本发明属于医药技术领域，尤其是涉及一种18β-甘草次酸的哌嗪酰胺衍生物及其制备方法与应用。
背景技术：
甘草次酸(glycyrrhetinicacid，ga)属于五环三萜类化合物，骨架11位上有c＝o，类似18-h-齐墩果烷型结构。
甘草次酸结构存在不同的光学异构体如18α型、18β型，这些异构体的药效作用并不完全相同，其中18α-甘草次酸在药物的肝靶向性、抗炎等方面较18β-甘草次酸更为出色[beatonjm,springfs.j.chem.soc.,1955:3126-3129.]，但是由于自然界中18α异构体的量极少，仅占甘草次酸天然总量的3％左右，故甘草次酸及其衍生物的开发研究仍以18β异构体为主。18β-甘草次酸也具有广泛的药理活性，包括类固醇样作用、抗炎抗过敏作用、保肝解毒活性、抗肿瘤作用、抗动脉粥样硬化作用等。近年来，研究者对甘草次酸进行较系统的修饰，其主要目的是增强其抗炎、抗氧化保肝、抗癌等活性，并降低或消除其假醛固酮增多症[chudzikm,korzonek-szlachetai,królw.molecules,2015,20(1):1610-1625.]。18β-甘草次酸及其衍生物的研究与开发，近年来已成为各国科研工作者的研究热点之一。
目前报道的合成18β-甘草次酸的哌嗪酰胺衍生物的制备方法主要由以下几种：
sommerwerk等[sommerwerks,hellerl,kerzigc,etal.eur.j.med.chem.,2017,127:1-9.]以三萜类羧酸先和酸酐在三乙胺等缚酸剂的存在下，常温下反应得到羟基乙酰化的三萜类羧酸，然后再和草酰氯反应得到的三萜类酰氯衍生物，不经纯化后直接和无水哌嗪反应得到对应的哌嗪酰胺衍生物。此方法乙酰化反应时间长，使用草酰氯存在操控危险，难以工业化的缺点。另外三萜类酰氯衍生物直接和无水哌嗪反应，由于哌嗪结构中的对称性，易生成双酰胺化副产物。反应如下所示：
2012年，陈凑喜等[陈凑喜,李学强,李天才,等.化学学报,2012,70(7):852-858.]以18β-甘草次酸为起始原料，在edcl，hobt，et3n的催化下，和无水无水哌嗪反应得到对应的18β-甘草次酸哌嗪酰胺衍生物。此法也常存在易生成双酰胺化副产物，导致产率很低，副产物分离困难的缺点。反应如下所示：
郭朝晖等[郭朝晖,李谦.中国药理学通报,1996(2):192-192.]报道18β-甘草次酸钠对革兰氏阳性菌均有较好的抑制作用，对金黄色葡萄球菌的mic值为1.6×10-4mol/l、对甲型链球菌、乙型链球菌的mic值为6.3×10-4mol/l、对变异链球菌的mic值为1.6×10-4mol/l、对乳酸杆菌的mic值为4.5×10-5mol/l。krausse等[krausser,bielenbergj,blaschekw,etal.jantimicrobchemother,2004,54(1):243-246.]开展的体外抑菌试验表明甘草次酸比甘草酸抵抗幽门螺杆菌的能力强，不仅抑菌迅速，而且最小抑菌浓度远低于甘草酸。
技术实现要素：
本发明要解决的第一个技术问题是提供一种18β-甘草次酸的哌嗪酰胺衍生物。
本发明要解决的第二个技术问题是提供上述18β-甘草次酸的哌嗪酰胺衍生物的制备方法；该制备方法操作简单，成本低廉，每个步骤中的产物收率都大于90％，易于工业化生产。
本发明要解决的第三个技术问题是提供上述18β-甘草次酸的哌嗪酰胺衍生物的应用。
为解决上述第一个技术问题，发明一种18β-甘草次酸的哌嗪酰胺衍生物，具有如下式(ⅲ)、式(ⅳ)或式(ⅴ)所示结构：
为解决上述第二个技术问题，本发明上述式(ⅲ)所示18β-甘草次酸的哌嗪酰胺衍生物的制备方法，包括如下步骤：
s1、酰胺化反应：在edcl、hobt或et3n的催化下，18β-甘草次酸(1)和n-boc-哌嗪在有机溶剂中加热反应，反应结束后，减压蒸馏得浆状物，倒入水中搅拌，抽滤，水洗得化合物(2)；
s2、酯化反应：化合物(2)和2-氯乙酸酐在有机溶剂中，在碱的存在下加热反应，制得化合物(ⅲ)；
反应方程式如下：
优选地，步骤s1中，所述有机溶剂是乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿(三氯甲烷)、乙腈、n,n-二甲基甲酰胺中的一种或几种。
优选地，步骤s1中，反应温度为40～100℃；更优选地，反应温度为60～90℃。
优选地，步骤s2中，所述有机溶剂是乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿、乙腈、甲苯、二甲苯、乙苯、n,n-二甲基甲酰胺中的一种或几种。
优选地，步骤s2中，反应温度为80～150℃；更优选地，反应温度为120～130℃。
优选地，步骤s2中，所述碱是三乙胺、吡啶、k2co3、na2co3、khco3、nahco3中的一种或几种。
本发明上述式(ⅳ)所示18β-甘草次酸的哌嗪酰胺衍生物的制备方法，包括如下步骤：
s3、氨基化反应：将化合物(ⅲ)和仲胺类化合物在有机溶剂中，在碱的存在下加热反应，制得化合物(ⅳ)。
优选地，步骤s3中，所述有机溶剂是乙酸乙酯、甲醇、无水乙醇、丙酮、二氯甲烷、氯仿、乙腈中的一种或几种。
优选地，步骤s3中，所述碱是三乙胺、吡啶、k2co3、na2co3、khco3、nahco3中的一种或几种；
反应方程式如下：
优选地，步骤s3中，化合物(ⅳ)中的r为下述结构中的一种：
本发明上述式(ⅴ)所示18β-甘草次酸的哌嗪酰胺衍生物的制备方法，包括如下步骤：
s4、脱羧反应：将化合物(ⅳ)和三氟乙酸在有机溶剂中搅拌反应，待反应结束后，反应混合物中加入碱，抽滤，固体层有机溶剂洗涤，减压蒸馏得产物18β-甘草次酸哌嗪酰胺衍生物(ⅴ)，反应方程式如下：
优选地，步骤s4中，所述有机溶剂是乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿中的一种或几种。
优选地，步骤s4中，反应温度为0～40℃；更优选地，反应温度为0～10℃。
为解决上述第三个技术问题，本发明上述式(ⅲ)、(ⅳ)、(ⅴ)所示18β-甘草次酸的哌嗪酰胺衍生物的在抑菌药物中的应用。
优选地，所述式(ⅲ)、(ⅳ)、(ⅴ)所示18β-甘草次酸的哌嗪酰胺衍生物在抑制大肠杆菌(e.coli)、铜绿假单胞菌(p.aeruginosa)、金黄色葡萄球菌(s.aureus)和枯草芽孢杆菌(b.subtilis)药物中的应用。
本发明所记载的任何范围包括端值以及端值之间的任何数值以及端值或者端值之间的任意数值所构成的任意子范围。
如无特殊说明，本发明中的各原料均可通过市售购买获得，本发明中所用的设备可采用所属领域中的常规设备或参照所属领域的现有技术进行。
与现有技术相比较，本发明具有如下有益效果：
本发明的式(ⅲ)、(ⅳ)、(ⅴ)所示18β-甘草次酸的哌嗪酰胺衍生物均为全新结构的化合物，制备方法也为全新的制备方法；本发明所述18β-甘草次酸的哌嗪酰胺衍生物对大肠杆菌(e.coli)，铜绿假单胞菌(p.aeruginosa)，金黄色葡萄球菌(s.aureus)和枯草芽孢杆菌(b.subtilis)均有较强的抑制作用。
具体实施方式
为了更清楚地说明本发明，下面结合优选实施例对本发明做进一步的说明。本领域技术人员应当理解，下面所具体描述的内容是说明性的而非限制性的，不应以此限制本发明的保护范围。
实施例1：
s1、酰胺化反应：4-(3β-羟基-11-氧代-18β-齐墩果-12-烯-30-羰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2)的制备：
将18β-甘草次酸(0.47g，1.0mmol)、edcl(0.23g,1.2mmol)、三乙胺(0.13g,1.2mmol)和hobt(0.16g,1.2mmol)依次加到乙腈(20ml)溶液中,混合物回流搅拌反应20min。然后n-boc-哌嗪(0.45g,2.5mmol)加到上述反应液中，再回流反应24h。待反应结束后减压蒸馏除去溶剂后余下固体残余，将固体残余用少量乙醇搅拌成浆状后，慢慢搅拌下倒入10倍体积的热水中，产生大量固体，溶液冷却后抽滤，水洗，干燥得化合物(2)，收率为94.3％；1hnmr(400mhz,chloroform-d)δ5.66(s,1h),3.63-3.52(m,4h),3.39(t,j＝5.2hz,4h),3.22-3.18(m,1h),2.79-2.74(m,1h),2.31(s,1h),2.30-2.23(m,1h),1.45(s,9h),1.34(s,3h),1.20(s,3h),1.11(s,3h),1.10(s,3h),0.98(s,3h),0.79(s,3h),0.78(s,3h),0.68(d,j＝11.6hz,1h)；13cnmr(101mhz,chloroform-d)δ200.10,174.13,169.40,154.53,128.56,80.25,78.75,61.77,54.92,48.08,45.26,43.88,43.82,43.26,39.12,39.10,37.70,37.06,33.1),32.79,31.75,28.40,28.36,28.07,27.28,27.05,26.69,26.39,23.14,18.66,17.46,16.36,15.56；hrms(m/z):[m+h]+calcd.forc39h63n2o5:639.4737,found:639.4736.
s2、酯化反应：4-(3β-(2-氯乙酰氧基)-11-氧代-18β-齐墩果-12-烯-30-羰基)哌嗪-1-羧酸(ⅲ)的制备：
三颈瓶上安装分水器、球形冷凝管，2-氯乙酸酐(1.37g,8.0mmol)加到甲苯(20ml)溶液中130℃加热反应20min，然后再依次加入k2co3(2.76g,20.0mmol)和化合物(2)(0.64g,1.0mmol)，反应混合物130℃再继续反应1h。待反应结束后减压蒸馏除去溶剂后余下固体残余，将固体残余冷却后，加水(20ml)搅拌均匀，产生大量固体，抽滤，水洗，干燥得化合物(ⅲ)，收率为96.5％；1hnmr(400mhz,chloroform-d)δ5.66(s,1h),4.59(dd,j＝11.8,4.7hz,1h),4.15–3.97(m,4h),3.65(s,4h),3.52(s,2h),2.85–2.75(m,1h),2.34(s,1h),2.28(d,j＝12.1hz,1h),1.34(m,3h),1.22(s,3h),1.14(s,3h),1.10(s,3h),0.88(s,6h),0.80(s,3h),0.78(m,1h)；13cnmr(101mhz,chloroform-d)δ199.83,174.27,169.43,167.13,165.34,128.51,82.99,61.62,54.95,48.06,46.28,45.26,43.93,43.83,43.27,42.21,41.23,40.65,38.67,38.22,37.67,36.88,33.01,32.68,31.76,28.39,28.00,27.03,26.65,26.35,23.40,23.11,18.65,17.31,16.60,16.40；hrms(m/z):[m+h]+calcd.forc37h56cln2o6:659.3827,found:659.3873；
s3、氨基化反应：4-(3β-(2-吗啉代乙酰氧基)-11-氧代-18β-齐墩果-12-烯-30-羰基)哌嗪-1-羧酸(ⅳa)的制备：
将化合物(ⅲ)(0.66g，1.0mmol)、吗啉(0.13g,1.5mmol)、k2co3(0.69g,5.0mmol)和催化剂量的i2依次加入无水乙醇(15ml)中，回流反应12h；待反应结束后减压蒸馏除去溶剂后余下固体残余，将固体残余用少量乙醇搅拌成浆状后，加水(20ml)搅拌均匀，产生大量固体，抽滤，水洗，干燥得化合物(ⅳa)，收率为91.2％；1hnmr(400mhz,chloroform-d)δ5.66(d,j＝2.9hz,1h),4.58(dd,j＝11.7,4.3hz,1h),3.70(t,j＝4.5hz,4h),3.60(s,8h),3.26–3.16(m,2h),2.86–2.74(m,1h),2.52(d,j＝5.2hz,4h),2.33(s,1h),2.27(d,j＝13.2hz,1h),1.34(s,3h),1.21(s,3h),1.14(s,3h),1.09(s,3h),0.87(s,6h),0.79(s,3h),0.77(m,1h)；13cnmr(101mhz,chloroform-d)δ199.84,174.27,169.52,167.71,167.13,128.48,82.98,66.76,61.62,61.45,54.95,53.44,48.10,45.26,43.91,43.79,43.27,41.86,41.23,38.66,38.22,37.68,36.87,33.09,32.67,31.76,28.40,28.00,27.04,26.66,26.36,23.40,23.11,18.64,17.31,16.60,16.40；hrms(m/z):(m+h+)calcd.forc41h64n3o7:710.4744,found:710.4740；
s4、脱羧反应：3β-(2-吗啉代乙酰氧基)-11-氧代-18β-齐墩果-12-烯-30-羰基哌嗪(ⅴa)的制备：
将化合物(ⅳa)(0.68g,1.0mmol)加入到ch2cl2(10ml)中，0℃搅拌20min。然后三氟乙酸(5ml)的ch2cl2(5ml)溶液慢慢滴加到上述混合物中，然后慢慢升至室温再搅拌反应3h。待反应结束后用na2co3饱和溶液中和，抽滤，固体层用ch2cl2洗涤，有机溶液干燥后减压蒸馏得产物18β-甘草次酸哌嗪酰胺衍生物(ⅴa)，收率为91.7％。1hnmr(400mhz,chloroform-d)δ5.70(t,j＝3.2hz,1h),4.60(dt,j＝11.2,4.7hz,1h),3.76(dt,j＝6.7,3.3hz,4h),3.62(t,j＝5.5hz,4h),3.21(dd,j＝4.5,2.4hz,2h),2.91–2.84(m,4h),2.81(d,j＝13.0hz,1h),2.60(t,j＝5.2hz,4h),2.36(t,j＝3.3hz,1h),2.30(d,j＝13.5hz,1h),1.36(s,3h),1.23(s,3h),1.16(s,3h),1.12(s,3h),0.88(s,6h),0.82(s,3h),0.79(s,1h)；13cnmr(101mhz,cdcl3)δ199.95,173.84,170.01,169.73,128.47,81.03,66.83,61.65,59.78,54.95,53.30,48.23,46.30,45.28,43.79,43.75,43.28,38.75,38.06,37.75,36.91,33.40,32.71,31.77,28.43,28.13,27.05,26.71,26.44,23.66,23.11,18.67,17.37,16.77,16.42；hrms(m/z):(m+h+)calcd.forc40h64n3o5:666.4846,found:666.4795.
实施例2:
s1、酰胺化反应：4-(3β-羟基-11-氧代-18β-齐墩果-12-烯-30-羰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2)的制备
18β-甘草次酸(0.47g，1.0mmol)、edcl(0.23g,1.2mmol)、三乙胺(0.13g,1.2mmol)和hobt(0.16g,1.2mmol)依次加到ch2cl2(20ml)溶液中,混合物室温搅拌反应20min。然后n-boc-哌嗪(0.45g,2.5mmol)加到上述反应液中，再回流反应24h。tlc监测原料全部转化后，只有痕量化合物(2)生成。减压蒸馏除去溶剂后余下固体残余，将固体残余用少量乙醇搅拌成浆状后，慢慢搅拌下倒入10倍体积的热水中，产生大量固体，溶液冷却后抽滤，水洗，干燥得化合物(2a)，收率为95.8％。hrms(m/z):[m+h]+calcd.forc36h50n3o4:588.3801,found:588.3801.
s2、酯化反应：4-(3β-(2-氯乙酰氧基)-11-氧代-18β-齐墩果-12-烯-30-羰基)哌嗪-1-羧酸(ⅲ)的制备
化合物(2)(0.64g,1.0mmol)、2-氯乙酸酐(1.37g,8.0mmol)和k2co3(2.76g,20.0mmol)依次加到乙腈(20ml)溶液中回流反应9h。tlc监测原料全部转化后，只有痕量化合物(ⅲ)生成。减压蒸馏除去溶剂后余下固体残余，将固体残余冷却后，加水(20ml)搅拌均匀，产生大量固体，抽滤，水洗，干燥得化合物(ⅲa)，收率为98.3％。hrms(m/z):[m+h]+calcd.forc38h57cl2n2o5:691.3645,found:691.3641.
s3、氨基化反应：4-(3β-(2-吗啉代乙酰氧基)-11-氧代-18β-齐墩果-12-烯-30-羰基)哌嗪-1-羧酸(ⅳa)的制备
化合物(ⅲ)(0.66g，1.0mmol)、吗啉(0.13g,3.0mmol)和催化剂量的i2依次加入无水乙醇(15ml)中，回流反应12h。待反应结束后减压蒸馏除去溶剂后余下固体残余，将固体残余用少量乙醇搅拌成浆状后，加水(20ml)搅拌均匀，产生大量固体，抽滤，水洗，干燥得化合物(ⅳa)，收率为91.1％。
s4、脱羧反应：3β-(2-吗啉代乙酰氧基)-11-氧代-18β-齐墩果-12-烯-30-羰基哌嗪(ⅴa)的制备
化合物(ⅳa)(0.68g,1.0mmol)加入到ch2cl2(10ml)中，室温下三氟乙酸(5ml)的ch2cl2(5ml)溶液慢慢滴加到上述混合物中，然后慢慢升至室温再搅拌反应3h。待反应结束后用na2co3饱和溶液中和，抽滤，固体层用ch2cl2洗，有机溶液干燥后减压蒸馏得产物18β-甘草次酸哌嗪酰胺衍生物(ⅴa)，收率为92.1％。
实施例3:
s1、酰胺化反应：4-(3β-羟基-11-氧代-18β-齐墩果-12-烯-30-羰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2)的制备
将18β-甘草次酸(0.47g，1.0mmol)、edcl(0.23g,1.2mmol)、三乙胺(0.13g,1.2mmol)和hobt(0.16g,1.2mmol)依次加到乙腈(20ml)溶液中,混合物60℃搅拌反应20min。然后n-boc-哌嗪(0.45g,2.5mmol)加到上述反应液中，再60℃反应20h。待反应结束后减压蒸馏除去溶剂后余下固体残余，将固体残余用少量乙醇搅拌成浆状后，慢慢搅拌下倒入10倍体积的热水中，产生大量固体，溶液冷却后抽滤，水洗，干燥得白色固体，柱层析分离后得化合物(2)收率为26.3％，化合物(2a)收率为71.8％。
s2、酯化反应：4-(3β-(2-氯乙酰氧基)-11-氧代-18β-齐墩果-12-烯-30-羰基)哌嗪-1-羧酸(ⅲ)的制备
将化合物(2)(0.64g,1.0mmol)、2-氯乙酸酐(1.37g,8.0mmol)和k2co3(2.76g,20.0mmol)依次加到甲苯(20ml)溶液中80℃反应9h。tlc监测原料全部转化后，只有痕量化合物(ⅲ)生成。减压蒸馏除去溶剂后余下固体残余，将固体残余冷却后，加水(20ml)搅拌均匀，产生大量固体，抽滤，水洗，干燥得化合物(ⅲa)，收率为97.9％。
s3、氨基化反应：4-(3β-(2-(4-氨甲酰基哌嗪-1-基)乙酰氧基)-11-氧代-18β-齐墩果-12-烯-30-羰基)哌嗪-1-羧酸(ⅳb)的制备
化合物(ⅲ)(0.66g，1.0mmol)、哌啶-4-甲酰胺(0.19g,1.5mmol)、k2co3(0.69g,5.0mmol)和催化剂量的i2依次加入无水乙醇(15ml)中，回流反应12h。待反应结束后减压蒸馏除去溶剂后余下固体残余，将固体残余用少量乙醇搅拌成浆状后，加水(20ml)搅拌均匀，产生大量固体，抽滤，水洗，干燥得化合物(ⅳb)，收率为93.6％。1hnmr(400mhz,chloroform-d)δ5.66(s,1h),5.54(d,j＝16.7hz,2h),4.56(dd,j＝11.7,4.7hz,1h),3.60(td,j＝15.7,14.2,8.0hz,4h),3.40(d,j＝5.2hz,4h),3.23(d,j＝4.3hz,2h),2.99(s,1h),2.83–2.73(m,1h),2.33(s,1h),2.28(t,j＝11.5hz,4h),2.16(tt,j＝11.4,4.0hz,1h),1.44(s,9h),1.33(s,3h),1.20(s,3h),1.13(s,3h),1.09(s,3h),0.85(s,6h),0.79(s,3h),0.77(s,1h)；13cnmr(101mhz,chloroform-d)δ199.92,177.17,174.12,170.09,169.55,154.52,128.48,81.07,80.25,61.63,59.47,54.94,52.62,52.51,48.10,45.26,43.87,43.79,43.27,42.13,38.71,38.04,37.70,36.89,33.16,32.70,31.75,28.71,28.67,28.40,28.35,28.12,27.04,26.67,26.38,23.66,23.09,18.65,17.35,16.78,16.39；hrms(m/z):(m+h+)calcd.forc47h75n4o7:807.5636,found:807.5633.
s4、脱羧反应：3β-(2-(4-氨甲酰基哌嗪-1-基)乙酰氧基)-11-氧代-18β-齐墩果-12-烯-30-羰基哌嗪(ⅴb)的制备
化合物(ⅳb)(0.81g,1.0mmol)加入到ch2cl2(10ml)中，0℃搅拌20min。然后三氟乙酸(5ml)的ch2cl2(5ml)溶液慢慢滴加到上述混合物中，然后慢慢升至室温再搅拌反应3h。待反应结束后用na2co3饱和溶液中和，抽滤，固体层用ch2cl2洗，有机溶液干燥后减压蒸馏得产物18β-甘草次酸哌嗪酰胺衍生物(ⅴb)，收率为91.7％。1hnmr(400mhz,chloroform-d)δ5.68(s,1h),5.55(d,j＝16.6hz,2h),4.58-4.54(m,1h),3.64-3.56(m,4h),3.40(d,j＝5.2hz,4h),3.22(d,j＝4.3hz,2h),2.99(s,4h),2.82(d,j＝13.0hz,1h),2.34(s,1h),2.30(t,j＝12.0hz,3h),2.19-2.12(m,1h),1.34(s,3h),1.21(s,3h),1.14(s,3h),1.10(s,3h),0.86(s,6h),0.80(s,3h),0.77(s,1h)；13cnmr(101mhz,chloroform-d)δ199.93,177.17,174.00,170.06,169.60,154.54,128.46,81.06,80.30,61.63,59.49,54.94,52.63,52.53,48.12,45.28,43.88,43.80,43.27,42.13,38.73,38.05,37.72,36.89,33.18,32.72,31.76,28.72,28.68,28.41,28.12,27.05,26.67,26.40,23.66,23.10,18.66,17.36,16.78,16.40；hrms(m/z):(m+h+)calcd.forc42h67n4o5:707.5112,found:707.5108.
实验效果测定：
18β-甘草次酸的哌嗪酰胺衍生物的抗菌活性测定
本发明化合物作为抗菌和抗结核抑制剂的活性可以按许多标准的生物学试验或药理学试验测定。
应用琼脂稀释法测定实验化合物的mic(μg/ml)值。
抗菌药物原液的配制：甲醇溶解后配制成2mg/ml溶液，用滤过法除菌。
含药琼脂原液的配制：用稀释法将原液稀释成多个梯度浓度。分别取1ml加入到已作好标记的内径90mm的平板孔内。再取已灭菌的50℃的m-h琼脂19ml到平板孔内，混菌后冷却。
接种：用接种器在平板孔内逐个接种，每次接种量为1～2μl(含菌量约为5×105cfu/ml)。最后接种不含药物的生长对照板，以检查整个实验过程中测试菌种的存活状态。
孵育：平板置于37℃孵育24h。
结果判断：菌落完全生长被完全抑制的最低药物浓度为该化合物对检测菌种的mic，单一菌落生长可忽略不计。
表1：18β-甘草次酸的哌嗪酰胺衍生物的抗菌活性测定结果
结果表明，18β-甘草次酸的哌嗪酰胺衍生物对大肠杆菌(e.coli)，铜绿假单胞菌(p.aeruginosa)，金黄色葡萄球菌(s.aureus)和枯草芽孢杆菌(b.subtilis)均有较强的抑制作用，其中含有羧基结构的ⅲ，ⅳa，ⅳb抑菌效果最好。
显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无法对所有的实施方式予以穷举。凡是属于本发明的技术方案所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。