包含阳离子基团和亲脂基团的巴比妥酸衍生物的制作方法

本发明涉及生物活性环状化合物及其作为例如针对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌(包括多重耐药性分离株)的抗微生物剂的用途。
背景技术：
：由多重耐药性细菌造成的感染在过去20-25年变成主要的社会问题。迫切需要开发满足全球危机和耐药性细菌的扩散的新的抗微生物剂。耐药性细菌目前每年引起25000位欧洲患者死亡并且如果没有开发大量新药，则最坏的情况是估计截止2050年每年1千万人死亡。有前景的一类抗微生物剂是阳离子抗微生物肽(amp)，也称为宿主防御肽。amp是两亲性的并且具有通过以非受体特异性方式靶向细菌的内膜和/或外膜来进行的独特作用模式。这些分子与细胞膜的脂质双层直接相互作用。小amp的药效团模型最近已被应用于设计β2,2-氨基酸衍生物和含有它们的肽。wo2011/051692披露了结合β2,2-氨基酸以用作溶解细胞治疗剂的肽、模拟肽和氨基酸衍生物。这些化合物具有广谱的抗细菌活性，例如针对革兰氏阳性种类和革兰氏阴性种类的活性。然而，还需要针对革兰氏阳性种类和革兰氏阴性种类具有改进活性的化合物。eusynstyelamide(海鞘酰胺)是一类从海洋极地苔藓虫斯瓦尔巴特群岛蛛苔虫(tegellacf.spitzbergensis)和澳大利亚海鞘砖红色海鞘(eusynstyelalatericius)分离的抗微生物剂，其展示出适度抗微生物活性。eusynstyelamide的抗微生物活性在tadesse等人,j.nat.prod.2011,74,837-841中报道。eusynstyelamide由附接至五元二羟基丁内酰胺环的两个阳离子基团(胺或胍)和两个亲脂基团组成(参见图1)。eusynstyelamide中的阳离子和亲脂基团的此两亲性结构布置满足小抗微生物肽(amp)的药效团模型。然而，使用eusynstyelamide的问题(通常由仅适度细胞毒性活性引起)在于，二羟基丁内酰胺环的结构非常复杂，具有三个立体中心，并且其合成因此是复杂的。因此仍需要开发展现良好活性，特别是针对耐药性或其他问题菌株的活性的抗生素化合物。技术实现要素：本发明人已经发现，可被认为是eusynstyelamide或小amp的模拟物的某些巴比妥酸酯具有良好抗细菌活性。这些化合物含有孪位附接至中心支架的两个亲脂基团，该中心支架进一步连接至两个阳离子基团。因此，本发明提供了一种具有式(i)的化合物：或其立体异构体、互变异构体、或溶剂合物，其中：x是ch2或c＝w；y是ch2或c＝w；z是键、ch2或c＝w；w是n、o或s；每个r1可以是相同或不同的，包含至少一个阳离子基团，该阳离子基团在ph7下具有至少+1的净电荷；每个r2可以是相同或不同的，是亲脂性的并且包含至少7个非氢和非氟原子；或者，这些r2基团被连接或稠合，以形成具有总计至少14个非氢和非氟原子或者当每个基团内的环状基团稠合在一起时具有至少12个非氢和非氟原子的亲脂基团；至少一个r2基团含有环状基团；并且该化合物在ph7下具有至少+2的净正电荷。具有式(i)的化合物含有孪位附接至中心环状支架的两个亲脂基团，该中心环状支架进一步连接至两个阳离子基团。中心支架确保刚性两亲性结构具有孪位取代的亲脂基团相对于阳离子基团的特定取向。两个亲脂基团附接至同一个碳并且可以在中心环平面的上方和下方取向。本发明提供具有式(i)的化合物，其中x是ch2或c＝w；y是ch2或c＝w；并且z是键、ch2或c＝w。优选地，x、y和z中的至少一个是c＝w。例如，x可以是c＝w，y可以是ch2并且z可以是键或ch2。更优选地，x、y和z中的至少两个是c＝w。例如，x和y可以是c＝w并且z可以是键、ch2或c＝w。或者，y和z可以是c＝w并且x可以是ch2。优选地，x和y二者是c＝w并且z是键或c＝w。最优选地，x、y和z全部是c＝w，特别是c＝o。本发明的化合物(具有式i)的优选环状支架是巴比妥酸酯或乙内酰脲，如下文所示。因此，本发明的优选化合物是具有式(ii)的化合物其中r1和r2是如本文所定义的。另外，本发明的优选化合物是具有式(iii)的化合物其中r1和r2如本文所定义。w可以是氮、氧或硫。优选地，w是氧或硫。更优选地，w是氧。每个r1基团包含至少一个阳离子基团，该阳离子基团在ph7下具有至少+1的净电荷；优选地，每个r1基团的净电荷在ph7下是+1。虽然每个r1基团可能不同，但是优选地每个r1基团是相同的。优选地，每个r1基团包含2-15个非氢原子。更优选地，每个r1基团包含3-12个非氢原子。最优选地，每个r1基团包含5-8个非氢原子。阳离子基团可以典型地是阳离子胺基团或阳离子亚胺(亚胺离子)基团。因此，阳离子基团可以优选地包含-nr3+、＝nr2+、-nr2+-和＝nr+-中的至少一者，其中每个r在每次出现时是相同或不同的并且是h或烷基。包含＝nr2+基团的基团的实例是基团-nr-c(＝nr2+)-nr2或-n(-c(＝nr2+)-nr2)-。包含-nr2+-基团的基团的实例是4-6元饱和环，诸如阳离子哌啶、哌嗪、吗啉、三嗪、吡咯烷酮、咪唑烷或吡唑烷。包含＝nr+-基团的基团的实例是4-6元不饱和环，诸如阳离子二嗪、噁嗪、噻嗪、吡啶、五唑、四唑、三唑、呋咱、噁二唑、噻二唑、二噻唑、噻唑、异噻唑、吡唑、咪唑、噁唑、异噁唑或吡咯。优选地，阳离子基团包含-nr3+或＝nr2+，其中每个r在每次出现时是相同或不同的并且是h或烷基。更优选地，阳离子基团包含-nr3+或-nr-c(＝nr2+)-nr2，其中每个r在每次出现时是相同或不同的并且是h或烷基。优选地，r是h或c1-6烷基，更优选地h、ch3或ch2ch3。最优选地，r是h或ch3。阳离子基团可以优选地是阳离子胺基团或阳离子胍基团或其同电子排列体或生物电子等排体。更优选地，阳离子基团是阳离子胺基团或阳离子胍基团。每个r1基团可以被定义为-m-ry，其中：m是键、烷基、烯基、炔基、杂烷基、烷氧基、卤代烷氧基、芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基，其各自可任选地被取代；并且ry包含阳离子基团，诸如上文所列出的那些。优选地，m是烷基、烯基、炔基、杂烷基、烷氧基或卤代烷氧基。更优选地，m是烷基、烯基或炔基，最优选地是烷基。例如，m可以是c2-8烷基、c2-8烯基或c2-8炔基。最优选地，m是c3-5烷基、c3-5烯基或c3-5炔基，特别是c3-5烷基。因此，优选地，每个r1基团是优选地是其中r是h或烷基，优选地h、ch3或ch2ch3，更优选地h；并且n是1-10，优选地2-8，更优选地3-5。优选地，r是h、ch3或ch2ch3并且n是2-8。更优选地，r是h并且n是3-5。因此，甚至更优选地，r1是最优选地每个r2基团是亲脂性的并且包含至少7个非氢和非氟原子。还必需的是，至少一个r2基团含有环状基团。每个亲脂性r2基团可以含有杂原子o、n或s，但是典型地不存在多于一个杂原子o、n和s，并且该杂原子优选地是氮。每个r2基团将优选地具有不多于2个极性基团(例如-br、-i或-cf3)。r2基团孪位附接至中心支架，可以被连接或稠合以形成具有总计至少14个非氢和非氟原子的亲脂性基团。当来自一个r2基团的一个或多个环状基团与来自其他r2基团的一个或多个环状基团稠合时，两个r2基团的非氢和非氟原子的合并总数是至少12。连接或稠合的r2基团的实例包括以下结构中所示的那些：然而，优选地，r2基团是未连接或未稠合的。可存在于r2基团中的非氢和非氟原子不存在最大数目。然而，如果r2基团太大，则这些化合物变得对人类红血球有毒。因此，每个r2基团可以具有20、优选18、以及更优选15的最大数目的非氢和非氟原子。优选地，每个r2基团包含至少8个非氢和非氟原子。更优选地，每个r2基团包含至少9个非氢和非氟原子。如果一个r2基团含有7个非氢和非氟原子，那么其他r2基团优选地含有至少8个、优选地至少9个非氢和非氟原子。因此，每个r2基团可以优选地包含8-20或8-15个非氢和非氟原子，更优选地9-20或9-15个非氢和非氟原子。每个r2基团可以选自烷基、烯基、炔基、杂烷基、烷氧基、卤代烷氧基、芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基，其各自可任选地被取代。优选地，r2包含任选取代的芳基或杂芳基基团。例如，r2可包含任选取代的苯基、萘基和吡啶，优选任选取代的苯基或萘基。任选取代基优选地选自下组，该组由以下组成：卤代基、-cn、-r4no2、-r4or3、-r4(＝o)r3、-r4oc(＝o)r3、-r4o2r3、-r4n(r3)2、-r4(＝o)n(r3)2、-r4oc(＝o)n(r3)2、-r4nr3(＝o)r3、-r4nr3(＝o)or3、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、芳基、杂芳基、环烷基、以及杂环烷基；其中r4是键或烷基，优选地为键或c1-6烷基，更优选地为键；并且r3是h、烷基、烯基、炔基、杂烷基、烷氧基、卤代烷氧基、芳基、杂芳基、环烷基、或杂环烷基，优选地是h或c1-6烷基，更优选地是h。更优选的取代基是卤代基、c1-6烷基、c1-6烷氧基、c1-6卤代烷基、c1-6卤代烷氧基、c6-10芳基、c4-6杂芳基、c3-6环烷基、或c3-6杂环烷基。特别优选的取代基包括卤代基、c1-4烷基、c1-4烷氧基、c1-4卤代烷基、c1-4卤代烷氧基、苯基和萘基。更优选地，取代基选自卤代基、叔丁基和-cf3。最优选的卤取代基是i和br。优选地，两个r2基团含有环状基团。在此情况下，每个r2基团可以被定义为-l-rx，其中：l是键、烷基、烯基、炔基、杂烷基、烷氧基或卤代烷氧基；并且rx是芳基、杂芳基、环烷基、或杂环烷基基团，其任选地被任一上文所列出的取代基取代。优选地，l是c1-3烷基。更优选地，l是-ch2-。每个rx基团可以包含两个或更多个环状基团，其可以被连接或稠合，优选地被稠合。例如，每个rx基团可以包含任选取代的萘环。优选地，rx是任选取代的芳基或杂芳基基团。例如，rx可选自任选取代的苯基、萘基和吡啶，优选任选取代的苯基或萘基。优选地，l是-ch2-并且rx是任选地被卤代基、叔丁基或-cf3取代的苯基或萘基。优选的r2基团示出在实施例中。两个r2基团优选地是相同的，只要方便合成即可。然而，对于一个r2基团而言希望的是结合如上文所讨论的环状基团，例如由-l-rx表示的环状基团，并且对于另一个r2基团而言希望的是烷基、烯基、炔基或杂烷基。这些基团是任选分支或取代的(如上文所讨论的)，但是优选地是线性和未取代的。术语“烷基”是指直链和支链饱和脂族烃链。优选地，烷基是指c1-10烷基。示例性烷基基团包括但不限于甲基(me)、乙基(et)、丙基(例如，正丙基和异丙基)、丁基(例如，正丁基、异丁基、叔丁基)、以及戊基(例如，正戊基、异戊基、新戊基)。术语“烯基”是指具有一个或多个、优选地一个或两个碳碳双键的直链和支链烃链构造。优选地，烯基是指c2-10烯基。烯基基团的实例包括但不限于乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、4-戊烯基、2-己烯基、3-己烯基、4-己烯基、5-己烯基、2-甲基-2-丙烯基、以及4-甲基-3-戊烯基。术语“炔基”是指具有一个或多个、优选地一个或两个碳碳三键的直链和支链烃链。优选地，炔基是指c2-10炔基。炔基基团的实例包括但不限于乙炔基、丙炔基和炔丙基。术语“烷氧基”是指-o-烷基基团。优选地，烷氧基是指c1-10烷氧基。示例性烷氧基基团包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基(例如正丙氧基和异丙氧基)、以及叔丁氧基。术语“卤代烷基”是指被1个或多个卤素(氟(f)、氯(cl)、溴(br)和碘(i))取代的直链和支链饱和脂族烃链。优选地，卤代烷基是指c1-10卤代烷基。卤代烷基基团的实例包括但不限于氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氯甲基、五氟乙基、五氯乙基、2,2,2-三氟乙基、七氟丙基、以及七氯丙基。术语“卤代烷氧基”是指通过氧桥附接的如上文所定义的卤代烷基基团。优选地，卤代烷氧基是指c1-10卤代烷氧基。卤代烷氧基的实例包括但不限于三氟甲氧基、2,2,2-三氟乙氧基和五氟乙氧基。术语“环烷基”是指环状烷基基团，包括单环、二环或多环环系。优选地，环烷基是指c3-10环烷基，更优选地c3-6环烷基。示例性环烷基基团包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基和降冰片基。术语“芳基”是指单环或多环芳族烃，包括例如苯基、萘基和菲基。优选地，芳基是指c6-12芳基，更优选地c6-10芳基。术语“杂环烷基”是指含有碳原子和1、2、3或4个独立地选自由n、o和s组成的组的杂原子的环状烷基基团，包括单环、二环或多环环系。优选地，杂环烷基是指c3-10杂环烷基，更优选地c3-6杂环烷基。示例性杂环烷基基团包括但不限于环氧乙烷、吡咯烷酮、四氢呋喃、哌啶、哌嗪、四氢吡喃、以及硫化环戊烷。术语“杂芳基”是指包含至少一个杂原子环成员诸如硫、氧或氮的单环和多环芳族烃。优选地，杂芳基是指c6-12杂芳基，更优选地c6-10杂芳基。杂芳基基团的实例包括但不限于吡啶、嘧啶、吡嗪、哒嗪、三嗪、呋喃、喹啉、异喹啉、噻吩、咪唑、噻唑、吲哚、吡咯、噁唑、苯并呋喃、苯并噻吩、苯并噻唑、异噁唑、吡唑、三唑、四唑、吲唑、1,2,4-噻二唑、异噻唑、嘌呤、咔唑、苯并咪唑、吲哚啉、苯并二氧戊环、以及苯并二氧六环。如本文其他位置所述，本发明的化合物展现出抗微生物活性。不希望受到理论约束，据信本发明的化合物可通过直接膜影响机制发挥细胞毒性效应并且因此可称为膜作用抗微生物剂。这些化合物可以是细胞裂解的、使细胞膜不稳定或甚至穿过细胞膜。这可提供相对于作用于靶细胞的蛋白质组分(例如细胞表面受体)或与其相互作用的药剂的不同的治疗优点。虽然突变可产生新形式的靶蛋白，从而产生抗生素抗性，但是不太可能的是，可发生对脂质膜的基团改变以预防细胞毒性作用。细胞裂解作用可引起非常快速的细胞死亡并且因此在细菌有机会繁殖之前具有杀灭细菌的优点。而且，不希望受到理论约束，据信本发明的分子可凭借阳离子基团的存在而被吸引到细胞膜的带负电荷磷脂，并且亲脂基团可能够使微生物(例如细菌或真菌)细胞膜的正常三维脂质双层构造不稳定。此相互作用可增加渗透性并且导致膜完整性损失并最终导致细胞裂解和死亡。因此，本发明提供具有式(i)的化合物用于使微生物细胞膜不稳定和/或透化。‘不稳定’意指正常三维脂质二层构造的扰乱，包括但不限于膜薄化、增加的膜对水、离子或代谢物等的渗透性(典型地不涉及通道)，这也会损害细菌的呼吸系统。本发明还提供具有式(i)的化合物(或包含具有式(i)的化合物的组合物或制剂)用于疗法中，特别是用于治疗微生物感染(例如细菌和/或真菌感染)。因此，在一个方面，本发明提供本文所定义的化合物用于治疗细菌感染。在另一个方面，本发明还提供本文所定义的化合物用于治疗真菌感染。治疗包括预防性治疗。本发明的优选化合物具有作为抗细菌剂和抗真菌剂的活性。从另一方面来看，本发明提供具有式(i)的化合物作为抗微生物剂(例如抗细菌剂或抗真菌剂)的用途。从另一方面来看，本发明提供一种治疗微生物感染(例如细菌和/或真菌感染)的方法，该方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的本发明的如本文所定义的化合物。治疗有效量将基于临床评估来确定并且可以容易监测。典型地，所施用的量应有效于杀灭全部或一定比例的靶微生物或预防或减少其繁殖速率或另外减轻其对身体的有害作用。临床医生或患者应观察到与感染相关的参数或症状中的一种或多种的改进。或者从另一方面来看，本发明提供本发明的如本文所定义的化合物制造用于治疗微生物感染(例如细菌和/或真菌感染)的药剂的用途。如上文所提及，本发明的化合物可用于治疗细菌感染。此类感染包括革兰氏阳性(g+)细菌或革兰氏阴性(g-)细菌的感染。例如，本发明的化合物可用于治疗大肠杆菌(ec)感染、铜绿假单胞菌(pa)感染、金黄色葡萄球菌(sa)感染、谷氨酸棒状杆菌(cg)感染、屎肠球菌感染、鲍氏不动杆菌感染、和/或克雷伯氏肺炎菌感染。本发明的化合物还可以用于治疗由铜绿假单胞菌感染引起的囊性纤维化。本发明的化合物还可以用于治疗肺炎嗜衣原体感染。本发明的化合物还可以用于改进和/或辅助伤口愈合，例如在免疫受损患者中。如上文所提及，本发明的化合物可用于治疗真菌感染。例如，本发明的化合物可以用于治疗白色念珠菌(ca)感染、红酵母属(rh)感染和/或出芽短梗霉菌(ap)感染。特别地，本发明的化合物可用于治疗白色念珠菌(ca)感染。根据本发明治疗的受试者将优选地是人类，但也预期兽医治疗。这些治疗可以涉及与另一种抗微生物剂共同施用。因此，在另一个方面，本发明提供一种包含(a)具有式(i)的化合物和(b)另一种抗微生物剂的产品作为组合制剂以用于单独、同时或依次用于治疗或预防抗微生物感染。此类抗微生物化合物也具有非治疗性用途(离体用途)，例如在农业中或在家用或工业情况下用作易于微生物污染材料的杀菌剂。因此，在另一个方面中，本发明提供本发明的化合物作为抗微生物剂，特别是作为抗细菌剂和/或抗真菌剂的用途。使用本发明的一种或多种化合物处理环境或农业场所或产品以及食品和食物生产场所或例如医院环境中的表面或工具以减少存在的活细菌的数目或限制细菌生长或繁殖的方法构成本发明的另一个方面。本发明的化合物也可以具有防污染、抗生物膜(例如针对细菌或真菌生物膜)和/或抗寄生物用途。因此，本发明的化合物也可以用作防污染剂、抗生物膜剂(例如针对细菌或真菌生物膜)和/或抗寄生物剂。因此，本发明提供如本文所定义的化合物用于治疗细菌或真菌感染，其中所述细菌或真菌感染呈生物膜形式。本发明还提供如本文所定义的化合物用于治疗寄生物感染。生物膜是由细胞外聚合物基质(在本领域中也称为多糖-蛋白质复合物)围绕的微生物的集合或群落。这些细胞外聚合物典型地是多糖，值得注意的是由生物体本身产生的多糖，但是它们也可以含有其他生物聚合物。生物膜将典型地附接至可为惰性或活的表面，但是还观察到的是生物膜可由彼此附接或在任何界面处附接的微生物形成。此生长模式保护了微生物并且使得它们难以去除或根除。生物膜引起关于感染、污染、沾污和腐败等的大量商业、工业和医学问题。生物膜环境中的微生物并未展示对抗微生物剂(例如抗生素、抗真菌剂和杀微生物剂)的相同易感性和宿主免疫防御或清除机制。认为此抗性是由于细胞外基质的屏障作用和/或微生物本身的表型变化。还据信生物膜中的微生物可更缓慢生长，并且因此更缓慢摄取抗微生物剂。因此，生物膜中生长的细菌通常比其浮游相对物更耐受抗微生物剂。浮游细菌的易感性测试可能未能预测装置相关的感染对抗微生物剂的体内抗性。因此特别有利的是提供为活性抗微生物剂并能够甚至针对以生物膜形式存在的微生物发挥其作用的药剂。此特性在实施例中得到证明并且本发明的优选化合物具有针对生物膜的活性并且预防生物膜形成。本发明的化合物还可具有抗癌(例如抗肿瘤)活性。因此，在一些实施方式中，本发明提供本发明的化合物用于治疗癌症(例如治疗肿瘤，诸如实体肿瘤)。因此，本发明的化合物可以用作抗肿瘤剂。从另一方面来看，本发明提供一种治疗癌症(例如肿瘤)的方法，该方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的本发明的如本文所定义的化合物。或者从另一方面来看，本发明提供本发明的如本文所定义的化合物在制造用于治疗癌症(例如肿瘤)的药剂中的用途。此特性在实施例中得到证明并且本发明的优选化合物具有针对肿瘤的活性。包含本发明的一种或多种化合物与适合稀释剂、载剂或赋形剂的混合物的制剂构成本发明的另一个方面。此类制剂可尤其用于药物(包括兽医)目的。适合稀释剂、赋形剂和载剂是技术人员已知的。根据本发明的组合物(制剂)(例如药物组合物)可例如以适用于经口、经鼻、胃肠外、静脉内、局部或直肠施用的形式呈现。如本文所用，术语“药物”包括本发明的兽医应用。本文所定义的活性化合物可以常规药理学施用形式呈现，诸如片剂、包衣片、鼻喷雾剂、溶液、乳液、脂质体、散剂、胶囊或缓释形式。局部施用的制剂优选地呈凝胶、乳膏、洗液、糊剂或比水更粘的其他制备物形式。用于局部应用的其他制剂包括已浸渍有本发明的化合物的绑带、纱布等，当浸渍此类材料时，含有本发明的化合物的制备物不需要比水更粘。常规药物赋形剂以及常用生产方法可用于制备这些形式。片剂可以例如通过将一种或多种活性成分与已知赋形剂，诸如与稀释剂(诸如碳酸钙、磷酸钙或乳糖)、崩解剂(诸如玉米淀粉或海藻酸)、粘合剂(诸如淀粉或明胶)、润滑剂(诸如硬脂酸镁或滑石)和/或用于获得缓释的试剂(诸如羧基聚亚甲基、羧甲基纤维素、邻苯二甲酸乙酸纤维素、或聚乙烯乙酸酯)混合来产生。片剂在需要时可由若干层组成。包衣片可通过使用通常用于片剂包衣的试剂(例如聚乙烯吡咯烷酮或虫胶、阿拉伯胶、滑石、二氧化钛或糖)包衣以类似于片剂的方式获得的核心来产生。为了获得缓释或避免不相容性，该核心也可由若干层组成。片剂包衣也可由若干层组成，以便获得缓释，在此情况下可以使用上文对于片剂所提及的赋形剂。还可以使用器官特异性载剂系统。注射溶液可例如以常规方式，诸如通过添加防腐剂诸如对羟基苯甲酸酯或稳定剂诸如edta来产生。然后将这些溶液填充到注射小瓶或安瓿中。鼻喷雾剂可以类似地在水溶液中配置并且包装到具有气溶胶喷射剂或设置有用于手动压缩的装置的喷雾容器中。含有一种或若干种活性成分的胶囊可以例如通过将活性成分与惰性载剂(诸如乳糖或山梨醇)混合并且将混合物填充到明胶胶囊中来产生。适合栓剂可以例如通过将活性成分或活性成分组合与预想用于此目的的常规载剂(诸如天然脂肪或聚乙二醇或其衍生物)混合来产生。含有活性化合物的剂量单元优选地含有0.1-10mg，例如1-5mg的抗微生物剂。药物组合物可另外包含其他活性成分，包括其他细胞毒性剂，诸如其他抗微生物化合物。其他活性成分可包括不同类型的抗生素。生物活性化合物当用于局部组合物中时通常以按重量计至少0.1％的量存在。在大部分情况下，不需要采用量大于按重量计1.0％的本发明的化合物。在全身性(肌肉内、静脉内、腹膜内)使用此类组合物时，活性化合物可以一定量存在，以实现生物活性分子的至少约5μg/ml的血清水平。一般而言，血清水平不需要超过500μg/ml。优选的血清水平是约100ug/ml。此类血清水平可以通过将生物活性化合物结合在有待以从1至约10mg/kg的剂量全身性施用的组合物中来实现。一般而言，化合物不需要以超过100mg/kg的剂量施用。如本文其他位置所述，本发明的分子具有抗微生物活性。附图说明本发明现在将借助于以下非限制性实施例参考附图进行描述，在附图中：图1-示出eusynstyelamide的通用结构图2-示出具有式(i)的两亲性巴比妥酸酯的结构。对于每种化合物，抗衡离子是cf3oo-。图3-示出具有式(i)的两亲性巴比妥酸酯的结构。对于每种化合物，抗衡离子是cf3oo-。图4-示出具有式(i)的其他感兴趣化合物。具体实施方式实施例实施例1针对细菌参考菌株的抗微生物活性通过下文所陈述的方法制备两个系列的两亲性巴比妥酸酯。系列7由具有两个阳离子氨基基团的巴比妥酸酯组成并且系列8涵盖具有两个阳离子胍基团的巴比妥酸酯(图2和3)。最初对于针对抗生素敏感性革兰氏阳性和革兰氏阴性参考菌株的抗微生物活性筛选巴比妥酸酯。结果在以下表1中示出。表1：针对抗生素敏感性革兰氏阳性和革兰氏阴性参考菌株的抗微生物活性(以μg/ml计的mic)。a细菌参考菌株：s.a–金黄色葡萄球菌atcc9144，c.g–谷氨酸棒状杆菌atcc13032,e.c–大肠杆菌atcc25922，并且p.a–铜绿假单胞菌pa01、dsm19880(atcc15692)。b包括2个当量的cf3oo-的分子量，即+mw228.05。对于系列7的胺巴比妥酸酯，针对革兰氏阳性菌株金黄色葡萄球菌和谷氨酸棒状杆菌的最小抑制浓度(mic)值的范围为从0.25-8μg/ml，并且针对革兰氏阴性细菌大肠杆菌和铜绿假单胞菌的mic值的范围为从2-16μg/ml。因此一般观察到的针对革兰氏阳性细菌的抗微生物活性高于针对革兰氏阴性细菌的抗微生物活性，但是对于系列7的最强效胺巴比妥酸酯而言，这些差异是微小的。最强效胺巴比妥酸酯是7(iii)，其具有两个超大亲脂性3,5-二-叔丁基-苄基侧链并且针对所有参考菌株展示0.25-4μg/ml的低得多的范围的mic值。两种巴比妥酸酯7(i)和7(ii)是第二最强效衍生物，其针对参考菌株展示1-8μg/ml的mic值。这些具有更小的亲脂性侧链，并且揭示了侧链大小与抗微生物活性之间的相关性。系列7的胺巴比妥酸酯的鸟苷酸化(guanylation)引起系列8的所得胍巴比妥酸酯的抗微生物活性急剧增加。系列8的高度强效的鸟苷酸化巴比妥酸酯显示针对革兰氏阳性菌株金黄色葡萄球菌和谷氨酸棒状杆菌的窄范围的mic值为<0.13-1μg/ml，并且针对革兰氏阴性细菌大肠杆菌和铜绿假单胞菌的mic为1-8μg/ml。鸟苷酸化巴比妥酸酯因此显示针对革兰氏阳性参考菌株的高效力并且被认为是均等的。针对革兰氏阴性参考菌株的抗微生物活性揭示8(i)、8(ii)和8(v)为针对大肠杆菌和铜绿假单胞菌的最强效衍生物，其mic值为1-4μg/ml。其后接着是胍类似物8(iii)(mic：4μg/ml)并且该类似物是高效且超大胺巴比妥酸酯7(iii)的类似物。针对30种多重耐药性临床分离株的抗微生物活性还针对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌的一组30种多重耐药性临床分离株筛选巴比妥酸酯，这些分离株包括具有扩展谱的β-内酰胺酶-碳青霉烯酶(esbl-carba)产生和粘菌素耐药性的分离株。所测试化合物的抗微生物活性(以μg/ml计的mic)在以下表2中示出。毒性展示为针对人类rbc的溶血活性(以μg/ml计的ec50)和针对个别分离株的括号中的选择性指数(ec50/mic值)。表2表2(续)表2(续)表2(续)*对抗生素粘菌素具有耐药性的临床分离株。确定针对人类rbc的毒性，并且选择性指数(si)被定义为rbcec50值除以针对个别分离株的mic值。对于最强效巴比妥酸酯而言，针对多重耐药性临床分离株的抗微生物功效低至mic2-4μg/ml，并且遵循与针对抗生素敏感性菌株相同的趋势。最强效广谱巴比妥酸酯是胺巴比妥酸酯7(iii)，以及胍巴比妥酸酯8(i)、8(ii)、8(iii)和8(v)。通过将大量高效胍巴比妥酸酯与胺巴比妥酸酯相比较，清楚的是，胍基团作为阳离子基团是有效的。然而，若干种胍巴比妥酸酯与类似的胺巴比妥酸酯相比显示几乎两倍高的rbc毒性。两个不同阳离子基团与七种不同亲脂性侧链之间的相互作用因此影响抗微生物效力和rbc毒性二者。7(i)展示低溶血活性(ec50143μg/ml)，使得关于其针对金黄色葡萄球菌、屎肠球菌和大肠杆菌的良好si为18-36。在具有3,5-二取代苄基侧链的三种胺巴比妥酸酯7(ii)、7(vi)和7(iii)中，超大7(iii)最强效，其针对所有30种多重耐药性临床分离株的mic值为2-16μg/ml。对于其余两种3,5-二取代的巴比妥酸酯，7(ii)比7(vi)更强效，显示了作为大苄基取代基的两个溴原子比具有两个三氟甲基基团更有效。然而，7(ii)的计算的clogp低于对于较低效的7(vi)计算的clogp，这显示不仅侧链的亲脂作用影响抗微生物功效，而且也可能影响电子效应。溴化巴比妥酸酯7(ii)针对金黄色葡萄球菌、屎肠球菌和大肠杆菌非常强效，其mic值为4-8μg/ml，并且其高的si10-21是制备的最有前景的胺巴比妥酸酯之一。胺巴比妥酸酯7(iv)和7(v)含有萘基侧链，并且二者均显示针对革兰氏阳性分离株金黄色葡萄球菌和屎肠球菌的最高功效，其mic值为4-16μg/ml。氟取代的巴比妥酸酯7(v)针对分离株屎肠球菌比7(iv)更强效。差异是所使用的浓度梯度的一个滴定步骤，但也反映了7(v)与7(iv)相比的更高侧链clogp(表2)。重要的是具有ec50243μg/ml的7(iv)和具有ec50160μg/ml的7(v)二者的极低溶血活性，两者给予针对革兰氏阳性分离株的极高si20-40。如上文所讨论的，巴比妥酸酯的鸟苷酸化引起系列8的抗微生物功效和溶血活性二者的增加。较大的胍基团可形成比伯胺基团更复杂的静电和氢键相互作用，并且因此与阴离子和两性离子磷脂相互作用。增加的抗微生物活性和rbc毒性可通过胍基团结合至阴离子磷脂(其为细菌膜的主要组成)和两性离子磷脂(其为哺乳动物细胞结构的主要组成)的能力来解释。关于侧链结构，对于系列8的胍巴比妥酸酯观察到与系列7的胺巴比妥酸酯相同的功效顺序。然而，与胺系列7相比，胍系列8表示出针对革兰氏阴性多重耐药性临床分离株的抗微生物活性的主要增加。4-取代的巴比妥酸酯8(i)展示针对革兰氏阴性多重耐药性临床分离株克雷伯氏肺炎菌和鲍曼不动杆菌的mic值为4-8μg/ml，以及针对金黄色葡萄球菌、屎肠球菌和大肠杆菌的mic值2-4μg/ml。这表示与类似的胺巴比妥酸酯7(i)相比的抗微生物活性的多至4倍的改进。而且，通过将阳离子基团改变成胍来实现8(i)针对铜绿假单胞菌的更高抗微生物活性(mic：8-16μg/ml)。系列8的胍巴比妥酸酯针对人类rbc的毒性水平也取决于所讨论的特定侧链结构。对于胍8(i)，观察到与胺7(i)相比两倍增加的rbc毒性。然而，在ec50为77μg/ml的情况下8(i)的溶血活性仍较低，引起关于其针对多重耐药性金黄色葡萄球菌、屎肠球菌和大肠杆菌的高功效的高si为19-39。所测试的两种3,5-二取代的胍巴比妥酸酯8(ii)和8(iii)中，贯穿该研究，8(ii)是所制备的总体最广谱的巴比妥酸酯，并且显示针对所有30种多重耐药性临床分离株革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌的mic值为2-16μg/ml。与对于胍巴比妥酸酯观察到的毒性一般两倍增加和其类似胺对应物7(ii)的溶血毒性(ec50：83μg/ml)相比，8(ii)的溶血活性(ec50：56μg/ml)低于预期。因此，再一次证明了在苄基侧链上作为大取代基的两个溴原子的效率，并且表明8(ii)为所制备的最有前景的广谱巴比妥酸酯之一。超大巴比妥酸酯8(iii)是所制备的最强效衍生物之一。两种萘基胍巴比妥酸酯8(iv)和8(v)的抗微生物功效显示氟化的8(v)具有针对所有30种多重耐药性临床分离株的最广谱活性，其中mic值为2-16μg/ml。8(v)针对人类rbc的毒性也较低(ec50：88μg/ml)并且与最有前景的溴化胺巴比妥酸酯7(ii)相当。由于8(v)的高功效，其还显示针对金黄色葡萄球菌、屎肠球菌和大肠杆菌的更高的si为11-44，并且因此是所有制备的巴比妥酸酯针对多重耐药性临床分离株金黄色葡萄球菌的总体第二最具选择性衍生物(si：44)。巴比妥酸酯8(v)也是在针对革兰氏阴性细菌的个别分离株的最具选择性的巴比妥酸酯中。较低效类似物8(iv)显示针对金黄色葡萄球菌和屎肠球菌的mic值为8-16μg/ml，并且因此均等于其胺类似物7(iv)。8(iv)针对大肠杆菌的功效高于7(iv)，但是由于更高溶血活性，鸟苷酸化巴比妥酸酯8(iv)的si低于胺巴比妥酸酯7(iv)。因此通过将7(iv)鸟苷酸化成8(iv)，观察到与对抗微生物活性相比更强的对rbc毒性的作用。针对三种临床分离株克雷伯氏肺炎菌k47-25、克雷伯氏肺炎菌50531633和鲍曼不动杆菌k63-58，显示针对最后手段阳离子抗生素粘菌素的耐药性，所有研究的两亲性巴比妥酸酯显示与针对粘菌素敏感性临床分离株相同的范围的抗微生物活性。耐药性机制被认为涉及改变的lps组成和影响粘菌素的结合和机制的电荷，但是似乎对最强效现存两亲性巴比妥酸酯的结合和活性不具有任何重大影响。化学品和设备所有试剂和溶剂均购自商业来源并且用作除了初始材料1-(溴甲基)-4-氟萘之外的供应，该起始材料根据文献程序由4-氟-1-萘酸合成。通过在(4x10-10m)分子筛上保存来制备无水dmf。通过使用merck预涂层硅胶板(60f254)的薄层色谱法(tlc)来监测反应。使用uv光或通过浸渍在高锰酸钾或磷钼酸(pma)中随后用加热枪进行光加热来实现可视化。使用正相快速色谱法进行的纯化通过使用normalsil60(40-63mm)硅胶的正相柱色谱法或通过具有预先装载在属于biotagesp-1的盒上的样品的自动化正相快速色谱法(庚烷/etoac)来完成。还在具有预先装载在盒上的样品的自动化纯化模块上执行反相(rp)c18柱色谱法(具有0.1％tfa的水/具有0.1％tfa的乙腈)对反应物的纯化。在装备xbridgetmc185μm4.6mmx250mm柱的waters2695分离模块上进行分析性rphplc并且在波长214和254nm下使用从波长210跨越至310nm的waters996pda检测器分析。用由二者均含有0.1％tfa的水和乙腈组成的流动相洗脱衍生物。梯度以10％乙腈(3min)开始，随后为在17min内90％乙腈的线性梯度。流速为1mlmin-1。在装备5mmsmartprobebb/1h(bb＝19f，31p-15n)的400mhzbrukeravanceiiihd上获得nmr谱。数据表示如下：化学位移、多重性(s＝单峰，d＝双重峰，t＝三重峰，q＝四重峰，p＝五重峰，h＝七重峰，m＝多重峰)、偶合常数(j，hz)和积分。化学位移(δ)以ppm相对于残余溶剂峰(cdcl3：δh7.26和δc77.16；cd3od：δh3.31和δc49.00)表示。在thermoelectronltqorbitrapxl分光仪上进行阳离子和阴离子电喷雾电离质谱(esi-ms)。合成用于合成取代的巴比妥酸酯的建立的方法包括使烷基化丙二酸酯与脲缩合、用n-烷基化脲和丙二酸二乙酯环化、使巴比妥酸与醛或酮发生克内文纳格尔缩合(knoevenagelcondensation)、以及使巴比妥酸烷基化。然而，后一种程序不选择1、3和5位置的烷基化。本发明人发现使二烷基化丙二酸酯与脲缩合继而发生n-烷基化是最成功的策略。如方案1所示，对称二取代的丙二酸酯3(i)-(vi)由丙二酸二乙酯2通过与适当苄基卤化物发生烷基化来获得，并且随后通过用dmf中的nah或k2co3处理来与脲环化，以提供产率为70-92％的4(i)-(vi)。干燥条件为产率所必要的。丙二酸酯3(vi)的环化作用由于在反应条件下脱羧基化而得到低产率(27％)。5,5-二取代的巴比妥酸酯4(i)-(vi)在碱性条件(dmf中的k2co3)下用过量1,4-二溴丁烷烷基化，以得到40-96％产率的n,n′-二烷基化烷基溴巴比妥酸酯5(i)-(vi)。这些产物使用dmf中的nan3(2-3当量)转化为对应叠氮化物6(i)-(vi)(68-100％产率)。用nabh4和催化量的二硫醇将叠氮化合物还原成胺并随后进行boc保护，在通过快速色谱法纯化之后提供boc保护的二胺。用tfa脱保护提供目标胺巴比妥酸酯7(i)-(vi)(>95％纯度，如通过分析性c18反相hplc所测定)。胺巴比妥酸酯7(i)-(v)用thf中的n-boc-1h-吡唑-1-甲脒进行鸟苷酸化并且纯化，之后去除boc保护基团。通过c18反相快速色谱法纯化，得到具有>95％纯度的目标鸟苷酸化巴比妥酸酯8(i)-(v)的tfa盐。(i)(4-tbu)(ii)(3,5-二-br)(iii)(3，5-二-tbu)(iv)(2-nal)(v)(4-f-1-nal)(vi)(3,5-二-cf3)方案1.条件：a)条件：a)arch2br、k2co3或nah、dmf，室温；b)10当量脲(无水)、nah、dmf(无水)，室温；c)10当量1,4-二溴丁烷、4当量k2co3、dmf(无水)，室温，18-48h；d)3当量nan3、dmf(无水)；e)nabh4、1,3-二巯基丙烷、thf:异丙醇1:1，室温；f)i.boc2o，室温，ii.ch2cl2:tfa；h)i.n-boc-1h-吡唑-1-甲脒、thf，室温，ii.ch2cl2:tfa。详细合成二烷基化丙二酸酯-3(i)-(vi)一般程序：向丙二酸二乙酯于cs2co3(2.1-2.2当量)或k2co3(3当量)上的dmf(≈100mg/ml)中的搅拌溶液中添加烷基卤化物(2当量)。将反应物在室温下保持搅拌过夜。将反应混合物用etoac(30ml)稀释并且用水(25ml)、5％licl水溶液(3x25ml)和盐水(25ml)洗涤。将有机相经na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物溶解于ch2cl2(20ml)并且使其吸附在硅藻土上。在硅胶柱上使用戊烷中的1-5％etoac作为流动相来纯化该产物。2,2-双(4-叔丁基苄基)丙二酸二乙酯-3(i)根据一般程序，向丙二酸二乙酯(3.43g，21.4mmol)于k2co3(8.8g，64.2mmol)上的dmf(25ml)中的搅拌溶液中添加1-(溴甲基)-4-叔丁基苯(10g，44mmol)。将反应物在室温下保持搅拌过夜。将反应混合物用etoac(80ml)稀释并且用水(3x50ml)、5％licl水溶液(50ml)和盐水(50ml)洗涤。将有机相经na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物溶解于二氯甲烷(20ml)并且使其吸附在硅藻土上。在硅胶柱上使用戊烷中的1-5％etoac作为流动相来纯化该产物，以得到呈白色固体的3(i)(8.80g，90％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.28(d,j＝8.3hz,4h),7.11(d,j＝8.4hz,4h),4.10(q,j＝7.1hz,4h),3.19(s,4h),1.30(s,18h),1.14(t,j＝7.1hz,6h)。13i)nmr(101mhz,cdcl3):δ171.2,149.7,133.4,129.9,125.2,61.2,60.4,38.6,34.5,31.5,14.0。hrms-esi：c29h40nao4+[m+na]+计算值：475.2818，实测值：475.2795。2,2-双(3,5-二溴苄基)丙二酸二乙酯-3(ii)根据一般程序，向丙二酸二乙酯(460mg，2.9mmol)于cs2co3(2.0g，6.37mmol)上的dmf(5ml)中的搅拌溶液中添加1,3-二溴-5(溴甲基)苯(2g，6.0mmol)。将反应物在室温下保持搅拌过夜。将反应混合物用etoac(30ml)稀释并且用水(25ml)、5％licl水溶液(3x25ml)和盐水(25ml)洗涤。将有机相经na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物溶解于ch2cl2(20ml)并且使其吸附在硅藻土上。在硅胶柱上使用戊烷中的1-5％etoac作为流动相来纯化该产物，以得到呈白色固体的3(ii)(1.17g，61％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.56(t,j＝1.8hz,2h),7.24(d,j＝1.8hz,4h),4.15(q,j＝7.1hz,4h),3.11(s,4h),1.20(t,j＝7.2hz,6h)。13i)nmr(101mhz,cdcl3):δ170.0,139.9,132.8,132.0,122.7,61.9,60.0,39.3,13.9。hrms-esi：c21h20br4nao4+[m+na]+计算值：674.7987，实测值：674.79612,2-双(萘-2-基-甲基)丙二酸二乙酯-3(iv)在0℃下向丙二酸二乙酯(3.44g，21.5mmol)于15mlch2cl2中的搅拌溶液中添加dbu(3.3ml，22.6mmol)。将反应混合物搅拌5min，之后添加2-(溴甲基)萘(5g，22.6mmol)。使该反应物达到室温并且将其搅拌过夜。将反应物浓缩并且分离呈棕色油状物的粗产物。将油状物溶解于etoac(30ml)中并且用水(2x30ml)、10％柠檬酸(30ml)、10％nahco3(30ml)和盐水(30ml)洗涤。将有机相经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到4.83g几乎纯的单烷基化丙二酸二乙酯。在0℃下向nah(774mg，32,2mmol)于无水thf(15ml)中的悬浮液中逐滴添加thf(15ml)中的溶液形式的2-(萘-2-基甲基)丙二酸二乙酯(4,8g)。将所得混合物搅拌10min，之后添加2-萘基甲基溴(5g，22.6mmol)。使该反应物达到室温并且将其搅拌过夜。在冰浴中冷却该反应混合物，用10％柠檬酸溶液淬灭过量nah并且将反应混合物浓缩。然后将粗产物溶解于etoac中并且用10％柠檬酸溶液(3x30ml)、10％nahco3溶液(2x30ml)和盐水(30ml)洗涤。将有机相经na2so4干燥，过滤并浓缩，以得到粗制品3(iv)(7.35g，78％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.85-7.80(m,2h),7.77(d,j＝8.1hz,4h),7.65(d,j＝1.7hz,2h),7.49-7.43(m,4h),7.32(dd,j＝8.5,1.7hz,2h),4.14(q,j＝7.1hz,4h),3.45(s,4h),1.14(t,j＝7.1hz,6h)。hrms-esi：c29h29o4+[m+h]+计算值：441.2060，实测值：441.2059。2,2-双(4-氟萘-1-基-甲基)丙二酸二乙酯-3(v)根据一般程序，向丙二酸二乙酯(1.3g，8.16mmol)于k2co3(3.36g，24.3mmol)上的dmf(10ml)中的搅拌溶液中添加4-f-萘-1-基溴甲烷(4g，16.7mmol)。将反应物在室温下保持搅拌过夜。将反应混合物用etoac(30ml)稀释并且用水(3x20ml)、5％licl水溶液(20ml)和盐水(20ml)洗涤。将有机相经na2so4干燥，过滤并浓缩。在圆底烧瓶中，将棕色固体粗产物溶解于温热etoh中，用铝箔加盖并且在室温下静置4天。在静置一小时后，产物以白色固体形式从棕色溶液中沉淀出来(1.6g，41％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.18-8.08(m,2h),8.05-7.95(m,2h),7.57-7.46(m,4h),7.36(dd,j＝8.0,5.5hz,2h),7.04(dd,j＝10.2,8.0hz,2h),3.81(s,4h),3.75(q,j＝7.2hz,4h),0.85(t,j＝7.1hz,6h)。13i)nmr(101mhz,cdcl3):δ171.3,158.1(d,j＝251.4hz),134.2(d,j＝4.2hz),128.9(d,j＝4.6hz),127.6(d,j＝8.2hz),126.8,125.9(d,j＝2.1hz),124.1-123.9(m),121.2(d,j＝6.0hz),108.9(d,j＝19.7hz),61.5,59.8,35.5,13.6。hrms-esi：c29h26(iv)2nao4+[m+na]+计算值：499.1691，实测值：499.1689。4.2.2.2,2-双(3,5-双(三氟甲基)苄基)丙二酸二乙酯-3(vi)根据一般程序，向dem(490mg，3.1mmol)于cs2co3(2.2g，6.83mmol)上的dmf(5ml)中的搅拌溶液中添加1-(溴甲基)-3,5-双(三氟甲基)苯(2g，6.51mmol)。将反应物在室温下保持搅拌过夜。将反应混合物用etoac(30ml)稀释并且用水(25ml)、5％licl水溶液(3x25ml)和盐水(25ml)洗涤。将有机相经na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物溶解于ch2cl2(20ml)并且使其吸附在硅藻土上。在硅胶柱上使用戊烷中的1-5％etoac作为流动相来纯化该产物，以得到呈白色固体的3(vi)(0.89g，63％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.79(s,2h),7.71-7.54(m,4h),4.10(q,j＝7.1hz,4h),3.32(s,4h),1.13(t,j＝7.1hz,6h)。13i)nmr(101mhz,cdcl3):δ169.8,138.5,131.8(q,j＝33.3hz),130.9-130.2(m),123.3(q,j＝272.7hz),121.5(p,j＝3.9hz),62.2,60.3,40.3,13.8。hrms-esi：c25h19f12o4-[m-h]–计算值：611.1098，实测值：611.10975,5-双(4-叔丁基苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮-4(i)向室温下的脲(6.63g，110mmol)于无水dmf(20ml)中的搅拌溶液中添加nah(660mg，27.5mmol)并且将反应物搅拌5min。将3(i)(5(v)，11mmol)于无水dmf(20ml)中的溶液逐滴添加到反应混合物中并且将反应物搅拌过夜。将反应混合物用etoac(20ml)稀释并且用10％柠檬酸(100ml)、10％nahco3(50ml)、盐水(50ml)、水(20ml)和盐水(2x50ml)洗涤。将有机相经na2so4干燥，过滤并浓缩。用自动化快速色谱法(庚烷/etoac)纯化粗产物，得到4.09g(88％)呈白色粉末的产物4(i)。1hnmr(400mhz,meod4):δ7.26(d,j＝7.7hz,2h),7.05(d,j＝7.6hz,2h),3.31(s,6h,overlapmeod),1.24(s,18h)。13i)nmr(101mhz,meod4):δ174.2,151.5*,133.5,130.4,126.4,61.4,45.0,35.3,31.7。*两个信号的假定重叠hrms-esi：c26h31n2o3-[m-h]-计算值：419.2340，实测值：419.2335。5,5-双(3,5-二溴苄基)嘧啶-2,4,6-(1h,3h,5h)-三酮-4(ii)向脲(1.83g，2.79mmol)于无水dmf(15ml)中的搅拌溶液中添加nah(183mg，7.6mmol)并且将所得溶液搅拌10min，之后添加3(ii)(2.0g，3.05mmol)。将所得混合物搅拌过夜。将反应物用etoac(50ml)稀释，用10％柠檬酸溶液(3x25ml)、10％nahco3(2x30ml)和盐水(30ml)洗涤。将有机相经na2so4干燥，过滤并浓缩。将白色固体溶解于氯仿(25ml)中并且再次浓缩，通过快速色谱法纯化，以得到4(ii)(1.52g，88％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.82(nh,s,2h),7.58(t,j＝1.8hz,2h),7.21(d,j＝1.5hz,4h),3.32(s,4h)。13i)nmr(101mhz,cdcl3):δ170.0,146.4,137.7,134.2,131.5,123.6,59.9,43.4。hrms-esi：c18h1179br4n2o3-[m-h]–计算值：618.7509，实测值：618.7501。5,5-双((萘-2-基)甲基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮-4(iv)在室温下将nah(9mg，0.37mmol)添加到脲(91mg，1.49mmol)于无水dmf(3ml)中的搅拌溶液中。将反应混合物搅拌10min，之后缓慢添加3(iv)(66mg，0.15mmol)并且将反应物搅拌过夜。将反应混合物用etoac(20ml)稀释，并且用水(4x20ml)洗涤，随后用盐水(20ml)洗涤。将有机相经na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物溶解于chcl3中并且吸附至硅藻土，之后在硅胶柱上使用chcl3中的0-5％etoac作为流动相进行纯化，以得到4(iv)(50mg，82％)。1hnmr(400mhz,cd3od):δ7.76-7.70(m,4h),7.69(d,j＝8.6hz,2h),7.62(s,2h),7.44-7.36(m,4h),7.26(dd,j＝8.4,1.7hz,2h),3.60(s,4h)。13i)nmr(101mhz,cd3od):δ173.2,149.5,133.8,133.1,132.8,129.1,128.7,128.1,127.9,127.8,126.6,126.4,60.8,45.1。hrms-esi：c26h19n2o3-[m-h]–计算值：407.1417，实测值：407.14005,5-双((4-氟萘-1-基)甲基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮-4(v)向脲(630mg，10.49mmol)于无水dmf(4ml)中的搅拌溶液中添加nah(76mg，3.16mmol)并且将所得溶液搅拌10min，之后缓慢添加3(v)(500mg，1.05mmol)。将所得混合物搅拌过夜。将反应混合物用25mletoac稀释并且用4x50ml水洗涤，随后用20ml盐水洗涤。将有机相经na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物溶解于chcl3中并且使其吸附至硅藻土，之后在硅胶柱上使用chcl3中的0-5％etoac作为流动相进行纯化，以得到4(v)(430mg，92％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.23(d,j＝8.5hz,2h),8.14-8.04(m,2h),7.64-7.49(m,4h),7.46(s,2h),7.29-7.26(m,2h),7.00(dd,j＝9.9,8.1hz,2h),4.05(s,4h)。13i)nmr(101mhz,cdcl3):δ171.4,158.7(d,j＝253.3hz),146.8,133.3(d,j＝4.5hz),128.0(d,j＝8.7hz),127.4,126.7(d,j＝4.7hz),126.5(d,j＝1.9hz),124.4-124.1(m),121.3(d,j＝6.2hz),109.1(d,j＝20.1hz),59.8,40.0。hrms-esi：c26h19n2o3-[m-h]–计算值：407.1401，实测值：407.14144.2.3.5,5-双(3,5-双(三氟甲基)苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮-4(vi)向脲(1.3g，21.6mmol)于20ml无水dmf中的溶液中添加nah(128mg，5.3mmol)并且将所得溶液搅拌10min，之后添加3(vi)(1.0g，1.7mmol)。将所得混合物搅拌过夜。将反应物用etoac9(50ml)稀释，用10％柠檬酸溶液(3x30ml)、10％nahco3(2x20ml)和盐水(30ml)洗涤。将有机相经na2so4干燥，过滤并浓缩。通过自动化快速色谱法纯化粗制品,以得到呈白色粉末的产物4(vi)(0.27g，27％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.82(s,2h),7.73(s,2h),7.62-7.57(m,4h),3.57(s,4h)。13i)nmr(101mhz,cdcl3):δ169.8,146.1,136.3,132.6(q,j＝33.6hz),130.4-129.7(m),122.0(q,j＝272.8hz),122.9-122.2(m),59.9,43.5。hrms-esi：c22h11f12n2o3-[m-h]–计算值：579.0584，实测值：579.0583。1,3-双(4-溴丁基)-5,5-双(4-叔丁基苄基)-嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮-5(i)向室温下的4(i)(3.88g，9.23mmol)于dmf(50ml)中的搅拌溶液中添加k2co3(5.12g，37mmol)和1,4-二溴丁烷(10.9ml，92.5mmol)。将反应混合物搅拌过夜。将反应混合物用etoac(100ml)稀释，并且用水(100ml)洗涤。使用自动化快速色谱法纯化粗产物，得到呈白色粉末的产物5(i)(2.60g，40％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.22(d,j＝7.8hz,4h),6.98(d,j＝7.9hz,4h),3.60(t,j＝6.9hz,4h),3.41(s,4h),3.33(t,j＝6.4hz,4h),1.56(p,j＝7.3hz,4h),1.42(p,j＝7.7hz,4h),1.25(s,18h)。13i)nmr(101mhz,cdcl3):δ170.9,150.7,149.9,131.9,129.2,125.5,60.7,45.0,40.7,34.5,32.9,31.4,29.5,26.2。hrms-esi：c34h4679br2n2nao3+计算值：711.1774，实测值：711.1773。1,3-双(4-溴丁基)-5,5-双(3,5-二溴苄基)-嘧啶-2,4,6-(1h,3h,5h)-三酮-5(ii)向4(ii)(300mg，0.48mmol)于dmf(6ml)中的搅拌溶液中添加k2co3(265mg，1.92mmol)和1,4-二溴丁烷(0.57ml，4.81mmol)。搅拌反应，直至通过tlc(chcl3中的5％etoac)指示完成。将反应混合物用etoac(25ml)稀释，并且过滤掉k2co3。将有机相用10％柠檬酸溶液(30ml)、nahco3(30ml)、水(3x30ml)和盐水(30ml)洗涤，用na2so4干燥，过滤并浓缩，得到油状物，该油状物缓慢转变成白色结晶。将粗产物溶解于chcl3(30ml)中并且使其吸附到硅藻土上，之后在硅胶柱上使用戊烷:ch2cl2(7:3至1:1)纯化，以得到呈白色粉末的5(ii)(347mg，80％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.54(d,j＝1.8hz,2h),7.14(d,j＝1.7hz,4h),3.65(t,j＝7.4hz,4h),3.38(t,j＝6.7hz,4h),3.33(s,4h),1.77-1.61(m,4h),1.58-1.43(m,4h)。13i)nmr(101mhz,cdcl3):δ169.9,149.1,138.4,133.9,131.3,123.4,59.9,44.2,41.3,32.7,30.0,26.7。hrmsesi：c26h2679br381br3cln2o3-[m+cl]-计算值：928.6671，实测值：928.66691,3-双(4-溴丁基)-5,5-双(3,5-二叔丁基苄基)-嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮-5(iii)向4(iii)(0.86g，1.62mmol)于dmf中的搅拌溶液10中添加k2co3(1.2g，8.9mmol)。将反应混合物搅拌5min，之后添加1,4-二溴丁烷(1.76ml，14.8mmol)。搅拌反应，直至通过tlc(chcl3中的5％etoac)指示完成。然后将反应混合物用etoac(15ml)稀释，并且过滤掉k2co3。将有机相用10％柠檬酸溶液(30ml)、nahco3(30ml)、水(3x30ml)和盐水(30ml)洗涤，用na2so4干燥，过滤并浓缩。通过自动化快速色谱法纯化粗制品,以得到产物5(iii)(0.64g，74％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.26(t,j＝1.9hz,2h),6.89(d,j＝1.8hz,4h),3.59*(t,j＝7.5hz,4h),3.46(s,4h),3.23(t,j＝6.7hz,4h),1.51(p,j＝6.8hz,4h),1.35-1.23(m,40h)。13i)nmr(101mhz,cdcl3):δ171.0,151.1,150.0,134.4,123.7,121.5,60.5,46.5,40.9,34.8,32.4,31.6,29.7,26.5。*不规则三重峰。hrms-esi：c42h6279br2kn2o3+[m+k]+计算值：839.2759，实测值：839.2725。1,3-双(4-溴丁基)-5,5-双(萘-2-基-甲基)-嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮-5(iv)向4(iv)(200mg，0.49mmol)和k2co3(273mg，1.95mmol)于dmf(4ml)中的搅拌悬浮液中添加1,4-二溴丁烷(0.57ml，4.9mmol)。搅拌反应，直至通过tlc(chcl3中的5％etoac)指示完成。然后将反应混合物用etoac(25ml)稀释，并且过滤掉k2co3。将有机相用10％柠檬酸溶液(30ml)、nahco3(30ml)、水(3x30ml)和盐水(30ml)洗涤，用na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物溶解于chcl3(30ml)中并且使其吸附至硅藻土上，之后在硅胶柱上使用chcl3中的0-5％etoac进行纯化，以得到呈白色粉末的5(iv)(347mg，80％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.75(dd,j＝9.4,6.4hz,4h),7.70(d,j＝8.4hz,2h),7.57(s,2h),7.48-7.42(m,4h),7.18(dd,j＝8.5,1.7hz,2h),3.68(s,4h),3.53(t,j＝6.7hz,4h),2.99(t,j＝6.2hz,4h),1.35-1.19(m,8h)。13i)nmr(101mhz,cdcl3):δ170.9,149.6,133.3,132.7,132.5,128.8,128.5,127.8,127.7,127.2,126.6,126.3,60.8,45.8,40.9,32.8,29.5,26.3。hrmsesi：c34h3479br2n2nao3+[m+na]+计算值：699.0827，实测值：699.0839。1,3-双(4-溴丁基)-5,5-双(4-f-萘-1-基甲基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮-5(v)向4(v)(242mg，0.54mmol)和k2co3(300mg，2.17mmol)于dmf(5ml)中的搅拌悬浮液中添加1,4-二溴丁烷(0.64ml，5.4mmol)。用tlc检查反应(chcl3rf产物0,74，rf起始材料0,11)并且当不可见痕量起始材料时，将反应混合物用etoac(25ml)稀释并且过滤掉k2co3。将有机相用10％柠檬酸溶液(30ml)、nahco3(30ml)、水(3x30ml)和盐水(30ml)洗涤，用na2so4干燥，过滤并浓缩，得到呈油状物的粗制品。将粗产物溶解于chcl3(30ml)中并且使其吸附至硅藻土上，之后在硅胶柱上使用chcl3作为流动相进行纯化，以得到呈白色固定的5(v)(237mg，61％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.23(d,j＝8.6hz,2h),8.08(d,j＝8.3hz,2h),7.63(t,j＝7.7hz,2h),7.54(t,j＝7.6hz,2h),7.23(dd,j＝8.0,5.5hz,2h),7.00(dd,j＝9.8,8.1hz,2h),4.06(s,4h),3.33(t,j＝7.2hz,4h),3.05(t,j＝6.6hz,4h),1.34-1.12(m,4h),1.08-0.90(m,4h)。13i)nmr(101mhz,cdcl3):δ170.96,158.5(d,j＝253.3hz),149.4,133.2(d,j＝4.4hz),128.0(d,j＝8.4hz),127.4(d,j＝4.7hz),127.2,126.4(d,j＝2.1hz),124.8(d,j＝2.7hz),124.1(d,j＝15.7hz),121.1(d,j＝6.0hz),108.9(d,j＝20.0hz),60.0,40.9,40.7,32.7,29.3,25.9。hrmsesi：c34h3279br2f2n2nao3+[m+na]+计算值：735.0639，实测值：735.0622。4.2.4.1,3-双(4-溴丁基)-5,5-双(3,5-双(三氟甲基)-苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮-5(vi)向4(vi)(0.864g，1.57mmol)于dmf(20ml)中的搅拌溶液中添加k2co3(1.233g，8.93mmol)和1,4-二溴丁烷(1.76ml，14.9mmol)。将反应混合物搅拌48h，用etoac(30ml)稀释，并且用水(3x20ml)、5％licl溶液(3x20)和盐水(20ml)洗涤。使用自动化快速色谱法纯化粗产物，以得到呈白色粉末的5(vi)(0.64g，50％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.79(s,2h),7.53(s,4h),3.59(s,4h),3.57-3.51(m,4h),3.26(t,j＝6.8hz,4h),1.67-1.55(m,4h),1.43-1.29(m,4h)。13i)nmr(101mhz,cdcl3):δ169.4,148.4,136.9,132.2(q,j＝33.6hz),130.0-129.4(m),122.9(q,j＝272.9hz),122.1(p,j＝3.8hz),59.7,44.3,41.1,31.7,29.6,26.1。hrms-esi：c30h2679br3f12n2o3-[m+br]-计算值：926.9308，实测值：926.9308。1,3-双(4-叠氮基丁基)-5,5-双(4-叔丁基苄基)-嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮-6(i)向溴5(i)(2.40g，3.47mmol)于dmf(15ml)中的搅拌溶液中添加nan3(678mg，10.4mmol)并且搅拌18h。将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(4x50ml)洗涤。将有机相经na2so4干燥，过滤并浓缩。分离呈透明油状物的粗产物6(i)(2.16g，100％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.20(d,j＝7.7hz,4h),6.97(d,j＝7.8hz,4h),3.59(s,4h),3.40(s,4h),3.21(s,4h),1.37-1.28(m,8h),1.24(s,18h)。13i)nmr(101mhz,cdcl3):δ171.0,150.8,150.0,132.0,129.3,125.5,60.7,50.9,45.1,41.1,34.6,31.4,26.0,24.8。hrms-esi：c34h46n8o3na+[m+na]+计算值：637.3577，实测值：637.3583。1,3-双(4-叠氮基丁基)-5,5-双(3,5-二溴苄基)嘧啶-2,4,6-(1h,3h,5h)-三酮-6(ii)向5(ii)(239mg，0,26mmol)于dmf(3ml)中的搅拌溶液中添加nan3(52mg，0.8mmol)。搅拌反应，直至通过tlc(chcl3中的5％etoac)指示完成。然后，将反应混合物用etoac(15ml)稀释，并且用水(2x20ml)洗涤。将有机相经na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物溶解于chcl3中并且使其吸附至硅藻土上，之后在硅胶柱上使用chcl3中的0-5％etoac进行纯化，以得到6(ii)(194mg，91％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.54(s,2h),7.14(s,4h),3.73-3.58(m,4h),3.33(s,4h),3.31-3.22(m,4h),1.58-1.29(m,8h)。13i)nmr(101mhz,cdcl3):δ169.9,149.1,138.4,133.8,131.4,123.3,59.9,50.9,44.2,41.6,26.1,25.3。hrms-esi：c26h2679br4(ii)ln8o3-[m+cl]-计算值：848.8555，实测值：848.8564。1,3-双(4-叠氮基丁基)-5,5-双(3,5-二叔丁基苄基)嘧啶-2,4,6-(1h,3h,5h)-三酮-6(iii)向5(iii)(630mg，110.78mmol)于dmf(10ml)中的搅拌溶液中添加nan3(140mg，2.15mmol)。将反应物搅拌过夜。当根据ms达到完全转化时，将反应混合物用etoac(50ml)稀释，并且用水4x50ml洗涤。将有机相经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物6(iii)(463mg，80％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.25(t,j＝1.9hz,2h),6.87(d,j＝1.7hz,4h),3.56(t,j＝7.2hz,4h),3.45(s,4h),3.14(t,j＝6.5hz,4h),1.25(s,44h)。13i)nmr(101mhz,cdcl3):δ171.1,151.1,150.0,134.4,123.8,121.6,60.6,50.8,46.5,41.3,34.8,31.6,25.9,25.1。hrms-esi：c42h62n8nao3+[m+na]+计算值：749.4838，实测值：749.4838。1,3-双(4-叠氮基丁基)-5,5-双(萘-2-基)嘧啶-2,4,6-(1h,3h,5h)-三酮-6(iv)向5(iv)(509mg，0.75mmol)于dmf(3ml)中的搅拌溶液中添加nan3(146mg，2.25mmol)。搅拌反应，直至通过tlc(chcl3中的5％etoac)指示完成。然后，将反应混合物用etoac(20ml)稀释，并且用水(3x20ml)洗涤。将有机相经na2so4干燥，过滤并浓缩。将粗产物溶解于chcl3中并且使其吸附至硅藻土，之后在硅胶柱上使用chcl3中的0-5％etoac进行纯化，以得到6(iv)(194mg，91％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.80-7.71(m,4h),7.68(d,j＝8.4hz,2h),7.57(s,2h),7.51-7.41(m,4h),7.17(d,j＝8.4hz,2h),3.68(s,4h),3.52(t,j＝7.0hz,4h),2.85(t,j＝6.6hz,4h),1.14(p,j＝7.4hz,4h),1.02(p,j＝7.0hz,4h)。13i)nmr(101mhz,cdcl3):δ170.9,149.6,133.4,132.7,132.5,128.8,128.5,127.8,127.7,127.2,126.6,126.3,60.8,50.7,45.8,41.2,25.8,24.9。hrms-esi：c34h34n8nao3+[m+na]+计算值：625.2646，实测值：625.2647。1,3-双(4-叠氮基丁基)-5,5-双((4-氟萘-1-基)甲基)嘧啶-2,4,6-(1h,3h,5h)-三酮-6(v)向5(v)(166mg，0.23mmol)于dmf(3ml)中的搅拌溶液中添加nan3(45mg，0.69mmol)。将反应搅拌过夜，直至通过tlc(chcl3)指示完成。然后，将反应混合物用etoac(20ml)稀释并且用水(3x30ml)和盐水(30ml)洗涤。将有机相经na2so4干燥，过滤并浓缩，以得到6(v)(142mg，95％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.23(d,j＝8.6hz,2h),8.08(d,j＝8.3hz,2h),7.62(t,j＝7.6hz,2h),7.54(t,j＝7.5hz,2h),7.22(t,j＝6.6hz,2h),6.98(t,j＝9.0hz,2h),4.06(s,4h),3.33(t,j＝6.8hz,4h),2.94(t,j＝6.4hz,4h),1.10-0.74(m,8h)。13i)nmr(101mhz,cdcl3):δ170.9,158.5(d,j＝253.4hz),149.4,133.2(d,j＝4.4hz),127.9(d,j＝8.5hz),127.4(d,j＝4.6hz),127.2,126.4(d,j＝1.9hz),124.8(d,j＝2.6hz),124.1(d,j＝15.7hz),121.1(d,j＝6.1hz),108.8(d,j＝20.0hz),60.0,50.7,41.1,40.7,25.6,24.4。hrms-esi：c34h32clf2n8o3-[m+cl]–计算值：673.2259，实测值：673.22594.2.5.1,3-双(4-叠氮基丁基)-5,5-双(3,5-双(三氟甲基)-苄基)嘧啶-2,4,6-(1h,3h,5h)-三酮-6(vi)向5(vi)(101mg，0.12mmol)于dmf(1ml)中的搅拌溶液中添加nan3(23mg，0.35mmol)。将反应物搅拌过夜。当根据ms达到完全转化时，将反应混合物用etoac(15ml)稀释，并且用水(3x20ml)洗涤。将有机相经na2so4干燥，过滤并浓缩，以得到呈白色粉末的粗制品6(vi)(63mg，68％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.78(s,2h),7.53(s,4h),3.59(s,4h),3.57-3.48(m,4h),3.19(t,j＝6.7hz,4h),1.42-1.31(m,4h),1.31-1.20(m,4h)。13i)nmr(101mhz,cdcl3):δ169.6,148.6,137.0,132.3(q,j＝33.6hz),129.9,123.0(q,j＝272.9hz),122.8-121.9(m),59.8,50.6,44.5,41.6,26.0,24.9。hrms-esi：c30h26(ii)lf12n8o3-[m+cl]–计算值：809.1630，实测值：809.1622。1,3-双(4-氨基丁基)-5,5-双(4-叔丁基苄基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮-7(i)向6(i)(2.16g，3.52mmol)和et3n(0.98ml，7.05mmol)于i-proh:thf(1:1，10ml)中的搅拌溶液中添加1,3-丙烷二硫醇(0.1ml，0.99mmol)。将混合物搅拌5min，之后添加nabh4(270mg，7.14mmol)。在72h反应时间之后，添加boc2o(1.69g，7.74mmol)和k2co3(1.94g，14.0mmol)并且将反应物搅拌18h并蒸发，之后添加etoac(20ml)和水(15ml)并搅拌30min。将有机相用水(3x15ml)和盐水(15ml)洗涤并浓缩。通过自动化快速色谱法纯化所得粗制品并且蒸发。将boc保护的中间体用ch2cl2(10ml)中的tfa(2.2ml，28.7mmol)脱保护18h。将反应混合物浓缩并通过rp自动化快速色谱法纯化粗产物并将其冻干，以得到呈tfa盐的7(i)(367mg，85％)。1hnmr(400mhz,cd3od):δ7.25(d,j＝7.1hz,4h),6.98(d,j＝7.2hz,4h),3.62-3.53(m,4h),3.39(s,4h),2.87(t,j＝7.4hz,4h),1.55-1.36(m,4h),1.36-1.15(m,22h)。13i)nmr(101mhz,cd3od):δ172.3,163.0(q,j＝34.4hz,tfa),151.9,151.0,133.5,130.3,126.5,118.2(q,j＝292.8hz,tfa),61.9,45.9,41.7,40.0,35.3,31.7,25.6,25.5。hrms-esi：c34h51n4o3+[m+h]+计算值：563.3956，实测值：563.3934。1,3-双(4-氨基丁基)-5,5-双(3,5-二溴苄基)甲基)-嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮-7(ii)向6(ii)(810mg，0.99mmol)和et3n(0.32ml，2.29mmol)于i-proh:thf(1:1，5ml)中的搅拌溶液中添加1,3-丙烷二硫醇(0.20ml，1.99mmol)。将混合物搅拌5min，之后添加nabh4(90mg，2.37mmol)。在48h反应时间之后，添加boc2o(650mg，2.97mmol)并且将反应混合物搅拌18h并蒸发。将粗混合物添加到etoac(15ml)和水(15ml)并搅拌30min。将有机相用水(3x15ml)和盐水(15ml)洗涤并浓缩。通过自动化快速色谱法纯化所得粗制品并且蒸发。将boc保护的中间体用ch2cl2(5ml)中的tfa(2ml，26mmol)脱保护18h。将反应混合物浓缩并通过rp自动化快速色谱法纯化粗产物并将其冻干，以得到呈tfa盐的7(ii)(374mg，38％)。1hnmr(400mhz,cd3od):δ7.66(s,2h),7.23(s,4h),3.68(t,j＝7.7hz,4h),3.43(s,4h),3.08-2.82(m,4h),1.76-1.48(m,4h),1.49-1.32(m,4h)。13i)nmr(101mhz,cd3od):δ171.2,163.01(q,j＝34.4hz,tfa),150.4,140.5,134.5,132.7,124.1,118.24(q,j＝293.3hz,tfa)。61.2,44.8,42.2,40.3,26.3,25.8。hrms-esi：c26h3179br4n4o3+[m+h]+计算值：762.9124，实测值：762.9124。1,3-双(4-氨基丁基)-5,5-双(3,5-二叔丁基苄基)-嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮-7(iii)向6(iii)(405mg，0.55mol)和et3n(0.16ml，1.15mmol)于i-proh:thf(1:1，6ml)中的搅拌溶液中添加1,3-丙烷二硫醇(0.12ml，1.15mmol)。将混合物搅拌5min，之后添加nabh4(44mg，1.16mmol)。在72h反应时间之后，添加boc2o(490mg，2.25mmol)并且将反应物再搅拌一个晚上，之后用etoac(10ml)和水(10ml)稀释并搅拌1h。将有机相用水(3x15ml)和盐水(15ml)洗涤并浓缩。通过自动化快速色谱法纯化所得粗制品并且蒸发。将boc保护的中间体用ch2cl2(5ml)中的tfa(1.7ml，22.2mmol)脱保护6h。将反应混合物浓缩并通过rp自动化快速色谱法纯化粗产物并将其冻干，以得到呈tfa盐的7(iii)(154mg，31％)。1hnmr(400mhz,cd3od):δ7.31(t,j＝1.5hz,2h),6.89(d,j＝1.6hz,4h),3.59(t*,4h),3.44(s,4h),2.78(t*,4h),1.40(p,j＝7.7hz,4h),1.26(s,36h),1.17(p,j＝7.6hz,4h)。13i)nmr(101mhz,cd3od):δ172.3,162.8(q,j＝34.7hz,tfa),152.3,151.1,135.8,124.7,122.6,118.1(q,j＝292.5hz,tfa),61.8,47.3,42.0,39.9,35.6,31.9,25.9,25.5。*不规则三重峰。hrms-esi：c42h67n4o3+[m+h]+计算值：675.5211，实测值：675.5211。1,3-双(4-氨基丁基)-5,5-双(萘-2-基-甲基)-嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮-7(iv)向6(iv)(438mg，0.73mmol)和et3n(0.22ml，1.59mmol)于i-proh:thf(1:1，4ml)中的搅拌溶液中添加1,3-丙烷二硫醇(0.1ml，0.99mmol)。将混合物搅拌5min，之后添加nabh4(68mg，1.81mmol)。在72h反应时间之后，添加boc2o(333mg，1.53mmol)和nahco3(244mg，2.90mmol)并且将反应物搅拌18h，之后通过硅藻土垫过滤并且浓缩。通过自动化快速色谱法纯化所得粗制品并且蒸发。将boc保护的中间体(305mg)用ch2cl2(5ml)中的tfa(2ml，26.1mmol)脱保护。当ms显示完全脱保护时，将反应混合物浓缩并且通过rp自动化快速色谱法纯化粗产物并将其冻干，以得到呈tfa盐的7(iv)(287mg，90％)。1hnmr(400mhz,cd3od):δ7.90-7.68(m,6h),7.60(s,2h),7.52-7.43(m,4h),7.19(d,j＝8.3hz,2h),3.70(s,4h),3.59-3.50(m,4h),2.56-2.37(m,4h),1.30-0.96(m,8h)。13i)nmr(101mhz,cd3od):δ172.2,162.8(q,j＝35.2hz,tfa),151.0,134.7,134.1,134.0,129.9,129.4,128.8,128.7,128.2,127.6,127.3,118.1(d,j＝292.3hz,tfa),62.0,46.6,41.7,39.8,25.6,25.5。hrms-esi：c34h39n4o3+[m+h]+计算值：551.3017，实测值：551.3020。1,3-双(4-氨基丁基)-5,5-双((4-氟萘-1-基)甲基)嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮-7(v)向6(v)(67mg，0.105mmol)和et3n(0.03ml，0.21mmol)于i-proh:thf(1:1，4ml)中的搅拌溶液中添加1,3-丙烷二硫醇(0.1ml，0.99mmol)。将混合物搅拌5min，之后添加nabh4(8mg，0.21mmol)。在72h反应时间之后，添加boc2o(48mg，0.22mmol)和nahco3(35mg，0.42mmol)并且将反应物搅拌18h，之后通过硅藻土垫过滤并且浓缩。通过自动化快速色谱法纯化所得粗制品并且蒸发。将boc保护的中间体(72mg)用ch2cl2(5ml)中的tfa(0.2ml，2.61mmol)脱保护。当ms显示完全脱保护时，将反应混合物浓缩并且通过rp自动化快速色谱法纯化粗产物并将其冻干，以得到呈tfa盐的7(v)(82mg，89％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.34(d,j＝7.9hz,2h),8.07(d,j＝7.7hz,2h),7.74-7.53(m,4h),7.38-7.19(m,2h),7.08(t,j＝8.9hz,2h),4.13(s,4h),3.39-3.33(m,4h),2.60(t,j＝6.8hz,4h),1.20-1.00(m,4h),0.94-0.71(m,4h)。13i)nmr(101mhz,cdcl3):δ172.2,163.11(q,j＝34.1hz,tfa),159.6(d,j＝251.5hz),150.8,134.5(d,j＝4.4hz),129.3(d,j＝4.5hz),128.4(d,j＝8.5hz),128.2,127.6(d,j＝1.1hz),126.3(d,j＝2.4hz),125.2(d,j＝15.6hz),121.5(d,j＝6.2hz),118.23(q,j＝292.8hz,tfa),109.76(d,j＝20.2hz),61.0,41.7,41.3,39.9,25.3,25.1。hrms-esi：c34h37(iv)2n4o3+[m+h]+计算值：587.2828，实测值：587.2828。4.2.2.1,3-双(4-氨基丁基)-5,5-双(3,5-双(三氟甲基)-嘧啶-2,4,6(1h,3h,5h)-三酮-7(vi)向6(vi)(63mg，0.81μmol)和et3n(0.034ml，0.24mmol)于i-proh:thf(1:1，2ml)中的搅拌溶液中添加1,3-丙烷二硫醇(0.10ml，0.99mmol)。将混合物搅拌5min，之后12添加nabh4(92mg，0.24mmol)。在48h反应时间之后，添加boc2o(70mg，0.32mmol)和k2co3(45mg，0.33mmol)并且将反应物再搅拌一个晚上，之后用etoac(10ml)和水(10ml)稀释并搅拌1h。将有机相用水(3x15ml)和盐水(15ml)洗涤并浓缩。通过自动化快速色谱法纯化所得粗制品并且蒸发。将boc保护的中间体用ch2cl2(5ml)中的tfa(2ml，26mmol)脱保护18h。将反应混合物浓缩并通过rp自动化快速色谱法纯化粗产物并将其冻干，以得到呈tfa盐的7(vi)(12mg，16％)。1hnmr(400mhz,cd3od):δ7.93(s,2h),7.68(s,4h),3.71(s,4h),3.61-3.54(m,4h),2.87-2.80(m,4h),1.57-1.46(m,4h),1.33-1.22(m,4h)。13i)nmr(101mhz,cd3od)δ170.9,150.1,139.4,133.0(q,j＝33.4hz,tfa),131.6-131.1(m),124.6(q,j＝272.1hz,tfa),123.0,61.1,44.8,42.3,40.0,25.9,25.7。hrms-esi：c30h31f12n4o3+[m+h]+计算值：723.2197，实测值：723.2161。1,1'-(4,4'-(5,5-双(4-叔丁基苄基)-2,4,6-三氧基二羟基嘧啶-1,3(2h,4h)-二基)双(丁烷-4,1-二基))二胍-8(i)向7(i)的tfa盐(129mg，0.16mmol)于thf(2ml)中的搅拌溶液中添加nahco3(68mg，0.81mmol)和n,n’-双-boc-1-脒基吡唑(200mg，0.64mmol)。将反应物在室温下搅拌48h。将反应混合物浓缩，将粗产物溶解于etoac(20ml)中并用10％柠檬酸溶液(2x20ml)、10％nahco3溶液(20ml)和盐水(20ml)洗涤。将有机相经na2so4干燥，过滤并浓缩。通过自动化快速色谱法纯化粗产物并且将所得boc保护的中间体用ch2cl2中的tfa(1ml)脱保护18h。将反应混合物浓缩并通过rp自动化快速色谱法纯化粗制品并将其冻干，以得到呈白色粉末的8(i)(16mg，11％)。1hnmr(400mhz,cd3od):δ7.24(d,j＝8.3hz,4h),6.98(d,j＝8.3hz,4h),3.58(t,j＝6.7hz,4h),3.39(s,4h),3.13(t,j＝6.6hz,4h),1.39-1.29(m,8h),1.24(s,18h)。13i)nmr(101mhz,cd3od)δ172.4,162.4(q,j＝35.6hz,tfa),158.7,151.9,151.2,133.4,130.3,126.4,117.9(q,j＝291.5hz,tfa),61.9,45.9,42.0,41.9,35.3,31.7,26.8,25.8。hrms-esi：c36h55n8o3+[m+h]+计算值：647.4393，实测值：647.4378。1,1'-(4,4'-(5,5-双(3,5-二溴苄基)-2,4,6-三氧基二羟基嘧啶-1,3(2h,4h)-二基)双(丁烷-4,1-二基))二胍-8(ii)向7(ii)的tfa盐(360mg，0.362mmol)于thf(5ml)中的搅拌溶液中添加nahco3(240mg，2.86mmol)和n,n’-双-boc-1-脒基吡唑(564mg，1.82mmol)。当ms显示完全鸟苷酸化时，将反应混合物过滤并浓缩。将粗产物溶解于etoac(20ml)中并用盐水(2x20ml)洗涤。将有机相经na2so4干燥，过滤并浓缩。通过自动化快速色谱法纯化粗产物并且将所得boc保护的中间体用ch2cl2(2ml)中的tfa(0.2ml)脱保护18h。将反应混合物浓缩并通过rp自动化快速色谱法纯化粗制品并将其冻干，以得到呈白色粉末的8(ii)(44mg，11％)。1hnmr(400mhz,cd3od):δ7.65(t,j＝1.8hz,2h),7.22(d,j＝1.7hz,4h),3.67(t,j＝7.2hz,4h),3.42(s,4h),3.20(t,j＝6.7hz,4h),1.52-1.36(m,8h).13i)nmr(101mhz,cd3od):δ171.3,163.0(q,j＝34.6hz,tfa),158.6,150.5,140.5,134.5,132.6,124.1,118.2(q,j＝292.7hz,tfa),61.2,44.9,42.6,42.1,27.0,26.4。hrms-esi：c28h3579br281br2n8o3+[m+h]+计算值：850.9525，实测值：850.9532。1,1'-(4,4'-(5,5-双(3,5-二叔丁基苄基)-2,4,6-三氧基二羟基嘧啶-1,3(2h,4h)-二基)双(丁烷-4,1-二基))-二胍-8(iii)向7(iii)的tfa盐(118mg，0.13mmol)于thf(3ml)中的搅拌溶液中添加n,n’-双-boc-1-脒基吡唑(245mg，0.79mmol)和nahco3(49mg，0.59mmol)并在室温下搅拌，直至tlc(chcl3)显示完全转化。将反应混合物用etoac(5ml)稀释并用10％柠檬酸溶液和盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩。通过自动化快速色谱法纯化粗制品并且将所得boc保护的中间体用ch2cl2(1.5ml)中的tfa(1.5ml)脱保护4h。将反应混合物浓缩并通过rp自动化快速色谱法纯化粗制品并将其冻干，以得到呈白色粉末的8(iii)(44mg，34％)。1hnmr(400mhz,cd3od):δ7.30(t,j＝1.8hz,2h),6.89(d,j＝1.8hz,4h),3.58*(t,j＝7.5hz,4h),3.44(s,4h),3.06(t,j＝7.0hz,4h),1.38-1.14(m,44h)。13i)nmr(101mhz,cd3od):δ172.4,162.8(q,j＝35.2hz,tfa),158.6,152.3,151.3,135.8,124.6,122.6,118.0(q,j＝292.3hz,tfa),61.7,47.3,42.4,41.8,35.6,31.9,26.7,26.2。*不规则三重峰。hrms-esi：c44h71n8o3+[m+h]+计算值：759.5644，实测值：759.5637。1,1'-(4,4'-(5,5-双(萘-2基-甲基)-2,4,6-三氧基二羟基嘧啶-1,3(2h,4h)-二基)双(丁烷-4,1-二基))-二胍-8(iv)向7(iv)的tfa盐(54mg，0.069mmol)于thf(4ml)中的搅拌溶液中添加n,n’-双-boc-1-脒基吡唑(63mg，0.20mmol)和nahco3(41mg，0.48mmol)并在室温下搅拌，直至tlc(chcl3)显示完全转化。将反应混合物用etoac(5ml)稀释，并用10％柠檬酸溶液(2x10ml)和盐水(10ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩。将boc保护的中间体溶解于chcl3中并且使其吸附至硅藻土上，之后在硅胶柱上使用chcl3作为流动相进行纯化。将boc保护的中间体(总计104mg中的64mg，0.057mmol)用ch2cl2(4ml)中的tfa(0.2ml)脱保护，直至tlc显示完全转化。将反应混合物浓缩并且通过rp自动化快速色谱法纯化并将其冻干，以得到呈白色粉末的8(iv)(60mg，99％)。1hnmr(400mhz,cd3od):δ7.85-7.69(m,6h),7.59(s,2h),7.53-7.40(m,4h),7.20(dd,j＝8.4,1.8hz,2h),3.69(s,4h),3.54(t,j＝7.1hz,4h),2.80(t,j＝7.1hz,4h),1.21-1.08(m,4h),1.08-0.98(m,4h)。13i)nmr(101mhz,cd3od):δ172.3,163.1(q,j＝34.3hz,tfa),158.5,151.0,134.7,134.1,134.0,129.8,129.4,128.7,128.6,128.3,127.6,127.3,118.2(q,j＝293.0hz,tfa),62.0,46.6,42.1,41.8,26.6,25.9。hrms-esi：c36h43n8o3+[m+h]+计算值：635.3450，实测值：635.3448。1,1'-(4,4'-(5,5-双((4-氟萘-1-基)甲基)-2,4,6-三氧基二羟基嘧啶-1,3(2h,4h)-二基)双(丁烷-4,1-二基))-二胍-8(v)向7(v)的tfa盐(35mg，43μmol)于thf(3ml)中的搅拌溶液中添加n,n’-双-boc-1-脒基吡唑(38mg，122μmol)和nahco3(25mg，0.29mmol)并在室温下搅拌，直至tlc(chcl3)显示完全转化。将反应混合物用etoac(5ml)稀释并用10％柠檬酸溶液和盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩。将boc保护的中间体溶解于chcl3中并且使其吸附至硅藻土上，之后在硅胶柱上使用chcl3作为流动相进行纯化。将boc保护的中间体(总计95mg中的41mg，0.038mmol)用ch2cl2(4ml)中的tfa(0.1ml)脱保护，直至tlc显示完全转化。将反应混合物浓缩并且通过rp自动化快速色谱法纯化并将其冻干，以得到呈白色粉末的8(v)(20mg，52％)。1hnmr(400mhz,cd3od):δ8.32(d,j＝8.6hz,2h),8.06(d,j＝7.9hz,2h),7.71-7.55(m,4h),7.25(dd,j＝8.0,5.5hz,2h),7.06(dd,j＝10.2,8.1hz,2h),4.12(s,4h),3.35(t,j＝7.2hz,4h),2.87(t,j＝7.1hz,4h),1.00(p,j＝7.2hz,4h),0.86(p,j＝7.4,6.8hz,4h)。13i)nmr(101mhz,cd3od):δ172.2,163.1(q,j＝34.1hz,tfa),159.6(d,j＝251.6hz),158.5,150.9,134.5(d,j＝4.3hz),129.2(d,j＝4.6hz),128.9(d,j＝8.5hz),128.2,127.6(d,j＝1.6hz),126.2(d,j＝2.5hz),125.2(d,j＝15.8hz),121.5(d,j＝6.2hz),118.2(q,j＝292.8hz,tfa),109.7(d,j＝20.2hz),60.9,42.1,41.8,41.4,26.5,25.4。hrms-esi：c36h41f2n8o3+[m+h]+计算值：671.3264，实测值：671.3244。生物测试方法最小抑制浓度(mic)试验用多至100％dmso制备测试衍生物的工作溶液并将其保存在-20℃下。如果需要，在测试之前将这些溶液加热至40-80℃，以促进完全溶解。在所有制备的稀释液中使用重蒸馏水。测试系列中dmso的最终浓度≤1％并且不会影响测定结果。根据临床和实验室标准委员会，"methodsfordilutionantimicrobialsisceptibilitytestsforbacteriathatgrawaerobically[用于需氧生长细菌的稀释抗微生物剂敏感性测试的方法]",approvedstandardm07-a9[批准标准m07-a9]，第2012版(具有如igumnova等人(bioorgmedchem[生物有机与药物化学],2016,24(22),5884-5894)所述的修改，将微量稀释敏感性测试用于mic测定。简言之，将细菌接种物在米勒-辛顿肉汤(mueller-hintonbroth，mhb，美国difco实验室)中调节至大约2.5-3x104个细胞/ml，并且以1:1比率与测试衍生物一起在聚苯乙烯96孔平底微孔板(nunc，德国罗斯基勒(roskilde,denmark))中孵育。包括阳性生长对照(没有测试衍生物)和阴性对照(没有细菌)。参考抗生素是盐酸氧四环素(美国密苏里州圣路易斯的西格玛奥德里奇公司(sigmaaldrich,saintlouis,mo,usa))。在置于设定为35℃的孵育器中的envision酶标仪(microplatereader)(芬兰图尔库的珀金埃尔默公司(perkin-elmer,turku,finland))中孵育微孔板48h。mic值被定义为使得没有细菌生长的衍生物的最低浓度，如通过od600测量所测定的。三次平行地测试所有衍生物。针对临床分离株的抗微生物筛选如上文所解释测定mic，存在一些例外；由保存在室温下的dmso储备液制备测试衍生物的工作溶液，细菌接种物的密度增加40倍至1-1.2x106个细胞/ml，在脑心浸液肉汤(bhib，美国difco实验室)中孵育肠球菌，将微孔板孵育24h，并且四次平行地测试衍生物。溶血活性测定使用新鲜抽取的血液的肝素化部分(1000iu/ml)测定溶血。使用含有edta的测试管(意大利阿尔泽尔格兰德的吉玛公司(kima,arzergrande,italy))中所收集的血液测定血球容积(hct)。将肝素化血液用预先温热的pbs洗涤3x并调节至4％的最终hct。将dmso(50mm)中的衍生物添加到96孔聚丙烯v形底板(nunc，挪威奥斯陆的飞世尔科技公司(fisherscientific,oslo,norway))中并且连续稀释。测试浓度范围是500-4μm，其中dmso含量≤1％。将1％tritonx-100溶液用作100％溶血的阳性对照。包括1％dmso于pbs缓冲液中的溶液作为阴性对照。未检测到dmso毒性的迹象。将rbc(1％v/v最终浓度)添加到孔板中并且在37℃和800rpm下孵育1h。在离心(5min，3000g)之后，将每孔100μl转移至96孔平底板并且在545nm下使用酶标仪(versamaxtm，美国加利福尼亚州森尼维耳市的分子仪器公司(moleculardevices,sunnyvale,ca,usa))测量吸光度。将溶血百分比计算为衍生物处理的样品和表面活性剂处理的样品中的吸光度的比率，对于pbs背景进行校正。进行三种独立实验并且将ec50值表示为平均值。实施例2根据本发明的其他目标化合物在图4中陈述。实施例3-抗生物膜活性使用表皮葡萄球菌评定测试化合物对抑制生物膜形成的作用。将胰酶大豆肉汤(ts；德国达姆施塔特的默克公司(merck,darmstadt,germany))用作生长培养基。将ts中生长过夜的表皮葡萄球菌的培养物用含有1％葡萄糖的新鲜ts稀释(1:100)。将50μl等分试样转移至96孔微量滴定板中，并且添加50μl以不同浓度溶解于水中的测试化合物。在37℃下孵育过夜后，小心丢弃细菌上清液，之后用水洗涤各孔。将板干燥并通过在55℃下孵育1小时来固定生物膜，之后将连接至表面的细胞用0.1％结晶紫(100μl)染色5分钟。去除结晶紫溶液并且将板用水再洗涤一次并在55℃下干燥1小时。在添加70μl70％乙醇之后，将板在室温下孵育10分钟。通过目视检查板，观察到生物膜形成。mic被定义为没有可见生物膜形成的最低浓度。将用50μl水稀释的表皮葡萄球菌用作阳性对照，并且将具有50μl水的50μl溶血葡萄球菌悬浮液用作阴性对照。将50μl水和50μlts的混合物用作试验对照。化合物抗生物膜ic50(μg/ml)7(i)47(ii)67(iii)17(iv)47(v)48(i)18(ii)18(iii)28(iv)18(v)1实施例4-针对a2058细胞的抗癌活性在暴露于人类白种人转移性黑色素瘤(a2058，atcccrl-11147)细胞72小时之后，评价测试化合物的细胞毒性。使a2058细胞生长过夜(2,000个细胞/孔)，并且然后用以memearle's稀释的测试化合物(浓度范围)孵育24小时，该memearle's补充有庆大霉素(10μg/ml)、非必需氨基酸(1％)、丙酮酸钠(1mm)、l-丙氨酰基-l谷氨酰胺(2mm)，但不具有fbs(总体积为100μl)。添加十μl的celltiteraqueousone溶液试剂(美国威斯康辛州麦迪逊的普洛麦格公司(promega,madison,wi,usa))，并且然后将板进一步孵育1小时。在dtx880多模式检测器中在485nm下测量吸光度。结果计算为与阴性(试验培养基)和阳性(tritonx-100；西格玛奥德里奇公司)对照相比的存活％。化合物抗癌ic50(μg/ml)7(i)17(ii)17(iii)17(iv)17(v)18(i)28(ii)28(iii)338(iv)88(v)8还测试化合物9(以下)并且发现具有2.9μg/ml的ic50值。实施例4遵循“乙内酰脲合成的布赫勒-贝格斯反应(bucherer-bergsreaction)”合成乙内酰脲的方法为本领域中熟知的(例如bucherer,h.t.；brandt,w.j.prakt.chem.[实用化学杂志]1934,140,129；bucherer,h.t.；steiner,w.j.prakt.chem.[实用化学杂志]1934,140,291；以及bucherer,h.t.；lieb,v.a.j.prakt.chem.[实用化学杂志]1934,141,5)。下文所示的此方法可用于合成具有式(iii)的化合物。确切地说，如以下方案2所示，前体乙内酰胺可通过使适当取代的羰基化合物与氰化钾(kcn)和碳酸铵[(nh4)2co3]反应或者由氰醇和碳酸铵发生多组分反应来制备。为了引入阳离子r1基团，可以使用上文对于合成化合物7(i)-8(v)(即具有式(ii)的化合物)所讨论的相同方法。一种可能的合成示出在以下方案3中。当前第1页12