本发明属于医药化学领域，涉及一类ido抑制剂的新化合物、其制备方法及在预防和治疗ido相关疾病方面的应用。
背景技术：
肿瘤免疫治疗近来备受关注，是肿瘤治疗领域的焦点，肿瘤免疫治疗由于其卓越的疗效和创新性，在2013年被《科学》杂志评为年度最重要的科学突破，目前己在一些肿瘤类型如黑色素瘤，非小细胞肺癌等的治疗中展示出了强大的抗肿瘤活性，并己有肿瘤免疫治疗药物(大分子抗体)获得美国fda批准临床应用。肿瘤免疫治疗有望成为继手术，化疗，放疗，靶向治疗后肿瘤治疗领域的一场革新。
肿瘤微环境中有许多免疫抑制分子存在，通过调节这些抑制分子的功能进而改善肿瘤免疫微环境的免疫治疗策略是目前肿瘤免疫治疗的小分子药物研究的重要策略。l-色氨酸(l-trp)是蛋白质、烟酸和神经递质5-羟基色胺(血清素)的生物合成所需的必需氨基酸，吲哚胺-2,3-双加氧酶1(indoleamine-2,3-dioxygenase1，也称为ido1)、吲哚胺-2,3-双加氧酶2(indoleamine-2,3-dioxygenase2，ido2)和色氨酸-2,3-双加氧酶(tryptophan-2,3-dioxygenase，tdo)是l-色氨酸最主要的代谢途径-犬尿氨酸(kynurenine)途径中的关键限速酶，催化作用发生在l-色氨酸到n-甲酰基-l-犬尿氨酸这一过程。ido1分布广泛，通常表达在胎盘、大小肠、结肠、脾、肾、肺、肝、胃和大脑中(king,n.j.c.；thomas,s.r.moleculesinfocus:indoleamine2,3-dioxygenase.int.j.biochem.cellbiol.,2007,39,2167-2172)，另外在髓系细胞(树突细胞，单核细胞，巨噬细胞等)和肿瘤细胞等很多细胞中，ido1还可以被诸多细胞因子(如干扰素α、β、γ，白细胞介素il-1、il-2，肿瘤坏死因子tnf等)诱导而表达(yuasa,h.j.；takubo,m.；takahashi,a.；hasegawa,t.；noma,h.；suzuki,t.evolutionofvertebrateindoleamine2,3-dioxygenases.j.mol.evol.,2007,65,705-714)；ido2主要表达在肾脏，以及附睾、睾丸、肝脏、卵巢、子宫、胎盘等组织，虽然ido1和ido2都广泛分布，但表达在不同的细胞类型中，tdo主要表达在肝脏中，负责调控外周系统的色氨酸含量，此外tdo在大脑中也有分布(kanai,m.；funakoshi,h.；takahashi,h.；hayakawa,t.；mizuno,s.；matsumoto,k.；nakamura,t.tryptophan2,3-dioxygenaseisakeymodulatorofphysiologicalneurogenesisandanxiety-relatedbehaviorinmice.mol.brain,2009,2,1-16)。尽管这些酶催化相同的生化反应，且都含有血红素，但其结构的相似度却并不高，ido1为单体，而tdo以四聚体形式存在，结构较接近的ido1与ido2的氨基酸序列有43％一致，而tdo与ido1则只有10％的氨基酸序列相同，ido1和tdo具有不同的底物特异性，其中tdo对于在吲哚基团的5-位和6-位处取代的l-色氨酸和l-色氨酸衍生物具有较强特异性，而ido1底物范围更广，可接受和氧化更多种底物，例如l-和d-色氨酸、色胺、5-羟基色胺和1-甲基-l-色氨酸(forouhar,f.etal.molecularinsightsintosubstraterecognitionandcatalysisbytryptophan2,3-dioxygenase.proc.natl.acad.sci.u.s.a.,2007,104,473-478)。
近年来对犬尿氨酸途径在免疫反应中的调节作用，也有了较充分的研究，作为此途径中分布最广泛的第一个限速酶，针对ido1的研究最为广泛。ido1的免疫抑制作用主要在于两个方面，一方面ido1会降低局部的色氨酸浓度，从而影响很多类型细胞的增殖，例如t-淋巴细胞对于色氨酸的缺乏就尤为敏感，t-细胞的细胞周期中存在一个对色氨酸水平非常敏感的调节点，局部色氨酸的缺乏，会致使t-细胞停滞于细胞周期中g1期中期，从而抑制了t-细胞的增殖，另一方面，ido1介导的犬尿氨酸途径的下游产物，如l-犬尿氨酸，3-羟基-l-犬尿氨酸，3-羟基-邻氨基苯甲酸等不仅抑制辅助t-细胞1(th1)和自然杀伤细胞(nkcell)的增殖，还会引导其凋亡，此外，犬尿氨酸途径中的色氨酸缺乏以及下游代谢产物与cd8+t-细胞的相互作用，而降低了cd8+t-细胞细胞的免疫反应活性(dounay,a.b.,tuttle,j.b.,verhoest,p.r.challengesandopportunitiesinthediscoveryofnewtherapeuticstargetingthekynureninepathwayj.med.chem.,2015,58,8762-8782)。目前大量研究表明ido在白血病细胞中较高表达，使局部t-细胞增殖受抑，抑制t-细胞介导的免疫反应，使t-细胞活化信号转导受阻，从而介导肿瘤细胞逃逸免疫系统的攻击。
相比于ido1，针对tdo的研究相对较少，platten等发现tdo在人胶质细胞瘤的细胞中高度表达，而且抑制或者敲除tdo会减少犬尿氨酸的产生，但敲除ido1和ido2却不影响犬尿氨酸的浓度，这表明在人胶质细胞瘤中，tdo是色氨酸代谢的主要酶。vandeneynde等通过p815肥大细胞瘤(mastocytoma)模型，证明了抑制tdo可以抑制肿瘤生长，此外他们也研究了tdo2和ido1在104种人类肿瘤细胞系中的表达，发现20种表达tdo2，17种表达ido1，另有16种两种都有表达(vandeneynde,b.j.etal.,proc.natl.acad.sci.u.s.a.,2012,109,2497-2502)。
寻找基于ido和/或tdo为靶点的高效抑制剂，己成为近年来药物开发的研究热点(austin,c.j.d.,rendina,l.m.targetingkeydioxygenasesintryptophan–kynureninemetabolismforimmunomodulationandcancerchemotherapy,drugdiscoverytoday,2015,20,609-617；gostner,j.m.,becker,k.,
目前尚无ido和/或tdo为靶点的药物上市，有一些候选药物正在进行i～iii期的临床试验，为了达到更好的肿瘤治疗效果的目的，更好的满足市场需求，我们希望能开发出新一代的高效低毒的高效的ido和/或tdo抑制剂类药物，用于治疗肿瘤，以及病毒感染、抑郁症、神经变性病症、白内障、器官移植排斥和自身免疫等疾病。
技术实现要素：
本发明涉及一类新的小分子ido抑制剂的化合物，及其药学上可接受的盐，立体异构体，互变异构形式，多晶型物，溶剂合物，前药，代谢物，同位素衍生物，该类化合物结构通式为式i所示。本发明还涉及包含所述化合物，及其药学上可接受的盐，立体异构体，互变异构形式，多晶型物，溶剂合物，前药，代谢物，同位素衍生物的药物组合物。经研究表明，本发明所合成的小分子ido抑制剂药效作用显著，安全性高，将有希望成为一类新型的抗肿瘤药物。
本发明的一方面涉及一种通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物：
其中，r0为
r1和r2分别独立的为卤素、氰基、c1-3烷基、卤素取代的c1-6烷基或c1-6烷氧基；优选为卤素、氰基、c1-3烷基、卤素取代的c1-3烷基或c1-3烷氧基；
r’为
x为-nh-、-o-、-s-或-nr”-；
y为单键、-nh-或-o-；
y为单键时，r为
y为-nh-时，r为
y为-o-时，r为
r3为-nh2、c1-10烷基、c3-10环烷基、c3-10杂环基、c6-20芳基或c3-14杂芳基；其中所述的c1-10烷基、c3-10环烷基、c3-10杂环基、c6-20芳基或c3-14杂芳基可被一个或多个的以下基团所取代：卤素、c1-8烷基、c1-8烷氧基、c1-8羧基、羟基、氨基、硝基、氰基、醛基、烷基酰基、三氟甲基、对硝基苯基、磺酰胺基、烷基磺酰基、苯磺酰基、芳基磺酰基或者为c1-8硝酸酯；
优选地，r3为-nh2、3-6元环烷基、4-6元杂环基或c1-4烷基，其中所述的3-6元环烷基、4-6元杂环基及c1-4烷基可被以下基团单取代或二取代：-oh、c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-nh2、卤素、苯基、氰基；
r4、r5、r6、r7、r8、r9分别独立的为-h或c1-3烷基；
r10为-h、c1-10烷基、c3-10环烷基、c3-10杂环基、c6-20芳基、c3-14杂芳基或
优选地，r10为-h、
或者r9和r10与所连接的氮原子一起形成4-6元环或形成吗啉基；
r11和r12分别独立的为c1-3烷基、-o-c1-4烷基，或r11和r12与所连接的磷原子一起形成4-6元环；
r”和r13分别独立的为c1-3烷基；
r14为-h、-cn、
r20、r21分别独立的为-h或c1-3烷基，或者r20和r21一起形成3-6元环烷基；
r22、r23分别独立的为-h或c1-3烷基；
r24为-cn、c1-10烷基、c3-10环烷基、c3-10杂环基、c6-20芳基、c3-14杂芳基；其中所述的c1-10烷基、c3-10环烷基、c3-10杂环基、c6-20芳基、c3-14杂芳基可被一个或多个的以下基团所取代：卤素、c1-8烷基、c1-8烷氧基、c1-8羧基、羟基、氨基、硝基、氰基、醛基、烷基酰基、三氟甲基、对硝基苯基、磺酰胺基、烷基磺酰基、苯磺酰基、芳基磺酰基或者为c1-8硝酸酯；
优选地，r24为c1-3烷基、-cn、3-6元环烷基或4-6元杂环基；
n为0、1或2；
m为1、2或3。
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中r0为
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中x为-nh-或-nr”-；y为-nh-；r为
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中r1和r2分别独立的为-c1-3烷基、-c1-3烷氧基、-f、-br、-cl、-cf3或-chf2；r10为-h。
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中r0为
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中r1和r2分别独立的为c1-3烷基、c1-3烷氧基、-f、-br、-cl、-cf3或-chf2；r13为甲基。
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中r0为
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中r1和r2分别独立的为c1-3烷基、c1-3烷氧基、-f、-br、-cl、-cf3或-chf2。
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中r0为
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中r1为-f；n为1。
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中r0为
y为单键时，r为
y为-nh-时，r为
r10为
或者r9和r10与所连接的氮原子一起形成4-6元环或形成吗啉基。
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中x为-nh-或-nr”-；所述的4-6元杂环基为
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中r1和r2分别独立的为-c1-3烷基、-f、-br、-cl、-cf3或-chf2。
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中r0为
r为
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中x为-nh-或-nr”-；所述的4-6元杂环基为
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中r1和r2分别独立的为-c1-3烷基、-f、-br、-cl、-cf3或-chf2。
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中y为-nh-；r为
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中r1和r2分别独立的为c1-3烷基、c1-3烷氧基、-f、-br、-cl、-cf3、-chf2。
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中r0为
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中r1和r2分别独立的为-c1-3烷基、-c1-3烷氧基、-f、-br、-cl、-cf3、-chf2；r10为-h。
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中r0为
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中r2为-chf2。
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中r1为-f。
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中r0为
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中r0为
本发明一些实施方式涉及前述的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，其中r1和r2分别独立的为-c1-3烷基、-f、-br、-cl、-cf3或-chf2。
本发明所提供化合物的合成流程：
(一)当通式(i)中的r0为
y为-nh-或-nr’-时，r为
以上结构的合成路线如下：
化合物ia在碱(如nahco3，na2co3，naoh等)作用下，与r1和r2取代的苯胺反应，得到化合物ib。
化合物ib在加热条件下，与cdi作用，得到关环产物ic。
化合物ic在酸性条件(如浓h2so4，tfa等)下，与氧化剂(如h2o2，过氧化尿素，过碳酸钠等)作用，得到硝基化合物id。
化合物id与胺ie-1(或在碱性条件下(如nahco3，三乙胺等)与其盐)作用，得到化合物if。
化合物if在碱性条件下(如naoh，k2co3等)开环，得到目标化合物i-1。
(二)当通式(i)中的r0为
以上结构的合成路线如下：
化合物id与胺ie-2(或在碱性条件下(如nahco3，三乙胺等)与其盐)作用，得到化合物ig。
化合物ig在tbaf，nh4f，hf等作用下，脱除tbdps保护基，得到化合物ih。
化合物ih在碱性条件下(如naoh，k2co3等)开环，得到化合物i-2。
(三)当通式(i)中的r0为
以上结构的合成路线如下：
化合物id与胺ie-3(或在碱性条件下(如nahco3，三乙胺等)与其盐)作用，得到化合物ii。
化合物ii在酸性条件下(如hcl，hbr，tfa等)，脱除boc保护基，得到化合物ij。
化合物ij在碱性条件下(如naoh，k2co3等)开环，得到化合物i-3。
(四)当通式(i)中的r0为
以上结构的合成路线如下：
化合物id与单boc保护的二胺ie-4作用，得到化合物ik。
化合物ik在酸性条件下(如hcl，hbr，tfa等)，脱除boc保护基，得到化合物il或其盐。
化合物il在碱性条件下(如三乙胺，二异丙基乙基胺，nahco3，na2co3，k2co3等)，与磺酰氯或磷酰氯作用，得到化合物im。
化合物im在碱性条件下(如naoh，k2co3等)开环，得到化合物i-4。
(五)当通式(i)中的r0为
以上结构的合成路线如下：
氯磺酰异氰酸酯与叔丁醇反应的产物，与化合物il在碱性条件下(如三乙胺，二异丙基乙基胺，nahco3，na2co3，k2co3等)作用，得到化合物in。
化合物in在酸性条件下(如hcl，hbr，tfa等)，脱除boc保护基，得到化合物io。
化合物io在碱性条件下(如naoh，k2co3等)开环，得到化合物i-5。
(六)当通式(i)中的r0为
以上结构的合成路线如下：
化合物id与胺或醇ie-5在碱性条件下(如三乙胺，naoh，tbuok，nah等)作用，得到化合物ip。
化合物ip在氧化剂(如m-cpba，naio4等)作用下，得到亚砜产物iq。
化合物iq在phi(oac)2作用下，与氨基甲酸铵或者在浓硫酸作用下，与nan3生成化合物ir。
化合物ir在碱性条件下(如naoh，k2co3等)开环，得到化合物i-6。
化合物ir在碱性条件下(如三乙胺，二异丙基乙基胺，nahco3，na2co3，k2co3等)与环烷基磺酰氯化合物反应，得到化合物is。
化合物is在碱性条件下(如naoh，k2co3等)开环，得到化合物i-7。
(七)当通式(i)中的r0为
以上结构的合成路线如下：
化合物ip在phi(oac)2作用下，与氰胺作用，得到化合物it。
化合物it在氧化剂(如m-cpba，naio4等)作用下，得到化合物iu。
化合物iu在碱性条件下(如naoh，k2co3等)开环，得到化合物i-8。
(八)当通式(i)中的r0为
以上结构的合成路线如下：
其中，环a为
化合物iaa在pd催化剂(如pd(oac)2，pd2(dba)3，pd(ch3cn)2cl2等)，膦配体(如binap，xantphos，p(t-bu)3，brettphos等)作用下，碱性条件下(如cs2co3，t-buona，k3po4等)与单boc保护的二胺作用，得到化合物iab。
化合物iab在碱性条件下(如lioh，naoh等)水解，得到化合物iac。
化合物iac在缩合剂(如hatu，hbtu，hoat，hobt，edc，dcc等)作用下，与取代的苯胺作用得到化合物iad。
化合物iad在酸性条件下(如hcl，hbr，tfa等)，脱除boc保护基，得到化合物iae。
化合物iae在碱性条件下(如nahco3，na2co3，三乙胺，二异丙基乙基胺等)，与fmoccl作用，得到化合物iaf。
化合物iaf在pcl5作用下，得到化合物iag。
化合物iag在碱性条件下(如nahco3，na2co3，naoac等)，与盐酸羟胺(或硫酸羟胺)作用，得到化合物iah。
化合物iah在加热条件下，与cdi作用，得到关环产物iai。
化合物iai在哌啶，吡咯烷，或tbaf等作用下，脱除fmoc保护基，得到化合物iaj。
氯磺酰异氰酸酯与叔丁醇反应的产物，与化合物iaj在碱性条件下(如三乙胺，二异丙基乙基胺，nahco3，na2co3，k2co3等)作用，得到化合物iak。
化合物iak在酸性条件下(如hcl，hbr，tfa等)，脱除boc保护基，得到化合物ial。
化合物ial在碱性条件下(如naoh，k2co3等)开环，得到化合物i-9。
(九)当通式(i)中的r0为
以上结构的合成路线如下：
其中，环a为
化合物iba在碱性条件下(如lioh，naoh等)水解，得到化合物ibb。
化合物ibb在缩合剂(如hatu，hbtu，hoat，hobt，edc，dcc等)作用下，与取代的苯胺作用得到化合物ibc。
化合物ibc在pcl5作用下，得到化合物ibd。
化合物ibd在碱性条件下(如nahco3，na2co3，naoac等)，与盐酸羟胺(或硫酸羟胺)作用，得到化合物ibe。
化合物ibe在加热条件下，与cdi作用，得到关环产物ibf。
氯磺酰异氰酸酯与叔丁醇反应的产物，与单boc保护的二胺在碱性条件下(如三乙胺，二异丙基乙基胺，nahco3，na2co3，k2co3等)作用，得到化合物ibh。
化合物ibh在酸性条件下(如hcl，hbr，tfa等)，脱除boc保护基，得到化合物ibi。
化合物ibf在室温或加热条件下，与化合物ibi作用，得到化合物ibg。
化合物ibg在碱性条件下(如naoh，k2co3等)开环，得到化合物i-10。
(十)当通式(i)中的r0为
以上结构的合成路线如下：
其中，环a为
化合物ica在缩合剂(如hatu，hbtu，hoat，hobt，edc，dcc等)作用下，与取代的苯胺作用得到化合物icb。
化合物icb在pcl5作用下，得到化合物icc。
化合物icc在碱性条件下(如nahco3，na2co3，naoac等)，与盐酸羟胺(或硫酸羟胺)作用，得到化合物icd。
化合物icd在加热条件下，与cdi作用，得到关环产物ice。
化合物ice在加热条件下，与醛icf作用，所得亚胺产物再用还原剂(如nabh4，nabh3(cn)，nabh(oac)3等)还原，得到化合物icg。或者化合物ice与醛icf直接在还原剂(如nabh3(cn)，nabh(oac)3等)作用下，得到化合物icg。
化合物icg在酸性条件下(如hcl，hbr，tfa等)，脱除boc保护基，得到化合物ich。
氯磺酰异氰酸酯与叔丁醇反应的产物，与化合物ich在碱性条件下(如三乙胺，二异丙基乙基胺，nahco3，na2co3，k2co3等)作用，得到化合物ici。
化合物ici在酸性条件下(如hcl，hbr，tfa等)，脱除boc保护基，得到化合物icj。
化合物icj在碱性条件下(如naoh，k2co3等)开环，得到化合物i-11。
本发明的通式(i)中具有代表性的化合物如下：
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((3-氨基磺酰基丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((3-(甲磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-((n-(2-甲氧基乙基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(n-(2-羟基丙基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-((n-(2-羟基乙基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-((n-(1-羟甲基)环丙基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((3-((n-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((3-((n-(1-羟基丙烷-2-基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-((n-甲基-n-(吡咯烷-3-基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-(2,2-二氧化-1,2,3-氧杂噻唑烷-3-基)乙基)氨基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-(1,1-二氧化异噻唑烷-2-基)乙基)氨基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-(1,1-二氧化-1,2,5-噻二唑-2-基)乙基)氨基)-n’-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(2-羰基咪唑烷-1-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(2-吡咯烷酮-1-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲眯；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(2-甲基-2-氧化-1,3,2-二氮杂磷杂环戊烷-1-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-氧化-1,3,2-二氧杂磷杂环己基-2-基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-((二甲基磷酰基)氨基)乙基)氨基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-((二乙基磷酰基)氨基)乙基)氨基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-((1-氧化-2,5-二氢磷杂环戊二烯基-1-基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-((1-氧化-2,5-磷杂环戊基-1-基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(5-羰基吡咯烷-2-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(5-羰基吡咯烷-3-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(2-羰基噁唑烷-5-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(2-羰基噁唑烷-4-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(3-甲基-2-羰基噁唑烷-5-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(3-甲基-2-羰基噁唑烷-4-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(1-甲基-2-羰基咪唑烷-4-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(3-甲基-2-羰基咪唑烷-4-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(1,1-二氧化-1,2,5-噻二唑烷-3-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(2-羰基-咪唑烷-4-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(5-羰基-4,5-二氢-1h-1,2,4-三唑-3-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(5-羰基-4,5-二氢-1h-四唑-1-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(6-氧-1,6-二氢吡啶-2-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(6-氧-1,6-二氢吡啶-3-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(6-羰基-1,6-二氢哒嗪-3-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(5-羰基-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(吗啉-4-磺酰氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(s-甲基亚砜亚胺)乙基)巯基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-(2-(s-甲基亚砜亚胺基)乙氧基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
4-((2-(n-环丙基磺酰基)-s-甲基亚砜亚胺基)乙基)氨基)-n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
4-((2-(s-甲基亚砜氰基亚胺)乙基)氨基)-n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
甲基(吡咯烷-3-基)氨基磺酸(2-((4-(n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基脒基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙基)酯；
(2-甲氧基乙基)氨基磺酸(2-((4-(n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基脒基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙基)酯；
(1-氮杂环丁基-3-基)氨基磺酸(2-((4-(n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基脒基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙基)酯；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-(甲基(2-(氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
4-(n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基甲脒基)-n-(2-((氨基磺酰)氨基)乙基)-1,2,5-噁二唑-3-甲酰胺；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-5-((2-((氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,3-噻二唑-4-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-((氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噻二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-((氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)呋喃-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-3-((2-((氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)噻吩-2-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-3-((2-((氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1h-吡唑-4-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-((氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1h-吡唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((3-(乙磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((3-((1-甲基乙基)磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((3-(环丙基磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((3-((2-羟基乙基)磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((3-(((四氢呋喃-3-基)甲基)磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((3-(((四氢呋喃-2-基)甲基)磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((3-(((3,3-二氟环丁基)甲基)磺酰基)丙基)氨基)-n’-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((3-((2-甲氧基乙基)磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((3-((四氢-2h-吡喃-4-基)磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((3-(环己基磺酰基)丙基)氨基)-n’-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(甲基磺酰基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(甲基磺酰基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(甲基磺酰基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(2-羰基咪唑烷-1-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(2-吡咯烷酮-1-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-4-((2-(1,1-二氧化-1,2,5-噻二唑-2-基)乙基)氨基)-n’-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-氧化-1,3,2-二氧杂磷杂环己基-2-基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-((n-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(s-甲基亚砜亚胺基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
(2-((4-(n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基甲脒基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙基)氨基磷酸二甲酯；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((1-(2-氧化-1,3,2-二氧杂磷杂环己基-2-基)哌啶-4-基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(氨基磺酰基(1-氨基磺酰基氮杂环丁烷-3-基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒；
n-(3-氯-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((3-(甲磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒。
本发明所说的“药学上可接受的盐”包括其酸加成盐及碱加成盐。
适合的酸加成盐由形成无毒盐的酸来形成。实例包括但不限于盐酸盐、硫酸盐/硫酸氢盐、硝酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、醋酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、柠檬酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐，及其类似盐。
适合的碱加成盐由形成无毒盐的碱来形成。例如作为碱金属盐、碱土金属盐或作为铵盐，实例包括但不限于钠盐、钾盐、钙盐、镁盐，或与氨或有机胺如乙胺、乙醇胺、三乙醇胺或氨基酸的盐。
适合的盐的综述参见stahl,p.h.及wermuth,c.g.的“handbookofpharmaceuticalsalts:properties,selection,anduse,2ndrevisededition”(wiley-vch,2011)。
如果通式(i)的化合物在分子内同时包含酸性和碱性基团，本发明还包括除了提及的盐形式之外的内盐或内铵盐(两性离子)。
用于制备本发明的化合物的药学上可接受的盐的方法为本领域技术人员已知的，例如通过使这些化合物与有机或无机酸或碱在溶剂或分散剂中接触获得，或通过与其他盐进行阴离子交换或阳离子交换获得。
通式(i)的化合物可以晶体或无定形形式存在。此外，通式(i)的化合物的某些晶体形式可以多晶型形式存在，其包括在本发明范围内。可以使用许多常规分析技术包括但不限于单晶x-射线粉末衍射(xrpd)图、红外(ir)光谱、拉曼光谱、差示扫描量热法(dsc)、热重分析(tga)和固体核磁共振(ssnmr)表征来区分式(i)化合物的多晶型。
本发明的化合物也包括互变异构形式。互变异构形式由单键与相邻双键的对换以及伴随的质子迁移而产生。互变异构形式包括质子转移互变异构体，它们是具有相同经验式和总电荷的异构质子化状态。质子转移互变异构体的实例包括酮-烯醇配对、酰胺-亚胺酸配对、内酰胺-内酰亚胺配对、烯胺-亚胺配对，以及其中质子能够占据杂环体系的两个或多个位置的环状形式，例如，1h-和3h-咪唑，1h-、2h-和4h-1,2,4三唑，1h-和2h-异吲哚，以及1h-和2h-吡唑。互变异构形式可以通过适当的取代而处于平衡或空间上固定于一种形式。
本发明的另一方面涉及一种药物组合物，其含有治疗有效剂量的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物。
在本发明的一些实施方式中，药物组合物还包含一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
本发明还涉及一种制备上述组合物的方法，其包括将通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物与药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂相混合。
本发明进一步涉及通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，或包含其的药物组合物在制备用于预防和/或治疗预防具有ido介导的色氨酸代谢途径的病理学特征的疾病的药物中的用途。ido抑制剂可以用于心脏障碍的抑制以及治疗其他具有ido介导的色氨酸代谢途径的病理学特征的疾病，这些疾病包括诸如aids等病毒的感染，诸如莱姆病和链球菌感染等细胞感染、神经退行性病症(例如阿尔茨海默症、亨廷顿症和帕金森症)、自身免疫性疾病、抑郁症、焦虑症、白内障、心理障碍、癌症(包括t细胞白血病和结肠癌)、眼睛疾病状态(例如白内障和与年龄相关的黄化)以及自身免疫性疾病，其中所述的癌症可以选自乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、肺癌、胃癌、直肠癌、胰腺癌、脑癌、皮肤癌、口腔癌、前列腺癌、骨癌、肾癌、卵巢癌、膀胱癌、肝癌、输卵管肿瘤、卵巢瘤、腹膜肿瘤、iv期黑色素瘤、实体瘤、神经胶质瘤、神经胶母细胞瘤、肝细胞癌、乳突肾性瘤、头颈部肿瘤、白血病、淋巴瘤、骨髓瘤和非小细胞肺癌。
本发明还涉及通式(通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，或包含其的药物组合物，其用于预防和/或治疗预防具有ido介导的色氨酸代谢途径的病理学特征的疾病。这些疾病包括诸如aids等病毒的感染，诸如莱姆病和链球菌感染等细胞感染、神经退行性病症(例如阿尔茨海默症、亨廷顿症和帕金森症)、自身免疫性疾病、抑郁症、焦虑症、白内障、心理障碍、癌症(包括t细胞白血病和结肠癌)、眼睛疾病状态(例如白内障和与年龄相关的黄化)以及自身免疫性疾病，其中所述的癌症可以选自乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、肺癌、胃癌、直肠癌、胰腺癌、脑癌、皮肤癌、口腔癌、前列腺癌、骨癌、肾癌、卵巢癌、膀胱癌、肝癌、输卵管肿瘤、卵巢瘤、腹膜肿瘤、iv期黑色素瘤、实体瘤、神经胶质瘤、神经胶母细胞瘤、肝细胞癌、乳突肾性瘤、头颈部肿瘤、白血病、淋巴瘤、骨髓瘤和非小细胞肺癌。
本发明还涉及一种治疗预防和/或治疗预防具有ido介导的色氨酸代谢途径的病理学特征的疾病的方法，其包括向患者施用治疗有效剂量的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，或包含其的药物组合物。这些疾病包括诸如aids等病毒的感染，诸如莱姆病和链球菌感染等细胞感染、神经退行性病症(例如阿尔茨海默症、亨廷顿症和帕金森症)、自身免疫性疾病、抑郁症、焦虑症、白内障、心理障碍、癌症(包括t细胞白血病和结肠癌)、眼睛疾病状态(例如白内障和与年龄相关的黄化)以及自身免疫性疾病，其中所述的癌症可以选自乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、肺癌、胃癌、直肠癌、胰腺癌、脑癌、皮肤癌、口腔癌、前列腺癌、骨癌、肾癌、卵巢癌、膀胱癌、肝癌、输卵管肿瘤、卵巢瘤、腹膜肿瘤、iv期黑色素瘤、实体瘤、神经胶质瘤、神经胶母细胞瘤、肝细胞癌、乳突肾性瘤、头颈部肿瘤、白血病、淋巴瘤、骨髓瘤和非小细胞肺癌。
本发明另一方面涉及一种治疗癌症的方法，该方法包括向患者施用治疗有效剂量的本发明的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，或包含其的药物组合物。该方法显示出突出的疗效和较少的副作用，其中所述的癌症可以选自乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、肺癌、胃癌、直肠癌、胰腺癌、脑癌、皮肤癌、口腔癌、前列腺癌、骨癌、肾癌、卵巢癌、膀胱癌、肝癌、输卵管肿瘤、卵巢瘤、腹膜肿瘤、iv期黑色素瘤、实体瘤、神经胶质瘤、神经胶母细胞瘤、肝细胞癌、乳突肾性瘤、头颈部肿瘤、白血病、淋巴瘤、骨髓瘤和非小细胞肺癌。
本发明的药物组合物可以利用一种或多种可药用的载体按照常规的方式加以配制。因此，本发明的活性化合物可以被配制成口服、口腔含化给药、鼻内、肠胃外(例如静脉内、肌内或皮下)或直肠给药的剂型。本发明的化合物也可以被配制成持续释放的剂型。
根据治疗目的，可将药物组合物制成各种类型的给药单位剂型，如片剂、丸剂、粉剂、液体、悬浮液、乳液、颗粒剂、胶囊、栓剂和针剂(溶液及悬浮液)等剂型。
为了使片剂形式的药物组合物成形，可使用本领域任何己知并广泛使用的赋形剂。例如，载体，如乳糖、白糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、淀粉、碳酸钙、高岭土、结晶纤维素和硅酸等；粘合剂，如水、乙醇、丙醇、普通糖浆、葡萄糖溶液、淀粉溶液、明胶溶液，羧甲基纤维素、紫胶、甲基纤维素和磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解剂，如干淀粉、藻酸纳、琼脂粉和海带粉，碳酸氢纳、碳酸钙、聚乙烯脱水山梨醇的脂肪酸酯、十二烷基硫酸纳、硬脂酸单甘酯、淀粉和乳糖等；崩解抑制剂，如白糖、甘油三硬脂酸酯、椰子油和氢化油；吸附促进剂，如季胺碱和十二烷基硫酸纳等；润湿剂，如甘油、淀粉等；吸附剂，如淀粉、乳糖、高岭土、膨润土和胶体硅酸等；以及润滑剂，如纯净的滑石，硬脂酸盐、硼酸粉和聚乙二醇等。还可以根据需要选用通常的涂渍材料制成糖衣片剂、涂明胶膜片剂、肠衣片剂、涂膜片剂、双层膜片剂及多层片剂。
为了使丸剂形式的药物组合物成形，可使用本领域任何己知的并广泛使用的赋形剂，例如，载体，如乳糖，淀粉，椰子油，硬化植物油，高岭土和滑石粉等；粘合剂，如阿拉伯树胶粉，黄蓍胶粉，明胶和乙醇等；崩解剂，如琼脂和海带粉等。
为了使栓剂形式的药物组合物成形，可使用本领域任何己知并广泛使用的赋形剂，例如，聚乙二醇，椰子油，高级醇，高级醇的酯，明胶和半合成的甘油酯等。
为了制备针剂形式的药物组合物，可将溶液或悬浮液消毒后(最好加入适量的氯化钠，葡萄糖或甘油等)，制成与血液等渗压的针剂。在制备针剂时，也可使用本领域内任何常用的载体。例如，水，乙醇，丙二醇，乙氧基化的异硬脂醇，聚氧基化的异硬脂醇和聚乙烯脱水山梨醇的脂肪酸酯等。此外，还可加入通常的溶解剂、缓冲剂和止痛剂等。
本发明还进一步涉及通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物，或包含其的药物组合物与抗ctla-4抗体、抗pd-1抗体、抗pd-l1抗体、抗病毒剂、化疗剂、免疫抑制剂、辐射、抗肿瘤疫苗、抗病毒疫苗、细胞因子疗法或酪氨酸激酶抑制剂进行联合用药。
本领域技术人员所熟知的，药物的给药剂量依赖于多种因素，包括但不限定于以下因素：所用具体化合物的活性、患者的年龄、患者的体重、患者的健康状况、患者的饮食、给药时间、给药方式、排泄的速率、药物的组合等。另外，最佳的治疗方式如治疗的模式、通式化合物(i)的日用量或可药用的盐的种类可以根据传统的治疗方案来验证。
发明的详细说明
除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。
术语“烷基”包括饱和的脂肪族基团，包括直链烷基(例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等)、支链烷基(异丙基、叔丁基、异丁基等)、环烷基基团(环丙基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基)、烷基取代的环烷基、和环烷基取代的烷基。
在某些实施方案中，直链或支链的烷基的骨架上具有6个或更少的碳原子(例如，直链为c1-6，支链为c3-6)，且更优选4个或更少的碳原子。同样，优选的环烷基在其环结构上具有3-8个碳原子，更优选在其环结构具有5或6个碳。
术语“c1-10烷基”包括包含1至10个碳原子的烷基。
此外，烷基的烃骨架中一个或多个碳上的氢可以被取代基替换。所述取代基可以包括：烯基、炔基、卤素、羟基、烷基羰基氧基、芳基羰基氧基、烷氧基羰基氧基、芳氧基羰基氧基、羟基羰基、烷基羰基、芳基羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、烷硫基羰基、烷氧基、磷酸酯、膦酸酯、氰基、氨基(包括烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基和烷基芳基氨基)、酰基氨基(包括烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、氨基甲酰基和脲基)、脒基、亚氨基、巯基、烷硫基、芳硫基、羟基硫代羰基、硫酸酯、烷基亚磺酰基、磺酸基、氨磺酰基、磺酰氨基、硝基、三氟甲基、氰基、叠氮基、杂环基、烷基芳基或芳族基团或杂芳族基团。
术语“卤素”包括氟、氯、溴、碘等。
术语“杂环基”或“杂环”包括饱和的或不饱和的非芳族环或环系统，例如，其是4-、5-、6-或7-元的单环，7-、8-、9-、10-、11-或12-元的二环或10-、11-、12-、13-、14-或15-元的三环环系统并且包含至少一个选自o、s和n的杂原子。其中所述n和s还能任选地被氧化为多种氧化状态。可以连接在杂环基团的杂原子或碳原子上。杂环基可包括稠合或桥联的环以及螺环。杂环的实例包括四氢呋喃(thf)、二氢呋喃、1,4-二烷、吗啉、1,4-二噻烷、哌嗪、哌啶、1,3-二氧戊环、咪唑烷、咪唑啉、吡咯啉、吡咯烷、四氢吡喃、二氢吡喃、氧硫杂环戊烷(oxathiolane)、二硫戊环、1,3-二烷、1,3-二噻烷、氧硫杂环己烷、硫吗啉等。
杂环基可以被1、2或3个诸如以下的取代基所取代：烷基、羟基(或被保护的羟基)、卤素、氧代(例如，＝o)、氨基、烷基氨基或二烷基氨基、烷氧基、环烷基、羧基、杂环氧基(其中杂环氧基是指经由氧桥连接的杂环)、烷基-o-c(o)-、巯基、硝基、氰基、氨磺酰基或磺酰胺、芳基、烷基-c(o)-o-、芳基-c(o)-o-、芳基-s-、芳氧基、烷基-s-、甲酰基(例如，hc(o)-)、氨基甲酰基、芳基-烷基-和被烷基、环烷基、烷氧基、羟基、氨基、烷基-c(o)-nh-、烷基氨基、二烷基氨基或卤素取代的芳基。
术语“芳基”包括6元-8元的单环芳族基团，例如苯基、环辛烯基；“芳基”还包括8元-14元的多环(二环、三环)芳基，例如萘、菲等。
术语“杂芳基”其是指至少一个环碳原子被选自o、s、n的杂原子替代的芳香性的环状基团，可以包含1-4个杂原子；杂芳基可以单环杂方基或多环杂芳基，可以是5-14元杂芳基、5-12元杂芳基、5-10元杂芳基、5-8元杂芳基、5-6元杂芳基，例如吡咯、呋喃、噻吩、噻唑、异噻唑、咪唑、三唑、四唑、吡唑、唑、异唑、吡啶、吡嗪、哒嗪和嘧啶等；此外，术语“芳基”还包括多环芳基，例如三环、二环，例如萘、苯并唑、苯并二唑、苯并噻唑、苯并咪唑、苯并噻吩、亚甲二氧基苯基、喹啉、异喹啉、萘啶、吲哚、苯并呋喃、嘌呤、苯并呋喃、脱氮嘌呤或中氮茚。这些杂芳基也称为“芳基杂环”、“杂环”、“杂芳基”或“杂芳族基团”。
典型的杂芳基包括2-或3-噻吩基；2-或3-呋喃基；2-或3-吡咯基；2-、4-或5-咪唑基；3-、4-或5-吡唑基；2-、4-或5-噻唑基；3-、4-或5-异噻唑基；2-、4-或5-唑基；3-、4-或5-异唑基；3-或5-1,2,4-三唑基；4-或5-1,2,3-三唑基；四唑基；2-、3-或4-吡啶基；3-或4-哒嗪基；3-、4-或5-吡嗪基；2-吡嗪基；2-、4-或5-嘧啶基。
术语“杂芳基”还包括其中杂芳族环与一个或多个芳基、环脂族或杂环基的环稠合的基团，其中其连接基团或连接点位于杂芳族环上。其实例包括但不限于1-、2-、3-、5-、6-、7-或8-中氮茚基；1-、3-、4-、5-、6-或7-异吲哚基；2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基；2-、3-、4-、5-、6-或7-吲唑基；2-、4-、5-、6-、7-或8-嘌呤基；1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-或9-喹嗪基；2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基；1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基；1-、4-、5-、6-、7-或8-酞嗪基；2-、3-、4-、5-或6-萘啶基；2-、3-、5-、6-、7-或8-喹唑啉基；3-、4-、5-、6-、7-或8-噌啉基；2-、4-、6-或7-蝶啶基；1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-4ah咔唑基；1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-咔唑基；1-、3-、4-、5-、6-、7-、8-或9-咔啉基；1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-、9-或10-菲啶基；1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-或9-吖啶基；1-、2-、4-、5-、6-、7-、8-或9-啶基；2-、3-、4-、5-、6-、8-、9-或10-菲咯啉基；1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-或9-吩嗪基；1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-、9-或10-吩噻嗪基；1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-、9-或10-吩嗪基；2-、3-、4-、5-、6-或1-、3-、4-、5-、6-、7-、8-、9-或10-苯并异喹啉基；2-、3-、4-或噻吩并[2,3-b]呋喃基；2-、3-、5-、6-、7-、8-、9-、10-或11-7h-吡嗪并[2,3-c]咔唑基；2-、3-、5-、6-或7-2h-呋喃并[3,2-b]-吡喃基；2-、3-、4-、5-、7-或8-5h-吡啶并[2,3-d]-o-嗪基；1-、3-或5-1h-吡唑并[4,3-d]-唑基；2-、4-或5-4h-咪唑并[4,5-d]噻唑基；3-、5-或8-吡嗪并[2,3-d]哒嗪基；2-、3-、5-或6-咪唑并[2,1-b]噻唑基；1-、3-、6-、7-、8-或9-呋喃并[3,4-c]噌啉基；1-、2-、3-、4-、5-、6-、8-、9-、10或11-4h-吡啶并[2,3-c]咔唑基；2-、3-、6-或7-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪基；7-苯并[b]噻吩基；2-、4-、5-、6-或7-苯并唑基；2-、4-、5-、6-或7-苯并咪唑基；2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基；1-、2-、4-、5-、6-、7-、8-或9-苯并氧杂基；2-、4-、5-、6-、7-或8-苯并嗪基；1-、2-、3-、5-、6-、7-、8-、9-、10-或11-1h-吡咯并[1,2-b][2]苯并氮杂基。典型的稠合杂芳基包括2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基；1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基；2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基；2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并[b]噻吩基；2-、4-、5-、6-或7-苯并唑基；2-、4-、5-、6-或7-苯并咪唑基；2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基。
“芳基”或“杂芳基”的芳环可以在一个或多个环位置上被上文所述的取代基取代，例如卤素、羟基、烷氧基、烷基羰基氧基、芳基羰基氧基、烷氧基羰基氧基、芳基氧基羰基氧基、羟基羰基、烷基羰基、烷基氨基羰基、芳基烷基氨基羰基、烯基氨基羰基、烷基羰基、芳基羰基、芳基烷基羰基、烯基羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、烷硫基羰基、磷酸酯、膦酸酯、氰基、氨基(包括烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基和烷基芳基氨基)、酰基氨基(包括烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、氨基甲酰基和脲基)、脒基、亚氨基、巯基、烷硫基、芳硫基、羟基硫代羰基、硫酸酯、烷基亚磺酰基、磺酸酯基、氨磺酰基、磺酰氨基、硝基、三氟甲基、氰基、叠氮基、杂环基、烷基芳基，或芳族基团或杂芳族基团，其中芳基基团也可以与非芳族的脂环或杂环稠合或桥连，以形成多环(例如四氢萘)。
术语“烷氧基”包括与氧原子共价连接的烷基。烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、异丙基氧基、丙氧基、丁氧基和戊氧基。烷氧基中的氢可以被取代基取代，被取代的烷氧基的实例包括卤代烷氧基。烷氧基还可被以下基团取代：烯基、炔基、卤素、羟基、烷基羰基氧基、芳基羰基氧基、烷氧基羰基氧基、芳氧基羰基氧基、羟基羰基、烷基羰基、芳基羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、烷硫基羰基、磷酸酯基、氰基、氨基(包括烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基和烷基芳基氨基)、酰基氨基(包括烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、氨基甲酰基和脲基)、脒基、亚氨基、巯基、烷硫基、芳硫基、羟基硫代羰基、烷基亚磺酰基、磺酸基、氨磺酰基、磺酰氨基、硝基、三氟甲基、氰基、叠氮基、杂环基、烷基芳基或芳族基团。
术语“烷基酰基”包括有酰基(ch3co-)或羰基基团的化合物或基团。其包括被取代的酰基基团。烷基酰基中一个或多个氢原子可以被下列基团替换：例如，烷基、炔基、卤素、羟基、烷基羰基氧基、芳基羰基氧基、烷氧基羰基氧基、芳基氧基羰基氧基、羟基羰基、烷基羰基、芳基羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、烷硫基羰基、烷氧基、磷酸酯(phosphate)、-p(o)(o-)2(phosphonato)、-ph(o)(o-)(phosphinato)、氰基、氨基(包括烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基和烷基芳基氨基)、酰基氨基(包括烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、氨基甲酰基和脲基)、脒基、亚氨基、巯基、烷硫基、芳硫基、羟基硫代羰基、硫酸酯(sulfate)、烷基亚磺酰基、-so2o-(sulfonato)、氨磺酰基、磺酰氨基、硝基、三氟甲基、氰基、叠氮基、杂环基、烷基芳基或芳族基团或杂芳族基团。
本文中，各基团，包括但不限于r0、r’、r、r10及r14的可选择基团，例如
本文中，通式(i)
术语“立体异构体”表示由于至少一个不对称中心形成的异构体。在具有一个或多个(例如一个、两个、三个或四个)不对称中心的化合物中，其可产生外消旋体、外消旋混合物、内消旋体、单一对映异构体、非对映异构体混合物和单独的非对映异构体。特定个别分子也可以几何异构体(顺式/反式)存在。
术语“溶剂合物”是指通常通过溶剂分解反应与溶剂物理结合的化合物形式。此物理结合包含氢键结合。常规溶剂包含水、乙醇、甲醇、乙酸等。式(i～iii)化合物可以结晶形式制备且可呈溶剂合物形式(例如水合形式)。适宜溶剂合物包含药学可接受的溶剂合物(例如水合物)，且进一步包含化学计量溶剂合物及非化学计量溶剂合物。在某些情形下，例如当一个或多个溶剂分子纳入结晶固体的晶格中时，溶剂合物将能够解离。“溶剂合物”涵盖溶液相及可解离溶剂合物。代表性溶剂合物包含水合物、乙醇合物及甲醇合物等。
术语“前药“是指通过与酶、胃酸等在生理条件下在活体内例如通过各自在酶催化下进行的氧化、还原、水解等反应转化为本发明化合物的衍生物。
术语“代谢物”是指在细胞或有机体优选人中源自本发明任意化合物的所有分子。
术语“同位素衍生物”是指构成化合物的一或多个原子处，以非天然比例含有同位素的所述的化合物。例如氘(2h或d)、氚(3h或t)、碳－13(13c)、氮－15(15n)、氧－18(18o)等。
术语“药物组合物”表示含有一种或多种本发明通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构形式、多晶型物、溶剂合物、前药、代谢物或同位素衍生物；药物组合物还可以包含其他组分例如生理学/药学上可接受的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。
所述载体包括药学领域所有的可用于制成注射和非注射给药途径的药物制剂，例如稀释剂、润湿剂、填充剂、粘合剂、湿滑剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、阻滞剂、吸附剂、助悬剂、絮凝剂、反絮凝剂、乳化剂、常用基质、增溶剂、助溶剂、潜溶剂、防腐剂、矫味剂、着色剂、抗氧剂、缓冲剂、抑菌剂、等渗调节剂、ph调节剂、金属离子络合剂、硬化剂、增稠剂等。
具体实施方式
以下结合实施例用于进一步描述本发明，但这些实施例并非限制着本发明的范围。本发明实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照原料或商品制造厂商所建议的条件。未注明具体来源的试剂，为市场购买的常规试剂。
本发明中的缩写具有以下含义：
化合物的结构是通过核磁共振(nmr)或/和质谱(ms)来确定的。nmr的测定是用varian或bruker400mhz核磁仪。nmr化学位移(δ)以10-6(ppm)的单位给出。测定溶剂为氘代氯仿(cdcl3)，氘代二甲基亚砜(dmso-d6)，氘代甲醇(cd3od)，内标为四甲基硅烷(tms)。
液质联用色谱lc-ms的测定用agilent1260高效液相色谱仪(agilentzorbaxc1875×4.6mm，3.5um色谱柱)和agilent6120质谱仪。
hplc测定使用waters2695-2996高压液相色谱仪(giminic18150×4.6mm色谱柱)。
反应的监测采用薄层色谱法(tlc)或lc-ms。
薄层层析硅胶板使用烟台黄海hsgf254或青岛gf254硅胶板，薄层色谱法(tlc)使用的硅胶板采用的规格是0.15mm～0.2mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。
柱层析一般使用烟台黄海硅胶200～300目或300～400目硅胶。
本发明实施例中的起始原料是己知的并且可以在市场上买到，或者可以采用或按照本领域己知的方法来合成。
氢化反应通常抽真空，充入氢气，反复操作3次。
使用的展开剂体系有：石油醚和乙酸乙酯体系、正己烷和乙酸乙酯体系、二氯甲烷和甲醇体系。溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节。
纯化化合物采用的柱层析的洗脱剂的体系和薄层色谱法的展开剂体系包括：石油醚和乙酸乙酯体系、正己烷和乙酸乙酯体系、二氯甲烷和甲醇体系。溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等碱性或酸性试剂进行调节。
在以下实施例中，如无特殊说明，反应的温度为室温(20℃～30℃)。
在以下实验步骤中，各起始原料若为前述步骤所制备的中间体，则该起始原料可能不一定是前述中间体所提及的批次制备的。
中间体的合成
合成中间体int-14-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-硝基-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮
第一步合成4-氨基-n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒int-1b
将化合物4-氨基-n-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒氯int-1a(20g，123.4mmol，采用专利申请“wo2010005958”公开的方法制备而得)溶于乙酸乙酯(100ml)和水(100ml)中，加入3-溴-4-氟苯胺(23.2g，123.4mmol)，碳酸氢钠(15.5g，185.1mmol)，加热至60℃，反应3小时，冷却，分层，水相用乙酸乙酯萃取，合并有机相，并用水洗，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到标题化合物int-1b(38g，120.9mmol)，收率98％。
msm/z(esi):316[m+h]+。
第二步合成3-(4-氨基-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮int-1c
将化合物int-1b(20g，63.4mmol)溶于乙酸乙酯(200ml)中，加入cdi(15.4g，95.2mmol)，加热至60℃，反应1小时，冷却，反应液用1mhcl(2×200ml)洗，有机相再用水洗，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到标题化合物int-1c(21g，61.5mmol)，收率97％。
msm/z(esi):342[m+h]+。
第三步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-硝基-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮int-1
将化合物int-1c(5g，14.6mmol)溶于浓硫酸(40ml)中，在冰浴下缓慢滴加30％双氧水(13.8ml，117.3mmol)，然后在冰浴下搅拌1小时，升至室温下搅拌反应6小时，反应完全。倾入冰水中，用乙酸乙酯萃取(2×200ml)，合并有机相，并用水洗，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(pe：ea＝4:1)，得到标题化合物int-1(2.9g，7.8mmol)，收率53％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.61–7.58(m,1h),7.27–7.26(m,1h),7.25(d,j＝1.4hz,1h)。
合成中间体int-23-(4-((2-氨基乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮盐酸盐
第一步合成叔丁基(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-氧杂-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙基氨基甲酸酯int-2a
化合物int-1(1.0g，2.7mmol)溶于thf(30ml)，加入化合物n-叔丁氧羰基-1,2-乙二胺(1.3g，8.1mmol)，室温搅拌10分钟，tlc监测原料消耗完。将反应液浓缩，粗品经柱层析纯化(pe：ea＝1:1)得到标题化合物int-2a(1.2g，2.5mmol),收率92％。
1hnmr(400mhz,meod-d4)δ7.86(dd,j＝6.0,2.5hz,1h),7.53(ddd,j＝8.8,4.2,2.6hz,1h),7.39(t,j＝8.6hz,1h),3.41(dd,j＝6.5,5.0hz,2h),3.32-3.31(m,2h),1.40(s,9h)。
msm/z(esi):507[m+na]+。
第二步合成3-(4-((2-氨基乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮盐酸盐int-2
化合物int-2a(0.24g，0.5mmol)溶于2mhcl乙酸乙酯溶液(5ml)，室温下搅拌2h。tlc检测反应完全。溶剂减压蒸干，得到标题化合物int-2(0.21g，0.5mmol，100％)。
msm/z(esi):385[m+h]+。
合成中间体int-33-二氟甲基-4-氟苯胺
第一步合成2-二氟甲基-1氟基-4-硝基苯int-3b
将2-氟-5硝基苯甲醛int-3a(3.7g，22.0mmol)溶于无水dcm(35ml)中，冰水浴冷却下，缓慢滴加dast(17.7g，110mmol)dcm溶液(15ml)，加毕，冰水浴反应1h，室温反应过夜。将反应液缓慢滴加到冰水(100ml)中，加入dcm(100ml)萃取，有机层用饱和nahco3(2×50ml)洗涤后，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩至干，柱层析纯化得标题化合物int-3b(4.1g)，收率98％。
第二步合成3-二氟甲基-4-氟苯胺int-3
将化合物int-3b(4.1g，21.5mmol)溶于meoh(90ml)中，冰水浴冷却下，缓慢滴加浓盐酸(22ml)，加毕，分批加入铁粉(4.8g，86.0mmol)，室温反应1.5h。将反应液滴加到饱和nahco3溶液(150ml)中，乙酸乙酯(2×100ml)萃取，合并有机层，经饱和食盐水(100ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩至干得标题化合物int-3(3.3g)，收率94％。
msm/z(esi):162[m+h]+。
合成中间体int-44-(3-二氟甲基-4-氟苯基)-3-(4-硝基-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮
采用与int-1相同的方法制备。第一步以int-3为原料，与int-1a反应。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.59–7.56(m,1h),7.51–7.45(m,1h),7.32(tt,j＝9.0,1.2hz,1h),6.88(t,j＝54.4hz,1h)。
合成中间体int-54-(3-氯-4-氟苯基)-3-(4-硝基-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮
以3-氯-4-氟苯胺为原料，与int-1a反应。后续步骤采用与中间体int-1相同的方法制备。
实施例1合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((3-氨基磺酰基丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒1
第一步合成3-(1,3-二羰基异二氢吲哚-2-基)丙烷-1-磺酸钾盐1b
将化合物1,3-丙烷磺内酯1a(1.0g，8.2mmol)和邻苯二甲酰亚胺钾(1.5g，8.2mmol)溶于乙醇(50ml)中，回流1小时。冷却到室温，将白色不溶物过滤，干燥得到标题化合物1b(1.5g，5.5mmol)，白色固体，收率68％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.86–7.75(m,4h),3.58(t,j＝7.2hz,2h),2.41–2.34(m,2h),1.88–1.79(m,2h)。
msm/z(esi):270[m+h]+(磺酸)。
第二步合成3-(1,3-二羰基异二氢吲哚-2-基)丙烷-1-磺酰胺1c
将化合物1c(1.0g，3.3mmol)溶解于二氯甲烷(50ml)中，向该反应体系加入氯化亚砜(4.4g，37mmol)。该反应混合物在回流状态下搅拌2小时。反应液浓缩得到磺酰氯粗品。该粗品溶解于四氢呋喃(5ml)中,慢慢滴加入氨水(5ml)中，室温下搅拌1小时，反应液浓缩得到粗品，柱层析纯化(dcm:meoh＝10:1)，得到标题化合物1c(460mg，1.7mmol)，收率53％。
msm/z(esi):269[m+h]+。
第三步合成3-氨基丙烷-1-磺酰胺盐酸盐1d
化合物1c(1g，3.7mmol)溶于乙醇(20ml)中，加入98％水合肼水溶液(1ml)。回流2小时，冷却到室温，将析出的白色固体过滤，滤液浓缩。浓缩后残留的固体溶于水中，加入3n的盐酸调节ph值到4，析出白色固体过滤，将滤液浓缩得到标题化合物1d粗品(300mg，1.6mmol)，收率43％。
第四步合成3-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)丙烷-1-磺酰胺1e
将化合物int-1(150mg，0.4mmol)和化合物1d(83mg，0.6mmol)溶于四氢呋喃(10ml)中，加入三乙胺(121mg，1.2mmol)，在室温下搅拌2小时，点板监测原料消失。反应液浓缩得到粗品，板层析纯化(dcm:meoh＝20:1)得到标题化合物1e(80mg，0.17mmol),收率43％。
msm/z(esi):463[m+h]+。
第五步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((3-氨基磺酰基丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒1
将化合物1e(80mg，0.17mmol)溶于四氢呋喃(10ml)中，加入2m氢氧化钠水溶液(3ml)，室温下搅拌1小时，用3m盐酸水溶液淬灭，调节ph值到8，混合物用乙酸乙酯萃取(3×10ml)，合并有机相。用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品。该粗品用板层析纯化(dcm:meoh＝10:1)得到标题化合物1(40mg，0.09mmol)，收率54％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.87(s,1h),7.19–7.12(m,1h),7.08(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.78(s,2h),6.73(ddd,j＝8.9,4.1,2.8hz,1h),6.27(t,j＝6.0hz,1h),3.32(d,j＝6.6hz,1h),3.04–2.95(m,2h),1.97(p,j＝7.0hz,2h).msm/z(esi):437[m+h]+。
实施例2合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((3-(甲磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒2
第一步合成(3-(甲硫基)丙基)氨基甲酸叔丁基酯2b
化合物(3-溴丙基)氨基甲酸叔丁基酯2a(1.0g，4.48mmol)溶于dmso(5ml)，加入甲硫醇钠(345mg，4.93mmol)，室温下搅拌过夜。加入水搅拌0.5h后加乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到标题化合物2b(820mg，4.0mmol)，收率89％。
第二步合成(3-(甲磺酰基)丙基)氨基甲酸叔丁酯2c
化合物2b(820mg，4.0mmol)溶于甲醇(20ml),滴加oxone(3.97g，6.5mmol)水溶液(20ml)，室温下搅拌1h。加水和二氯甲烷萃取，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到标题化合物2c(1.0g，4.2mmol)，收率98％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ4.72(s,1h),3.30(t,j＝6.7hz,2h),3.16–3.01(m,2h),2.92(s,3h),2.15–1.92(m,2h),1.44(s,9h)。
第三步合成3-(甲磺酰基)丙基-1-胺2d
化合物2c(170mg，0.72mmol)溶于二氯甲烷(20ml)，滴加tfa(2ml)，室温下搅拌1h。反应完毕后，加氨水碱化溶液，二氯甲烷萃取三次，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到标题化合物2d(60mg，0.44mmol)，收率61％。
第四步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((3-(甲磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4噁二唑-5(4h)-酮2e
化合物2d(60mg，0.44mmol)和三乙胺(44mg，0.44mmol)溶于四氢呋喃(10ml)，加入化合物int-1(162mg，0.44mmol)，在室温下搅拌1h。加入乙酸乙酯和水，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后板层析纯化得到标题化合物2e(180mg，0.39mmol)，收率88％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.64(dd,j＝5.8,2.5hz,1h),7.38–7.33(m,1h),7.32–7.27(m,1h),5.55(t,j＝6.6hz,1h),3.63(q,j＝6.4hz,2h),3.13(t,j＝7.4hz,2h),2.95(s,3h),2.29(p,j＝6.8hz,2h)。
msm/z(esi):462[m+h]+。
第五步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((3-(甲磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒2
化合物2e(180mg，0.39mmol)溶于甲醇(10ml)，加入无水碳酸钾(376mg，2.73mmol)，在50℃下搅拌1h。冷却后，加入饱和氯化铵溶液，用二氯甲烷萃取三次，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后板层析纯化得到标题化合物2(120mg，0.28mmol)，收率71％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.41(s,1h),8.86(s,1h),7.15(t,j＝8.8hz,1h),7.08(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.73(ddd,j＝8.9,4.2,2.8hz,1h),6.29(t,j＝6.0hz,1h),3.31(t,j＝6.4hz,2h),3.14–3.07(m,2h),1.99–1.91(m,2h)。
msm/z(esi):436[m+h]+。
实施例3合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-((n-(2-甲氧基乙基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒3
第一步合成(2-甲氧乙基)氨基磺酰氯3b
将2-甲氧乙基-1-胺3a(200mg,2.6mmol)和三乙胺(0.56ml,4mmol)的混合液在冰浴下缓慢滴加到1m的磺酰氯的二氯甲烷溶液(4ml)中。该反应混合物在0℃下搅拌反应2小时后倒入到冰水中，用二氯甲烷萃取(3×10ml)。合并有机相，有机相用饱和食盐水洗两次，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩滤液得粗品标题化合物3b，呈无色油状。该粗品直接用于下一步反应。
第二步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-((n-(2-甲氧乙基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮3c
将化合物int-2(175mg，0.41mmol)和三乙胺(83mg，0.82mmol)溶于二氯甲烷(4ml)，室温下向该体系滴加化合物3b(84mg，0.49mmol)的二氯甲烷溶液。滴加完毕，该反应混合物在室温下搅拌1小时，反应液浓缩得到粗品。该粗品用板层析纯化(dcm:meoh＝10:1)得到标题化合物3c(210mg，0.4mmol)，收率96％。
msm/z(esi):522[m+h]+。
第三步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-((n-(2-甲氧基乙基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒3
将化合物3c(210mg，0.4mmol)溶于四氢呋喃中(5ml)中，室温下向该体系中加入2m的氢氧化钠水溶液(2ml)。该反应混合物在室温下搅拌1小时，在冰浴下用3m盐酸水溶液淬灭反应，调节ph值到8，用乙酸乙酯萃取(3×10ml)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤两次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩得粗品。粗品用板层析纯化(dcm:meoh＝10:1)得到标题化合物3(90mg，0.18mmol)，白色固体，收率45％。
1hnmr(400mhz,meod-d4)δ7.11(dd,j＝6.0,2.7hz,1h),7.02(t,j＝8.6hz,1h),6.83(ddd,j＝8.8,4.1,2.7hz,1h),3.44(dt,j＝7.9,5.9hz,4h),3.31(s,3h),3.20(dd,j＝6.6,5.4hz,2h),3.11(t,j＝5.6hz,2h)。
msm/z(esi):496[m+h]+。
实施例4合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(n-(2-羟基丙基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒4
第一步合成2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧)丙基-1-胺4b
化合物1-氨基-2-丙醇4a(500mg，6.66mmol)，三乙胺(808mg，7.99mmol)溶于二氯甲烷(20ml)，加入叔丁基二苯基氯硅烷(2.12g，7.32mmol)，在室温下搅拌4h。加入饱和氯化铵溶液，用二氯甲烷萃取三次，有机相合并，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后柱层析得到标题化合物4b(1.35g，4.31mmol)，收率65％。
第二步合成(2-((2-氧代噁唑烷)-3-氨基磺酰基)乙基)氨基甲酸叔丁酯4e
化合物氯磺酰异氰酸酯4c(5g，35.3mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，在冰浴下，滴加溴乙醇(4.41g，35.3mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液，冰浴下反应2h。
化合物n-叔丁氧羰基-1,2-乙二胺(6.23g，38.9mmol)和三乙胺(7.15g，70.7mmol)溶于二氯甲烷(20ml)中，在冰浴下，滴加上述反应液。滴毕后，自然升温至室温过夜。加水，用二氯甲烷萃取三次，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到标题化合物4e(10g，32.4mmol)，收率91％。粗品直接用于下一步。
第三步合成(2-((n-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧)丙基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯4f
化合物4b(1g，3.23mmol)，4e(1g，3.23mmol)和三乙胺(654mg，6.47mmol)溶于乙腈(30ml)，加热至80℃过夜。加水，用乙酸乙酯萃取三次，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后柱层析得到标题化合物4f(1.1g，2.06mmol)，收率64％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.70–7.61(m,4h),7.48–7.35(m,6h),4.98–4.34(m,3h),4.06–3.96(m,1h),3.23(brs,2h),3.08–2.90(m,4h),1.43(s,9h),1.11(d,j＝6.2hz,3h),1.06(s,9h)。
msm/z(esi):436[m+h-100]+。
第四步合成2-((n-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧)丙基)氨基磺酰基)氨基)乙基胺4g
化合物4f(300mg，0.56mmol)溶于二氯甲烷(20ml)，滴加tfa(2ml)，室温下搅拌1h。反应完毕后，加氨水碱化溶液，二氯甲烷萃取三次，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到标题化合物4g(150mg，0.34mmol)，收率62％。
第五步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(n-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧)丙基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4噁二唑-5(4h)-酮4h
化合物4g(210mg，0.48mmol)溶于四氢呋喃(10ml)，加入化合物int-1(179mg，0.48mmol)，在室温下搅拌1h。加入乙酸乙酯和水，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后板层析纯化，得到标题化合物4h(250mg，0.33mmol)，收率69％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.70–7.61(m,5h),7.48–7.37(m,6h),7.37–7.31(m,1h),7.29(d,j＝7.7hz,1h),5.63–5.56(m,1h),4.48(brs,1h),4.06–3.96(m,1h),3.52(q,j＝5.8hz,2h),3.22(t,j＝5.6hz,2h),3.08–2.89(m,2h),1.12(d,j＝6.2hz,3h),1.06(s,9h)。
msm/z(esi):682[m+h-76]+。
第六步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(n-(2-羟基丙基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4噁二唑-5(4h)-酮4i
化合物4h(250mg，0.33mmol)溶于四氢呋喃(10ml)，加入tbaf(860mg，3.3mmol)，室温下搅拌1h。反应完毕后，加乙酸乙酯，用饱和氯化铵溶液洗三次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后柱层析得标题化合物4i(100mg，0.19mmol)，收率58％。
msm/z(esi):522[m+h]+。
第七步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(n-(2-羟基丙基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒4
化合物4i(100mg，0.19mmol)溶于甲醇(10ml)，加入无水碳酸钾(185mg，1.34mmol)，在50℃下搅拌1h。冷却后，加入饱和氯化铵溶液，用二氯甲烷萃取三次，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后板层析纯化得到标题化合物4(60mg，0.12mmol)，收率64％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.49(s,1h),8.89(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.12(dd,j＝6.0,2.7hz,1h),6.97(t,j＝5.9hz,1h),6.80–6.73(m,2h),6.23(t,j＝6.0hz,1h),4.67(d,j＝4.7hz,1h),3.73–3.61(m,1h),3.35(q,j＝6.1hz,2h),3.05(q,j＝6.2hz,2h),2.82–2.64(m,2h),1.03(d,j＝6.2hz,3h)。msm/z(esi):496[m+h]+。
实施例5合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-((n-(2-羟基乙基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒5
采用与实施例4相同的方法制备，以乙醇胺为起始原料，代替4a。
1hnmr(400mhz,meod-d4)δ7.14(dd,j＝6.0,2.7hz,1h),7.05(t,j＝8.7hz,1h),6.85(ddd,j＝8.8,4.1,2.7hz,1h),3.64(t,j＝5.9hz,2h),3.46(dd,j＝6.6,5.4hz,2h),3.24(dd,j＝6.6,5.4hz,2h),3.09(t,j＝5.9hz,2h).
msm/z(esi):482[m+h]+。
实施例6合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-((n-(1-羟甲基)环丙基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒6
采用与实施例4相同的方法制备，以(1-氨基环丙烷基)甲醇为起始原料，代替4a。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.50(s,1h),8.89(s,1h),7.29(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.11(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.89(t,j＝5.9hz,1h),6.82–6.72(m,1h),6.24(t,j＝6.0hz,1h),4.65(t,j＝5.8hz,1h),3.47(d,j＝5.8hz,2h),3.37–3.33(m,2h),3.02(q,j＝6.2hz,2h),0.77–0.71(m,2h),0.63–0.57(m,2h)。msm/z(esi):508[m+h]+。
实施例7合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((3-((n-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒7
采用与实施例4相同的方法制备，以2-氨基-2-甲基-1-丙醇为起始原料，代替4a。
1hnmr(400mhz,methanol-d4)δ.16–6.66(m,5h),3.44(d,j＝5.5hz,4h),3.23(dt,j＝6.4,4.9hz,2h),1.25(s,5h).
msm/z(esi):510[m+h]+。
实施例8合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((3-((n-(1-羟基丙烷-2-基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒8
采用与实施例4相同的方法制备，以2-氨基-1-丙醇为起始原料，代替4a。1hnmr(400mhz,methanol-d4)δ7.11(dd,j＝6.0,2.7hz,1h),7.02(t,j＝8.7hz,1h),6.83(ddd,j＝8.8,4.1,2.7hz,1h),3.55–3.31(m,5h),3.22(dd,j＝6.5,5.4hz,2h),1.16(d,j＝6.6hz,3h).
msm/z(esi):496[m+h]+。
实施例9合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-((n-甲基-n-(吡咯烷-3-基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒9
第一步合成3-((氯磺酰)(甲基)氨基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯9b
氮气保护下，磺酰氯so2cl2(0.135g，1.0mmol)溶于无水二氯甲烷(5ml)，冷却至-10℃，然后缓慢滴加3-(甲基氨基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯9a(1.0g，1.0mmol)和三乙胺(0.1g，1.0mmol)的二氯甲烷溶液(10ml)。反应升至室温反应2小时，直接用于下一步。
第二步合成3-((n-(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙基)氨基磺酰基)(甲基)氨基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯9c
氮气保护下，化合物int-2(0.42g，1.0mmol)，三乙胺(0.20g，2.0mmol)溶于无水二氯甲烷(5ml)，冰水浴冷却至0℃，然后滴加上一步的化合物9b反应液，在室温下搅拌过夜。加入饱和氯化铵溶液,振荡，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到的粗品用板层析纯化(dcm:meoh＝20:1)得标题化合物9c(200mg，0.31mmol)，收率31％。
msm/z(esi):669[m+na]+。
第三步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(n-甲基-n‘-(吡咯烷-3-基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4噁二唑-5(4h)-酮三氟乙酸盐9d
化合物9c(200mg，0.31mmol)溶于dcm(5ml)，加入tfa(0.5ml)，室温下反应2小时。反应液减压浓缩至干得粗品标题化合物9d(190mg，0.3mmol)，收率97％。
msm/z(esi):547[m+h]+。
第四步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-((n-甲基-n-(吡咯烷-3-基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒9
化合物9d(190mg，0.3mmol)溶于thf(5ml)，加入naoh水溶液(1.0ml，2m)。搅拌1小时。加入氯化铵溶液和乙酸乙酯萃取，有机相合并后用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到的粗品经板层析纯化(dcm:meoh＝10:1)得标题化合物9(50mg，0.1mmol)，收率33％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.48(s,1h),9.24(s,1h),9.07(s,1h),8.90(s,1h),7.52(d,j＝6.0hz,1h),7.19(t,j＝8.8hz,1h),7.11(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.78(dd,j＝7.7,4.3hz,1h),6.27(d,j＝6.5hz,1h),4.45(q,j＝8.3hz,1h),3.32(dd,j＝14.2,7.7hz,4h),3.04(d,j＝6.1hz,4h),2.68(s,3h),2.10–1.94(m,2h).
msm/z(esi):521[m+h]+。
实施例10合成n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-(2,2-二氧化-1,2,3-氧杂噻唑烷-3-基)乙基)氨基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒10
第一步合成2-氧化-1,2,3-氧杂噻唑烷-3-甲酸叔丁酯10b
将咪唑(2.9g，43.4mmol)溶于二氯甲烷(50ml)中，在0℃下将氯化亚砜(0.94ml,13mmol)的二氯甲烷(4ml)溶液慢慢滴加到体系中，滴加完毕，将该反应体系升温至室温并继续搅拌1小时。再次将反应体系降温至-78℃，将化合物10a(2-羟基乙基)氨基甲酸叔丁酯(1g，6.2mmol)的二氯甲烷溶液(4ml)缓慢滴加进反应混合物中，而后慢慢升温至室温并继续搅拌过夜。将反应体系中的固体滤出，滤饼用二氯甲烷洗两次，合并滤液并用水洗两次，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩的粗品标题化合物10b(1.2g，5.7mmol)，收率92％，呈淡棕色油状物。粗品直接用于下一步反应。
第二步合成2,2-二氧化-1,2,3-氧杂噻唑烷-3-甲酸叔丁酯10c
将化合物10b(1.2g，5.7mmol)溶于二氯甲烷(40ml)中，加入高碘酸钠(3.0g，14.3mmol)的水溶液(5ml)，加完后反应混合物降温至0℃，将三氯化钌(0.15g，2.45mmol)加入到反应混合物中。该反应混合物在0℃下搅拌2小时，然后慢慢升至室温并搅拌过夜。反应液用二氯甲烷萃取三次，合并有机相，有机相用水和饱和食盐水洗，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到标题化合物10c(0.5g，2.2mmol)，收率38％，呈乳白色固体。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ4.61(t,j＝6.4hz,2h),4.04(t,j＝6.4hz,2h),1.54(s,9h)。
第三步合成2,2-二氧化-1,2,3-氧杂噻唑烷10d
将化合物10c(0.5g，2.2mmol)溶于二氯甲烷(10ml)中，慢慢加入三氟乙酸(4ml)。该反应混合物在室温下搅拌1小时，反应液浓缩得到粗品标题化合物10d，该粗品直接用于下一步反应。
第四步合成(2-(2,2-二氧化-1,2,3-氧杂噻唑烷-3-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯10e
将化合物10d(270mg，2.2mmol)溶于dmf(5ml)中，室温下加入(2-溴乙基)氨基甲酸叔丁酯(590mg，2.6mmol)和无水碳酸钾(910mg,6.6mmol)，室温下反应过夜。加入饱和氯化铵溶液，用乙酸乙酯萃取三次，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后，柱层析纯化，得到标题化合物10e(230mg,0.86mmol)，收率39％。
msm/z(esi):289[m+na]+。
第五步合成2,2-二氧化-3-(2-氨基乙基)-1,2,3-氧杂噻唑烷三氟乙酸盐10f
将化合物10e(230mg，0.86mmol)溶于二氯甲烷(5ml)中，慢慢加入三氟乙酸(1ml)。该反应混合物在室温下搅拌1小时，反应液浓缩得到粗品标题化合物10f，该粗品直接用于下一步反应。
第六步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(2,2-二氧化-1,2,3-氧杂噻唑烷-3-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮10g
将化合物10f(200mg,0.76mmol)溶于四氢呋喃(5ml)中，加入化合物int-1(283mg,0.76mmol)和三乙胺(154mg,1.52mmol)。该反应混合物在室温下搅拌1小时，浓缩反应液得到粗品，粗品用板层析纯化(dcm:meoh＝10:1)得到标题化合物10g(155mg,0.32mmol)，收率42％
msm/z(esi):491[m+h]+。
第七步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-(2,2-二氧化-1,2,3-氧杂噻唑烷-3-基)乙基)氨基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒10
将化合物10g(150mg，0.31mmol)溶于四氢呋喃(5ml)中，然后加入2n的氢氧化钠水溶液(2ml)，室温下搅拌1小时，用3n盐酸水溶液淬灭，调节ph值到8，用乙酸乙酯萃取三次，合并有机相，有机相用水和饱和食盐水洗，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得粗品，粗品经板层析纯化(dcm:meoh＝8:1)得到标题化合物10(45mg，0.097mmol)，收率32％。
msm/z(esi):465[m+h]+。
实施例11合成n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-(1,1-二氧化异噻唑烷-2-基)乙基)氨基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒11
第一步合成(2-((3-氯丙基)磺酰胺基)乙基)氨基甲酸叔丁酯11b
n-叔丁氧羰基-1,2-乙二胺(1.6g，10.0mmol)和dipea(1.50g，11.6mmol)溶于thf(20ml)，冰水浴冷却下，滴加3-氯丙烷-1-磺酰氯11a(1.77g,10.0mmol)的thf溶液(5ml)。滴完逐渐升温至室温过夜。旋干，加入乙酸乙酯和氯化铵溶液分液，有机相用食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得标题化合物11b(3.0g，10.0mmol，100％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ5.03(brs,1h),4.90(brs,1h),3.68(t,j＝6.2hz,2h),3.30–3.26(m,4h),3.23–3.15(m,2h),2.35–2.22(m,2h),1.45(s,9h)。
msm/z(esi):301[m+h]+。
第二步合成(2-(1,1-二氧化异噻唑烷-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯11c
氮气保护下，化合物11b(0.6g，2.0mmol)溶于无水dmf(10ml)，冰浴冷却下加入nah(120mg，3.0mmol，60％wt)，加完后逐渐升至室温搅拌过夜。向反应液中加入氯化铵溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取3次，有机相合并，饱和食盐水洗涤2次，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得标题化合物11c(0.27g,1.0mmol)，收率51％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ4.92(brs,1h),3.33–3.27(m,4h),3.20–3.11(m,4h),2.41–2.30(m,2h),1.43(s,9h)。
msm/z(esi):287[m+na]+。
第三步合成2-(1,1-二氧化异噻唑烷-2-基)乙基胺盐酸盐11d
化合物11c(0.3g，1.13mmol)溶于2mhcl乙酸乙酯溶液(5ml)，室温下搅拌4小时。旋干得标题化合物11d(0.23g，1.13mmol)，收率100％。直接用于下一步。
第四步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(1,1-二氧化异噻唑烷-2-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮11e
化合物11d(226mg，1.13mmol)和三乙胺(230mg，2.27mmol)溶于dcm(10ml)，加入化合物int-1(430mg，1.16mmol)，室温下搅拌30min。反应液旋干，加入乙酸乙酯和少量氯化铵溶液洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得粗品，经板层析纯化后，得到标题化合物11e(150mg，0.3mmol)，收率27％。
msm/z(esi):489[m+h]+。
第五步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-(1,1-二氧化异噻唑烷-2-基)乙基)氨基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒11
化合物11e(0.10g，0.2mmol)溶于thf(10ml)，加入naoh水溶液(1ml，2m)。室温下搅拌30min。加入饱和氯化铵溶液和乙酸乙酯，有机相分液后用无水硫酸钠干燥，过滤，旋干所得粗品经板层析纯化(dcm:meoh＝10:1)得标题化合物11(42mg，0.09mmol)，收率44％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.46(s,1h),8.90(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.12(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.76(ddd,j＝8.9,4.2,2.7hz,1h),6.28(t,j＝6.1hz,1h),3.41(q,j＝6.3hz,2h),3.24(t,j＝6.7hz,2h),3.20–3.15(m,2h),3.13(t,j＝6.2hz,2h),2.27–2.14(m,2h)。
msm/z(esi):463[m+h]+。
实施例12合成n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-(1,1-二氧化-1,2,5-噻二唑-2-基)乙基)氨基)-n’-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒12
第一步合成2-苄基-1,2,5-噻二唑1,1-二氧化物12b
化合物n1-苄基-1,2-乙二胺12a(1.0g，6.66mmol)溶于1,4-二氧六环(30ml)，加入磺酰胺(640mg，6.66mmol)和三乙胺(1.35g，1.92mmol)，加热回流搅拌16h。冷却后，加入饱和氯化铵溶液，用乙酸乙酯萃取三次，有机相合并后用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品经柱层析纯化，得到标题化合物12b(700mg，3.3mmol)，收率50％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.41–7.27(m,5h),4.56(t,j＝6.7hz,1h),4.18(s,2h),3.47(q,j＝6.6hz,2h),3.27(t,j＝6.6hz,2h)。
msm/z(esi):213[m+h]+。
第二步合成(2-(5-苄基-1,1-二氧化-1,2,5-噻二唑-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯12c
化合物12b(300mg，1.41mmol)溶于dmf(10ml)，加入化合物(2-溴乙基)氨基甲酸叔丁酯(348mg，1.55mmol)和无水碳酸钾(390mg，2.82mmol)，室温下反应过夜。加入饱和氯化铵溶液，用乙酸乙酯萃取三次，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后，板层析得到标题化合物12c(400mg，1.13mmol)，收率80％。
msm/z(esi):378[m+na]+。
第三步合成(2-(1,1-二氧化-1,2,5-噻二唑-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯12d
化合物12c(300mg，0.84mmol)溶于甲醇(10ml)，加入钯碳(10％pd，300mg)，加入甲酸铵(800mg，12.6mmol)，加热回流5h。过滤，浓缩后得到粗品标题化合物12d(200mg,0.75mmol)，收率89％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ4.91(brs,1h),4.32(brs,1h),3.57–3.44(m,4h),3.39(q,j＝5.7hz,2h),3.17(t,j＝6.0hz,2h),1.44(s,9h)。
msm/z(esi):288[m+na]+。
第四步合成2-(2-氨基乙基)-1,2,5-噻二唑1,1-二氧化物12e
化合物12d(80mg，0.3mmol)溶于二氯甲烷(5ml)，室温下滴加tfa(1ml)。于室温下搅拌1h。反应完毕后，加水和氨水碱化溶液，二氯甲烷萃取三次，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到标题化合物12e(50mg，0.3mmol)，收率100％。
msm/z(esi):166[m+h]+。
第五步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-((2-(1,1-二氧化-1,2,5-噻二唑-2-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮12f
化合物12e(50mg，0.3mmol)和int-1(113mg，0.3mmol)溶于四氢呋喃(3ml)，在室温下搅拌1h。加入乙酸乙酯和水，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后板层析纯化，得到标题化合物12f(80mg,0.16mmol)，收率54％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.64(dd,j＝5.8,2.6hz,1h),7.35(ddd,j＝8.8,4.2,2.6hz,1h),7.29(d,j＝7.7hz,1h),5.65(t,j＝6.2hz,1h),4.32(brs,1h),3.74–3.64(m,2h),3.60–3.44(m,4h),3.42–3.28(m,2h)。
msm/z(esi):490[m+h]+。
第六步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-(1,1-二氧化-1,2,5-噻二唑-2-基)乙基)氨基)-n’-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒12
化合物12f(80mg，0.16mmol)溶于甲醇(5ml)，后加入碳酸钾(160mg，1.16mmol)，在50℃下搅拌1h。冷却后，加入饱和氯化铵溶液，用二氯甲烷萃取三次，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩后板层析纯化，得到标题化合物12(25mg，0.05mmol)，收率为33％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.46(s,1h),8.91(s,1h),7.21–7.15(m,2h),7.12(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.75(ddd,j＝8.9,4.2,2.7hz,1h),6.31(t,j＝6.0hz,1h),3.44(q,j＝6.3hz,2h),3.38–3.33(m,2h),3.31–3.24(m,2h),3.10(t,j＝6.3hz,2h)。
msm/z(esi):464[m+h]+。
实施例13合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(2-羰基咪唑烷-1-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒13
第一步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(2-羰基咪唑烷-1-基)乙基)氨基)-1,2,5-恶二唑-3-基)-1,2,4-恶二唑-5(4h)-酮13b
化合物int-1(150mg，0.4mmol)溶于乙腈(2ml)，在室温搅拌下依次加入化合物1-(2-氨基乙基)咪唑烷-2-酮13a(78mg,0.6mmol)和三乙胺(121mg,1.2mmol)，该反应混合物在室温下搅拌反应10分钟，有不溶物析出。过滤得到标题化合物13b(70mg，0.15mmol)，纯度为96％的白色粉末。滤液浓缩得到纯度为63％的标题化合物13b(120mg，0.26mmol)，总收率78％。
msm/z(esi):454[m+h]+。
第二步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(2-羰基咪唑烷-1-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒13
将纯度为63％的化合物13b(120mg,0.26mmol)溶于四氢呋喃(5ml)，室温下加入2n的氢氧化钠水溶液(2ml)。室温搅拌1小时后，在冰浴下用3n的盐酸水溶液淬灭，调节ph值到8。然后用乙酸乙酯萃取(3×30ml),合并有机相。有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品。粗品经板层析纯化两次得到标题化合物13(15mg,0.03mmol)，收率21％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.46(s,1h),8.89(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.12(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.74(ddd,j＝9.0,4.2,2.7hz,1h),6.33(s,1h),6.24(t,j＝5.8hz,1h),3.39–3.30(m,4h),3.28–3.18(m,4h)。
msm/z(esi):428[m+h]+。
实施例14合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(2-吡咯烷酮-1-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲眯14
第一步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(2-吡咯烷酮-1-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮14b
化合物int-1(370mg，1.0mmol)溶于thf(10ml)，加入化合物1-(2-氨基乙基)吡咯烷-2-酮盐酸盐14a(160mg，1.0mmol)，再加入饱和nahco3水溶液(1ml)，室温搅拌3小时。加入饱和氯化铵溶液和少量水，乙酸乙酯萃取两次。有机相用饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干。所得粗品经板层析纯化(pe：ea＝1:2)，得标题化合物14b(135mg，0.3mmol)，收率30％。
msm/z(esi):453[m+h]+。
第二步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(2-吡咯烷酮-1-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲眯14
化合物14b(135mg，0.3mmol)溶于thf(5ml),加入2mnaoh水溶液(1ml)，室温搅拌10分钟后反应完全。加入饱和氯化铵溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取两次。合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干。所得淡黄色固体粗品，加入少量乙酸乙酯和石油醚打浆，过滤，得标题化合物14(50mg，0.12mmol)，收率39％，呈白色固体。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.43(s,1h),8.89(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.12(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.76(ddd,j＝8.9,4.2,2.7hz,1h),6.25(t,j＝5.7hz,1h),3.43–3.32(m,6h),2.17(t,j＝8.1hz,2h),1.95–1.83(m,2h)。
msm/z(esi):427[m+h]+。
实施例15合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(2-甲基-2-氧化-1,3,2-二氮杂磷杂环戊烷-1-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒15
第一步合成1-苄基-2-甲基-2-氧化-1,3,2-二氮杂膦杂环戊烷15a
化合物n1-苄基-1,2-乙二胺12a(500mg，3.3mmol)和三乙胺(840mg，8.3mmol)溶于二氯甲烷(20ml)，0℃下慢慢滴加二氯甲基膦(420mg，3.2mmol)的二氯甲烷溶液(5ml)，滴完逐渐升温至室温过夜。加入饱和氯化铵溶液淬灭，有机相再用饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品。粗品经柱层析纯化得到标题化合物15a(220mg，1.0mmol)，收率31％。msm/z(esi):211[m+h]+。
后续步骤采用与实施例12类似的方法制备，可得化合物15。
msm/z(esi):462[m+h]+。
实施例16合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-氧化-1,3,2-二氧杂磷杂环己基-2-基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒16
第一步合成2-氯-2-氧化-1,3,2-二氧杂磷杂环己烷16b
化合物1,3-丙二醇16a(270mg，3.54mmol)和三乙胺(717mg，7.08mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，冷却到0℃，然后向溶液中滴加三氯氧磷(543mg，3.54mmol)。将上述溶液在室温下搅拌过夜，直接用于下一步。
第二步合成(2-((2-氧化-1,3,2-二氧杂磷杂环己基-2-基)氨基)乙基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲基酯16c
氮气保护下，化合物n-芴甲氧羰基乙二胺盐酸盐(300mg，0.9mmol)和三乙胺(190mg，1.8mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，冷却到0℃，向溶液中滴加化合物上一步16b(147mg，3.54mmol)的二氯甲烷溶液。室温下搅拌1h。用水洗反应液，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后柱层析纯化，得到标题化合物16c(240mg，0.6mmol)，收率63％。
msm/z(esi):403[m+h]+。
第三步合成2-((2-氨基乙基)氨基)-2-氧化-1,3,2-二氧杂磷杂环己烷16d
化合物16c(100mg，0.25mmol)溶于四氢呋喃(10ml)，加入tbaf(650mg，2.5mmol)，室温下搅拌1h。反应完毕后，直接用于下一步。
第四步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-((2-氧化-1,3,2-二氧杂磷杂环己基-2-基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4噁二唑-5(4h)-酮16e
向上一步化合物16d的反应液中加入化合物int-1(93mg，0.25mmol)，室温下搅拌1h。加入乙酸乙酯(20ml)稀释，依次用饱和氯化铵溶液和饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后板层析纯化，得到标题化合物16e(50mg，0.1mmol)，收率40％。
msm/z(esi):505[m+h]+。
第五步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-氧化-1,3,2-二氧杂磷杂环己基-2-基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒16
化合物16e(50mg，0.1mmol)溶于甲醇(20ml)，加入碳酸钾(97mg，0.7mmol)，50℃搅拌1h。冷却后，加入饱和氯化铵溶液，用二氯甲烷萃取三次，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后板层析纯化，得到标题化合物16(40mg，0.08mmol)，收率84％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.47(s,1h),8.89(s,1h),7.22-7.15(m,1h),7.13-7.07(m,1h),6.81-6.72(m,1h),6.25-6.16(m,1h),5.36-5.25(m,1h),4.38-4.13(m,4h),3.30-3.20(m,2h),3.01-2.87(m,2h),1.93-1.75(m,2h)。
msm/z(esi):479[m+h]+。
实施例17合成n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-((二甲基磷酰基)氨基)乙基)氨基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒17
第一步合成n-(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙基)-p,p-二甲基次膦酰胺17b
化合物int-2(0.125g，0.30mmol)溶于乙腈(10ml)，加入三乙胺(0.10g，1.0mmol)，冰水浴冷却下，滴加二甲基磷酰氯17a(0.12g，1.1mmol)的乙腈溶液(3ml)。逐渐升至室温搅拌过夜。旋干，粗品经板层析纯化(dcm:meoh＝20:1)，得到标题化合物17b(65mg，0.14mmol)，收率47％。
msm/z(esi):461[m+h]+。
第二步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-((二甲基磷酰基)氨基)乙基)氨基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒17
化合物17b(110mg，0.24mmol)溶于甲醇(10ml)，加入无水碳酸钾(230mg，1.67mmol)，50℃搅拌1h。冷却后，加入饱和氯化铵溶液，用二氯甲烷萃取三次，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后板层析纯化，得到标题化合物17(45mg，0.10mmol)，收率43％。
msm/z(esi):435[m+h]+。
实施例18合成n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2-((二乙基磷酰基)氨基)乙基)氨基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒18
采用与实施例17相同的方法制备，以二乙基磷酰氯为原料，代替17a。
msm/z(esi):463[m+h]+。
实施例19合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-((1-氧化-2,5-二氢磷杂环戊二烯基-1-基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒19
第一步合成1-羟基-1-氧化-2,5-二氢磷杂环戊二烯19b
冰水浴下，化合物次磷酸铵(3.0g，36.13mmol)慢慢加入到化合物n,o-双(三甲基硅烷基)乙酰胺(22.05g，108.4mmol)中，之后加入化合物1,4-二氯-2-丁烯19a(4.97g，39.75mmol)，氮气保护下在110℃反应7天。冷却后，加入1％稀盐酸，用乙酸乙酯萃取，浓缩水相，加入二氯甲烷，超声1h。无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到粗品标题化合物19b(500mg，4.2mmol)，收率12％。
msm/z(esi):119[m+h]+。
第二步合成1-氯-1-氧化-2,5-二氢磷杂环戊二烯19c
化合物19b(500mg，4.2mmol)溶于二氯甲烷(20ml)，冰水浴下，滴加草酰氯(1.07g，8.47mmol)，室温下搅拌过夜。直接浓缩，加入甲苯，继续浓缩，重复三次，得到标题化合物19c(500mg，3.7mmol)，收率88％。
第三步合成(2-((1-氧-2,5-二氢磷杂环戊二烯基-1-基)氨基)乙基)甲酸(9h-芴-9-基)甲基酯19d
化合物n-芴甲氧羰基乙二胺盐酸盐(300mg，0.9mmol)和三乙胺(190mg，1.8mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，将所得溶液冷却到0℃，氮气保护下，向溶液中滴加化合物19c(122mg，0.9mmol)的二氯甲烷溶液(3ml)，室温搅拌1h。用水洗反应液，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后柱层析纯化，得到标题化合物19d(229mg，0.6mmol)，收率67％。
msm/z(esi):383[m+h]+。
第四步合成1-氧化-1-((2-氨基乙基)氨基)-2,5-二氢磷杂环戊二烯19e
化合物19d(229mg，0.6mmol)溶于四氢呋喃(10ml)，加入tbaf(1.3g，5.1mmol)，室温下搅拌1h。反应完毕后，加乙酸乙酯，用饱和氯化铵溶液洗三次，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得标题化合物19e(86mg，0.54mmol)，收率90％。
msm/z(esi):161[m+h]+。
第五步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-((1-氧化-2,5-二氢磷杂环戊二烯基-1-基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮19f
化合物19e(40mg，0.25mmol)和化合物int-1(93mg，0.25mmol)溶于四氢呋喃(10ml)，在室温下搅拌1h。加入乙酸乙酯和水，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后板层析纯化，得到标题化合物19f(77mg，0.16mmol)，收率64％。
msm/z(esi):485[m+h]+。
第六步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-((1-氧化-2,5-二氢磷杂环戊二烯基-1-基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒19
化合物19f(77mg，0.16mmol)溶于甲醇(10ml)，加入无水碳酸钾(155mg，1.12mmol)，在50℃下搅拌1h。冷却后，加入饱和氯化铵溶液，用二氯甲烷萃取三次，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后板层析纯化，得到标题化合物19(41mg，0.09mmol)，收率56％。
msm/z(esi):459[m+h]+。
实施例20合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-((1-氧化-2,5-磷杂环戊基-1-基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒20
第一步合成1-氧化-1-((2-氨基乙基)氨基)-2,5-磷杂环戊烷20a
化合物19e(40mg，0.25mmol)溶于甲醇(10ml)，加入钯碳(10％pd，10mg)，氢气氛下在室温下搅拌过夜。过滤，浓缩后得到标题化合物20a(30mg，0.19mmol)，收率74％。
msm/z(esi):163[m+h]+。
第二步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-((1-氧化-2,5-磷杂环戊基-1-基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮20b
化合物20a(30mg，0.19mmol)和化合物int-1(70mg，0.19mmol)溶于四氢呋喃(10ml)，室温下搅拌1h。加入乙酸乙酯和水，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后板层析纯化，得到标题化合物20b(68mg，0.14mmol)，收率74％。
msm/z(esi):487[m+h]+。
第三步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-((1-氧化-2,5-磷杂环戊基-1-基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒20
化合物20b(68mg，0.14mmol)溶于甲醇(10ml)，加入无水碳酸钾(155mg，1.12mmol)，在50℃下搅拌1h。冷却后，加入饱和氯化铵溶液，用二氯甲烷萃取三次，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后板层析纯化，得到标题化合物20(37mg，0.08mmol)，收率57％。
msm/z(esi):461[m+h]+。
实施例21合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(5-羰基吡咯烷-2-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒21
第一步合成5-羰基吡咯烷-2-甲醛21b
氮气保护下，化合物5-(羟甲基)吡咯烷-2-酮21a(1.15g，10.0mmol)溶于二氯甲烷(50ml)，冰水浴下分批加入dmp(5.1g，12.0mmol)，反应升至室温反应1小时。过滤，滤液用饱和亚硫酸钠溶液洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后柱层析纯化，得标题化合物21b(0.8g，7.1mmol)，收率71％。
msm/z(esi):114[m+h]+。
第二步合成2-(5-羰基吡咯烷-2-基)乙醛21c
氮气保护下，甲氧基甲基三苯基氯化膦(0.7g，2.0mmol)溶于无水四氢呋喃(30ml)，冷却至-78℃，滴加n-buli(2.5m，1.7ml，4.2mmol)。加完后逐渐升至室温并搅拌1小时，再冷却至-78℃，缓慢加入化合物21b(0.22g，2.0mmol)的无水四氢呋喃溶液(5ml)。加完后自然升温并搅拌过夜。饱和氯化铵溶液淬灭后加入1ml浓盐酸并在70℃下回流1小时。加入乙酸乙酯萃取，有机相合并后用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到粗品标题化合物21c(0.20g，1.57mmol),收率78％。
msm/z(esi):128[m+h]+。
第三步5-(2-氨基乙基)吡咯烷-2-酮21d
化合物21c(0.20g，1.57mmol)溶于甲醇，加入乙酸铵(0.22g，3.0mmol)。搅拌1小时后加入氰基硼氢化钠(0.24g，4.0mmol)，室温下搅拌过夜。加入饱和nahco3溶液淬灭，浓缩后加入乙酸乙酯和水，萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到的粗品，经柱层析纯化，得到标题化合物21d(0.13g，1.0mmol),收率60％。
msm/z(esi):129[m+h]+。
第四步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(5-羰基吡咯烷-2-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮21e
化合物21d(0.13g，1.0mmol)和int-1(0.372g，1.0mmol)溶于四氢呋喃(5ml)，室温反应1h。浓缩后用板层析纯化得标题化合物21e(350mg，0.77mmol)，收率77％
msm/z(esi):453[m+h]+。
第五步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(5-羰基吡咯烷-2-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒21
化合物21e(135mg，0.3mmol)溶于甲醇(5ml)，加入无水碳酸钾(330mg，2.4mmol)，在50℃下搅拌1h。冷却后，加入饱和氯化铵溶液，用二氯甲烷萃取三次，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后板层析纯化，得到标题化合物21(60mg，0.14mmol)，收率47％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.41(s,1h),8.09(s,1h),7.76(s,1h),7.10–7.20(m,2h),6.73–6.77(m,1h),6.19–6.22(m,1h),3.45–3.51(m,1h),3.17–3.32(m,2h),2.07–2.16(m,3h),1.57–1.74(m,3h)。
msm/z(esi):427[m+h]+。
实施例22合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(5-羰基吡咯烷-3-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒22
采用与实施例21相同的方法制备，以4-(羟甲基)吡咯烷-2-酮22a为原料，代替21a。
msm/z(esi):427[m+h]+。
实施例23合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(2-羰基噁唑烷-5-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒23
采用与实施例21相同的方法制备，以5-(羟甲基)噁唑烷-2-酮23a为原料，代替21a。
msm/z(esi):429[m+h]+。
实施例24合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(2-羰基噁唑烷-4-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒24
采用与实施例21相同的方法制备，以4-(羟甲基)噁唑烷-2-酮24a为原料，代替21a。
msm/z(esi):429[m+h]+。
实施例25合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(3-甲基-2-羰基噁唑烷-5-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒25
第一步合成5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧代)甲基)噁唑烷-2-酮25a
化合物5-(羟甲基)噁唑烷-2-酮23a(2.34g，20.0mmol)，咪唑(1.7g，25mmol)溶于乙腈(30ml)，冰浴至0℃，然后加入叔丁基二甲基氯硅烷(3.3g，22.0mmol)。反应在0℃搅拌0.5小时，然后升至室温搅拌过夜。加入饱和氯化铵溶液和乙酸乙酯，萃取，有机相用饱和氯化铵溶液洗三次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后所得粗品，经柱层析纯化后得标题化合物25a(3.7g，18mmol)收率80％。
第二步合成5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧代)甲基)-3-甲基噁唑烷-2-酮25b
氮气保护下，化合物25a(3.7g，18mmol)溶于dmf(40ml)，冷却至0℃，然后加入nah(1.08g，27mmol，60％wt)。反应在0℃搅拌0.5小时，然后升至室温搅拌半小时。加入碘甲烷(3.8g，27mmol)，室温搅拌过夜。加入饱和氯化铵水溶液和乙酸乙酯，萃取，有机相用饱和食盐水洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得标题化合物25b(3.0g，12.2mmol)，收率68％。
msm/z(esi):246[m+h]+。
第三步合成5-(羟甲基)-3-甲基噁唑烷-2-酮25c
化合物25b(3.0g，12.2mmol)溶于thf(20ml)，加入四正丁基氟化铵(30g，114mmol)，搅拌2小时后，加入水和乙酸乙酯，萃取，有机相用饱和氯化铵和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩所得粗品，经柱层析纯化，得标题化合物25c(0.8g，6.1mmol)，收率50％。
后续步骤采用与实施例21相同的方法制备，可得化合物25。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.43(s,1h),8.93(s,1h),7.16–7.21(t,j＝8.8hz,1h),7.11–7.13(dd,j＝6.0,2.8,1h),6.72–6.77(m,1h),6.33–6.35(t,j＝6.0hz,1h),5.76(s,1h),4.42–4.48(m,1h),3.58–3.62(t,j＝8.4hz,1h),3.26–3.32(m,1h),3.17–3.21(m,1h),2.73(s,3h),1.88–1.93(m,2h).
msm/z(esi):443[m+h]+。
实施例26合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(3-甲基-2-羰基噁唑烷-4-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒26
采用与实施例25相同的方法制备，以4-(羟甲基)噁唑烷-2-酮24a为原料，代替23a。
msm/z(esi):429[m+h]+。
实施例27合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(1-甲基-2-羰基咪唑烷-4-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒27
第一步合成5-醛基-3-甲基-2-羰基咪唑烷-1-甲酸苄酯27b
氮气保护下，化合物5-羟甲基-3-甲基-2-羰基咪唑烷-1-甲酸苄酯27a(2.0g，7.6mmol，采用专利申请“wo2015150995”公开的方法制备而得)溶于二氯甲烷(20ml)，冰水浴下分批加入dmp(4.8g，11.4mmol)，反应升至室温反应1小时。过滤，滤液用饱和亚硫酸钠溶液洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后柱层析纯化，得标题化合物27b(1.2g，4.6mmol)，收率60％。
msm/z(esi):265[m+h]+。
第二步合成3-甲基-2-羰基-5-(2-羰基乙基)咪唑烷-1-甲酸苄酯27c
氮气保护下，甲氧基甲基三苯基氯化膦(1.44g，4.2mmol)溶于无水四氢呋喃(20ml)，冷却至-78℃，滴加n-buli(2.5m，1.8ml，4.6mmol)。加完后逐渐升至室温并搅拌1小时，再冷却至-78℃，缓慢加入化合物27b(1.0g，3.8mmol)的无水四氢呋喃溶液(5ml)。加完后自然升温并搅拌过夜。饱和氯化铵溶液淬灭后加入2ml浓盐酸并在70℃下回流1小时。加入乙酸乙酯萃取，有机相合并后用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到粗品，经柱层析纯化，得到标题化合物27c(0.65g，2.4mmol),收率62％。
msm/z(esi):277[m+h]+。
第三步合成5-(2-氨基乙基)-3-甲基-2-羰基咪唑烷-1-甲酸苄酯27d
化合物27c(600mg，2.17mmol)溶于甲醇，加入乙酸铵(335mg，4.34mmol)。搅拌1小时后加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.15g，5.43mmol)，室温下搅拌过夜。加入饱和nahco3溶液淬灭，浓缩后加入乙酸乙酯和水，萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到的粗品，经柱层析纯化，得到标题化合物27d(355mg，1.28mmol),收率59％。
msm/z(esi):278[m+h]+。
第四步合成4-(2-氨基乙基)-1-甲基咪唑烷-2-酮27e
化合物27d(350mg，1.26mmol)溶于甲醇(10ml)，加入钯碳(10％pd，40mg)，氢气氛下在室温下搅拌过夜。过滤，浓缩后得到标题化合物27e(170mg，1.19mmol)，收率94％。
msm/z(esi):144[m+h]+。
第五步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(1-甲基-2-羰基咪唑烷-4-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮27f
化合物27e(150mg，1.05mmol)和int-1(400mg，1.08mmol)溶于四氢呋喃(5ml)，室温反应1h。浓缩后用板层析纯化得标题化合物27f(350mg，0.75mmol)，收率71％
msm/z(esi):468[m+h]+。
第六步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(1-甲基-2-羰基咪唑烷-4-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒27
化合物27f(150mg，0.32mmol)溶于甲醇(5ml)，加入无水碳酸钾(350mg，2.53mmol)，在50℃下搅拌1h。冷却后，加入饱和氯化铵溶液，用二氯甲烷萃取三次，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后板层析纯化，得到标题化合物27(68mg，0.15mmol)，收率48％。
msm/z(esi):442[m+h]+。
实施例28合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(3-甲基-2-羰基咪唑烷-4-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒28
第一步合成4-羟甲基-3-甲基-2-羰基咪唑烷-1-甲酸苄酯28b
化合物1-苄氧基羰基-3-甲基-2-羰基咪唑烷-4-甲酸甲酯28a(2.9g，10.0mmol，采用专利申请“wo2008119825”公开的方法制备而得)溶于甲醇(30ml)，冰水浴下分批加入硼氢化钠(0.46g，12.0mmol)。加完后继续搅拌2小时。加入水淬灭并在室温搅拌1小时。减压浓缩至较小体积，然后加入水和乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得标题化合物28b(2.5g，9.5mmol)，收率95％。
msm/z(esi):265[m+h]+。
后续步骤采用与实施例27相同的方法制备，可得化合物28。
msm/z(esi):442[m+h]+。
实施例29合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(1,1-二氧化-1,2,5-噻二唑烷-3-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒29
第一步合成1,1-二氧化-1,2,5-噻二唑烷-3-甲酸甲酯29b
化合物2,3-二氨基丙酸甲酯二盐酸盐29a(1.0g，5.23mmol)和三乙胺(1.85g，18.3mmol)溶于1,4-二氧六环(20ml)，加入磺酰胺(503mg，5.23mmol)，加热回流搅拌16h。冷却后，加入饱和氯化铵溶液，用乙酸乙酯萃取三次，有机相合并后用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品经柱层析纯化，得到标题化合物29b(450mg，2.5mmol)，收率48％。
msm/z(esi):181[m+h]+。
后续步骤采用与实施例28相同的方法制备，可得化合物29。
msm/z(esi):464[m+h]+。
实施例30合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(2-羰基-咪唑烷-4-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒30
第一步合成2-羰基咪唑烷-4-甲酸甲酯30a
化合物2,3-二氨基丙酸甲酯二盐酸盐29a(1.0g，5.23mmol)和三乙胺(1.17g，11.5mmol)溶于thf(20ml)，加入cdi(1.02g，6.3mmol)。室温下搅拌过夜，加入氯化铵淬灭，加入etoac萃取水相3次，有机相再用稀盐酸洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到标题化合物30a(520mg，3.6mmol)，收率69％。
msm/z(esi):145[m+h]+。
后续步骤采用与实施例28相同的方法制备，可得化合物30。
msm/z(esi):428[m+h]+。
实施例31合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(5-羰基-4,5-二氢-1h-1,2,4-三唑-3-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒31
第一步合成n-(2,4-二甲氧基苄基)-2-(5-羰基-4,5-二氢-1h-1,2,4-三唑-3-基)乙酰胺31b
化合物2-(5-羰基-4,5-二氢-1h-1,2,4-三唑-3-基)乙酸31a(0.43g，3.0mmol)和2,4-二甲氧基苄胺(0.55g，3.3mmol)溶于dmf(5ml)，加入edc(0.86g，6.0mmol)，室温反应过夜。浓缩所得粗品经柱层析纯化，得标题化合物31b(490mg，1.7mmol)，收率56％。
msm/z(esi):293[m+h]+。
第二步合成5-(2-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)乙基)-2,4-二氢-3h-1,2,4-三唑-3-酮31c
化合物31b(460mg，1.6mmol)溶于无水thf(5ml)中，冰水浴冷却下，滴加2m硼烷二甲硫醚溶液(1.6ml，3.2mmol)，滴完加热回流4h。冷却至室温，加入少量甲醇淬灭，浓缩，粗品经柱层析纯化得标题化合物31c(360mg，1.3mmol)，收率82％。
msm/z(esi):279[m+h]+。
第三步合成5-(2-氨基乙基)-2,4-二氢-3h-1,2,4-三唑-3-酮三氟乙酸盐31d
化合物31c(350mg，1.3mmol)溶于dcm(5ml)，滴加tfa(1ml)，室温搅拌1h。旋干，得粗品标题化合物31d，直接用于下一步。
msm/z(esi):129[m+h]+。
第四步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(5-羰基-4,5-二氢-1h-1,2,4-三唑-3-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮31e
上步粗品化合物31d，化合物int-1(484mg，1.3mmol)溶于thf(5ml)，加入三乙胺(330mg，3.3mmol)，室温反应1h。浓缩，粗品经板层析纯化，得标题化合物31e(405mg，0.9mmol)，两步收率69％。
msm/z(esi):453[m+h]+。
第五步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(5-羰基-4,5-二氢-1h-1,2,4-三唑-3-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒31
化合物31e(150mg，0.33mmol)溶于甲醇(5ml)，加入无水碳酸钾(366mg，2.65mmol)，在50℃下搅拌1h。冷却后，加入饱和氯化铵溶液，用二氯甲烷萃取三次，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后板层析纯化，得到标题化合物31(85mg，0.2mmol)，收率60％。
msm/z(esi):427[m+h]+。
实施例32合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(5-羰基-4,5-二氢-1h-四唑-1-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒32
第一步合成1-(2-氯乙基)-1,4-二氢-5h-四唑-5-酮32b
将化合物1-氯-2-异氰酸基乙烷32a(10g，95.2mmol),叠氮三甲基硅烷(16.35g，142.2mmol)和催化量的三氟化硼乙醚混合，并在回流状态下搅拌过夜。将反应液浓缩，加入甲醇淬灭，再次浓缩得到粗品，粗品经柱层析纯化(pe:ea＝1:1)得到标题化合物32b(10.5g，70.9mmol)，收率74％。
msm/z(esi):149[m+h]+。
第二步合成2-(2-(5-羰基-4,5-二氢-1h-四唑-1-基)乙基)异二氢吲哚-1,3-二酮32c
将化合物32b(2.0g，13.5mmol),邻苯二甲酰亚胺钾(2.5g，13.5mmol),碳酸钾(5.6g，40.5mmol)和催化量的碘化钾溶于乙腈(150ml)中，在回流状态下搅拌4小时，冷却至室温，过滤，滤液浓缩得到粗品，粗品直接用于下一步反应。
msm/z(esi):260[m+h]+。
第三步合成1-(2-氨基乙基)-1,4-二氢-5h-四唑-5-酮32d
将化合物32c(3.0g,11.5mmol)溶于乙醇(100ml)中,加入98％水合肼(5ml)，该反应混合物在回流下搅拌5小时，冷却至室温，将白色不溶物滤除，滤液浓缩得粗品，粗品经柱层析纯化得到标题化合物32d(1.22g,9.5mmol)，收率82％
msm/z(esi):130[m+h]+。
第四步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(5-羰基-4,5-二氢-1h-四唑-1-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮32e
将化合物32d(0.5g，3.8mmol)和化合物int-1(1.43g，3.8mmol)溶于四氢呋喃(50ml)中，该反应混合物在室温下搅拌1小时。反应液浓缩得到粗品，粗品经柱层析纯化得到标题化合物32e(0.95g，2.1mmol)，收率55％。msm/z(esi):454[m+h]+。
第五步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(5-羰基-4,5-二氢-1h-四唑-1-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒32
化合物32e(150mg，0.33mmol)溶于四氢呋喃(10ml)中，然后加入2n的氢氧化钠水溶液(4ml)。该反应混合物在室温下搅拌1小时，用3n盐酸水溶液淬灭，调节ph值到8，用乙酸乙酯萃取三次，合并有机相，有机相用水和饱和食盐水洗，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得粗品，粗品经板层析纯化得到标题化合物32(45mg,0.11mmol)，收率31％。
msm/z(esi):428[m+h]+。
实施例33合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(6-氧-1,6-二氢吡啶-2-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒33
第一步合成2-(6-甲氧基吡啶-2-基)乙腈33b
氮气保护下，正丁基锂(2.5m，8.0ml，20.0mmol)于-78℃下，滴加到乙腈(1.1ml，21.2mmol，分子筛干燥)的无水四氢呋喃(20ml)溶液中，于该温度下反应30min。后缓慢滴加化合物2-溴-6-甲氧基吡啶33a(1g，5.32mmol)的无水四氢呋喃(5ml)溶液。滴毕后，逐渐升温至室温，搅拌4h。倒入冰水中，用乙酸乙酯萃取三次，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后，柱层析纯化得到标题化合物33b(474mg，3.2mmol)，收率60％。msm/z(esi):149[m+h]+。
第二步合成2-(6-甲氧基吡啶-2-基)乙基-1-胺33c
化合物33b(474mg，3.2mmol)溶于甲醇(10ml)，加入六水氯化钴(71mg，0.3mmol)冰水浴下分批加入硼氢化钠(122mg，3.2mmol)。逐渐升温至室温下搅拌4h。加入饱和氯化铵溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取三次，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后，柱层析纯化得到标题化合物33c(426mg，2.8mmol)，收率88％。
msm/z(esi):153[m+h]+。
第三步合成6-(2-氨基乙基)吡啶-2(1h)酮33d
化合物33c(426mg，2.8mmol)溶于溴化氢的甲醇溶液(～10％hbr，25ml)，加热回流2h。旋干，加乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠溶液，萃取三次，有机相合并，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到标题化合物33d(110mg，0.8mmol)，收率29％。
msm/z(esi):139[m+h]+。
第四步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-(6-氧-1,6-二氢吡啶-2-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮33e
化合物33d(110mg，0.8mmol)溶于四氢呋喃(10ml)，加入化合物int-1(297mg，0.8mmol)，在室温下搅拌1h。浓缩后板层析纯化，得到标题化合物33e(250mg，0.54mmol)，收率67％。
msm/z(esi):463[m+h]+。
第五步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(6-氧-1,6-二氢吡啶-2-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒33
化合物33e(250mg，0.54mmol)溶于甲醇(10ml)，加入无水碳酸钾(522mg，3.78mmol)，在50℃下搅拌1h。冷却后，加入饱和氯化铵溶液，用二氯甲烷萃取三次，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后板层析纯化，得到标题化合物33(122mg，0.28mmol)，收率49％。
msm/z(esi):437[m+h]+。
实施例34合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(6-氧-1,6-二氢吡啶-3-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒34
采用与实施例33相同的方法制备，以5-溴-2-甲氧基吡啶为原料，代替33a。1hnmr(400mhz,methanol-d4)δ7.54(dd,j＝9.4,2.6hz,1h),7.24(d,j＝2.5hz,1h),7.14–6.98(m,2h),6.85–6.74(m,1h),6.51(d,j＝9.3hz,1h),3.46(t,j＝6.9hz,2h),2.73(t,j＝6.8hz,2h).
msm/z(esi):437[m+h]+。
实施例35合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(6-羰基-1,6-二氢哒嗪-3-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒35
第一步合成6-(羟甲基)哒嗪-3(2h)-酮35b
化合物35a(1.0g，6.5mmol)溶于无水四氢呋喃(20ml)，冰水浴下滴加dibal-h(1.0m，13ml，13.0mmol)，滴完逐渐升至室温搅拌1h。加入饱和氯化铵淬灭，乙酸乙酯萃取三次，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后柱层析纯化，得到标题化合物35b(510mg，4.0mmol)，收率62％.msm/z(esi):127[m+h]+。
后续步骤采用与实施例21相同的方法制备，可得化合物35。
msm/z(esi):438[m+h]+。
实施例36合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(5-羰基-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒36
第一步合成(2-氰基乙基)氨基甲酸叔丁酯36b
化合物3-氨基丙腈36a(1.0g，14.3mmol)和三乙胺(1.59g，15.7mmol)溶于dcm(15ml)，冰水浴下，加入二碳酸二叔丁酯(3.43g，15.7mmol)，室温搅拌过夜。反应液依次用0.5m盐酸(2×20ml)，饱和碳酸氢钠溶液(20ml)和饱和食盐水(20ml)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得标题化合物36b(2.4g，14.3mmol)，收率100％。
msm/z(esi):193[m+na]+。
第二步合成(3-(羟基氨基)-3-脒基丙基)氨基甲酸叔丁酯36c
化合物36b(500mg，2.9mmol)溶于乙醇(20ml)，加入盐酸羟胺(409mg，5.9mmol)，分批加入乙醇钠(600mg，8.8mmol)，60℃加热过夜。冷却后浓缩，加水和乙酸乙酯，萃取，水相再用乙酸乙酯萃取3次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得粗品标题化合物36c(480mg，2.4mmol)，收率80％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.81(s,1h),6.64(t,j＝4.8hz,1h),5.35(s,2h),3.08(q,j＝6.9hz,2h),2.09(t,j＝7.5hz,2h),1.37(s,9h)。
msm/z(esi):204[m+h]+。
第三步合成(2-(5-氧-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯36d
化合物36c(450mg，2.2mmol)溶于乙醇(8ml)，加入cdi(715mg，4.4mmol)和乙醇钠(204mg，4.4mmol)，60℃加热过夜。冷却后浓缩，加水和乙酸乙酯，萃取，水相再用乙酸乙酯萃取3次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得粗品，经柱层析纯化得标题化合物36d(270mg，1.2mmol)，收率53％。
msm/z(esi):230[m+h]+。
第四步合成3-(2-氨基乙基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮盐酸盐36e
化合物36d(270mg，1.2mmol)溶于2mhcl乙酸乙酯溶液(10ml)，室温搅拌过夜。浓缩得标题化合物36e，直接用于下一步。
第五步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-硝基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒36f
化合物int-1(186mg，0.5mmol)溶于甲醇(10ml)，加入无水碳酸钾(553mg，4.0mmol)，在50℃下搅拌1h。冷却后，加入饱和氯化铵溶液，用二氯甲烷萃取三次，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品标题化合物36f(150mg，0.4mmol)，收率87％。
第六步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(5-羰基-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒36
化合物36e(66mg，0.4mmol)和36f(150mg，0.4mmol)溶于thf(5ml)，加入三乙胺(80mg，0.8mmol)，在室温下搅拌1h。浓缩后板层析纯化，得到标题化合物36(103mg，0.24mmol)，收率60％。
msm/z(esi):428[m+h]+。
实施例37合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(吗啉-4-磺酰氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒37
采用与实施例17相同的方法制备，以吗啉-4-磺酰氯为原料，代替17a。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.46(s,1h),8.90(s,1h),7.49(t,j＝5.8hz,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.10(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.76(ddd,j＝8.9,4.2,2.7hz,1h),6.26(t,j＝6.1hz,1h),3.64–3.57(m,4h),3.37–3.29(m,2h),3.12(q,j＝6.2hz,2h),3.04–2.96(m,4h)。
msm/z(esi):508[m+h]+。
实施例38合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(s-甲基亚砜亚胺)乙基)巯基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒38
第一步合成(2-(苄氧基)乙基)(甲基)硫醚38b
化合物((2-溴乙氧基)甲基)苯38a(2.15g，1.0mmol)溶于dmf(30ml)，加入甲硫醇钠(0.11g，1.5mmol)。混合物室温下搅拌1小时，减压浓缩反应液，加入乙酸乙酯和水分液，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得标题化合物38b(1.40g，0.8mmol)，收率80％。
msm/z(esi):183[m+h]+。
第二步合成((2-(甲基亚砜基)乙氧基)甲基)苯38c
化合物38b(0.18g，1.0mmol)溶于dcm(20ml)，降温至-40℃，滴加mcpba(0.21g，1.2mmol)的dcm溶液(5ml)。加完后缓慢升至室温，在室温下继续搅拌1小时。加入亚硫酸钠溶液淬灭反应，有机相用饱和碳酸氢钠溶液洗涤三次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得标题化合物38c(118mg，0.6mmol)，收率60％。
msm/z(esi):199[m+h]+。
第三步合成((2-((s-甲基)(2,2,2-三氟乙酰基)亚砜亚胺基)乙氧基)甲基)苯38d
化合物38c(198mg，1.0mmol)溶于dcm(20ml)，加入三氟乙酰胺(226mg，2.0mmol)，氧化镁(201mg，5.0mmol)，醋酸铑(22mg，0.05mmol)，再加入醋酸碘苯(644mg，2.0mmol)。室温搅拌过夜，过滤，母液浓缩至干，加水和乙酸乙酯分液，有机相合并后用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后的粗品经柱层析纯化，得标题化合物38d(150mg，0.48mmol)，收率48％。
msm/z(esi):310[m+h]+。
第四步合成2-((s-甲基)(2,2,2-三氟乙酰基)亚砜亚胺基)乙醇38e
化合物38d(0.3g，1.0mmol)溶于meoh(10ml)，加入pd/c(10％pd,50mg)，置于6mpa氢气压力下搅拌过夜。过滤，浓缩后得到粗品标题化合物38e(0.2g，1.0mmol)，收率100％。
msm/z(esi):220[m+h]+。
第五步合成2-(s-甲基-n-(2,2,2-三氟乙酰基)亚砜亚胺基)乙基甲磺酸酯38f
化合物38e(0.15g，0.7mmol)，三乙胺(0.15g，0.7mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，冰水浴下，缓慢滴加甲烷磺酰氯(125mg，1.1mmol)的二氯甲烷溶液(2ml)。加完后撤去冰浴，在室温下搅拌2小时。反应液依次用饱和氯化铵溶液洗两次，饱和碳酸氢钠溶液和饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到粗品标题化合物38f，直接用于下一步反应。
第六步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-((s-甲基)(2,2,2-三氟乙酰基)亚砜亚胺基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮38g
化合物int-1(0.19g，0.5mmol)溶于dmf(8ml)，加入硫氢化钠(67mg，0.6mmol)。室温搅拌1小时，然后加入化合物38f(0.15g，0.5mmol)和碳酸钠(0.11g，1.0mmol)，反应在室温下搅拌过夜。加水稀释，乙酸乙酯萃取3次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后柱层析纯化得标题化合物38g(0.12g，0.2mmol，40％)。
msm/z(esi):560[m+h]+。
第七步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-(s-甲基亚砜亚胺)乙基)巯基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒38
化合物38g(0.25g，0.45mmol)溶于thf(5ml)，然后加入2mnaoh溶液(1.5ml)。室温搅拌1小时。加入饱和氯化铵溶液，乙酸乙酯萃取三次，有机相合并后用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到的粗品，经板层析纯化得标题化合物38(50mg，0.11mmol)，收率26％。
msm/z(esi):438[m+h]+。
实施例39合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-(2-(s-甲基亚砜亚胺基)乙氧基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒39
第一步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-(2-(甲硫基)乙氧基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮39a
化合物int-1(0.372g，1.0mmol)和2-(甲硫基)乙醇(0.27g，3.0mmol)溶于thf(20ml)，加入cs2co3(0.33g，1.0mmol)，60℃搅拌4小时。加入饱和氯化铵溶液，乙酸乙酯萃取3次，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品，经柱层析纯化，得到标题化合物39a(0.21g，0.5mmol)，收率50％。
第二步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-(2-(甲基亚砜基)乙氧基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮39b
化合物39a(0.21g，0.5mmol)溶于dcm(10ml)，降温至-40℃，滴加mcpba(0.21g，1.2mmol)的dcm溶液(5ml)。加完后缓慢升至室温，在室温下继续搅拌1小时。加入亚硫酸钠溶液淬灭反应，有机相用饱和碳酸氢钠溶液洗涤三次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品经板层析纯化得标题化合物39b(85mg，0.2mmol)，收率40％。
msm/z(esi):433[m+h]+。
第三步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-(2-(s-甲基亚砜亚胺基)乙氧基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮39c
化合物39b(85mg，0.2mmol)溶于meoh(2ml)，加入氨基甲酸铵(63mg，0.8mmol)和phi(oac)2(190mg，0.6mmol)，室温搅拌1小时。将反应液减压浓缩，板层析纯化得标题化合物39c(45mg，0.1mmol)，收率51％。msm/z(esi):448[m+h]+。
第四步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-(2-(s-甲基亚砜亚胺基)乙氧基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒39
化合物39c(45mg，0.1mmol)溶于thf(5ml)，加入2mnaoh溶液(0.5ml)，室温搅拌30min。加入饱和氯化铵溶液和乙酸乙酯，分液，水相再用乙酸乙酯萃取两次，有机相合并后用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后的粗品，经板层析纯化得标题化合物39(24mg，0.057mmol)，收率57％。
msm/z(esi):422[m+h]+。
实施例40合成n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒40
第一步合成(2-((4-(4-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-5-氧-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯40a
化合物int-4(300mg，0.87mmol)和n-叔丁氧羰基-1,2-乙二胺(420mg，2.6mmol)溶于thf(10ml)，室温反应30min。浓缩，向剩余物中加入乙酸乙酯(15ml)，依次用0.5mhcl(10ml)，水(10ml)和饱和食盐水(10ml)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得标题化合物40a(400mg，0.87mmol)，收率100％。
msm/z(esi):457[m+h]+。
第二步合成3-(4-((2-氨基乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮40b
化合物40a(400mg，0.87mmol)溶于2mhcl乙酸乙酯溶液(6ml)，室温反应过夜。将反应液加入到饱和碳酸氢钠溶液(50ml)中，乙酸乙酯萃取(3×20ml)，合并有机层，依次用水(15ml)和饱和食盐水(15ml)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得标题化合物40b(250mg，0.7mmol)，收率80％。msm/z(esi):357[m+h]+。
第三步合成(n-(2-((4-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-5-氧代-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙基)氨基磺酰基)氨基甲酸叔丁酯40c
化合物氯磺酸异氰酸酯(0.24g，1.7mmol)溶于无水dcm(2ml)，冰水浴冷却下，滴加t-buoh(0.16ml，1.7mmol)，室温反应1h，备用(反应液a)。
化合物40b(250mg，0.7mmol)悬浮于无水dcm(2ml)中，冰水浴冷却下，滴加tea(0.47ml，3.4mmol)，将反应液a缓慢滴入，滴完逐渐升至室温反应2h。加入乙酸乙酯(20ml)稀释，依次用0.1mhcl(2×10ml)和饱和食盐水(2×10ml)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，所得粗品经柱层析纯化，得标题化合物40c(100mg，0.19mmol)，收率27％。
msm/z(esi):536[m+h]+。
第四步合成4-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-3-(4-((2-(氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4噁二唑-5(4h)-酮40d
化合物40c(100mg，0.19mmol)悬浮于dcm(7ml)，加入tfa(3.5ml)，反应液变澄清，室温反应2h。浓缩至干，柱层析纯化得标题化合物40d(60mg，0.14mmol)，收率74％。
msm/z(esi):436[m+h]+。
第五步合成n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒40
化合物40d(60mg，0.14mmol)溶于甲醇(3ml)，滴加2mnaoh水溶液(0.4ml，0.8mmol)，室温反应1.5h。滴加3mhcl调ph为7，减压蒸除甲醇，加入水(5ml)，乙酸乙酯萃取(2×5ml)，合并有机层，用饱和食盐水洗(5ml)，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得标题化合物40(55mg，0.13mmol)，收率97％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.49(s,1h),8.95(s,1h),7.18(t,j＝9.5hz,1h),7.12(t,j＝54.4hz,1h),7.06–7.01(m,1h),6.96–6.90(m,1h),6.71(t,j＝6.0hz,1h),6.60(s,2h),6.25(t,j＝6.1hz,1h),3.39–3.35(m,2h),3.10(q,j＝6.2hz,2h)。
msm/z(esi):410[m+h]+。
实施例41合成4-((2-(n-环丙基磺酰基)-s-甲基亚砜亚胺基)乙基)氨基)-n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒41
第一步合成4-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-3-(4-((2-(甲巯基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮41a
化合物int-4(6.0g，17.5mmol)和2-甲巯基乙胺盐酸盐(1.9g，21.0mmol)溶于乙腈(50ml)，加入三乙胺(2.65g，26.2mmol)，室温反应20min。减压蒸除乙腈，向剩余物中加入乙酸乙酯(50ml)，依次用0.5mhcl(25ml)和饱和食盐水(30ml)，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩所得粗品，经柱层析纯化(pe:ea＝5:1)得标题化合物41a(4.9g，12.6mmol)，收率72％。
msm/z(esi):388[m+h]+。
第二步合成4-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-3-(4-((2-甲基亚砜基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮41b
将化合物41a(1.0g，2.6mmol)溶于dcm/meoh(10:1，15ml)中，加入mmpp(0.71g，1.43mmol)，室温反应过夜。加入乙酸乙酯(30ml)稀释，有机层依次用水(10ml)和饱和食盐水(15ml)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得标题化合物41b(0.73g，1.8mmol)，收率70％。
msm/z(esi):404[m+h]+。
第三步合成4-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-3-(4-((2-(s-甲基亚砜亚胺基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮41c
化合物41b(0.7g，1.7mmol)溶于chcl3(20ml)，加入nan3(0.22g，3.4mmol)，冰水浴冷却下，滴加浓硫酸(0.4ml)。加毕，加热至40℃过夜。加入饱和碳酸氢钠溶液(30ml)，用乙酸乙酯(3×30ml)萃取，合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得标题化合物41c(0.5g，1.2mmol)，收率70％。msm/z(esi):419[m+h]+。
第四步合成4-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-3-(4-((2-(n-环丙基磺酰基)-s-甲基亚砜亚胺基乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4噁二唑-5(4h)-酮41d
将化合物41c(0.5g，1.2mmol)溶于吡啶(10ml)，加入环丙基磺酰氯(0.51g，3.6mmol)和dmap(0.15g，1.2mmol)，室温反应过夜。加入饱和碳酸氢钠(15ml)，用乙酸乙酯萃取(2×30ml)，合并有机相，饱和食盐水(10ml)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化得标题化合物41d(0.13g，0.25mmol)，收率21％。
msm/z(esi):523[m+h]+。
第五步合成4-((2-(n-环丙基磺酰基)-s-甲基亚砜亚胺基)乙基)氨基)-n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒41
化合物41d(0.1g，0.19mmol)溶于thf/meoh(1:1，10ml)，加入2mnaoh水溶液(1ml)，室温反应2h。加入饱和氯化铵溶液(20ml)，用乙酸乙酯萃取(2×25ml)，合并有机层，饱和食盐水(10ml)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品经板层析纯化，得标题化合物41(75mg，0.15mmol)，收率79％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.41(s,1h),8.96(s,1h),7.18(t,j＝9.6hz,1h),7.12(t,j＝54.4hz,1h),7.05–7.03(m,1h),6.95–6.92(m,1h),6.57(t,j＝5.9hz,1h),3.95-3.75(m,,4h),3.46(s,3h),2.60–2.67(m,1h),0.90-0.96(m,4h).
msm/z(esi):497[m+h]+。
实施例42合成4-((2-(s-甲基亚砜氰基亚胺)乙基)氨基)-n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒42
第一步合成4-(3-二氟甲基)-4-氟苯基)-3-(4-((2-(甲基氰亚硫胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮42a
化合物41a(250mg，0.65mmol)和氰胺(52mg，1.3mmol)溶于乙腈(5ml)，冰水浴冷却下，加入醋酸碘苯(0.23g，0.72mmol)，保温反应3h。浓缩，柱层析纯化得标题化合物42a(0.22g，0.51mmol)，收率80％。
msm/z(esi):428[m+h]+。
第二步合成4-(3-二氟甲基)-4-氟苯基)-3-(4-((2-(甲基亚砜氰亚硫胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮42b
化合物42a(0.22g，0.51mmol)溶于无水乙醇(5ml)，加入k2co3(0.21g，1.5mmol)和间氯过氧苯甲酸(0.13g，0.77mmol)，室温反应2h。加入乙酸乙酯(20ml)稀释，有机相用饱和食盐水(10ml)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，所得粗品经柱层析纯化得标题化合物42b(0.12g，0.27mmol)，收率55％。
msm/z(esi):444[m+h]+。
第三步合成4-((2-(s-甲基亚砜氰基亚胺)乙基)氨基)-n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒42
化合物42b(120mg，0.27mmol)溶于thf(5ml)，加入2mnaoh水溶液(0.5ml)，室温反应1h。用3mhcl溶液调ph为6～7，浓缩，加入乙酸乙酯(10ml)萃取，有机层用饱和食盐水(5ml)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得标题化合物42(102mg，0.24mmol)，收率90％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.46(s,1h),8.97(s,1h),7.18(t,j＝9.6hz,1h),7.12(t,j＝54.4hz,1h),7.08–7.02(m,1h),6.97–6.89(m,1h),6.61(t,j＝5.9hz,1h),3.94(t,j＝6.3hz,2h),3.79(q,j＝6.0hz,2h),3.54(s,3h)。
msm/z(esi):418[m+h]+。
实施例43合成甲基(吡咯烷-3-基)氨基磺酸(2-((4-(n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基脒基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙基)酯43
第一步合成3-(((2-(((苄氧基)羰基)氨基)乙氧基)磺酰基)(甲基)氨基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯43a
将(2-羟基乙基)氨基甲酸苄酯(1.5g，5.0mmol)和吡啶(0.40g，5.0mmol)溶于无水dcm(10ml)中，冰水浴冷却下，缓慢滴加化合物9b，室温反应过夜。将反应液依次用0.1mhcl(2×10ml)和饱和食盐水(15ml)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化得标题化合物43a(0.57g，1.2mmol)，收率25％。
msm/z(esi):458[m+h]+。
第二步合成3-(((2-氨基乙氧基)磺酰基)(甲基)氨基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯43b
化合物43a(0.57g，1.2mmol)溶于meoh(10ml)，加入pd/c(10％pd，0.1g)，氢气氛下室温反应过夜。过滤，浓缩得标题化合物43b(0.35g，1.1mmol)，收率为90％。
msm/z(esi):324[m+h]+。
第三步合成3-(((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙氧基)磺酰基)(甲基)氨基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯43c
化合物43b(0.35g，1.1mmol)和化合物int-1(0.32g，0.85mmol)溶于乙腈(3ml)，室温反应30min，加入乙酸乙酯(20ml)稀释，用饱和食盐水(5ml)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化得标题化合物43c(0.34g)，收率62％。
msm/z(esi):648[m+h]+。
第四步合成2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙基甲基(吡咯烷-3-基)氨基磺酸酯43d
化合物43c(0.34g，0.52mmol)溶于dcm(10ml)中，加入tfa(5ml)，室温反应2h。浓缩，残余物用乙酸乙酯和水溶解，加入饱和碳酸氢钠溶液，萃取，水相再用乙酸乙酯萃取2次，合并有机相，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得标题化合物43d(0.24g，0.44mmol)，收率85％。
msm/z(esi):548[m+h]+。
第五步合成甲基(吡咯烷-3-基)氨基磺酸(2-((4-(n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基脒基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙基)酯43
化合物43d(0.24mg，0.44mmol)溶于甲醇(5ml)中，滴加2mnaoh水溶液(0.5ml，1mmol)，室温反应1.5h。滴加3mhcl调ph至6～7，减压蒸除meoh，加水，用乙酸乙酯(2×10ml)萃取，合并有机层，用饱和食盐水(5ml)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，所得粗品经柱层析纯化，得标题化合物43(0.18g，0.34mmol)，收率78％。
msm/z(esi):522[m+h]+。
实施例44合成(2-甲氧基乙基)氨基磺酸(2-((4-(n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基脒基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙基)酯44
采用与实施例43相同的方法制备，以(2-甲氧乙基)氨基磺酰氯3b为原料，代替9b。
msm/z(esi):497[m+h]+。
实施例45合成(1-氮杂环丁基-3-基)氨基磺酸(2-((4-(n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基脒基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙基)酯45
第一步合成2-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)乙基)氯磺酸酯45b
化合物(2-羟基乙基)氨基甲酸((9h-芴-9-基)甲基)酯45a(1.0g，3.53mmol)和吡啶(279mg，3.53mmol)溶于甲苯(20ml)，于-50℃～-60℃下滴加磺酰氯(476mg，3.53mmol)的甲苯溶液(5ml)，于此温度下反应2h，然后自然升温至室温，继续搅拌2h。过滤，滤液分别用水，1m盐酸，饱和碳酸氢钠溶液洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到标题化合物45b(1.2g，3.14mmol)，收率89％。
第二步合成3-(((2-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)乙氧基)磺酰基)氨基)氮杂环丁基-1-甲酸叔丁酯45c
化合物45b(1.2g，3.14mmol)，三乙胺(636mg，6.29mmol)溶于四氢呋喃(20ml)，后缓慢加入化合物3-氨基氮杂环丁基-1-甲酸叔丁酯(433mg，2.51mmol)，室温下反应2h。加水，乙酸乙酯萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后柱层析得到标题化合物45c(650mg，1.26mmol)，收率50％。
msm/z(esi):518[m+h]+。
第三步合成3-(((2-氨基乙氧基)磺酰基)氨基)氮杂环丁基-1-甲酸叔丁酯45d
化合物45c(650mg，1.26mmol)溶于四氢呋喃(10ml)，加入tbaf(650mg，2.5mmol)，室温反应1h。加乙酸乙酯稀释，用饱和氯化铵溶液洗三次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得标题化合物45d(330mg，1.12mmol)，收率89％。
第四步合成3-(((2-((4-(3-溴-4-氟苯基)-5-氧-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙氧基)磺酰基)氨基)氮杂环丁基-1-甲酸叔丁酯45e
化合物45d(330mg，1.12mmol)和化合物int-1(415mg，1.12mmol)溶于四氢呋喃(10ml)，在室温下反应1h。浓缩，板层析纯化，得到标题化合物45e(425mg，0.69mmol)，收率61％。
msm/z(esi):620[m+h]+。
第五步合成(1-氮杂环丁基-3-基)氨基磺酸(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-氧-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙基)酯45f
化合物45e(425mg，0.69mmol)溶于二氯甲烷(20ml)，室温下滴加tfa(2ml)，室温搅拌1h。加水和饱和碳酸氢钠溶液碱化溶液，二氯甲烷萃取三次，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到化合物45f(320mg，0.62mmol)，收率90％。
第六步合成(1-氮杂环丁基-3-基)氨基磺酸(2-((4-(n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基脒基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙基)酯45
化合物45f(320mg，0.62mmol)溶于甲醇(10ml)，加入无水碳酸钾(600mg，4.34mmol)，在50℃下搅拌1h。冷却后，加入饱和氯化铵溶液，用二氯甲烷萃取三次，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后板层析纯化，得到标题化合物45(92mg，0.19mmol)，收率30％。
1hnmr(400mhz,meod-d4)δ7.15(dd,j＝6.0,2.7hz,1h),7.05(t,j＝8.7hz,1h),6.89–6.80(m,1h),4.40(p,j＝7.3hz,1h),3.93(d,j＝7.4hz,4h),3.58(t,j＝6.4hz,2h),3.41(t,j＝6.4hz,2h)。
msm/z(esi):494[m+h]+。
实施例46合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-(甲基(2-(氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒46
采用与实施例40相同的方法制备，以(2-(甲基氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯为原料，并用int-1代替int-4。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.14(s,1h),10.32(s,1h),9.22(s,1h),9.10(s,1h),8.05(dd,j＝6.3,2.7hz,1h),7.35(ddd,j＝9.0,4.3,2.7hz,1h),7.27(t,j＝8.8hz,1h),7.14(t,j＝8.8hz,1h),7.09(dd,j＝6.0,2.7hz,1h),6.69(ddd,j＝8.9,4.1,2.8hz,1h),6.60–6.54(m,2h),6.53(s,4h),3.40(t,j＝6.8hz,2h),3.29(t,j＝6.8hz,1h),3.05(q,j＝6.5hz,2h),2.99–2.92(m,5h),2.89(s,3h).msm/z(esi):452[m+h]+。
实施例47合成4-(n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基甲脒基)-n-(2-((氨基磺酰)氨基)乙基)-1,2,5-噁二唑-3-甲酰胺47
第一步合成(2-(氨基磺酰胺基)乙基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲基酯47n
氮气保护下，化合物n-芴甲氧羰基乙二胺盐酸盐47m(300mg，0.9mmol)和三乙胺(190mg，1.8mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，冰水浴冷却下，向溶液中滴加氨基磺酰氯(207mg，1.8mmol)，室温下搅拌1h。用水和饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后柱层析纯化，得到标题化合物47n(253mg，0.7mmol)，收率78％。
msm/z(esi):362[m+h]+。
第二步合成2-((氨基磺酰基)氨基)乙基-1-胺47o
化合物47n(253mg，0.7mmol)和tbaf(1.3g，5.1mmol)溶于四氢呋喃(10ml)，室温下搅拌1h。加乙酸乙酯稀释，用饱和氯化铵溶液洗三次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得标题化合物47o(75mg，0.54mmol)，收率77％。
第三步合成3,4-二(肟基)二氢呋喃-2(3h)-酮47b
化合物4-羟基-2(5h)-呋喃酮47a(10g，0.1mol)溶于水(60ml)，分批次加入亚硝酸钠(6.9g，0.1mol)，在室温下搅拌10min。然后将反应液滴加到硫酸羟氨(16.4g，0.1mol)的水溶液(20ml)中，室温搅拌2h后，过滤，滤饼用水洗后，干燥，得标题化合物47b(3.0g，23.8mmol)，收率24％。
第四步合成4h,6h-呋喃并[3,4-c][1,2,5]噁二唑-4-酮47c
化合物47b(3.0g，23.8mmol)溶于1,4-二氧六环(60ml)，缓慢滴加氯化亚砜(3.93g，33.3mmol)，在室温下搅拌过夜。浓缩，所得固体用乙醇重结晶，得标题化合物47c(2.1g，16.4mmol)，收率69％。
第五步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-1,2,5-噁二唑-3-甲酰胺47d
化合物47c(2.1g，16.4mmol)加入到乙醇(80ml)和dmf(10ml)中，冰浴下缓慢滴加3-溴-4-氟苯胺(3.1g，16.4mmol)的乙醇溶液(5ml)，80℃搅拌过夜。浓缩，加水，用乙酸乙酯萃取3次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品经柱层析纯化，得标题化合物47d(3.1g，9.8mmol)，收率60％。msm/z(esi):316[m+h]+。
第六步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-4-(((三异丙基硅烷基)氧)甲基)-1,2,5-噁二唑-3-甲酰胺47e
化合物47d(4.5g，14.3mmol)和三乙胺(1.44g，14.3mmol)溶于二氯甲烷(20ml)，加入三异丙基氯硅烷(2.75g，14.3mmol)，室温下搅拌过夜。加入饱和氯化铵溶液，用二氯甲烷萃取三次，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后柱层析纯化，得到标题化合物47e(5.13g，10.9mmol)，收率76％。
第七步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-(((三异丙基硅烷基)氧)甲基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒47f
化合物47e(3.53g，7.5mmol)溶于乙腈(20ml)，加入五氯化磷(2.25g，10.9mmol)，80℃搅拌5h。冷却后浓缩，残余物溶于乙醇(20ml)，加入乙酸钠(0.71g，8.6mmol)，和硫酸羟氨(0.71g，4.3mmol)，70℃搅拌4h。浓缩后柱层析纯化，得到标题化合物47f(1.65g，3.4mmol)，收率45％。
第八步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-4-(((三异丙基硅烷基)氧)甲基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮47g
化合物47f(3.16g，6.5mmol)溶于thf(20ml)，加入cdi(1.1g，6.5mmol)，加热回流4h。冷却后加入乙酸乙酯，依次用1mhcl，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后柱层析纯化，得到标题化合物47g(2.6g，5.1mmol)，收率79％。
msm/z(esi):513[m+h]+。
第九步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-(羟甲基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮47h
化合物47g(2.6g，5.1mmol)和tbaf(2.6g，10.2mmol)溶于四氢呋喃(10ml)，室温下搅拌2h。加乙酸乙酯稀释，用饱和氯化铵溶液洗三次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得标题化合物47h(1.50g，4.2mmol)，收率82％。
第十步合成4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-氧-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-甲醛47i
氮气保护下，化合物47h(1.50g，4.2mmol)溶于二氯甲烷(20ml)，冰水浴下分批加入dmp(2.67g，6.3mmol)，反应升至室温反应2小时。过滤，滤液用饱和亚硫酸钠溶液洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后柱层析纯化，得标题化合物47i(0.95g，2.7mmol)，收率64％。
msm/z(esi):355[m+h]+。
第十一步合成4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-氧-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-甲酸47j
化合物47i(0.95g，2.7mmol)溶于叔丁醇(20ml)和水(8ml)，加入2-甲基-2-丁烯的thf溶液(2m，10.7ml，21.4mmol)，磷酸二氢钠(0.64g，5.4mmol)和亚氯酸钠(3.0g，80％，26.7mmol)，室温搅拌过夜。加水稀释，用1mhcl调ph值为4，乙酸乙酯萃取三次，合并有机相，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后柱层析纯化，得到标题化合物47j(460mg，1.2mmol)，收率46％。
msm/z(esi):371[m+h]+。
第十二步合成4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-氧-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)-n-(2-((氨基磺酰基)氨基)乙基)-1,2,5-噁二唑-3-甲酰胺47k
化合物47j(200mg，0.54mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，加入edci(104mg，0.54mmol)和hobt(73mg，0.54mmol)，于室温下搅拌30min，再加入化合物47o(75mg，0.54mmol)，室温下搅拌过夜。加入水，用二氯甲烷萃取，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后板层析纯化，得到标题化合物47k(216mg，0.44mmol)，收率61％。
msm/z(esi):492[m+h]+。
第十三步合成4-(n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基甲脒基)-n-(2-((氨基磺酰)氨基)乙基)-1,2,5-噁二唑-3-甲酰胺47
化合物47k(216mg，0.44mmol)溶于甲醇(10ml)，加入无水碳酸钾(425mg，3.08mmol)，在50℃下搅拌1h。冷却后，加入饱和氯化铵溶液，用二氯甲烷萃取三次，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后板层析纯化，得到标题化合物47(107mg，0.23mmol)，收率52％。
msm/z(esi):466[m+h]+。
实施例48合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-5-((2-((氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,3-噻二唑-4-甲脒48
第一步合成5-氯-1,2,3-噻二唑-4-羧酸48b
化合物5-氯-1,2,3-噻二唑-4-甲酸乙酯48a(1.0g，5.2mmol)溶于1,4-二氧六环(20ml)，加入浓盐酸(10ml)，加热回流3h。冷却后，浓缩除去大部分溶剂，用乙酸乙酯萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到标题化合物48b(787mg，4.8mmol)，收率92％。
第二步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-5-氯-1,2,3-噻二唑-4-甲酰胺48c
化合物48b(787mg，4.8mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，加入edci(920mg，4.8mmol)和hobt(648mg，4.8mmol)，室温下搅拌30min，再加入3-溴-4-氟苯胺(907mg，4.8mmol)，室温搅拌过夜。加水，用二氯甲烷萃取两次，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析纯化，得到标题化合物48c(1.4g，4.2mmol)，收率88％。
msm/z(esi):336[m+h]+。
第三步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-5-氯-n'-羟基-1,2,3-噻二唑-4-甲脒48d
化合物48c(1.4g，4.2mmol)溶于乙腈(20ml)，加入五氯化磷(1.13g，4.2mmol)，80℃搅拌5h。冷却后浓缩，残余物溶于乙醇(20ml)，加入乙酸钠(0.42g，5.0mmol)，和硫酸羟氨(0.83g，5.0mmol)，70℃搅拌4h。浓缩后柱层析纯化，得到标题化合物48d(0.7g，2.0mmol)，收率48％。
msm/z(esi):351[m+h]+。
第四步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(5-氯-1,2,3-噻二唑-4-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮48e
化合物48d(910mg,2.6mmol)溶于thf(10ml)，加入cdi(440mg，2.6mmol)，加热回流4h。冷却后加入乙酸乙酯，依次用1mhcl，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后柱层析纯化，得到标题化合物48e(865mg，2.3mmol)，收率88％。
msm/z(esi):377[m+h]+。
第五步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(5-((2-((氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,3-噻二唑-4-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮48f
化合物48e(790mg，2.1mmol)和化合物47o(291mg，2.1mmol)溶于乙醇(15ml)，在室温下搅拌2h。浓缩后柱层析纯化，得到标题化合物48f(297mg，0.62mmol)，收率30％。
msm/z(esi):480[m+h]+。
第六步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-5-((2-((氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,3-噻二唑-4-甲脒48
化合物48f(297mg，0.62mmol)溶于甲醇(10ml)，加入无水碳酸钾(600mg，4.34mmol)，在50℃下搅拌1h。冷却后，加入饱和氯化铵溶液，用二氯甲烷萃取三次，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后板层析纯化，得到标题化合物48(217mg，0.48mmol)，收率77％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.98(s,1h),7.78(d,j＝7.3hz,1h),7.53(d,j＝7.4hz,1h),7.47(d,j＝7.4hz,1h),7.39(p,j＝7.3hz,2h),7.21(t,j＝7.6hz,1h),6.95(d,j＝7.8hz,2h),5.23(s,1h),4.02(t,j＝4.8hz,2h),3.76(s,3h),3.00(s,2h),2.83(s,1h),2.69(s,2h),2.51(s,3h).
msm/z(esi):454[m+h]+。
实施例49合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-((氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噻二唑-3-甲脒49
采用与实施例48相同的方法制备，以4-氯-1,2,5-噻二唑-3-甲酸乙酯为原料，代替48a。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.88(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.05(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.91(s,2h),6.70(m,1h),6.63(m,3h),4.19(s,2h),3.22(q,j＝5.9hz,2h).
msm/z(esi):454[m+h]+。
实施例50合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-((氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)呋喃-3-甲脒50
第一步合成4-溴呋喃-3-甲酸乙酯50b
化合物3,4-二溴呋喃50a(5g，22.3mmol)溶于四氢呋喃(100ml)中，零度下向该体系滴加1m异丙基溴化镁(33.4ml，33.4mmol)，零度下反应1小时。然后在保持零度下往该反应体系慢慢滴加入氯甲酸乙酯(2.4g，22.3mmol)。滴加完毕慢慢升温并保持搅拌2小时。用饱和氯化铵溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取三次，合并有机相，用水和饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品用柱层析纯化，得到标题化合物50b(3.4g，15.6mmol)，收率70％。msm/z(esi):219[m+h]+。
第二步合成4-((2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)氨基)呋喃-3-甲酸乙酯50c
化合物50b(2.5g，11.4mmol)，(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯(2.75g，17.4mmol)，乙酸钯(0.25g，1.14mmol)，xantphos(0.66g，1.14mmol)和碳酸钾(3.1g，22.8mmol)溶于无水二氧六环(100ml)中，在氮气保护下，回流搅拌过夜。反应液过滤，滤液浓缩，粗品用柱层析纯化得到标题化合物50c(0.74g，2.5mmol)，收率22％。
msm/z(esi):299[m+h]+。
第三步合成4-((2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)氨基)呋喃-3-甲酸50d
化合物50c(0.74g，2.5mmol)溶于四氢呋喃(10ml)中，加入2m氢氧化钠水溶液(3ml)。在室温下搅拌2小时，用3m盐酸淬灭，调节ph值到4，用乙酸乙酯萃取三次，合并有机相，用水和饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩得到标题化合物50d(0.6g，2.3mmol)，收率92％。
msm/z(esi):271[m+h]+。
第四步合成(2-((4-((3-溴-4-氟苯基)氨基甲酰基)呋喃-3-基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯50e
化合物50d(0.6g，2.3mmol)，3-溴-4-氟苯胺(0.47g，2.5mmol)，hatu(0.95g，2.5mmol)和三乙胺(0.35g，3.5mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(15ml)中，室温下搅拌3小时。加入乙酸乙酯，有机相用水洗四次，用饱和食盐水洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，粗品用柱层析纯化得到标题化合物50e(0.88g，2.0mmol)，收率87％。
msm/z(esi):442[m+h]+。
第五步合成4-((2-氨基乙基)氨基)-n-(3-溴-4-氟苯基)呋喃-3-甲酰胺三氟乙酸盐50f
化合物50e(0.88g，2.0mmol)溶于二氯甲烷(15ml)中，加入三氟乙酸(8ml)。该反应混合物在室温下搅拌2小时。反应液浓缩得到粗品标题化合物50f(0.75g，1.7mmol),直接用于下一步反应。
msm/z(esi):342[m+h]+。
第六步合成(9h-芴-9-基)甲基(2-((4-((3-溴-4-氟苯基)氨基甲酰基)呋喃-3-基)氨基)乙基)氨基甲酸酯50g
化合物50f(0.75g，1.7mmol)和三乙胺(0.51g，5.1mmol)溶于二氯甲烷(10ml),在室温下加入9-芴基甲基氯甲酸酯(0.54g，2.1mmol)，室温下搅拌过夜。加入饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，用二氯甲烷萃取三次，合并有机相，有机相用水和饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，粗品用柱层析纯化得到标题化合物50g(0.78g，1.4mmol),收率82％。
msm/z(esi):564[m+h]+。
第七步合成(9h-芴-9-基)甲基(2-((4-(n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基氨基甲亚胺酰基)呋喃-3-基)氨基)乙基)氨基甲酸酯50h
化合物50g(0.7g，1.2mmol)溶于甲苯(10ml)中，加入五氯化磷(0.3g，1.5mmol)。该反应混合物在氮气保护回流状态搅拌4小时，反应液浓缩，将残留物溶于乙醇(10ml)中，在室温下滴加到50％羟胺水溶液中。该反应混合物在室温下搅拌2小时。蒸去多余的乙醇，用二氯甲烷萃取三次，合并有机相，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，粗品用柱层析纯化得到标题化合物50h(0.46g，0.8mmol)，收率66％。
msm/z(esi):579[m+h]+。
第八步合成(9h-芴-9-基)甲基(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)呋喃-3-基)氨基)乙基)氨基甲酸酯50i
化合物50h(0.46g，0.8mmol)和cdi(0.19g，1.2mmol)溶于四氢呋喃(20ml)中，在回流状态下搅拌2小时。反应液浓缩，粗品用柱层析纯化得到标题化合物50i(0.3g，0.5mmol)，收率62％。
msm/z(esi):605[m+h]+。
第九步合成3-(4-((2-氨基乙基)氨基)呋喃-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮50j
化合物50i(0.3g，0.5mmol)溶于四氢呋喃(10ml)中，向反应混合物中加入四丁基氟化铵(0.65g，2.5mmol)，该反应混合物在室温下搅拌2小时。反应液用饱和氯化铵淬灭，用二氯甲烷萃取三次，合并有机相，有机相用饱和氯化铵洗三次，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品。粗品用柱层析纯化得到标题化合物50j(0.15g，0.4mmol)，收率80％。
msm/z(esi):383[m+h]+。
第十步合成(n-(2-((4-(4-(3-溴-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)呋喃-3-基)氨基)乙基)氨基磺酰基)氨基甲酸叔丁基酯50k
将氯磺酰异氰酸酯(70mg，0.5mmol)溶于二氯甲烷(5ml)中，在冰浴下滴加叔丁醇(59mg，0.8mmol)的二氯甲烷(2ml)溶液。滴加完毕，该反应混合物在室温下搅拌1小时。将该反应混合物直接滴加到化合物50j(0.15g，0.4mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中，该反应混合物在室温下继续搅拌1小时，浓缩得到粗品，粗品用柱层析纯化得到标题化合物50k(168mg，0.3mmol)，收率75％。
msm/z(esi):562[m+h]+。
第十一步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-((氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-呋喃-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮三氟乙酸盐50l
化合物50k(168mg，0.3mmol)溶于二氯甲烷(5ml)中，加入三氟乙酸(2ml)。该反应混合物在室温下搅拌1小时。反应液浓缩得到粗品标题化合物50l。该粗品直接用于下一步反应。
msm/z(esi):462[m+h]+。
第十二步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-((氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)呋喃-3-甲脒50
化合物50l溶于四氢呋喃(10ml)中，然后加入2m的氢氧化钠水溶液(4ml)。该反应混合物在室温下搅拌1小时，用3m盐酸水溶液淬灭，调节ph值到8，用乙酸乙酯萃取三次，合并有机相，有机相用水和饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得粗品，粗品用板层析纯化得到标题化合物50(35mg，0.08mmol)，两步收率26％。
msm/z(esi):436[m+h]+。
实施例51合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-3-((2-((氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)噻吩-2-甲脒51
采用与实施例50相同的方法制备，以3-溴噻吩-2-甲酸甲酯为原料，代替50b。
msm/z(esi):452[m+h]+。
实施例52合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-3-((2-((氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1h-吡唑-4-甲脒52
第一步合成3-氨基-n-(3-溴-4-氟苯基)-1h-吡唑-4-甲酰胺52b
将化合物3-氨基-1h-吡唑-4-甲酸52a(5.0g，39.3mmol)，edci(11.3g，59.0mmol)和hobt(8.0g，59.0mmol)溶于dmf(50ml)中，室温反应1h，加入3-溴-4-氟苯胺(8.2g，43.2mmol)，室温反应过夜。减压浓缩至干，柱层析纯化得标题化合物52b(7.7g，23.4mmol)，收率65％。
msm/z(esi):299[m+h]+。
第二步合成3-氨基-n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-1h-吡唑-4-甲脒52c
化合物52b(7.0g，23.4mmol)溶于甲苯(50ml)中，加入五氯化磷(6.3g，30.4mmol)。该反应混合物在氮气保护回流状态搅拌4小时，反应液浓缩，将残留物溶于乙醇(30ml)中，在室温下滴加到50％羟胺水溶液中。该反应混合物在室温下搅拌2小时。蒸去多余的乙醇，用二氯甲烷萃取三次，合并有机相，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，粗品用柱层析纯化得到标题化合物52c(3.9g，12.4mmol)，收率53％。
msm/z(esi):314[m+h]+。
第三步合成3-(3-氨基-1h-吡唑-4-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮52d
化合物52c(3.9g，12.4mmol)和cdi(2.2g，13.6mmol)溶于thf(20ml)中，回流反应2h。冷至室温，浓缩，加入乙酸乙酯(50ml)，依次用0.5mhcl(2×20ml)和饱和食盐水(25ml)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得标题化合物52d(3.8g，11.2mmol)，收率90％。
msm/z(esi):340[m+h]+。
第四步合成(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-氧代-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)-1h-吡唑-3-基)胺基)乙基)氨基甲酸叔丁酯52e
化合物52d(3.8g，11.2mmol)和(3-氧代丙基)氨基甲酸叔丁酯(2.1g，12.1mmol)溶于二氯甲烷(50ml)，加入少量hoac，分批加入nabh(oac)3(7.1g，33.5mmol)，室温反应过夜。加入饱和nahco3溶液，分出有机层，水层再用dcm(50ml)萃取，合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化得标题化合物52e(2.85g，5.9mmol)，收率53％。
msm/z(esi):483[m+h]+。
第五步合成3-(3-((2-氨基乙基)氨基)-1h-吡唑-4-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮三氟甲酸盐52f
将化合物52e(2.0g，4.1mmol)溶于dcm(10ml)中，加入tfa(5ml)，室温反应2h。浓缩至干得粗品标题化合物52f，直接用于下一步。
msm/z(esi):383[m+h]+。
第六步合成(n-(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基-5-氧代-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)-1h-吡唑-3-基)氨基)乙基)氨基磺酰基)氨基甲酸叔丁酯52g
将氯磺酸异氰酸酯(0.37g，2.6mmol)溶于无水dcm(2ml)中，冰水浴冷却下，滴加t-buoh(0.19g，2.6mmol)，室温反应1h，备用(反应液a)。
将化合物52f(0.5g，1.3mmol)溶于无水dcm(2ml)中，冰水浴冷却下，滴加tea(0.53g，5.2mmol)，将反应液a缓慢滴入，滴完逐渐升至室温反应2h。加入乙酸乙酯(20ml)稀释，有机层依次用0.1mhcl(2×10ml)和饱和食盐水(10ml)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩所得粗品，经柱层析纯化得标题化合物52g(0.40g，0.71mmol)，收率55％。
msm/z(esi):562[m+h]+。
第七步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-((氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1h-吡唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮52h
将化合物52g(0.40g，0.71mmol)悬浮于dcm(7ml)中，加入tfa(3.5ml)，室温反应2h。浓缩至干，加入饱和碳酸氢钠溶液，乙酸乙酯萃取3次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩所得粗品，经柱层析纯化得标题化合物52h(0.27g，0.58mmol)，收率81％。
msm/z(esi):462[m+h]+。
第八步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-3-((2-((氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1h-吡唑-4-甲脒52
化合物52h(0.27g，0.58mmol)溶于甲醇(8ml)中，滴加2mnaoh水溶液(0.6ml，1.2mmol)，室温反应1.5h。滴加3mhcl调ph为6～7，减压蒸除甲醇，加水，用乙酸乙酯萃取两次，合并有机层，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩所得粗品，经板层析得标题化合物52(0.23g，0.53mmol)，收率90％。
msm/z(esi):436[m+h]+。
实施例53合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((2-((氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1h-吡唑-3-甲脒53
采用与实施例52相同的方法制备，以4-氨基-1h-吡唑-3-甲酸为原料，代替52a。
msm/z(esi):436[m+h]+。
实施例54合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((3-(乙磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒54
采用与实施例2相同的方法制备，以乙硫醇钠为起始原料，代替甲硫醇钠。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.47(s,1h),8.94(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.11(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.76(ddd,j＝8.9,4.2,2.7hz,1h),6.35(t,j＝5.9hz,1h),3.33(q,j＝6.6hz,2h),3.21–2.99(m,4h),2.06–1.91(m,2h),1.21(t,j＝7.4hz,3h)。
msm/z(esi):450[m+h]+。
实施例55合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((3-((1-甲基乙基)磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒55
第一步合成(3-(1’-甲基乙硫基)丙基)氨基甲酸叔丁基酯55b
化合物(3-溴丙基)氨基甲酸叔丁基酯2a(1.0g，4.48mmol)溶于dmso(5ml)，加入异丙基硫醇(374mg，4.93mmol)和氢氧化钠(197mg，4.93mmol)，室温下搅拌过夜。加入水搅拌0.5h后加乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到标题化合物55b(854mg，3.20mmol)，收率71％。
后续步骤采用与实施例2相同的方法制备，可得化合物55。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.45(s,1h),8.92(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.12(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.80–6.73(m,1h),6.34(t,j＝5.9hz,1h),3.37–3.32(m,2h),3.29–3.21(m,1h),3.15–3.07(m,2h),2.03–1.93(m,2h),1.23(s,6h).
msm/z(esi):464[m+h]+。
实施例56合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((3-(环丙基磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒56
第一步合成环丙基硫醇56b
将化合物环丙基溴化镁溶液56a(10ml，5.0mmol)溶于四氢呋喃(20ml)中，于冰浴下，分批次加入硫粉(128mg，4.0mmol)，加完后，于50℃下反应3小时，后降温至0℃，缓慢加入lialh4(95mg，2.5mmol)，加完后，回流半小时。后于冰浴下，很小心的加入水(3ml)，5％稀硫酸，所得混合物用乙酸乙酯萃取(3×25ml)，合并有机相。用5％稀硫酸洗，5％碳酸钠溶液洗，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品。
后续步骤采用与实施例55相同的方法制备，可得化合物56。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.45(s,1h),8.92(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.12(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.80–6.73(m,1h),6.35(t,j＝5.9hz,1h),3.37–3.33(m,2h),3.23–3.14(m,2h),2.74–2.65(m,1h),2.06–1.95(m,2h),1.05–0.91(m,4h).
msm/z(esi):462[m+h]+。
实施例57合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((3-((2-羟基乙基)磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒57
第一步合成2-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧代)乙烷-1-硫醇57b
化合物1-巯基-乙醇57a(1.0g，12.82mmol)，三乙胺(1.94g，19.23mmol)溶于二氯甲烷(30ml)，加入叔丁基二苯基氯硅烷(3.71g，12.82mmol)，在室温下搅拌4h。加入饱和氯化铵溶液，用二氯甲烷萃取三次，有机相合并，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后柱层析得到标题化合物57b(2.43g，7.69mmol)，收率60％。
第二步合成(3-((2-((叔-丁基二苯基甲硅烷基)氧代)乙基)硫代)丙基)氨基甲酸叔丁酯57c
化合物(3-溴丙基)氨基甲酸叔丁基酯2a(1.0g，4.48mmol)溶于dmso(5ml)，加入化合物57b(1.56g，4.93mmol)和氢氧化钠(197mg，4.93mmol)，室温下搅拌过夜。加入水搅拌0.5h后加乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到标题化合物57c(1.44g，3.05mmol)，收率68％。
第三步合成(3-((2-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧代)乙基)磺酰基)丙基)氨基甲酸叔丁酯57d
化合物(3-((2-((叔-丁基二苯基甲硅烷基)氧代)乙基)硫代)丙基)氨基甲酸叔丁酯57c(1.44g，3.05mmol)溶于甲醇(20ml),滴加oxone(2.79g，4.58mmol)水溶液(20ml)，室温下搅拌1h。加水和二氯甲烷萃取，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到标题化合物57d(1.29g，2.56mmol)，收率84％。
第四步合成(3-((2-羟基乙基)磺酰基)丙基)氨基甲酸叔丁酯57e
化合物57d(1.29g，2.56mmol)溶于四氢呋喃(30ml)，加入tbaf(6.67g，25.6mmol)，室温下搅拌1h。反应完毕后，直接用于下一步。
后续步骤采用与实施例2相同的方法制备，可得化合物57。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.45(s,1h),8.90(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.12(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.80–6.71(m,1h),6.32(t,j＝6.0hz,1h),5.12(t,j＝5.1hz,1h),3.78(q,j＝5.5hz,2h),3.37–3.29(m,2h),3.22(t,j＝5.8hz,2h),3.20–3.13(m,2h),2.05–1.94(m,2h)。
msm/z(esi):466[m+h]+。
实施例58合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((3-(((四氢呋喃-3-基)甲基)磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒58
第一步合成s-(3-(((苄氧基)羰基)氨基)丙基)硫代乙酸酯58b
化合物(3-溴丙基)氨基甲酸苄酯58a(10g，36.9mmol)溶于dmf(50ml)，向该体系加入硫代乙酸钾(5g，44.2mmol)。在室温下搅拌过夜。加水淬灭，用乙酸乙酯萃取三次，合并有机相，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，粗品经柱层析纯化得到标题化合物58b(9g，33.7mmol)无色油状物,收率91％。
msm/z(esi):290[m+na]+。
第二步合成(3-巯丙基)氨基甲酸苄酯58c
化合物58b(9g，33.7mmol)溶于甲醇(100ml)，加入2n氢氧化钠溶液(150ml)。该反应混合物在室温下搅拌4小时。加入3n盐酸调节ph值至7，用乙酸乙酯萃取三次，合并有机相，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩得到标题化合物58c(7g，31.1mmol)橙色油状物，收率91％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.30(dt,j＝9.6,7.4hz,5h),3.05(q,j＝6.4hz,2h),2.45–2.38(m,2h),2.30(dd,j＝8.5,7.3hz,1h),1.62(p,j＝6.9hz,2h)。
msm/z(esi):248[m+na]+。
第三步合成(3-(((四氢呋喃-3-基)甲基)硫代)丙基)氨基甲酸苄酯58d
化合物58c(200mg，0.88mmol)，3-(溴甲基)四氢呋喃(175mg，1.06mmol)和叔丁醇钾(197mg，1.76mmol)分散在乙醇中(5ml)，在回流状态下反应10分钟，冷却至室温，加水淬灭，用乙酸乙酯萃取三次，合并有机相，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，粗品经柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)得到标题化合物58d(100mg，0.32mmol)呈无色油状物，收率36％。
msm/z(esi):310[m+h]+。
第四步合成(3-(((四氢呋喃-3-基)甲基)磺酰基)丙基)氨基甲酸苄酯58e
化合物58d(100mg，0.32mmol)溶于甲醇(2ml)，加入过氧硫酸氢钾复合盐(107mg，0.64mmol)的水溶液。该反应混合物在室温下搅拌2小时，加入饱和nahco3水溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取三次，合并有机相。有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩得到标题化合物58e(102mg，0.30mmol)呈谈褐色油状物，收率93％。
msm/z(esi):342[m+h]+。
第五步合成3-(((四氢呋喃-3-基)甲基)磺酰基)丙烷-1-胺58f
化合物58e(102mg，0.30mmol)溶于甲醇(3ml)，加入10％pd/c(3mg)，在氢气环境下常温搅拌过夜。将反应液过滤，滤液浓缩得到标题化合物58f(50mg，0.24mmol)呈淡棕色油状物，收率80％。
第六步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((3-(((四氢呋喃-3-基)甲基)磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮58g
化合物58f(50mg，0.24mmol)，化合物int-1(90mg，0.24mmol)和三乙胺(72mg，0.72mmol)溶于乙腈(5ml)，室温下搅拌1小时。反应液浓缩，粗品经柱层析纯化(dcm：meoh＝10:1)得到标题化合物58g(90mg，0.17mmol)呈无色油状物，收率70％。
msm/z(esi):532[m+h]+。
第七步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((3-(((四氢呋喃-3-基)甲基)磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3甲脒58
化合物58g(90mg，0.17mmol)溶于四氢呋喃(5ml)中，加入2n的氢氧化钠水溶液(4ml)，在室温下搅拌1小时。用3n盐酸水溶液淬灭，调节ph值到8，用乙酸乙酯萃取三次，合并有机相。有机相用水和饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品经板层析纯化(dcm:meoh＝8:1)，得到标题化合物58(12mg，0.023mmol)呈白色固体，收率13％。
1hnmr(400mhz,methanol-d4)δ7.11(dd,j＝6.0,2.7hz,1h),7.03(t,j＝8.6hz,1h),6.82(ddd,j＝8.8,4.1,2.7hz,1h),3.97(dd,j＝8.7,7.1hz,1h),3.84(td,j＝8.3,4.8hz,1h),3.74(dt,j＝8.3,7.5hz,1h),3.51(dd,j＝8.7,7.1hz,1h),3.44(t,j＝6.7hz,2h),3.26–3.07(m,5h),2.76(dq,j＝14.5,7.3hz,1h),2.27–2.06(m,3h),1.75(dq,j＝12.5,7.9hz,1h).
msm/z(esi):506[m+h]+。
实施例59合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((3-(((四氢呋喃-2-基)甲基)磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒59
以2-(溴甲基)四氢呋喃为原料，与58c反应。后续步骤采用与实施例58相同的方法制备。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.46(s,1h),8.91(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.11(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.76(ddd,j＝8.9,4.2,2.7hz,1h),6.32(t,j＝6.0hz,1h),4.22–4.14(m,1h),3.78–3.70(m,1h),3.68–3.59(m,1h),3.45–3.26(m,3h),3.25–3.07(m,3h),2.10–1.92(m,3h),1.90–1.73(m,2h),1.66–1.54(m,1h)。
msm/z(esi):506[m+h]+。
实施例60合成n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((3-(((3,3-二氟环丁基)甲基)磺酰基)丙基)氨基)-n’-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒60
以3-(溴甲基)-1,1-二氟环丁烷为原料，与58c反应。后续步骤采用与实施例58相同的方法制备。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.47(s,1h),8.92(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.12(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.77(ddd,j＝8.9,4.2,2.7hz,1h),6.34(t,j＝5.9hz,1h),3.40(d,j＝6.9hz,2h),3.36–3.30(m,2h),3.17–3.09(m,2h),2.84–2.70(m,2h),2.63–2.42(m,3h),2.05–1.93(m,2h)。
msm/z(esi):526[m+h]+。
实施例61合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((3-((2-甲氧基乙基)磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒61
以1-溴-2-甲氧基乙烷为原料，与58c反应。后续步骤采用与实施例58相同的方法制备。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.46(s,1h),8.91(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.11(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.76(ddd,j＝8.9,4.2,2.7hz,1h),6.32(t,j＝6.0hz,1h),3.68(t,j＝5.7hz,2h),3.36(t,j＝5.7hz,2h),3.35–3.30(m,2h),3.24(s,3h),3.18–3.09(m,2h),1.99(p,j＝7.0hz,2h)。
msm/z(esi):480[m+h]+。
实施例62合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((3-((四氢-2h-吡喃-4-基)磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒62
以4-溴-四氢吡喃为原料，与58c反应。后续步骤采用与实施例58相同的方法制备。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.45(s,1h),8.91(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.12(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.76(ddd,j＝8.8,4.1,2.7hz,1h),6.33(t,j＝6.0hz,1h),3.99–3.92(m,2h),3.45–3.29(m,5h),3.15–3.08(m,2h),2.04–1.94(m,2h),1.92–1.84(m,2h),1.68–1.55(m,2h)。
msm/z(esi):506[m+h]+。
实施例63合成n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((3-(环己基磺酰基)丙基)氨基)-n’-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒63
以环己基硫醇为原料，与2a反应。后续步骤采用与实施例56相同的方法制备。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.45(s,1h),8.92(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.11(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.79–6.73(m,1h),6.33(t,j＝5.9hz,1h),3.36–3.29(m,2h),3.12–2.99(m,3h),2.06–1.92(m,4h),1.84–1.76(m,2h),1.67–1.59(m,1h),1.41–1.10(m,5h).
msm/z(esi):504[m+h]+。
实施例64合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(甲基磺酰基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒64
以(2-溴乙基)氨基甲酸叔丁基酯64a为原料，与甲硫醇钠反应。后续步骤采用与实施例2相同的方法制备。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.50(s,1h),8.92(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.11(dd,j＝6.2,2.7hz,1h),6.79–6.72(m,1h),6.49(t,j＝6.0hz,1h),3.67(q,j＝6.5hz,2h),3.44(t,j＝6.5hz,2h),3.04(s,3h)。
msm/z(esi):422[m+h]+。
实施例65合成n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(甲基磺酰基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒65
以4-(3-二氟甲基-4-氟苯基)-3-(4-硝基-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮int-4为原料，代替int-1与64d反应。后续步骤采用与实施例64相同的方法制备。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.48(s,1h),8.96(s,1h),7.18(t,j＝9.5hz,1h),7.13(t,j＝54.2hz,1h),7.03(dd,j＝6.1,2.8hz,1h),6.96–6.90(m,1h),6.51(t,j＝6.0hz,1h),3.67(q,j＝6.4hz,2h),3.44(t,j＝6.5hz,2h),3.04(s,3h)。
msm/z(esi):394[m+h]+。
实施例66合成n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(甲基磺酰基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒66
以4-(3-二氟甲基-4-氟苯基)-3-(4-硝基-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮int-4为原料，代替int-1与2d反应。后续步骤采用与实施例2相同的方法制备。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.44(s,1h),8.96(s,1h),7.19(t,j＝9.5hz,1h),7.12(t,j＝54.9hz,1h),7.06–7.01(m,1h),6.97–6.91(m,1h),6.35(t,j＝5.9hz,1h),3.36–3.29(m,2h),3.17–3.10(m,2h),2.97(s,3h),1.98(p,j＝7.0hz,2h)。
msm/z(esi):408[m+h]+。
实施例67合成n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(2-羰基咪唑烷-1-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒67
以4-(3-二氟甲基-4-氟苯基)-3-(4-硝基-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮int-4为原料，代替int-1与13a反应。后续步骤采用与实施例13相同的方法制备。
1hnmr(400mhz,meod-d4)δ7.10–7.04(m,2h),7.03–6.97(m,1h),6.91(t,j＝55.8hz,1h),3.57–3.51(m,2h),3.46–3.42(m,4h),3.42–3.36(m,2h)。
msm/z(esi):400[m+h]+。
实施例68合成n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(2-吡咯烷酮-1-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒68
以4-(3-二氟甲基-4-氟苯基)-3-(4-硝基-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮int-4为原料，代替int-1与14a反应。后续步骤采用与实施例14相同的方法制备。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.42(s,1h),8.94(s,1h),7.18(t,j＝9.4hz,1h),7.13(t,j＝54.6hz,1h),7.02(dd,j＝6.3,2.7hz,1h),6.97–6.91(m,1h),6.27(t,j＝5.7hz,1h),3.42–3.31(m,6h),2.17(t,j＝8.1hz,2h),1.89(p,j＝7.5hz,2h)。
msm/z(esi):399[m+h]+。
实施例69合成n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-4-((2-(1,1-二氧化-1,2,5-噻二唑-2-基)乙基)氨基)-n’-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒69
以4-(3-二氟甲基-4-氟苯基)-3-(4-硝基-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮int-4为原料，代替int-1与12e反应。后续步骤采用与实施例12相同的方法制备。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.45(s,1h),8.96(s,1h),7.22–7.15(m,2h),7.12(t,j＝54.7hz,1h),7.05–7.00(m,1h),6.96–6.90(m,1h),6.32(t,j＝5.9hz,1h),3.43(q,j＝6.1hz,2h),3.38–3.31(m,2h),3.28(t,j＝6.3hz,2h),3.10(t,j＝6.3hz,2h)。
msm/z(esi):436[m+h]+。
实施例70合成n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-氧化-1,3,2-二氧杂磷杂环己基-2-基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒70
以4-(3-二氟甲基-4-氟苯基)-3-(4-硝基-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮int-4为原料，代替int-1与16d反应。后续步骤采用与实施例16相同的方法制备。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.45(s,1h),8.93(s,1h),7.18(t,j＝9.5hz,1h),7.12(t,j＝54.3hz,1h),7.04(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.97–6.91(m,1h),6.22(t,j＝6.1hz,1h),5.30(dt,j＝13.3,6.8hz,1h),4.34–4.12(m,4h),3.27(q,j＝6.3hz,2h),2.97(dq,j＝13.0,6.5hz,2h),1.93–1.75(m,2h)。
msm/z(esi):451[m+h]+。
实施例71合成n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-((n-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒71
第一步合成(2-((n-(1-羟基-2-甲基丙基-2-基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯71b
化合物2-氨基-2-甲基丙基-1-醇71a(200mg，2.24mmol)，化合物4e(800mg，2.59mmol)和三乙胺(450mg，4.45mmol)溶于乙腈(15ml)，100℃加热6h。冷却后浓缩，粗品经柱层析纯化(dcm:meoh＝5:1)，得标题化合物71b(600mg，1.93mmol)，收率86％。
第二步合成2-((n-(1-羟基-2-甲基丙基-2-基)氨基磺酰基)氨基)乙胺三氟乙酸盐71c
化合物71b(300mg，0.96mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，加入tfa(2ml)，室温反应1h。浓缩，得粗品标题化合物71c，直接用于下一步。
第三步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((2-((n-(1-羟基-2-甲基丙基-2-基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮71d
上述化合物71c，化合物int-1(325mg，0.94mmol)和三乙胺(190mg，1.88mmol)溶于乙腈(5ml)，室温下搅拌1小时。反应液浓缩，粗品经柱层析纯化，得到标题化合物71d(100mg，0.19mmol)，收率20％。
第四步合成n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-((n-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)氨基磺酰基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒71
化合物71d(100mg，0.19mmol)溶于四氢呋喃(5ml)中，加入2n的氢氧化钠水溶液(1ml)，在室温下搅拌1小时。用1n盐酸水溶液调节ph值到8，用乙酸乙酯萃取三次，合并有机相。有机相用水和饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品经板层析纯化，得到标题化合物71(25mg，0.05mmol)，收率28％。
1hnmr(400mhz,meod-d4)δ7.12–7.04(m,2h),7.04–6.99(m,1h),6.91(t,j＝54.9hz,1h),3.49–3.43(m,4h),3.28–3.23(m,2h),1.28(s,6h)。
msm/z(esi):482[m+h]+。
实施例72合成n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(s-甲基亚砜亚胺基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒72
化合物41c(130mg，0.31mmol)溶于thf/meoh(1:1，10ml)，加入2mnaoh水溶液(0.6ml)，室温反应1h。用1mhcl调节ph值为7，加乙酸乙酯稀释(25ml)，依次用水(10ml)和饱和食盐水(10ml)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得标题化合物72(115mg，0.29mmol)，收率94％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.47(s,1h),8.94(s,1h),7.18(t,j＝9.5hz,1h),7.13(t,j＝54.4hz,1h),7.02(dd,j＝6.1,2.8hz,1h),6.96–6.89(m,1h),6.59(t,j＝6.0hz,1h),3.87(s,1h),3.65(q,j＝6.4hz,2h),3.42–3.27(m,2h),2.95(s,3h)。
msm/z(esi):393[m+h]+。
实施例73合成(2-((4-(n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基甲脒基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙基)氨基磷酸二甲酯73
第一步合成(2-((二甲氧基膦酰基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯73b
化合物n-叔丁氧羰基-1,2-乙二胺盐酸盐73a(500mg，2.5mmol)和三乙胺(514mg，5.0mmol)溶于二氯甲烷(8ml)，冰水浴下加入二甲氧基磷酰氯(404mg，2.8mmol)，室温反应过夜。加水稀释后用二氯甲烷萃取3次，合并有机相，饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得标题化合物73b(600mg，0.22mmol)，收率88％。
msm/z(esi):291[m+na]+。
第二步合成(2-氨基乙基)氨基磷酸二甲酯73c
化合物73b(200mg，0.75mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，加入tfa(1ml)，室温反应0.5h。浓缩，得粗品标题化合物73c，直接用于下一步。
第三步合成(2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-氧-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙基)氨基磷酸二甲酯73d
化合物73c溶于四氢呋喃(10ml)和水(1ml)，加入碳酸钾(207mg，1.5mmol)和化合物int-1(100mg，0.27mmol)，室温反应2h。加水，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品经板层析纯化，得标题化合物73d(10mg，0.02mmol)，收率7.5％。
msm/z(esi):493[m+h]+。
第四步合成(2-((4-(n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基甲脒基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙基)氨基磷酸二甲酯73
化合物73d(10mg，0.02mmol)溶于甲醇(10ml)，加入碳酸钾(14mg，0.1mmol)，50℃搅拌1h。冷却后，加入饱和氯化铵溶液，用二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后板层析纯化，得到标题化合物73(9mg，0.019mmol)，收率95％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.45(s,1h),8.89(s,1h),7.19(t,j＝8.8hz,1h),7.11(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.80–6.74(m,1h),6.22(t,j＝6.2hz,1h),5.15–5.07(m,1h),3.56(s,3h),3.53(s,3h),3.26(q,j＝6.2hz,2h),3.00–2.91(m,2h)。
msm/z(esi):467[m+h]+。
实施例74合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((1-(2-氧化-1,3,2-二氧杂磷杂环己基-2-基)哌啶-4-基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒74
第一步合成2-氯-2-氧化-1,3,2-二氧杂磷杂环己烷16b
化合物1,3-丙二醇16a(497mg，6.54mmol)和三乙胺(1.32g，13.08mmol)溶于二氯甲烷(20ml)，氮气保护下，冷却到0℃，然后向溶液中滴加三氯氧磷(1.0g，6.54mmol)。将上述溶液在室温下搅拌过夜，直接用于下一步。
第二步合成(1-(2-氧化-1,3,2-二氧杂磷杂环己烷-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯74a
氮气保护下，化合物4-(叔丁氧羰基氨基)哌啶(1.0g，5.0mmol)和三乙胺(505mg，5.0mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，冷却到0℃，向溶液中滴加上一步化合物16b的二氯甲烷溶液。室温下搅拌2h。用水洗反应液，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后重结晶，得到标题化合物74a(1.0g，3.1mmol)，收率63％。
msm/z(esi):343[m+na]+。
第三步合成2-氧化-2-(4-氨基哌啶-1-基)-1,3,2-二氧杂磷杂环己烷三氟乙酸盐74b
化合物74a(200mg，0.62mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，加入tfa(2ml)，室温反应1h。浓缩，得粗品标题化合物74b，直接用于下一步。
第四步合成4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-((1-(2-氧化-1,3,2-二氧杂磷杂环己烷-2-基)哌啶-4-基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮74c
上述化合物74b和碳酸钾(75mg，0.54mmol)加入到四氢呋喃(10ml)和水(1ml)体系中，加入化合物int-1(100mg，0.27mmol)，室温下搅拌1h。加水稀释，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品经板层析纯化，得标题化合物74c(60mg，0.11mmol)，收率41％。
第五步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((1-(2-氧化-1,3,2-二氧杂磷杂环己基-2-基)哌啶-4-基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒74
化合物74c(60mg，0.11mmol)溶于甲醇(10ml)，加入碳酸钾(107mg，0.77mmol)，50℃搅拌1h。冷却后，加入饱和氯化铵溶液，用二氯甲烷萃取三次，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后板层析纯化，得到标题化合物74(50mg，0.096mmol)，收率88％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.47(s,1h),8.90(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.11(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.78(ddd,j＝8.9,4.2,2.7hz,1h),6.18(d,j＝7.4hz,1h),4.39–4.15(m,4h),3.52–3.42(m,1h),3.42–3.34(m,2h),2.88–2.75(m,2h),2.07–1.72(m,4h),1.44–1.30(m,2h)。
msm/z(esi):519[m+h]+。
实施例75合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(氨基磺酰基(1-氨基磺酰基氮杂环丁烷-3-基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒75
第一步合成3-((2-((芴甲氧羰基)氨基)乙基)氨基)氮杂环丁烷-1-氨基甲酸叔丁酯75b
化合物n-芴甲氧羰基乙二胺盐酸盐75a(824mg，2.92mmol)，1-叔丁氧基羰基-3-氮杂环丁酮(500mg，2.92mmol)溶于二氯甲烷(15ml)，加入乙酸(0.5ml)，分批加入nabh(oac)3(928mg，4.38mmol)，室温搅拌过夜。加入饱和碳酸氢钠溶液和二氯甲烷，萃取2次，无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，粗品经柱层析纯化，得标题化合物75b(500mg，1.14mmol)，收率44％。
第二步合成3-((2-氨基乙基)氨基)氮杂环丁烷-1-氨基甲酸叔丁酯75c
化合物75b(540mg，1.23mmol)溶于四氢呋喃(5ml)，加入tbaf(470mg，1.8mmol)，室温反应2h。所得粗品标题化合物75c的溶液直接用于下一步。
第三步合成3-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-氧-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙基)氨基)氮杂环丁烷-1-氨基甲酸叔丁酯75d
上述化合物75c的四氢呋喃溶液中加入化合物int-1(270mg，0.72mmol)，室温反应0.5h。加水稀释后用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品经柱层析纯化，得标题化合物75d(170mg，0.31mmol)，收率43％。
第四步合成3-(4-((2-((氮杂环丁烷-3-基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4--噁二唑-5(4h)-酮三氟乙酸盐75e
化合物75d(220mg，0.41mmol)溶于二氯甲烷(5ml)，加入tfa(2ml)，室温搅拌1h。浓缩得粗品标题化合物75e，直接用于下一步。
第五步合成((3-((2-((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-氧-4,5-二氢-1,2,4--噁二唑-3-基)-1,2,5--噁二唑-3-基)氨基)乙基)(n-(叔丁氧基羰基)氨基磺酰基)氨基)氮杂环丁烷-1-基)氨基磺酰基)氨基甲酸叔丁酯75f
化合物氯磺酸异氰酸酯(23mg，0.16mmol)溶于无水二氯甲烷(1ml)，冰水浴冷却下，加入t-buoh(13mg，0.18mmol)，室温反应1h，备用(反应液a)。
化合物75e(80mg，0.15mmol)溶于无水二氯甲烷(1ml)中，冰水浴冷却下，加入三乙胺(61mg，0.6mmol)，将反应液a缓慢滴入，滴完逐渐升至室温反应2h。加入二氯甲烷(10ml)稀释，依次用水和饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，所得粗品经板层析纯化，得标题化合物75f(40mg，0.05mmol)，收率35％。
第六步合成((3-((2-((4-(n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基甲脒基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)乙基)(n-(叔丁氧基羰基)氨基磺酰基)氨基)氮杂环丁烷-1-基)氨基磺酰基)氨基甲酸叔丁酯75g
化合物75f(40mg，0.05mmol)溶于四氢呋喃(1ml)，加入2nnaoh水溶液(0.5ml)，室温搅拌1h。用2nhcl调ph值为7，乙酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品经板层析纯化，得标题化合物75g(20mg，0.026mmol)，收率52％。
msm/z(esi):772[m+h]+。
第七步合成n-(3-溴-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((2-(氨基磺酰基(1-氨基磺酰基氮杂环丁烷-3-基)氨基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒75
化合物75g(20mg，0.026mmol)溶于二氯甲烷(1ml)，加入tfa(0.5ml)，室温反应1h。浓缩，粗品经反相柱层析纯化，得标题化合物75(5.6mg，0.01mmol)，收率38％。
1hnmr(400mhz,meod-d4)δ7.15(dd,j＝6.0,2.7hz,1h),7.05(t,j＝8.7hz,1h),6.89–6.80(m,1h),4.40(p,j＝7.3hz,1h),3.93(d,j＝7.4hz,4h),3.58(t,j＝6.4hz,2h),3.41(t,j＝6.4hz,2h)。
msm/z(esi):572[m+h]+。
实施例76合成n-(3-氯-4-氟苯基)-n’-羟基-4-((3-(甲磺酰基)丙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒76
以4-(3-氯-4-氟苯基)-3-(4-硝基-1,2,5-噁二唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-5(4h)-酮int-5为原料，代替int-1与2d反应。后续步骤采用与实施例2相同的方法制备。1hnmr(400mhz,meod-d4)δ11.47(s,1h),8.93(s,1h),7.22(t,j＝9.1hz,1h),6.99(dd,j＝6.6,2.8hz,1h),6.80–6.66(m,1h),6.33(t,j＝6.0hz,1h),3.38-3.28(m,2h),3.14(t,j＝7.9hz,2h),2.97(s,3h),2.09–1.88(m,2h).
msm/z(esi):392[m+h]+。
实施例774-((2-(n-甲氧基酰基)-s-甲基亚砜亚胺基)乙基)氨基)-n-(3-(二氟甲基)-4-氟苯基)-n’-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒77
采用与化合物41相同的方法制备，以氯甲酸甲酯代替环丙基磺酰氯，。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.46(s,1h),8.97(s,1h),7.19(t,j＝9.5hz,1h),7.13(t,j＝54.4hz,1h)7.04(dd,j＝6.2,2.8hz,1h),6.97–6.89(m,1h),6.56(t,j＝5.7hz,1h),3.89–3.65(m,4h),3.53(s,3h),3.37(s,3h).
msm/z(esi):451[m+h]+。
生物学实验实施例：
实施例1、本发明化合物对人源吲哚胺-2,3双加氧酶1(hido1)体外酶抑制活性的测定
1.实验目的和方法
本实验目的是为了测试本发明化合物对人源吲哚胺-2,3双加氧酶(hido1)体外酶抑制活性实验，根据ic50评价化合物的体外活性。
1.1反应体系的配置
总反应体系为100ul，分别将终浓度为400uml-色氨酸(sigma，cat#t8941)，20mm抗坏血酸(sigma，cat#a4034)，20um亚甲基蓝(sigma，cat#m9140)，1000u/ml过氧化氢酶(sigma，cat#9322)，100mm磷酸盐缓冲液(corning，cat#21-040-cvr)ph6.5混合，混合液于37℃水浴锅(上海精宏实验设备)预热5min。
1.2化合物的配置
用100％dmso(sigma，cat#d2650)稀释化合物，化合物的浓度从10000nm开始，1:4进行稀释，最终测试浓度为9.765nm-10000nm。取10ul的各稀释组化合物至上述反应体系中。
1.3检测
向含有化合物的反应体系中加入终浓度为20nm的hido1(自备)，37℃反应30分钟，酶促反应后，加入30％w/v三氯乙酸50ul(sigma，cat#t0699)使反应终止，反应液在52℃加热30分钟，使之完成从n-甲酰犬尿氨酸到犬尿氨酸的转化，然后12000rpm常温离心10分钟，取100ul上清液与等体积的ehrlich’s试剂(sigma，cat#156477)混合，使用酶标仪(biotek)在480nm检测吸光度(od)值。
1.4数据处理及结果分析
使用通用的抑制剂公式lgic50＝xm-i(p-(3-pm-pn)/4)，xm:lg最大剂量，i:lg(最大剂量/相邻剂量)，p:阳性反应率之和，pm:最大阳性反应率，pn:最小阳性反应率。进行浓度相关的统计分析，计算出化合物的半数抑制剂浓度ic50。
实验中所用的阳性化合物为：incb024360(与昂化工，cat#1204669-58-8)。
2.测试结果
本发明化合物对人源吲哚胺-2,3双加氧酶(hido1)的体外酶活性测定的具体ic50值见下表1。由下表1可知，本发明化合物对人源吲哚胺-2,3双加氧酶(hido1)的体外酶抑制效果优于incb024360。
表1：本发明中化合物对hido1酶抑制活性的半数抑制浓度(ic50)
将人胚胎肾细胞hek293细胞(来源于中科院细胞所)以2.5×105/ml接种于96孔板(corning,cat:3599)中，每孔100ul，置于37℃，湿度95％、5％co2培养箱(thermo)中过夜。24小时后使用脂质体lipofectamin2000(invitrogen,cat#11668-027)转染重组质粒pcdna3-hido1。细胞培养所用的培养基等信息如下：dmem(corning,cat#11960)，fbs(gibco,cat#35-076-cv)，青、链霉素双抗(corning，cat：30-002-ci)。
1.2化合物的配置
用100％dmso(sigma，cat#d2650)稀释化合物，化合物的浓度从100000nm开始，1:4进行稀释，最终测试浓度为9.765nm-10000nm。
1.3实验流程
重组质粒pcdna3-hido1转染293细胞24小时后加入10ul已稀释好的不同浓度的化合物，对照组化合物为incb024360(与昂化工，cat#1204669-58-8)。
1.4检测
继续孵育24小时后，分别取100ul的细胞上清液到另一96孔板中，加入50ul30％w/v的三氯乙酸(sigma,cat#t0699)使反应终止，52℃加热30分钟，然后12000rpm常温离心10分钟，取100ul上清液与等体积的ehrlich’s(sigma，cat#156477)试剂混合显色，最后采用酶标仪(biotek)在480nm检测吸光度(od)值。
1.5数据处理及结果分析
使用通用的抑制剂公式(lgic50＝xm-i(p-(3-pm-pn)/4)，xm:lg最大剂量，i:lg(最大剂量/相邻剂量)，p:阳性反应率之和，pm:最大阳性反应率，pn:最小阳性反应率进行浓度相关的统计分析，计算出化合物的半数抑制剂浓度ic50。
2.测试结果
本发明化合物对人源吲哚胺-2,3双加氧酶(hido1)的细胞酶抑制活性测定的具体ic50值见下表2。由下表2可知，本发明化合物对人源吲哚胺-2,3双加氧酶(hido1)的抑制效果明显优于incb024360。
表2：本发明中化合物对hido1的细胞酶抑制活性的半数抑制浓度(ic50)
本发明化合物对人子宫内膜癌hela细胞内吲哚胺-2,3双加氧酶(ido1)酶抑制活性实验，根据ic50评价化合物的体外活性。
1.1.细胞培养和准备
将人子宫内膜癌hela细胞(来源于中科院细胞所)以1×105/ml接种于96孔板(corning，cat#3599)中，每孔100ul，置于37℃，湿度95％、5％co2培养箱(thermo)中过夜。细胞培养所用的培养基等信息如下：dmem(corning,cat#11960)，fbs(gibco,cat#35-076-cv)，青、链霉素双抗(corning,cat#30-002-ci)。
1.2化合物的配置
用100％dmso(sigma，cat#d2650)稀释化合物，化合物的浓度从100000nm开始，1:4进行稀释，最终测试浓度为9.765nm-10000nm。
1.3实验流程
细胞培养24小时，去除上清，每孔加入100ul的含有inf-γ(r&d，cat#285-if-100)和10ul稀释后的化合物的dmem高糖培养基(corning,cat#11960)过夜培养，使其表达吲哚胺-2,3双加氧酶(ido1)，对照化合物为incb024360(与昂化工，cat#1204669-58-8)。
1.4检测
孵育24小时后，分别取100ul的细胞上清到另一96孔板中，加入50ul30％w/v的三氯乙酸(sigma，cat#t0699)使反应终止，52度加热30分钟，然后12000rpm常温离心10分钟，取100ul上清液与等体积的ehrlich’s试剂(sigma，cat#156477)混合显色，最后采用酶标仪(biotek)在480nm检测吸光度(od)值。
1.5数据处理及结果分析
使用通用的抑制剂公式lgic50＝xm-i(p-(3-pm-pn)/4)，xm:lg最大剂量，i:lg(最大剂量/相邻剂量)，p:阳性反应率之和，pm:最大阳性反应率，pn:最小阳性反应率，进行浓度相关的统计分析，计算出化合物的半数抑制剂浓度(ic50)。
2.测试结果
本发明化合物对人子宫内膜癌hela细胞酶抑制活性测定的具体ic50值见下表3。由下表3可知，本发明化合物对人子宫内膜癌hela细胞内吲哚胺-2,3双加氧酶(ido1)的酶抑制效果明显优于incb024360。
表3：本发明化合物对人子宫内膜癌hela细胞内ido1酶抑制活性的半数抑制浓度(ic50)
结论：本发明化合物对人子宫内膜癌hela细胞内吲哚胺-2,3双加氧酶(ido1)具有较强的抑制活性。
实施例4、本发明化合物对小鼠黑色素瘤细胞b16f10的体外细胞毒性试验
1.实验目的和方法
本实验目的是为了测试本发明化合物对小鼠黑色素瘤细胞b16f10的细胞毒性试验。
1.1.细胞培养和准备
将小鼠黑色素瘤细胞b16f10(来源于中科院细胞所)以1×104/ml接种于96孔板(corning，cat：3599)中，每孔100ul，置于37℃，湿度95％、5％co2培养箱(thermo)中过夜。细胞培养所用的培养基等信息如下：dmem(corning,cat#11960)，fbs(gibco,cat#35-076-cv)，青、链霉素双抗(corning，cat#30-002-ci)。
1.2化合物的配置
用100％dmso(sigma，cat#2650)稀释化合物，化合物的浓度从100000nm开始，1:4进行稀释，最终测试浓度为9.765nm-10000nm。
1.3实验流程
取10ul稀释好的化合物加入细胞中继续培养48小时，每个样品设置3个复孔(实验组)；同时设置空白对照组(培养基)，背景调零组(仅含有细胞和培养基)，阴性对照孔(细胞、培养基、相同浓度的药物溶解介质，噻唑蓝(mtt)、dmso)和阳性对照孔(细胞、相同浓度的incb024360(与昂化工，cat#1204669-58-8)、培养基、噻唑蓝(mtt)、dmso)。
1.4检测
每孔加入20ul噻唑蓝(mtt)溶液(5mg/ml，sigma，cat#m2003)，继续培养4小时，弃去孔内培养液，每孔加入150uldmso(sigma，cat#d2650)，置摇床上低速振荡10分钟，使结晶物充分溶解。采用酶标仪(biotek)在490nm检测各孔吸光度(od)值。
1.5数据处理及结果分析
使用公式计算细胞增值抑制率＝100％×(1-(实验组平均od值–阴性对照组平均od值)/阴性对照组平均od值))
2.测试结果
本发明化合物对小鼠黑色素瘤细胞b16f10的增值抑制率测定的具体数据见下表4。由下表4可知本发明化合物，在体外对小鼠黑色素瘤细胞b16f10没有细胞毒性。
表4：本发明化合物对在体外对小鼠黑色素瘤细胞b16f10的增值抑制率
结论：本发明化合物对小鼠黑色素瘤细胞b16f10没有细胞毒性。
实施例5、本发明化合物对成熟的树突状细胞犬尿氨酸水平的抑制实验
1.实验目的和方法
本实验目的是为了测试本发明化合物对成熟的树突状细胞犬尿氨酸水平的抑制试验。
1.1.细胞培养和准备
根据参考文献(liux,shinn,koblishhk,etal.selectiveinhibitionofido1effectivelyregulatesmediatorsofantitumorimmunity.blood,2010,115(17):3520.)对人淋巴细胞分离液(sigma，cat#：10771)作密度梯度离心，2500rpm，离心30分钟分离得到人外周血单核细胞(pbmc)，并将人外周血单核细胞接种于24孔板(corning，cat#3473)。细胞培养用的培养基等信息如下：dmem(corning,cat#11960)，fbs(gibco,cat#35-076-cv)，青、链霉素双抗(corning，cat#30-002-ci)。
1.2化合物的配置
用100％dmso(sigma，cat#d2650)稀释化合物，化合物的浓度从100000nm开始，1:4进行稀释，最终测试浓度为9.765nm-10000nm。
1.3实验流程
用含100ng/ml的粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子gm-csf(r&d，cat#215-gm-010)和200ng/ml的il-4(r&d，cat#204-il-010)的无血清细胞培养基aimv(invitrogen，cat#12055091)诱导培养5天，再加脂多糖lps(invitrogen，cat#00-4976-93)和ifn-γ(r&d，cat#285-if-100)共培养48小时以诱导吲哚胺-2,3双加氧酶(ido)表达，加入稀释后的不同浓度的实施例化合物和对照组样品incb024360(与昂化工，cat#1204669-58-8)，并设定溶媒组(dmso组)和阴性对照组(空白对照)，继续孵育48小时。
1.4检测
孵育48小时后，取上清液100ul，用高效液相色谱-荧光检测法测定上清中的犬尿氨酸的浓度。
1.5数据处理及结果分析
使用通用的抑制剂公式lgic50＝xm-i(p-(3-pm-pn)/4)，xm:lg最大剂量，i:lg(最大剂量/相邻剂量)，p:阳性反应率之和，pm:最大阳性反应率，pn:最小阳性反应率，进行浓度相关的统计分析，计算出化合物对成熟的树突状细胞犬尿氨酸水平的半数抑制剂浓度(ic50)。
2.测试结果
本发明实施例化合物能够抑制成熟的树突状细胞的犬尿氨酸生成水平，具体数据见下表5，由下表5可知本发明化合物对成熟树突状细胞的犬尿氨酸水平的抑制作用比对照组incb024360更加明显。
表5：本发明化合物对成熟树突状细胞的犬尿氨酸水平的半数抑制浓度
结论：本发明化合物对成熟树突状细胞的犬尿氨酸水平具有较强的抑制作用。
实施例6、本发明化合物的小鼠体内药效实验
1.实验目的
以小鼠为实验动物，测定实施例化合物18、实施例化合物24、实施例化合物37、实施例化合物48、实施例化合物67，口服给药后对小鼠结肠癌模型ct26.wt的抑瘤效果的影响。探讨本发明化合物对ct26.wt荷瘤鼠的抑瘤效果。
2.实验方案
2.1实验用化合物
实施例化合物18、实施例化合物24、实施例化合物37、实施例化合物48、实施例化合物67
2.2化合物的配制
称取一定量的化合物，溶于5％n，n二甲基乙酰胺(国药，cat#30066818)、30％peg400(泰坦，cat#g41713b)、65％的10％(2-羟丙基)β-环糊精(阿拉丁，cat#h1088b)，超声混匀，溶液呈混悬液。
2.3操作
2.3.1实验流程
无菌条件下，将对数生长期的小鼠结肠癌细胞ct26.wt(来源于中科院细胞所)消化成单个细胞，移植于balb/c小鼠(购于上海西普尔-必凯实验动物有限公司)背部右侧皮下，每只小鼠接种1×105细胞，体积为100ul，接种后9天，待小鼠肿瘤生长到平均值100mm3左右时，将小鼠随机分成7组，每组6只进行体内药效实验，阳性对照组为incb024360(与昂化工，cat#1204669-58-8)，阴性对照组给等量的溶媒。具体设计见表6。
表6：化合物体内药效实验
2.3.2抑瘤率的测定
根据公式计算小鼠肿瘤体积＝长*宽*宽/2(mm3)，抑瘤率的公式＝1-(给药组肿瘤大小/阴性对照组肿瘤大小)*100％
2.4实验结果
本实施例化合物能够抑制ct26荷瘤鼠的肿瘤生长速度，具体数据见下表7，由下表7可知本发明化合物对ct26荷瘤鼠的肿瘤生长速度的抑制作用比对照组incb024360更加明显。
表7：本发明化合物对ct26荷瘤鼠的肿瘤生长抑制率
结论：本发明化合物对ct26荷瘤鼠的肿瘤生长具有较好的抑制作用。
实施例7、本发明化合物的小鼠体内药效实验
1.1.实验目的
以小鼠为实验动物，测定实施例化合物20、实施例化合物56、实施例化合物62联合阿西替尼，分别给药后对小鼠胰腺癌模型pan02的抑瘤效果的影响。探讨本发明化合物联合阿西替尼对pan02荷瘤鼠的抑瘤效果。
2.实验方案
2.1实验用化合物
实施例化合物20、实施例化合物56、实施例化合物62
2.2化合物的配制
称取一定量的化合物，溶于5％nn二甲基乙酰胺(国药，cat#30066818)、30％peg400(泰坦，cat#g41713b)、65％的10％(2-羟丙基)β-环糊精(阿拉丁，cat#h1088b)，超声混匀，溶液呈混悬液。
2.3操作
2.3.1实验流程
无菌条件下，将对数生长期的小鼠胰腺癌细胞pan02(来源于南京科佰生物科技有限公司)消化成单个细胞与基质胶matrigel(corning，cat#354234)混合后移植于c57bl/6小鼠背部右侧皮下，每只小鼠接种5*10^6细胞，体积100ul，接种后，待小鼠肿瘤生长到平均值100mm3左右时，将小鼠随机分成10组，每组6只进行药效实验，阳性对照组为incb024360(与昂化工，cat#1204669-58-8)，阴性对照组给等量的溶媒。具体设计见表8。
表8：化合物体内药效实验
2.3.2抑瘤率的测定
根据公式计算小鼠肿瘤体积＝长*宽*宽/2(mm3)，抑瘤率的公式＝1-(给药组肿瘤大小/阴性对照组肿瘤大小)*100％
2.4实验结果
本实施例化合物与阿西替尼联用能够抑制pan02荷瘤鼠的肿瘤生长速度，具体数据见下表9，由下表9可知本发明化合物与阿西替尼联用对pan02荷瘤鼠的肿瘤生长速度的抑制作用比对照组incb024360更加明显。
表9：本发明化合物与阿西替尼联用对pan02荷瘤鼠的肿瘤生长抑制率
结论：本发明化合物联合阿西替尼对pan02荷瘤鼠的肿瘤生长具有较好的抑制作用。
实施例8、本发明化合物的小鼠体内药效实验
1.实验目的
以c57bl/6小鼠为实验动物，皮下接种小鼠黑色素瘤细胞b16f10，待肿瘤平均体积生长到100mm3时，分别给予实施例化合物17、实施例化合物23、实施例化合物47、实施例化合物58联合环磷酰胺，测定本发明化合物联合环磷酰胺对b16f10荷瘤鼠的肿瘤抑制效果。
2.实验方案
2.1实验用化合物
实施例化合物17、实施例化合物23、实施例化合物47、实施例化合物58
2.2化合物的配制
称取一定量的化合物，溶于5％n，n二甲基乙酰胺(国药，cat#30066818)、30％peg400(泰坦，cat#g41713b)、65％的10％(2-羟丙基)β-环糊精(阿拉丁，cat#h1088b)，超声混匀，溶液呈混悬液。
2.3操作
2.3.1实验流程
无菌条件下，将对数生长期的小鼠黑色素瘤细胞b16f10(来源于中科院细胞所)消化成单个细胞与基质胶matrigel(corning，cat#354234)混合后移植于c57bl/6小鼠背部右侧皮下，每只小鼠接种1×105细胞，体积100ul，接种后，待小鼠肿瘤生长到平均值100mm3左右时，将小鼠随机分成12组，每组6只进行药效实验，阳性对照组为incb024360(与昂化工，cat#1204669-58-8)，阴性对照组给等量的溶媒。具体设计见表10。
表10：化合物体内药效实验
2.3.2抑瘤率的测定
根据公式计算小鼠肿瘤体积＝长*宽*宽/2(mm3)，抑瘤率的公式＝1-(给药组肿瘤大小/阴性对照组肿瘤大小)*100％
2.4实验结果
本实施例化合物与环磷酰胺联用能够抑制b16f10荷瘤鼠的肿瘤生长速度，具体数据见下表11，由下表11可知本发明化合物与环磷酰胺联用对b16f10荷瘤鼠模型有着比对照组incb024360与环磷酰胺联用更有效的肿瘤生长抑制作用。
表11：本发明化合物与环磷酰胺联用对b16f10荷瘤鼠的肿瘤生长抑制率
结论：本发明化合物联合环磷酰胺对b16f10荷瘤鼠的肿瘤生长具有较好的抑制作用
实施例9、本发明化合物的小鼠体内药效实验
1.实验目的
以balb/c小鼠为实验动物，皮下接种4t1小鼠肿瘤细胞(来源于中科院细胞所)，待肿瘤平均体积生长到100mm3时，分别给予实施例化合物14、实施例化合物33、实施例化合物45联合阿霉素，测定本发明化合物联合阿霉素对4t1荷瘤鼠的肿瘤抑制效果。
2.实验方案
2.1实验用化合物
实施例化合物14、实施例化合物33、实施例化合物45
2.2化合物的配制
称取一定量的化合物，溶于5％n，n二甲基乙酰胺(国药，cat#30066818)、30％peg400(泰坦，cat#g41713b)、65％的10％(2-羟丙基)β-环糊精(阿拉丁，cat#h1088b)，超声混匀，溶液呈混悬液。
2.3操作
2.3.1实验流程
无菌条件下，将对数生长期的小鼠乳腺癌细胞4t1消化成单个细胞移植于balb/c小鼠背部右侧皮下，每只小鼠接种1×105细胞，体积100ul，接种后，小鼠肿瘤生长到平均值100mm3左右时，将小鼠随机分成10组，每组6只进行药效实验，阳性对照组为incb024360(与昂化工，cat#1204669-58-8)，阴性对照组给等量的溶媒。具体设计见表12。
表12：化合物体内药效实验
2.3.2抑瘤率的测定
根据公式计算小鼠肿瘤体积＝长*宽*宽/2(mm3)，抑瘤率的公式＝1-(给药组肿瘤大小/阴性对照组肿瘤大小)*100％
2.4实验结果
本实施例化合物与阿霉素联用能够抑制4t1荷瘤鼠的肿瘤生长速度，具体数据见下表13，由下表13可知本发明化合物与阿霉素联用对4t1荷瘤鼠模型有着比对照组incb024360与阿霉素联用更有效的肿瘤生长抑制作用。
表13：本发明化合物与阿霉素联用对4t1荷瘤鼠的肿瘤生长抑制率
结论：本发明化合物联合阿霉素对4t1荷瘤鼠的肿瘤生长具有较好的抑制作用
实施例10、本发明化合物的小鼠体内药效实验
1.实验目的
以重症联合免疫缺陷(scid)小鼠为实验动物，皮下接种b16f10小鼠肿瘤细胞，待肿瘤平均体积生长到100mm3时，分别给予实施例化合物11、实施例化合物54、实施例化合物67联合ifn-γ，测定本发明化合物对b16f10荷瘤鼠的肿瘤抑制效果。
2.实验方案
2.1实验用化合物
实施例化合物11、实施例化合物54、实施例化合物67
2.2化合物的配制
称取一定量的化合物，溶于5％n，n二甲基乙酰胺(国药，cat#30066818)、30％peg400(泰坦，cat#g41713b)、65％的10％(2-羟丙基)β-环糊精(阿拉丁，cat#h1088b)，超声混匀，溶液呈混悬液。
2.3操作
2.3.1实验流程
无菌条件下，将对数生长期的小鼠黑色素细胞b16f10(来源于中科院细胞所)消化成单个细胞与基质胶matrigel(corning，cat#354234)混合后移植于重症联合免疫缺陷(scid)小鼠(购于北京维通利华实验动物技术有限公司)背部右侧皮下，每只小鼠接种1×105细胞，体积100ul，接种3天后，将小鼠根据体重随机分成5组，每组6只进行药效实验，阳性对照组为incb024360(与昂化工，cat#1204669-58-8)，阴性对照组给等量的溶媒。具体设计见表14。
表14：化合物体内药效实验
2.3.2抑瘤率的测定
根据公式计算小鼠肿瘤体积＝长*宽*宽/2(mm3)，抑瘤率的公式＝1-(给药组肿瘤大小/阴性对照组肿瘤大小)*100％
2.4实验结果
本实施例化合物与ifn-γ联用能够抑制b16f10荷瘤鼠的肿瘤生长速度，具体数据见下表15，由下表15可知本发明化合物与ifn-γ联用对b16f10荷瘤鼠模型有着比对照组incb024360与ifn-γ联用更有效的肿瘤生长抑制作用。
表15：本发明化合物与ifn-γ联用对b16f10荷瘤鼠的肿瘤生长抑制率
结论：本发明化合物联合ifn-γ对b16f10荷瘤鼠的肿瘤生长具有较好的抑制作用
实施例11、本发明化合物联用anti-pd-1抗体的小鼠体内药效实验
1.实验目的
以c57bl/6小鼠(购于上海斯莱克实验动物有限公司)为实验动物，皮下接种mc38小鼠肿瘤细胞(来源于南京科佰生物科技有限公司)，待肿瘤平均体积生长到100mm3时，分别将实施例化合物15、实施例化合物18、实施例化合物63与anti-pd-1抗体联合，测定本发明化合物联合anti-pd-1抗体对mc38荷瘤鼠的肿瘤抑制效果。
2.实验方案
2.1实验用化合物
实施例化合物15、实施例化合物18、实施例化合物63
2.2化合物的配制
称取一定量的化合物，溶于5％nn二甲基乙酰胺(国药，cat#30066818)、30％peg400(泰坦，cat#g41713b)、65％的10％(2-羟丙基)β-环糊精(阿拉丁，cat#h1088b)，超声混匀，溶液呈混悬液。
2.3操作
2.3.1实验过程
无菌条件下，将对数生长期的小鼠结肠癌细胞mc38消化成单个细胞并与基质胶matrigel(corning，cat#354234)混合后移植于c57bl/6小鼠背部右侧皮下，每只小鼠接种1×106细胞，体积100ul，接种后，当肿瘤体积达到100mm3范围时，将荷瘤小鼠将随机分成8组进行药效实验，每组6只进行药效实验，具体设计见表16。
表16：化合物体内药效实验
2.3.2抑瘤率的测定
根据公式计算小鼠肿瘤体积＝长*宽*宽/2(mm3)，抑瘤率的公式＝1-(给药组肿瘤大小/阴性对照组肿瘤大小)*100％
2.4实验结果
本实施例化合物与anti-pd-1抗体联用能够抑制mc38荷瘤鼠的肿瘤生长速度，具体数据见下表17，由下表17可知本发明化合物与anti-pd-1抗体联用对mc38荷瘤鼠模型有着比对照组incb024360与anti-pd-1抗体联用更有效的肿瘤生长抑制作用。
表17：本发明化合物与anti-pd-1抗体联用对mc38荷瘤鼠的肿瘤生长抑制率
结论：本发明化合物联合anti-pd-1抗体对mc38荷瘤鼠的肿瘤生长具有较好的抑制作用
实施例12、本发明化合物的大鼠药物代谢动力学实验
1.实验目的
以200-250g，8周龄的雄性sd大鼠(购于上海西普尔-必凯实验动物有限公司)为实验动物，应用lc/ms/ms法测定口服给予实施例化合物6、实施例化合物9、实施例化合物11、实施例化合物13、实施例化合物15、实施例化合物17、实施例化合物18、实施例化合物20、实施例化合物24、实施例化合物33、实施例化合物37、实施例化合物45、实施例化合物47、实施例化合物48、实施例化合物51、实施例化合物54、实施例化合物56、实施例化合物58、实施例化合物62、实施例化合物65、实施例化合物67后，不同时刻血浆中的药物浓度。研究本发明化合物在大鼠体内的药代动力学行为，评价其药代动学特征。
2.实验方案
2.1实验用化合物
测定实施例化合物6、实施例化合物9、实施例化合物11、实施例化合物13、实施例化合物15、实施例化合物17、实施例化合物18、实施例化合物20、实施例化合物24、实施例化合物33、实施例化合物37、实施例化合物45、实施例化合物47、实施例化合物48、实施例化合物51、实施例化合物54、实施例化合物56、实施例化合物58、实施例化合物62、实施例化合物65、实施例化合物67
2.2化合物的配制
化合物的配置：称取一定量的化合物，溶于5％n，n二甲基乙酰胺(国药，cat#30066818)、30％peg400(泰坦，cat#g41713b)、65％的10％(2-羟丙基)β-环糊精(阿拉丁，cat#h1088b)，超声混匀，溶液呈混悬液。
2.3操作
大鼠分别口服给予上述化合物，在给药前和给药后0.083、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、12.0、24.0小时经眼眶采血0.2ml，置于抗凝管中，4℃，6000转/分钟离心10分钟分离血浆，-80℃保存。
具体给药按照试验方案进行，详情见表18。
表18：大鼠药代动力试验方案
取50μl上述不同时刻的血浆，加入150μl含内标的乙腈(阿拉丁，cat#a998-4)溶液混合、振摇5分钟，12000rpm，离心5分钟后，取出100μl上清，再与200μl水混合后进样分析。
2.4实验结果
采用液相色谱-质谱(lc/ms/ms)方法测定小鼠血浆中化合物的含量。利用winnonlin5.3软件的非房室模型计算给药后化合物的药代动力学参数。本发明化合物的药代动力学具体数据见表格19。
表19：本发明化合物的药代动力学参数
结论：本发明化合物药代吸收较好，具有较好的药效动力学特征。
实施例13、本发明化合物的急毒实验
1.实验目的
以20-22g,8周龄的icr小鼠为实验动物，雌雄各半，口服给药实施例化合物3、实施例化合物7、实施例化合物11、实施例化合物15、实施例化合物17、实施例化合物25、实施例化合物27、实施例化合物30、实施例化合物34、实施例化合物39、实施例化合物42、实施例化合物47、实施例化合物61、实施例化合物67、实施例化合物76，给药1次，连续观察14天，包括临床观察、体重和病理学检查。
2.实验方案
2.1实验用化合物
测定实施例化合物3、实施例化合物7、实施例化合物11、实施例化合物15、实施例化合物17、实施例化合物25、实施例化合物27、实施例化合物30、实施例化合物34、实施例化合物39、实施例化合物42、实施例化合物47、实施例化合物61、实施例化合物67、实施例化合物76
2.2化合物的配制
称取一定量的化合物，溶于5％n，n二甲基乙酰胺(国药，cat#30066818)、30％peg400(泰坦，cat#g41713b)、65％的10％(2-羟丙基)β-环糊精(阿拉丁，cat#h1088b)，超声混匀，溶液呈混悬液。
2.3操作
采用上下法观察小鼠单次口服分别给予实施例化合物3、实施例化合物7、实施例化合物11、实施例化合物15、实施例化合物17、实施例化合物25、实施例化合物27、实施例化合物30、实施例化合物34、实施例化合物39、实施例化合物42、实施例化合物47、实施例化合物61、实施例化合物67、实施例化合物76后的急性毒性，每个剂量组10只小鼠，雌雄各半。将实施例化合物配制成200mg/ml给药，给药体积为10ml/kg，给药1次。
2.4实验结果
给药后连续观察14天，所有动物均未出现其他异常表现。各组给药动物给药第2天体重稍有下降，但与溶媒对照组(5％n，n二甲基乙酰胺(国药，cat#30066818)、30％peg400(泰坦，cat#g41713b)、65％的10％(2-羟丙基)β-环糊精(阿拉丁，cat#h1088b)比差异不显著。14天观察期结束后全部动物安乐死后进行大体解剖检查，体表未见明显异常，胸腔、腹腔、盆腔、颅腔未见肉眼可见病变。
本实验条件下，本发明化合物口服给药后的ld50值>2000mg/kg，安全性较好。
实施例14、本发明化合物的大鼠长毒预实验
1.实验目的
以100-140g的sd大鼠为实验动物，雌雄各半，随机分成4组，每组大鼠均为10只，口服给药实施例化合物11、实施例化合物15、实施例化合物47、实施例化合物67，每个化合物分别给药600mg/kg、300mg/kg、100mg/kg，连续给药28天，记录动物死亡情况，中毒反应，体重变化，饮食，外观，行为等。停止给药后32天，继续观察动物的外观特征，行为活动，体重，粪便及动物死亡情况。
2.实验方案
2.1实验用化合物
测定实施例化合物11、实施例化合物15、实施例化合物47、实施例化合物67
2.2化合物的配制
称取一定量的化合物，溶于5％nn二甲基乙酰胺(国药，cat#30066818)、30％peg400(泰坦，cat#g41713b)、65％的10％(2-羟丙基)β-环糊精(阿拉丁，cat#h1088b)，超声混匀，溶液呈混悬液。
2.3操作
将各组大鼠连续28天口服给予相应浓度的实施例化合物11、实施例化合物15、实施例化合物47、实施例化合物67，每个剂量组10只小鼠，雌雄各半，给药体积为10ml/kg，观察各组动物的状况，包括动物的外观特征，行为活动，体重，粪便及动物死亡情况；停药32天后，将动物安乐死并解剖各组动物的脏器进行观察。
2.4实验结果
连续给药28天，所有动物的行为、步态、毛发、粪便等基本无异常。停药32天后，解剖各组动物检查，体表未见明显异常，各脏器均未见肉眼可见病变。
本发明化合物的明显不良反应剂量(noeal)>600mg/kg，安全性好。与对照组小鼠比较，给药组小鼠自给药日起60天内未见体重及行为异常，本发明化合物并未显示出明显毒性。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用于限定本发明的保护范围。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均包含在本发明的保护范围。