀。
6、将上述经过处理的冻干紫苜蓿置于美拉德反应容器中，加入其重量8倍的水和其重量1倍的苏氨酸，混匀后调节反应体系的ph至10，温度控制为100℃，搅拌状态下进行美拉德反应3h。
7、反应结束后，将体系温度降至50℃以下，过滤除杂后即得所述紫苜蓿反应物。
实施例4
一种烟用紫苜蓿反应物的制备方法，包括以下步骤：
1、将现蕾期刈割的紫苜蓿，清水洗净表面浮灰，沥干，剪成5cm的小段；
2、将上述紫苜蓿在-50℃下进行预冷冻6h；
3、将经过预冷冻的紫苜蓿移入真空冷冻干燥机的干燥室内，在真空室压力为40pa，升华温度为50℃条件下冷冻干燥12h，水分含量控制于18％。
4、称取经冷冻干燥后的紫苜蓿加入其重量6倍的无水乙醇，在150hz条件下超声15min后，置于4℃冰箱中静置5h；
5、将上述混合物经定性滤纸过滤后，滤液回收，留下冻干紫苜蓿，并用水清洗冻干紫苜蓿3次，去除表面蛋白质沉淀。
6、将上述经过处理的冻干紫苜蓿置于美拉德反应容器中，加入其重量10倍的水和其重量1.5倍的甘氨酸，混匀后调节反应体系的ph至10，温度控制为100℃，搅拌状态下进行美拉德反应3h。
7、反应结束后，将体系温度降至50℃以下，过滤除杂后即得所述紫苜蓿反应物。
所得产品为褐色流体，香气丰富浓郁，烘烤香味纯正，将其按照0.05％～0.1％的质量比例添加到空白烟丝中，经感官评吸得出该产品能够增加烟气浓度，降低喉部刺激，改善烟气透发性和口腔余味。
固定香料在空白烟丝中的添加比例为0.08％，参照国家局评吸标准进行评价，评吸小组由13名卷烟感官评价专家组成，并以未添加添加剂的空白卷烟做对照评吸。具体结果如表1所示。
表1评吸结果
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何属于本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。