治疗膀胱癌的方法与流程

相关申请的交叉引用本申请要求2017年4月14日提交的美国临时申请号62/485,805，和2017年5月3日提交的美国临时申请号62/500,729的优先权，所有这些专利均全文以引用方式全文并入本文。本发明涉及使用溶瘤病毒，诸如cg0070治疗原位膀胱癌的方法。
背景技术：
：2016年诊断出大约77,000个尿膀胱癌的新病例。非肌肉浸润性膀胱癌(ta期、t1期或原位癌)占这些病例的70％至80％，然而肌肉浸润性疾病(t2期及以上)和转移性疾病构成剩余的20％至30％。膀胱癌根据其不同的细胞生长模式分为2种亚型：乳头状肿瘤和扁平肿瘤。原位癌是局限于膀胱表面层的扁平肿瘤。与ta期和t1期的乳头状肿瘤相比，膀胱cis更难以诊断，并且具有向肌肉浸润性膀胱癌进展的高风险。膀胱内卡介苗(bcg)是治疗膀胱cis的标准治疗。患者通常接受由每周bcg膀胱内灌注持续6周组成的诱导疗程，之后进行每月维持治疗持续6个月至12个月。然而，约30％至40％的患者对bcg治疗单一疗程无反应。在一个研究中，在2.5年的中间随访情况下，bcg治疗的cis患者的总体进展风险为约14％。参见，witjes,j.a.europeanurology45.2(2004):142-146。因为bcg失败的cis患者进展的机会显著，膀胱切除术(包括部分和根治性膀胱切除术)仍然是首选的治疗。然而，膀胱切除术与严重的副作用相关联，并且不利地影响患者的生活质量。此外，临床局限性膀胱癌的根治性膀胱切除术之后的复发风险高并且是分期依赖性的。参见，例如，bassip等人，j.urol.1999；161:1494-7。老年人和肾衰竭患者对于手术或化疗的耐受性较低，这对膀胱cis的治疗提出了附加的临床挑战。本文提及的所有出版物、专利、专利申请和公布的专利申请的公开内容据此全文以引用方式并入本文。技术实现要素：本申请提供了用于治疗个体的膀胱癌的方法、组合物(包括药物组合物)和药盒，所述方法、组合物和药盒包括膀胱内施用溶瘤病毒，例如cg0070。在一个方面，本文提供了一种治疗个体的膀胱癌的方法，所述方法包括在维持阶段期间每周一次向所述个体膀胱内施用有效量的溶瘤病毒持续三周，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在另一方面，本文提供了在个体中膀胱保留的方法，所述方法包括在维持期期间每周一次向个体膀胱内施用有效量的溶瘤病毒持续三周，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在根据上述方法中任一种所述的一些实施方案中，在所述维持期期间每六个月每周一次施用溶瘤病毒持续三周。在一些实施方案中，所述方法还包括在维持期之前的诱导期，其中所述诱导期包括每周一次向所述个体施用有效量的溶瘤病毒持续六周。在一些实施方案中，诱导期的开始和维持期的开始间隔约3个月。在一些实施方案中，诱导期的开始和维持期的开始间隔约6个月。在一些实施方案中，诱导期包括在治疗方案的第零个月和第三个月，每周一次向所述个体施用有效量的溶瘤病毒持续六周。本文还提供了一种治疗未接受经尿道膀胱肿瘤切除(turbt)的个体的ta或t1膀胱癌的方法，所述方法包括向所述个体膀胱内施用有效量的溶瘤病毒，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在本申请的一个方面，提供了一种治疗个体(诸如人类)的膀胱癌的方法，所述方法包括向所述个体膀胱内施用有效量的溶瘤病毒，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在一些实施方案中，个体仅患有原位膀胱癌。在一些实施方案中，个体不患有ta期或t1期并发乳头状癌。在一些实施方案中，个体患有原位膀胱癌和ta期或ta期的癌(cis+ta或cis+t1)。在一些实施方案中，个体患有ta或t1膀胱癌，而不是原位癌。在一些实施方案中，个体患有ta或t1膀胱癌并且未接受经尿道膀胱肿瘤切除(turbt)。在一些实施方案中，个体患有不可切除的ta期或t1期膀胱癌。在一些实施方案中，个体对bcg治疗无反应。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之后具有疾病复发。在一些实施方案中，个体在约6个月内bcg治疗失败。在一些实施方案中，个体是bcg难治的。在根据上述方法中任一种所述的一些实施方案中，个体尚未接受膀胱切除术。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术。在一些实施方案中，膀胱切除术是根治性膀胱切除术。在根据上述方法中任一种所述的一些实施方案中，所述溶瘤病毒在癌细胞中优先复制。在一些实施方案中，癌细胞在rb途径中有缺陷。在一些实施方案中，肿瘤特异性启动子为e2f-1启动子。在一些实施方案中，e2f-1启动子包含以seqidno:1示出的核苷酸序列。在根据上述方法中任一种所述的一些实施方案中，免疫相关分子选自gm-csf、il-2、il-12、干扰素、ccl4、ccl19、ccl21、cxcl13、tlr1、tlr2、tlr3、tlr4、tlr5、tlr6、tlr7、tlr8、tlr9、tlr10、rig-i、mda5、lgp2、和ltαβ。在一些实施方案中，免疫相关分子是gm-csf。在一些实施方案中，异源性基因可操作地连接至病毒启动子。在根据上述方法中任一种所述的一些实施方案中，所述溶瘤病毒选自腺病毒、单纯性疱疹病毒、牛痘病毒、腮腺炎病毒、新城疫病毒、脊髓灰质炎病毒、麻疹病毒、塞内卡谷病毒、柯萨奇病毒、呼肠孤病毒、水疱性口炎病毒、马拉巴病毒和弹状病毒、以及细小病毒。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒为溶瘤腺病毒。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒复制所必需的病毒基因选自e1a、e1b和e4。在一些实施方案中，异源性基因可操作地连接至e1启动子或e3启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒为血清5型腺病毒，其中天然腺病毒的内源性e1a启动子被人类e2f-1启动子替代，并且所述天然腺病毒的内源性e319kd编码区被编码人类gm-csf的核酸替代。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒为cg0070。在根据上述方法中任一种所述的一些实施方案中，所述溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒的剂量施用。在根据上述方法中任一种所述的一些实施方案中，每周施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，施用溶瘤病毒持续约1周至约6周。在根据上述方法中任一种所述的一些实施方案中，所述方法还包括在施用所述溶瘤病毒之前，向所述个体膀胱内施用转导增强剂。在一些实施方案中，所述转导增强剂为n-十二烷基-β-d-麦芽糖苷(ddm)。在根据上述方法中任一种所述的一些实施方案中，所述方法重复至少一次。在根据上述方法中任一种所述的一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在根据上述方法中任一种所述的一些实施方案中，溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一个方面，还提供了一种用于治疗个体(诸如人类)的膀胱癌的药物组合物，其中将所述药物组合物膀胱内施用于所述个体，并且其中所述药物组合物包含溶瘤病毒，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在一个方面，还提供了溶瘤病毒在制备用于治疗个体(诸如人类)的膀胱癌的药剂中的用途，其中将所述药剂膀胱内施用于个体，并且其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。根据随后的具体实施方式和所附权利要求书，本发明的这些方面和其他方面以及优点将变得显而易见。应当理解，本文所述的各个实施方案的一种、一些或所有特性可组合，以形成本发明的其他实施方案。附图说明图1是cg0070和野生型(wt)5型腺病毒的示意图。cg0070是基于血清5型腺病毒，但内源性e1a启动子和e319kd编码区分别被人类e2f-1启动子和人类gm-csf的cdna编码区替代。图2示出了在接受膀胱内cg0070疗法之后6个月时，患有各期高级非肌肉浸润性膀胱癌的患者中的完全反应(cr)百分比。具体实施方式本发明提供了通过向个体膀胱内施用有效量的溶瘤病毒(诸如cg0070)治疗个体的膀胱癌的方法和组合物。体外研究表明，使用条件性复制溶瘤病毒(诸如cg0070)可以是治疗膀胱癌的有效策略。rameshn,gey,ennistdl,zhum,minam,ganeshs,reddyps,yudc,cg0070，一种用于治疗膀胱癌的有条件复制粒细胞巨噬细胞菌落-刺激因子-武装溶瘤腺病毒(cg0070,aconditionallyreplicatinggranulocytemacrophagecolony-stimulatingfactor-armedoncolyticadenovirusforthetreatmentofbladdercancer)，《临床癌症研究》(clincancerres.),2006；12:305-13。然而，cg0070在某些患者群体中的意料不到的功效以及如本文所述的某些剂量给药方案的效果在先前是未知的。所述方法是膀胱保留、高度有效且对膀胱癌良好耐受的，包括先前标准治疗疗法失败的那些。在ii期临床试验中，发明人令人惊讶地发现，先前bcg疗法失败的患有纯cis的患者中72.2％在膀胱内cg0070疗法6个月之后具有完全反应(cr)。溶瘤病毒的治疗效果可使用溶瘤病毒作为单治疗剂，或不与免疫检查点调节子组合来实现。本文所述的方法和组合物尤其可用于患有高风险膀胱cis但拒绝接受膀胱切除术或不适合膀胱切除术的患者。因此，本申请的一个方面提供了一种治疗个体的膀胱癌的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用有效量的溶瘤病毒。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒为cg0070。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，个体对bcg治疗不反应或在bcg治疗之后具有疾病复发。还提供了可用于本文所述方法的组合物(诸如药物组合物)、药物、药盒和单位剂量。i.定义除非另有如下定义，否则本文所用的术语按照本领域的常用方法使用。如本文所用，“原位膀胱癌”，“膀胱cis”和“膀胱的原位癌”可互换使用以指膀胱癌的临床分期，其特征在于扁平(即非乳头状)病变，包括可涉及尿路上皮的全部或部分厚度的细胞学上的恶性肿瘤细胞。如本文所用，“治疗”是用于获得有益或期望的结果(包括临床结果)的方法。就本发明的目的而言，有益或期望的临床结果包括但不限于以下结果中的一种或多种：减轻膀胱癌导致的一种或多种症状、降低膀胱癌的程度、稳定膀胱癌(例如，预防或延缓膀胱癌恶化)、预防或延缓膀胱癌扩散(例如，癌细胞转移)、预防或延缓膀胱癌复发、降低膀胱癌的复发率、延缓或减慢膀胱癌的进展、改善膀胱癌状态、提供膀胱癌缓解(部分或全部)、减少治疗膀胱癌所需的一种或多种其他药物的剂量、延缓膀胱癌进展、增加生活质量和/或延长寿命。“治疗”还涵盖降低膀胱癌的病理后果。本发明的方法设想了治疗的任何一个或多个这些方面。本文所用的“先前疗法”是指不同于本文所述的方法并且在本文所述的方法之前制定的治疗方案，所述方法包括对溶瘤病毒的膀胱内施用。如本文所用，“存在风险”个体是存在发展膀胱cis风险的人类个体。“存在风险”的人类个体可患有或可不患有可检测的疾病，并且在本文所述的治疗方法之前可表现出或可尚未表现出可检测的疾病。“存在风险”表示人类个体具有一种或多种所谓的风险因素，所述风险因素是与本文所述的肌肉浸润性膀胱癌的发展相关的可测量参数。具有这些风险因素中一个或多个的人类个体比不具有这些风险因素的人类个体具有更高的发展膀胱cis的可能性。“辅助环境”是指其中个体具有患有膀胱癌病史并且一般(但不一定)对疗法有反应的临床环境，其包括但不限于手术(例如，经尿道膀胱肿瘤切除(“turbt”)、部分膀胱切除术或根治性膀胱切除术)、放疗和化疗。“辅助环境”中的治疗或施用是指后续治疗模式。“新辅助环境”是指在初始疗法/确定性疗法之前进行所述方法的临床环境。术语“个体”、“受试者”和“患者”在本文中可互换使用以描述哺乳动物，包括人类。个体包括但不限于人类、牛科动物、马科动物、猫科动物、犬科动物、啮齿动物或灵长类动物。在一些实施方案中，所述个体为人类。在一些实施方案中，所述个体患有膀胱cis。在一些实施方案中，所述个体需要治疗。如本文所用，“延缓”膀胱癌的发展意指推迟、阻碍、减慢、减缓、稳定和/或延迟膀胱癌的发展。这种延缓效果持续的时间可不同，具体取决于病史和/或被治疗的个体。对于本领域技术人员显而易见的是，充分或显著的延缓实际上可涵盖预防，即个体不发展疾病。“延缓”膀胱癌发展的方法是当与不使用该方法相比时，降低给定时间范围内疾病发展的可能性和/或降低给定时间范围内的膀胱癌程度的方法。此类比较通常基于临床研究，其使用统计学上显著的受试者数。膀胱癌的发展可使用标准方法检测到，其包括但不限于尿细胞学检查、尿道膀胱镜检查(ucs)、计算机断层扫描(ct扫描，例如螺旋ct扫描)、内镜超声(eus)、内镜逆行胰胆管造影(ercp)、腹腔镜检查或活检(例如，经皮穿刺活检或细针抽吸)。发展还可指可以是最初不可检测的并且包括复发的膀胱癌进展。如本文所用，“组合疗法”意指第一药剂与另一药剂联合施用。“联合”是指除了另一种治疗模式之外还施用一种治疗模式。因此，“联合”是指在将其他治疗模式递送给个体之前、期间或之后施用一种治疗模式。如本文所用，“单一疗法”是指不与另一种治疗模式(诸如免疫检查点调节子)联合，施用单一治疗剂，诸如溶瘤病毒。利用溶瘤病毒的单一疗法可与预处理剂(诸如转导增强剂(例如，ddm))一起施用，就本发明的目的而言，该预处理剂不被认为是不同的治疗模式。本文所用的术语“有效量”是指足以治疗特定障碍、病症或疾病，诸如改善、缓解、减轻和/或延缓其症状中的一种或多种的药剂(诸如本文所述的溶瘤病毒)或组合物的量。参见癌症，有效量包括足以引起肿瘤收缩和/或减少肿瘤生长速率(诸如抑制肿瘤生长)或预防或延缓癌症中其他不希望的细胞增殖的量。在一些实施方案中，有效量为足以延缓膀胱癌的发展的量。在一些实施方案中，有效量为足以预防或延缓复发的量。在一些实施方案中，有效量为足以降低个体中的复发率的量。在一些实施方案中，有效量为足以抑制个体中的肿瘤癌细胞转移的量。有效量可在一次或多次施用中进行施用。药剂或组合物的有效量可：(i)降低癌细胞的数量；(ii)降低肿瘤尺寸；(iii)在一定程度上抑制、减缓、减慢并优选阻止癌细胞浸润到周边器官中；(iv)抑制(即，在一定程度上减慢并优选阻止)肿瘤癌细胞转移；(v)抑制肿瘤生长；(vi)预防肿瘤的发生和/或复发；(vii)延缓肿瘤的发生和/或复发；(viii)降低肿瘤的复发率，和/或(ix)在一定程度上缓解与癌症相关联的一种或多种症状。如本领域所理解的，“有效量”可以为一个或多个剂量，即，可能需要单剂量或多剂量来达到期望的治疗终点。如本文所用，术语“同时施用”意指同时施用组合疗法中的第一疗法和第二疗法。当同时施用第一疗法和第二疗法时，所述第一疗法和第二疗法可包含在相同的组合物中(例如，组合物包含第一疗法和第二疗法两者)或单独的组合物中(例如，第一疗法包含在一种组合物中，并且第二疗法包含在另一种组合物中)。如本文所用，术语“顺序施用”或“依次”意指组合疗法中的第一疗法和第二疗法以例如超过约1分钟，诸如超过约5分钟、10分钟、15分钟、20分钟、30分钟、40分钟、50分钟、60分钟或更多分钟中的任一者的时间间隔施用。在一些情况下，术语“顺序施用”意指组合疗法中的第一疗法和第二疗法以超过约1天，诸如超过约1天至1周、2周、3周、4周、8周、12周或更多周中的任一者的时间间隔施用。可首先施用第一疗法或第二疗法。所述第一疗法和第二疗法包含在单独的组合物中，所述组合物可包含在相同或不同的包装或药盒中。术语“在……之前立即施用”意指第一疗法在施用第二疗法之前不超过约15分钟(诸如不超过约10分钟、5分钟或1分钟中的任一者)施用。术语“在……之后立即施用”意指第一疗法在施用第二疗法之后不超过约15分钟(诸如不超过约15分钟、10分钟或1分钟中的任一者)施用。如本文所用，所谓“药学上可接受的”或“药理学上相容的”意指不是生物学上或换句话讲不可取的材料，例如，所述材料可掺入施用于患者的药物组合物中，但不导致任何显著的不可取的生物效应或以有害方式与包含所述材料的组合物的任何其他组分相互作用。药学上可接受的载体或赋形剂优选满足毒理和制造测试所需的标准和/或被包括在由美国食品和药品监督管理局制备的“非活性成分指南”中。如本文所用，“不良事件”或“ae”是指接受市售药物产品的个体或参与临床试验的接受研究或非研究性药剂的个体的任何不良医疗事件。ae不一定具有与个体治疗的因果关系。因此，ae可以是与药物产品的使用临时相关联的任何不利且非预期的征象、症状或疾病，无论是否被认为与该药物产品相关。ae包括但不限于：预先存在的疾病的恶化；预先存在的情景性事件或病症的频率或强度的增加；在研究药物施用之后检测或诊断到病症，即使该病症在研究开始之前可能已经存在；以及在基线处存在并且在研究开始后恶化的持续存在的疾病或症状。ae通常不包括：医疗或外科手术(例如，手术、内窥镜检查、拔牙或输血)；然而，导致该手术的病症是不良事件；不恶化的在研究开始时存在或检测到的预先存在的疾病、病症或实验室异常；出于选择性目的住院治疗或手术与不良医疗事件无关(例如，为美容或选择性手术或社交/便利入院的住院治疗)；正在研究的疾病或与该疾病相关联的征象/症状，除非个体的病症比预期的更加严重；以及研究药物的过量剂量给药，但不具有任何临床征象或症状。如本文所用，“严重不良事件”或(sae)是指任何剂量下的任何不良医疗事件，其包括但不限于：a)是致命的；b)危及生命的(定义为在事件发生时来自所述事件的立即死亡风险)；c)导致持续或显著的残疾或丧失工作能力；d)需患者要住院治疗或延长现有的住院治疗(例外：对在研究期间不恶化的预先存在的病症进行选择性治疗的住院治疗不被认为是不良事件)。住院期间发生的并发症是ae，并且如果并发症延长了住院，则该事件是严重的)；e)在接受药物的个体的后代中存在先天性异常/出生缺陷；或f)未包括在上述定义中的可能危及个体或可能需要干预以预防上述结果中的一种的病症，除非与个体的潜在疾病明确相关。“缺乏功效”(进行性疾病)不被认为是ae或sae。如果它们满足ae或sae定义，则应当报告由缺乏功效而导致的征象或症状或临床后遗症。以下定义可用于评估基于靶病变的反应：“完全反应”或“cr”是指所有靶病变的消失；“部分反应”或“pr”是指参考基线sld，靶病变的最长直径(sld)的总和至少减少30％；“稳定的疾病”或“sd”是指参考自治疗开始的最低点sld，既没有获得pr的靶病变的足够收缩，也没有获得pd的足够增加；并且“进行性疾病”或“pd”是指参考自治疗开始起记录的最低点sld，靶病变的sld的至少增加20％，或存在一个或多个新病变。反应评估的以下定义可用于评估非靶病变：“完全反应”或“cr”是指所有非靶病变消失；“稳定的疾病”或“sd”是指不具有cr或pd资格的一种或多种非靶病变持续存在；并且“进行性疾病”或“pd”是指现有非靶病变的“明确进展”或认为出现一种或多种新病变是进行性疾病(如果要对于仅基于一个或多个非靶病变的进展的时间点进行个体pd的评估，则需要满足附加的标准)。“无进展生存期”(pfs)指示在治疗期间和之后癌症不生长的时间长度。无进展生存期包括个体经历完全反应或部分反应的时间量，以及个体经历稳定性疾病的时间量。“无膀胱切除术生存期”(cfs)指示在治疗期间和之后患者不需要膀胱切除术的时间长度，如由医师确定的。本文所用的“预测(predicting或prediction)”是指个体可能对治疗方案有利地或不利地反应的可能性。如本文所用，“开始治疗时”或“基线”是指第一次暴露于治疗时或之前的时间段。如本文所用，“样本”是指包含分子的组合物，所述分子待例如基于物理、生化、化学、生理和/或遗传特征进行表征和/或鉴定。应当理解，本文所述的本发明的实施方案包括“由…组成”和/或“基本由…组成”实施方案。本文提及“约”的值或参数包括(并描述)涉及该值或参数本身的变化。例如，关于“约x”的描述包括对“x”的描述。如本文所用，提及“非”某个值或参数通常意指并描述“除该值或参数之外”的值或参数。例如，该方法不用于治疗x类型的癌症，意指该方法用于治疗除x类型之外的类型的癌症。本文所用的术语“约x-y”具有与“约x至约y”相同的含义。如本文和所附权利要求书中所用，单数形式“一”，“一个”和“该”包括复数指代，除非上下文另外明确规定。ii.治疗膀胱癌的方法本申请的一个方面涉及通过局部施用病毒(诸如，溶瘤病毒)来治疗个体(诸如人类个体)的膀胱癌。在这种情况下，溶瘤病毒的局部施用涵盖溶瘤病毒的膀胱内施用。本文所述方法中的任一种可用于抑制膀胱肿瘤的生长、抑制膀胱肿瘤的癌细胞转移、延长患有膀胱癌的个体的生存期(诸如无疾病生存期、无进展生存期、或无膀胱切除术生存期)、导致患有膀胱癌的个体的疾病缓解、预防患有膀胱癌的个体的疾病进展、和/或改善患有膀胱癌的个体的生活质量。在一些实施方案中，该方法是膀胱保存或膀胱保留的。在一些实施方案中，膀胱保存或膀胱保留方法可用于改善个体的生活质量。在一些实施方案中，本文提供了一种治疗膀胱癌的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用溶瘤病毒(诸如cg0070)，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因，其中所述溶瘤病毒每周一次施用持续三周。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，溶瘤病毒在第0个月每周一次递送持续6周，并且在第6个月每周一次递送持续3周。在一些实施方案中，在诱导期和维持期期间施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，诱导期包括每周一次施用溶瘤病毒持续六周。在一些实施方案中，诱导期包括在第0个月和第3个月，每周一次施用溶瘤病毒持续六周。在一些实施方案中，维持期包括在诱导期之后，每周一次施用溶瘤病毒持续三周。在一些实施方案中，维持期包括每六个月每周一次递送溶瘤病毒持续三周。在一些实施方案中，维持期包括每6个月，每周2次、3次、4次、5次、6次或根据需要施用溶瘤病毒持续三周。在一些实施方案中，维持期包括在第6个月、第12个月和第18个月每周施用溶瘤病毒持续三周。在一些实施方案中，维持期包括在第3个月、第6个月、第12个月和第18个月每周施用溶瘤病毒持续三周。在一些实施方案中，可基于个体对溶瘤病毒的反应来修改剂量方案。例如，在一些实施方案中，个体在第0个月中每周一次施用溶瘤病毒持续六周，并且在第3个月重新评估。在一些实施方案中，在第3个月具有完全反应的个体开始维持期，所述维持期包括每6个月每周一次施用溶瘤病毒持续6周。在一些实施方案中，在第3个月不具有完全反应的个体每周一次接受第二诱导剂量的溶瘤病毒持续6周。因此，本文提供了一种治疗个体的膀胱癌的方法，所述方法包括每六个月每周施用溶瘤病毒持续三周，其中溶瘤病毒(诸如cg0070)膀胱内施用，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之后无反应或具有疾病复发。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用溶瘤病毒之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，膀胱癌为cis、cis+ta、cis+t1、不具有ta或t1的cis、ta或t1级膀胱癌。在一些实施方案中，个体患有ta或t1膀胱癌并且未接受经尿道膀胱肿瘤切除(turbt)。在一些实施方案中，膀胱癌为ta或t1不可切除的膀胱癌。在一些实施方案中，在治疗方案的第6个月、第12个月、第18个月施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，在治疗方案的第3个月、第6个月、第12个月和第18个月施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，根据需要每六个月每周施用溶瘤病毒持续三周。在一些实施方案中，本文提供了一种治疗膀胱癌的方法，所述方法包括在诱导期期间每周一次施用溶瘤病毒持续六周，并且在维持期期间每周一次施用溶瘤病毒持续三周，其中溶瘤病毒(诸如cg0070)膀胱内施用，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之后无反应或具有疾病复发。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用溶瘤病毒之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，膀胱癌为cis、cis+ta、cis+t1、不具有ta或t1的cis、ta或t1级膀胱癌。在一些实施方案中，膀胱癌为ta或t1不可切除的膀胱癌。在一些实施方案中，诱导期包括在第0个月和第3个月，每周一次施用溶瘤病毒持续六周。在一些实施方案中，维持期包括在第6个月、第12个月和第18个月每周一次施用溶瘤病毒持续三周。在一些实施方案中，维持期包括在第3个月、第6个月、第12个月和第18个月每周一次施用溶瘤病毒持续三周。在一些实施方案中，维持期包括根据需要每六个月每周一次施用溶瘤病毒持续三周。本发明的方法具有降低对患者膀胱切除术的需要的优点，并且因此可用于膀胱保留方法以及治疗不适合或拒绝膀胱切除术的患者。因此，在一些实施方案中，本文提供了膀胱保留方法，所述方法包括在个体中包括每六个月每周施用溶瘤病毒持续三周，其中溶瘤病毒(诸如cg0070)膀胱内施用，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之后无反应或具有疾病复发。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用溶瘤病毒之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，膀胱癌为cis、cis+ta、cis+t1、不具有ta或t1的cis、ta或t1级膀胱癌。在一些实施方案中，个体患有ta或t1膀胱癌并且未接受经尿道膀胱肿瘤切除(turbt)。在一些实施方案中，膀胱癌为ta或t1不可切除的膀胱癌。在一些实施方案中，在治疗方案的第6个月、第12个月、第18个月施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，在治疗方案的第3个月、第6个月、第12个月和第18个月施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，根据需要每六个月每周施用溶瘤病毒持续三周。在一些实施方案中，本文提供了一种维持疗法的方法，所述方法包括每六个月每周施用溶瘤病毒持续三周，其中溶瘤病毒(诸如cg0070)膀胱内施用，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之后无反应或具有疾病复发。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用溶瘤病毒之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，膀胱癌为cis、cis+ta、cis+t1、不具有ta或t1的cis、ta或t1级膀胱癌。在一些实施方案中，个体患有ta或t1膀胱癌并且未接受经尿道膀胱肿瘤切除(turbt)。在一些实施方案中，膀胱癌为ta或t1不可切除膀胱癌。在一些实施方案中，在治疗方案的第6个月、第12个月、第18个月施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，在治疗方案的第3个月、第6个月、第12个月和第18个月施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，根据需要每六个月每周施用溶瘤病毒持续三周。在一些实施方案中，个体接受不超过21个剂量的溶瘤病毒。在一些实施方案中，个体接受不超过30个、25个、20个、15个、14个、13个、12个、11个、10个、9个、8个、7个或6个剂量的溶瘤病毒。在一些实施方案中，提供了一种治疗个体的膀胱癌(诸如，cis膀胱癌或ta或t1级膀胱癌但不进行turbt)的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用有效量的溶瘤病毒(诸如溶瘤腺病毒)，所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，肿瘤选择性启动子允许溶瘤病毒在肿瘤细胞中优先复制。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒在癌细胞(诸如在rb途径中有缺陷的癌细胞)中优先复制。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒选自腺病毒、单纯性疱疹病毒、牛痘病毒、腮腺炎病毒、新城疫病毒、脊髓灰质炎病毒、麻疹病毒、塞内卡谷病毒、柯萨奇病毒、呼肠孤病毒、水疱性口炎病毒、马拉巴病毒和弹状病毒、以及细小病毒。在一些实施方案中，肿瘤特异性启动子为e2f-1启动子，诸如人类e2f-1启动子或包含以seqidno:1示出的核苷酸序列的e2f-1启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒复制所必需的病毒基因选自e1a、e1b和e4。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒还包含免疫相关分子(诸如细胞因子、趋化因子或prrago(即病原体识别受体激动剂))。在一些实施方案中，免疫相关分子不是免疫检查点调节子。在一些实施方案中，免疫相关分子选自gm-csf、il-2、il-12、干扰素(诸如，1型、2型或3型干扰素，例如干扰素γ)、ccl4、ccl19、ccl21、cxcl13、tlr1、tlr2、tlr3、tlr4、tlr5、tlr6、tlr7、tlr8、tlr9、tlr10、rig-i、mda5、lgp2和ltαβ。在一些实施方案中，免疫相关分子选自sting(即，干扰素基因的刺激因子)激活因子(诸如cdn，即，环状二核苷酸))、prrago(诸如，cpg、咪喹莫特或聚i:c)、tlr刺激因子(诸如gs-9620、aed-1419、cyt-003-qbg10、ave-0675或pf-7909)或rlr刺激因子(诸如rig-i、mda5、或lgp2刺激因子)。在一些实施方案中，免疫相关分子诱导树突状细胞、t细胞、b细胞和/或t卵泡辅助细胞。在一些实施方案中，免疫相关分子由溶瘤病毒表达。例如，所述溶瘤病毒可包含编码免疫相关分子的核酸，并且所述核酸可处于病毒载体中或在单独的载体上。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒为包含病毒载体的病毒，并且其中所述病毒载体包含编码免疫相关分子的核酸。在一些实施方案中，编码免疫相关分子的核酸可操作地连接至病毒启动子，诸如e1启动子或e3启动子。在一些实施方案中，免疫相关分子增强个体中的免疫应答。免疫相关分子可包括但不限于细胞因子、趋化因子、干细胞生长因子、淋巴毒素、造血因子、集落刺激因子(csf)、促红细胞生成素、血小板生成素、肿瘤坏死因子-α(tnf)、tnf-β、粒细胞集落刺激因子(g-csf)、粒细胞巨噬细胞-集落刺激因子(gm-csf)、干扰素-α、干扰素-β、干扰素-γ、干扰素-λ、命名为“s1因子”干细胞生长因子、人类生长激素、n-甲硫胺酰基人类生长激素、牛生长激素、甲状旁腺激素、甲状腺素、胰岛素、胰岛素原、松弛素、松弛素原、卵泡刺激素(fsh)、促甲状腺激素(tsh)、黄体生成素(lh)、肝脏生长因子、前列腺素、成纤维细胞生长因子、催乳素、胎盘催乳素、ob蛋白质、苗勒氏管抑制物质、小鼠促性腺激素相关联的肽、抑制素、激活素、血管内皮生长因子、整合素、ngf-β、血小板生长因子、tgf-α、tgf-β、胰岛素样生长因子-i、胰岛素样生长因子-ii、巨噬细胞-csf(m-csf)、il-1、il-1a、il-2、il-3、il-4、il-5、il-6、il-7、il-8、il-9、il-10、il-11、il-12、il-13、il-14、il-15、il-16、il-17、il-18、il-21、il-25、lif、flt-3、血管生成抑制素、血小板反应蛋白、内皮抑素、淋巴毒素、沙利度胺、来那度胺或泊马度胺。因此，在一些实施方案中，提供了一种治疗个体的膀胱癌(诸如，cis膀胱癌或ta或t1级膀胱癌但不进行turbt)的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用有效量的溶瘤病毒，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码可操作地连接至病毒启动子的免疫相关分子(诸如细胞因子或趋化因子)的核酸。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，肿瘤特异性启动子为e2f-1启动子，诸如人类e2f-1启动子或包含以seqidno:1示出的核苷酸序列的e2f-1启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒复制所必需的病毒基因选自e1a、e1b和e4。在一些实施方案中，可操作地连接至编码免疫相关分子的核酸的病毒启动子是e3启动子。在一些实施方案中，免疫相关分子是gm-csf。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用溶瘤病毒之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，每周施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，施用溶瘤病毒持续约1周至约6周(诸如约6周或约3周)。在一些实施方案中，膀胱癌为cis、cis+ta、cis+t1、ta或t1级膀胱癌。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒为血清5型腺病毒。在一些实施方案中，天然腺病毒的内源性e1a启动子和e319kd编码区被人类e2f-1启动子和编码人类gm-csf的核酸替代。在一些实施方案中，多腺苷酸化信号(pa)插入e2f-1启动子的5'。在一些实施方案中，编码人类gm-csf的核酸可操作地连接至e3启动子。在一些实施方案中，血清5型腺病毒的载体主链还包含与野生型血清5型腺病毒基因组相同的e2、e4、晚期蛋白区域或反向末端重复序列(itr)。在一些实施方案中，溶瘤病毒具有如图1所示的基因组结构。在一些实施方案中，溶瘤病毒是条件性复制的。在一些实施方案中，溶瘤病毒在癌细胞中优先复制。在一些实施方案中，癌细胞是rb途径有缺陷的癌细胞。在一些实施方案中，溶瘤病毒为cg0070。因此，在一些实施方案中，提供了一种治疗个体的膀胱癌(诸如，cis膀胱癌或ta或t1级膀胱癌但不进行turbt)的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用有效量的血清5型腺病毒，其中所述天然腺病毒的内源性e1a启动子和e319kd编码区被人类e2f-1启动子和编码免疫相关分子的核酸(诸如细胞因子或趋化因子，例如gm-csf)替代。在一些实施方案中，肿瘤特异性启动子为人类e2f-1启动子或包含以seqidno:1示出的核苷酸序列的e2f-1启动子。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用腺病毒之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，腺病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，腺病毒每周施用。在一些实施方案中，施用腺病毒持续约1周至约6周(诸如约6周或约3周)。在一些实施方案中，膀胱癌为cis、cis+ta、cis+t1、ta或t1级膀胱癌。在一些实施方案中，提供了一种治疗膀胱癌(诸如cis膀胱癌或ta或t1级膀胱癌但不进行turbt)的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用有效量的cg0070。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用cg0070之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，cg0070以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，cg0070每周施用。在一些实施方案中，施用cg0070持续约1周至约6周(诸如约6周或约3周)。在一些实施方案中，膀胱癌为cis、cis+ta、cis+t1、ta或t1级膀胱癌。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用于个体。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用于个体。如本文所用，“免疫检查点调节子”是指抑制抑制性免疫检查点分子的分子或试剂(诸如抗体)，或激活免疫细胞(诸如t细胞)或肿瘤细胞上的免疫刺激分子的免疫刺激剂。“免疫检查点分子”包括开启免疫信号的分子(即”免疫刺激分子”)，或关闭针对肿瘤细胞的免疫信号的分子(即，“抑制性免疫检查点分子”)。在一些实施方案中，溶瘤病毒不与免疫刺激剂联合施用于个体。免疫刺激剂可以为选自下列的免疫刺激分子的天然或工程化配体：ox40的配体(例如，ox40l)、cd-28的配体(例如，cd80、cd86)、icos的配体(例如，b7rp1)，4-1bb的配体(例如，4-1bbl、超4-1bbl)、cd27的配体(例如，cd70)、cd40的配体(例如，cd40l)、以及tcr的配体(例如，mhci类或ii类分子、imcgp100)。免疫刺激剂还可以为选自下列的抗体：抗-cd28(例如，tgn-1412)、抗-ox40(例如，medi6469、medi-0562)、抗-icos(例如，medi-570)、抗-gitr(例如，trx518、inbrx-110、nov-120301)、抗-41-bb(例如，bms-663513、pf-05082566)、抗-cd27(例如，bion-1402、varlilumab和hcd27.15)、抗-cd40(例如，cp870,893、bi-655064、bms-986090、apx005、apx005m)、抗-cd3(例如，博纳吐单抗、莫罗单抗)、和抗-hvem。在一些实施方案中，溶瘤病毒不与免疫检查点抑制剂联合施用于个体。免疫检查点抑制剂可以为选自下列的抑制性免疫检查点分子的天然或工程化配体：ctla-4的配体(例如，b7.1、b7.2)、tim3的配体(例如，半乳凝素-9)、a2a受体的配体(例如，腺苷、类伽腺苷)、lag3的配体(例如，mhci类或mhcii类分子)、btla的配体(例如，hvem、b7-h4)、kir的配体(例如，mhci类或mhcii类分子)、pd-1的配体(例如，pd-l1、pd-l2)、ido的配体(例如，nktr-218、indoximod、nlg919)和cd47的配体(例如，sirp-α受体)。免疫检查点抑制剂也可以是选自下列的靶向抑制性免疫检查点蛋白的抗体：抗-ctla-4(例如，易普利姆玛、屈米林单抗、kahr-102)、抗-tim3(例如，f38-2e2、enum005)、抗-lag3(例如，bms-986016、imp701、imp321、c9b7w)、抗-kir(例如，lirilumab和iph2101)、抗-pd-1(例如，纳武单抗、pidilizumab、派姆单抗、bms-936559、阿特朱单抗、lambrolizumab、mk-3475、amp-224、amp-514、sti-a1110、tsr-042)、抗-pd-l1(例如，ky-1003(ep20120194977)、mcla-145、rg7446、bms-936559、medi-4736、msb0010718c、aur-012、sti-a1010、pct/us2001/020964、mpdl3280a、amp-224、dapirolizumabpegol(cdp-7657)、medi-4920)、抗-cd73(例如，ar-42(osu-hdac42、hdac-42、ar42、ar42、osu-hdac42、osu-hdac-42、nscd736012、hdac-42、hdac42、hdac42、nscd736012、nsc-d736012)、medi-9447)、抗-b7-h3(例如，mga271、ds-5573a、8h9)、抗-cd47(例如，cc-90002、tti-621、vlst-007)、抗-btla、抗-vista、抗-a2ar、抗-b7-1、抗-b7-h4、抗-cd52(诸如阿仑单抗)、抗-il-10、抗-il-35、以及抗-tgf-β(诸如fresolumimab)。因此，在一些实施方案中，提供了一种治疗个体的膀胱癌(诸如，cis膀胱癌或ta或t1级膀胱癌但不进行turbt)的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用有效量的溶瘤病毒(诸如溶瘤腺病毒)，所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码可操作地连接至病毒启动子的免疫相关分子(诸如细胞因子或趋化因子)的核酸，其中所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，提供了一种治疗个体的膀胱癌的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用有效量的溶瘤病毒(诸如溶瘤腺病毒)，所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码可操作地连接至病毒启动子的免疫相关分子(诸如细胞因子或趋化因子)的核酸，其中所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，肿瘤特异性启动子为e2f-1启动子，诸如人类e2f-1启动子或包含以seqidno:1示出的核苷酸序列的e2f-1启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒复制所必需的病毒基因选自e1a、e1b和e4。在一些实施方案中，可操作地连接至编码免疫相关分子的核酸的病毒启动子是e3启动子。在一些实施方案中，免疫相关分子为gm-csf。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用溶瘤病毒之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，每周施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，施用溶瘤病毒持续约1周至约6周(诸如约6周或约3周)。在一些实施方案中，膀胱癌为cis、cis+ta、cis+t1、ta或t1级膀胱癌。在一些实施方案中，提供了一种治疗个体的膀胱癌(诸如，cis膀胱癌或ta或t1级膀胱癌但不进行turbt)的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用有效量的血清5型腺病毒，其中所述天然腺病毒的内源性e1a启动子和e319kd编码区被人类e2f-1启动子和编码免疫相关分子的核酸(诸如细胞因子或趋化因子，例如gm-csf)替代，其中腺病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，提供了一种治疗个体的原位膀胱癌的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用有效量的血清5型腺病毒，其中所述天然腺病毒的内源性e1a启动子和e319kd编码区被人类e2f-1启动子和编码免疫相关分子的核酸(诸如细胞因子或趋化因子，例如gm-csf)替代，其中腺病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，肿瘤特异性启动子为人类e2f-1启动子或包含以seqidno:1示出的核苷酸序列的e2f-1启动子。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用腺病毒之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，腺病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，腺病毒每周施用。在一些实施方案中，施用腺病毒持续约1周至约6周(诸如约3周或约6周)。在一些实施方案中，膀胱癌为cis、cis+ta、cis+t1、ta或t1级膀胱癌。在一些实施方案中，提供了一种治疗个体的膀胱癌(诸如，cis膀胱癌或ta或t1级膀胱癌但不进行turbt)的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用有效量的cg0070，其中cg0070作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，提供了一种治疗个体的原位膀胱癌的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用有效量的cg0070，其中cg0070不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用cg0070之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，cg0070以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，cg0070每周施用。在一些实施方案中，施用cg0070持续约1周至约6周(诸如约3周或约6周)。在一些实施方案中，膀胱癌为cis、cis+ta、cis+t1、ta或t1级膀胱癌。患者群体本文所述的方法可用于治疗多种膀胱癌。在一些实施方案中，如根据美国癌症联合委员会(ajcc)指南的tnm分期系统所测定的，个体具有处于ta期、t1期或cis(tis)期的膀胱癌。在一些实施方案中，膀胱癌为cis。在一些实施方案中，膀胱cis为移行细胞癌或尿道上皮癌。在一些实施方案中，膀胱cis为转移性尿道上皮癌。在一些实施方案中，膀胱cis位于膀胱的尿道上皮中。在一些实施方案中，膀胱cis位于上尿路中。在一些实施方案中，膀胱cis处于输尿管中。在一些实施方案中，膀胱cis处于尿道中。在一些实施方案中，膀胱cis位于肾盂中。“原位膀胱癌”是高级膀胱癌，也称为0is期、tis期、扁平期膀胱癌或膀胱cis。膀胱cis仅存在于膀胱的内衬上，并且不朝向膀胱的中空部分生长，并且不扩散到膀胱的厚肌肉层或结缔组织。膀胱cis被认为是攻击性疾病，并且据信其为浸润性膀胱癌的前体。根据nccn膀胱癌指南，目前膀胱cis的标准疗法是切除，之后利用bcg进行膀胱内疗法。bcg通常每周一次给药持续6周，之后是4周至6周的休息时间段，并且在疗法开始之后在12周时进行完全重新评估。如果患者不能耐受bcg，则可施用膀胱内丝裂霉素c。在一些实施方案中，个体具有“纯cis”或“cis”的病理期，其中个体仅患有一种或多种原位膀胱癌。在一些实施方案中，个体具有tis、n0、m0的病理期。在一些实施方案中，膀胱cis为原发性肿瘤。在一些实施方案中，膀胱cis为复发性肿瘤。在一些实施方案中，个体患有至少约1种、2种、3种、4种、5种、10种或更多种原位膀胱癌中的任一者。在一些实施方案中，个体同时患有一种或多种原位膀胱癌和一种或多种ta期或t1期乳头状癌。在一些实施方案中，个体具有“cis+ta”的病理期，其中个体同时患有一种或多种原位膀胱癌和一种或多种ta期乳头状癌。在一些实施方案中，个体具有“cis+t1”的病理期段，其中个体同时患有一种或多种原位膀胱癌和一种或多种t1期乳头状癌。“乳头状癌”是指从膀胱内表面朝向中空中心以细长的指状突起生长的膀胱肿瘤。乳头状肿瘤通常朝向膀胱的中心生长但不生长到更深的膀胱层中。这些肿瘤被称为非浸润性乳头状癌。极低级(生长缓慢)、非浸润性乳头状癌有时被称为低恶性潜能的乳头状尿道上皮肿瘤(punlmp)。“ta”期乳头状癌是指在膀胱内衬的表面上发现的乳头状癌。癌细胞聚集在一起，并且通常可很容易地去除。癌症尚未侵入膀胱壁的肌肉或结缔组织。ta乳头状癌也称为非浸润性乳头状尿道上皮癌，或0a期膀胱癌。“t1”期乳头状癌是指穿过膀胱内衬生长到固有层中的乳头状癌。其尚未扩散到膀胱壁中的厚肌肉层或淋巴结或其他器官。在一些实施方案中，癌已侵入上皮下结缔组织。在一些实施方案中，个体不患有并发乳头状癌伴cis。在一些实施方案中，个体不患有低级或高级乳头状癌。在一些实施方案中，个体不患有高级乳头状癌。在一些实施方案中，个体不患有低级ta期的并发乳头状癌。在一些实施方案中，个体不患有高级ta期的并发乳头状癌。在一些实施方案中，个体不患有低级t1期的并发乳头状癌。在一些实施方案中，个体不患有高级t1期的并发乳头状癌。在一些实施方案中，个体不患有ta期或t1期并发乳头状癌。在一些实施方案中，个体患有乳头状癌。在一些实施方案中，个体患有与cis并发的低级或高级乳头状癌。在一些实施方案中，个体患有高级乳头状癌。在一些实施方案中，个体患有低级ta期的并发乳头状癌。在一些实施方案中，个体具有高级ta期的并发乳头状癌。在一些实施方案中，个体不患有低级t1期的并发乳头状癌。在一些实施方案中，个体不患有高级t1期的并发乳头状癌。在一些实施方案中，个体不患有ta期或t1期并发乳头状癌。在一些实施方案中，个体患有乳头状癌但不具有cis。在一些实施方案中，个体患有低级或高级性乳头状癌。在一些实施方案中，个体患有高级乳头状癌。在一些实施方案中，个体患有低级ta期的并发乳头状癌。在一些实施方案中，个体具有高级ta期的并发乳头状癌。在一些实施方案中，个体不患有低级t1期的并发乳头状癌。在一些实施方案中，个体不患有高级t1期的并发乳头状癌。在一些实施方案中，个体患有ta期或t1期膀胱癌但不具有cis。可使用本领域任何已知的方法检测膀胱癌并将膀胱癌分期，其包括但不限于尿细胞学检查、尿道膀胱镜检查(ucs)、活检(诸如经尿道膀胱肿瘤切除或“turbt”)、计算机断层(ct或cat)扫描(例如，ct尿路造影)、磁共振成像(mri，即mr尿路造影)、正电子发射断层(pet或pet-ct)扫描、超声(例如，肾脏超声)、输尿管镜检查和x-射线成像(例如，胸部成像)。膀胱cis的一个明显特征是cis细胞的连贯性和附着性减少的事实。因此，尿液中存在更多细胞，这可通过尿细胞学检查检测到。另外，膀胱cis与活检时裸露上皮的机会增加相关联。来自尿样本或活检标本的肿瘤细胞可使用免疫组织化学、elisa、rt-pcr或其他合适的方法进行检查，以检测膀胱cis或乳头状肿瘤的尿标记物。荧光膀胱镜检查方法，例如使用基于卟啉的光敏剂的那些可尤其适用于检测cis病变。因此，在一些实施方案中，提供了一种仅治疗患有原位膀胱癌的个体的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用溶瘤病毒(诸如cg0070)，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用溶瘤病毒之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，每周施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，施用溶瘤病毒持续约1周至约6周(诸如约3周或约6周)。在一些实施方案中，提供了一种治疗患有膀胱cis的个体的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用溶瘤病毒(诸如cg0070)，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因，并且其中所述个体不具有ta期或t1期并发乳头状癌。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用溶瘤病毒之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，每周施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，施用溶瘤病毒持续约1周至约6周(诸如约3周或约6周)。在一些实施方案中，提供了一种治疗患有膀胱cis(诸如纯cis)的个体的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用cg0070，其中cg0070以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如约1×1012个病毒颗粒)的剂量每周施用持续约3周至约6周。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用cg0070之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，cg0070不与免疫检查点调节剂联合施用。在一些实施方案中，cg0070作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之后无反应或具有疾病复发。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，提供了一种治疗患有t1期膀胱癌与cis的个体的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用cg0070，其中cg0070以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如约1×1012个病毒颗粒)的剂量每周施用持续约3周至约6周。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用cg0070之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，cg0070不与免疫检查点调节剂联合施用。在一些实施方案中，cg0070作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之后无反应或具有疾病复发。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，提供了一种治疗患有ta期膀胱癌与cis的个体的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用cg0070，其中cg0070以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如约1×1012个病毒颗粒)的剂量每周施用持续约6周。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用cg0070之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，cg0070不与免疫检查点调节剂联合施用。在一些实施方案中，cg0070作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之后无反应或具有疾病复发。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，提供了一种治疗患有t1期膀胱癌但不具有cis的个体的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用cg0070，其中cg0070以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如约1×1012个病毒颗粒)的剂量每周施用持续约6周。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用cg0070之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，cg0070不与免疫检查点调节剂联合施用。在一些实施方案中，cg0070作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之后无反应或具有疾病复发。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，提供了一种治疗患有ta期膀胱癌但不具有cis的个体的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用cg0070，其中cg0070以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如约1×1012个病毒颗粒)的剂量每周施用持续约6周。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用cg0070之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，cg0070不与免疫检查点调节剂联合施用。在一些实施方案中，cg0070作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之后无反应或具有疾病复发。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，个体患有早期膀胱癌、非转移性膀胱癌、非浸润性膀胱癌、非肌肉浸润性膀胱癌、原发性膀胱癌、局部晚期膀胱癌(诸如不可切除的局部晚期膀胱癌)、转移性膀胱癌、或缓解期膀胱癌。在一些实施方案中，膀胱癌是局部可切除的、局部不可切除的、或不可切除的。在一些实施方案中，膀胱癌是高级的、非肌肉浸润性癌症，其对于标准膀胱内输注(膀胱内)疗法是难治的。在一些实施方案中，个体具有高级的、非肌肉浸润性cis，其对标准的膀胱内输注(膀胱内)疗法是难治的。在一些实施方案中，个体患有尿道上皮(即，移行细胞)癌。本文提供的方法可用于治疗已被诊断患有或怀疑患有膀胱癌的个体(例如，人类)。在一些实施方案中，个体已经历肿瘤切除，诸如turbt或部分膀胱切除术。在一些实施方案中，个体先前仅接受turbt。在一些实施方案中，个体先前已接受turbt和同步放化疗。在一些实施方案中，个体先前已接受重复的turbt。在一些实施方案中，个体先前已接受turbt至少约1次、2次、3次、4次或更多次中的任一者。在一些实施方案中，个体先前已接受最大turbt。在一些实施方案中，个体未接受肿瘤切除。根据nccn膀胱癌指南，通常仅对于具有较小的孤立性肿瘤、阴性淋巴结、无原位癌、无肿瘤相关的肾积水和良好的治疗前膀胱功能的患者保留在最大turbt和同步放化疗情况下的膀胱保留。在一些实施方案中，本文提供的方法可用于治疗患有膀胱癌的个体，所述个体在用cg0070治疗之前未接受turbt或部分膀胱切除术。在一些实施方案中，个体患有ta期或t1期癌症。在一些实施方案中，个体被认为是不可切除的或具有残留疾病。在一些实施方案中，个体具有不允许充分切除的潜在医学病症。因此，在一些实施方案中，提供了一种治疗尚未切除或被认为是不可切除的患有t1期或ta期膀胱癌的个体的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用cg0070，其中cg0070以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如约1×1012个病毒颗粒)的剂量每周施用持续约6周。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用cg0070之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，cg0070不与免疫检查点调节剂联合施用。在一些实施方案中，cg0070作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之后无反应或具有疾病复发。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，个体已经拒绝膀胱切除术，诸如部分膀胱切除术或根治性膀胱切除术。在一些实施方案中，个体不适合进行膀胱切除术，诸如部分膀胱切除术或根治性膀胱切除术。在一些实施方案中，个体对膀胱切除术的耐受性较差。在一些实施方案中，个体在医学上不可操作。在一些实施方案中，个体先前已接受外照射放疗的全部疗程，并且具有大体积的残留疾病。在一些实施方案中，个体先前已接受膀胱保留疗法。在一些实施方案中，个体为老年患者。在一些实施方案中，个体由于年龄而不能耐受膀胱切除术。在一些实施方案中，个体为至少约60岁、65岁、70岁、75岁、80岁、85岁、90岁、95岁或更大中的任一者。在一些实施方案中，个体患有肾虚或肾衰竭。根据nccn膀胱癌指南，部分膀胱切除术适用于t2肌肉浸润性疾病，其具有适于分段切除的位置中的孤立性病变并具有足够边缘，并且通过随机活检确定不具有原位癌。根治性膀胱切除术或膀胱前列腺切除术适用于残留的高级t1和肌肉浸润性疾病。如果没有给予患者的疗法，则通常在诊断后3个月内进行膀胱切除术。另外，膀胱切除术适用于在turbt或bcg治疗之后，处于ta期、t1期或cis期的复发性或持续性膀胱癌。在一些实施方案中，根据国家综合癌症网络(nccn)指南，个体不适合根治性膀胱切除术。例如，由于虚弱，个体可不适于治愈性疗法。在本发明的方法之前，此类个体通常接受姑息性放疗但不进行化疗(3.5gy/分数—10次治疗；或7gy/分数—7次治疗；turbt；或不进行治疗)。在一些实施方案中，基于美国麻醉医师学会(asa)指南，个体不能耐受根治性膀胱切除术。例如，不能耐受根治性膀胱切除术的个体可被认为在医学上不适于需要全身或硬膜外麻醉的手术。在其他实施方案中，个体可为缺乏手术、手术后护理基础结构或个人，如由美国麻醉学家协会提供的老年综合评估所确定的。根据这些指南，如果个体表现出日常生活的异常独立性活动、严重营养不良、认知障碍或老年病人并发累积疾病评分量表(cisr-g)3-4级，则认为该个体是虚弱的。因此，在一些实施方案中，提供了一种治疗患有膀胱癌的个体的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用溶瘤病毒(诸如cg0070)，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因，并且其中所述个体拒绝或不适合膀胱切除术(诸如，根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用溶瘤病毒之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，每周施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，施用溶瘤病毒持续约1周至约6周(诸如约3周或约6周)。与要求移除膀胱的标准治疗方案相比，本发明的方法还提供重要和显著的治疗有益效果。本发明还具有可用作用于适合膀胱切除术但选择不进行膀胱切除术的个体的膀胱保留方案的优点。与目前可用的治疗相比，本发明方法导致个体的生活质量极大改善，所述个体在患有膀胱癌之后可能能够保留其膀胱。因此，在一些实施方案中，提供了一种膀胱保留的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用溶瘤病毒(诸如cg0070)，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因，并且其中所述个体拒绝或不适合膀胱切除术(诸如，根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用溶瘤病毒之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，每周施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，施用溶瘤病毒持续约1周至约6周(诸如约3周或约6周)。在一些实施方案中，个体先前已经对膀胱癌进行治疗(也被称为“先前疗法”)。在一些实施方案中，先前疗法包括一种或多种(诸如1种、2种、3种、4种、5种或更多种)治疗模式，包括但不限于手术(诸如经尿道膀胱肿瘤切除，或部分膀胱切除术)、膀胱内疗法(诸如bcg或膀胱内化疗)、放疗、化疗、免疫疗法、以及它们的组合。在一些实施方案中，本发明的方法尤其适用于在bcg疗法之后在至少3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、或12个月后复发的个体。在一些实施方案中，所述方法尤其适用于在接受bcg疗法之后至少9个月复发的个体。在一些实施方案中，个体患有cis。在一些实施方案中，个体先前已用膀胱癌的标准疗法治疗。在一些实施方案中，个体先前已用非浸润性乳头状癌的标准疗法治疗。在一些实施方案中，个体先前已用膀胱cis的标准疗法治疗。在一些实施方案中，先前的标准疗法是膀胱内疗法，诸如膀胱内化疗或膀胱内免疫疗法。在一些实施方案中，先前的标准疗法是用丝裂霉素c治疗。在一些实施方案中，先前的标准疗法是用干扰素(例如干扰素-α)治疗。在一些实施方案中，先前的标准疗法是用基于铂的试剂治疗。在一些实施方案中，先前的标准疗法是用丝裂霉素和噻替派治疗。在一些实施方案中，先前的标准疗法是用顺铂、多柔比星、吉西他滨和戊柔比星治疗。在一些实施方案中，先前的标准疗法是bcg治疗。在一些实施方案中，个体患有缓解期膀胱cis、进行性膀胱cis、持续性膀胱cis或复发性膀胱cis。在一些实施方案中，个体对利用其他药剂(诸如bcg或化疗药剂)治疗膀胱cis具有抗性。在一些实施方案中，个体最初可响应于利用其他药剂(诸如bcg或化疗药剂)对膀胱cis的治疗，但在治疗之后具有进展。在一些实施方案中，个体在接受turbt之后具有持续性或复发性膀胱cis。在一些实施方案中，个体在接受膀胱内疗法(诸如膀胱内bcg或膀胱内化疗(例如，丝裂霉素c)之后，具有持续性或复发性膀胱cis。在一些实施方案中，个体在接受至少2个连续周期或膀胱内疗法，和/或至少两种膀胱内药剂(例如膀胱内bcg，之后进行膀胱内丝裂霉素c)之后，具有持续性或复发性膀胱cis。在一些实施方案中，个体在接受turbt和一种或多种膀胱内疗法的组合之后，具有持续性或复发性膀胱cis。在一些实施方案中，个体在先前疗法(诸如，先前的标准疗法，例如膀胱内bcg)之后，具有复发性膀胱cis(诸如纯cis)。例如，个体最初可响应于利用先前疗法的治疗，但在先前疗法停止之后约2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月、24个月、36个月、48个月或60个月中任一者之后发展膀胱cis。在一些实施方案中，个体先前已接受bcg治疗。在一些实施方案中，个体先前已接受膀胱内bcg治疗中的至少一个(诸如，至少约1个、2个、3个、4个、5个、6个或更多个中的任一者)疗程。在一些实施方案中，膀胱内bcg治疗包括bcg的每周膀胱内灌注持续至少约4周，诸如至少约5周、6周、7周、8周、9周或更多周中的任一者。在一些实施方案中，个体先前已接受了膀胱内bcg治疗的诱导疗程(诸如每周约4次至约9次，例如约6次bcg施用)。在一些实施方案中，个体先前已接受膀胱内bcg治疗的诱导疗程和至少一个维持疗程。在一些实施方案中，个体先前已接受bcg的6k至233k诱导疗程，之后在约3个月、6个月、12个月、18个月、24个月、30个月和36个月中的任一者或多者时利用每周三次灌注进行维持。在一些实施方案中，个体已经处于维持膀胱内bcg治疗状态持续至少约3个月、诸如至少约3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月、18个月、24个月、30个月、36个月的任一者或更长。在一些实施方案中，个体在接受本申请的病毒治疗之前约12个月、11个月、10个月、9个月、8个月、7个月、6个月、5个月、4个月、3个月、2个月或1个月中的任一者内已接受bcg治疗。在一些实施方案中，个体在膀胱内bcg治疗之后具有严重不利的副作用。在一些实施方案中，个体具有细菌尿、持续性肉眼血尿、持续性严重局部症状或全身症状。在一些实施方案中，即使在剂量降低之后，个体也不能耐受膀胱内bcg治疗。在一些实施方案中，个体bcg治疗已失败。在一些实施方案中，个体在最后施用bcg之后的约24个月、22个月、20个月、18个月、16个月、14个月、12个月、11个月、10个月、9个月、8个月、7个月、6个月、5个月、4个月、3个月、2个月或1个月中的任一者内bcg治疗已失败。在一些实施方案中，个体的膀胱内bcg治疗的诱导疗程已失败。在一些实施方案中，个体在一个或多个维持疗程期间或之后的bcg治疗失败。在一些实施方案中，个体对bcg治疗无反应。在一些实施方案中，个体对bcg治疗具有部分反应。在一些实施方案中，个体不能耐受bcg治疗的副作用。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之后具有疾病复发。在一些实施方案中，个体在最后施用bcg(诸如bcg诱导或bcg维持)之后在不超过约24个月、22个月、20个月、18个月、16个月、14个月、12个月、11个月、10个月、9个月、8个月、7个月、6个月、5个月、4个月、3个月、2个月或1个月中的任一者之后，具有疾病复发。在一些实施方案中，尽管接受了bcg治疗的维持过程，但个体具有疾病进展。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之前具有膀胱cis。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之前不具有膀胱cis。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之前具有乳头状肿瘤(诸如ta期或t1期)。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之前具有膀胱cis和乳头状肿瘤(诸如ta期或t1期)两者。因此，在一些实施方案中，提供了一种治疗个体的bcg无反应非肌肉浸润性膀胱癌(诸如bcg无反应膀胱cis)的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用溶瘤病毒(诸如cg0070)，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，个体仅患有膀胱cis。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用溶瘤病毒之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，每周施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，施用溶瘤病毒持续约1周至约6周(诸如约6周)。在一些实施方案中，提供了一种治疗患有膀胱cis的个体的方法，所述方法包括向个体膀胱内施用溶瘤病毒(诸如cg0070)，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因，并且其中所述个体在bcg治疗之后具有疾病复发。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，个体仅患有膀胱cis。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用溶瘤病毒之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，每周施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，施用溶瘤病毒持续约1周至约6周(诸如约3周或约6周)。终点在一些实施方案中，该方法抑制膀胱癌在个体中的进展。在一些实施方案中，该方法将非肌肉浸润性膀胱癌向肌肉浸润性膀胱癌的进展抑制至少约3个月、6个月、9个月、12个月、18个月、24个月、30个月、36个月、42个月、48个月、54个月、60个月或更多个月中的任一者。在一些实施方案中，提供了一种抑制患有膀胱癌的个体的疾病进展的方法，所述方法包括向所述个体膀胱内施用溶瘤病毒(诸如cg0070)，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之后无反应或具有疾病复发。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用溶瘤病毒之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，每周施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，施用溶瘤病毒持续约1周至约6周(诸如约3周或约6周)。在一些实施方案中，膀胱癌为cis、cis+ta、cis+t1、ta或t1级膀胱癌。在一些实施方案中，该方法抑制膀胱癌的生长或降低其尺寸。在一些实施方案中，膀胱癌的尺寸降低至少约10％(包括例如至少约20％、30％、40％、60％、70％、80％、90％或100％中的任一者)。在一些实施方案中，提供了一种抑制患有膀胱癌的个体的肿瘤生长或降低肿瘤尺寸的方法，所述方法包括向所述个体膀胱内施用溶瘤病毒(诸如cg0070)，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之后无反应或具有疾病复发。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用溶瘤病毒之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，每周施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，施用溶瘤病毒持续约1周至约6周(诸如约3周或约6周)。在一些实施方案中，膀胱癌为cis、cis+ta、cis+t1、ta或t1级膀胱癌。在一些实施方案中，该方法导致个体的疾病缓解(部分或完全)。在一些实施方案中，个体具有持续至少约2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、12个月、24个月、或更多个月中的任一者的疾病缓解。在一些实施方案中，提供了一种导致患有膀胱cis(诸如纯cis)的个体的疾病缓解(诸如部分或完全缓解)的方法，所述方法包括向所述个体膀胱内施用溶瘤病毒(诸如cg0070)，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之后无反应或具有疾病复发。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用溶瘤病毒之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，每周施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，施用溶瘤病毒持续约1周至约6周(诸如约3周或约6周)。在一些实施方案中，该方法抑制个体的肿瘤癌细胞转移。在一些实施方案中，抑制至少约10％(包括例如至少约20％、30％、40％、60％、70％、80％、90％或100％中的任一者)癌细胞转移。在一些实施方案中，提供了抑制癌细胞转移到淋巴结的方法。在一些实施方案中，提供了抑制癌细胞转移到肺的方法。可通过本领域的任何已知方法，诸如通过血液测试、骨扫描、x-射线扫描、ct扫描、pet扫描和活检来评估癌细胞转移。在一些实施方案中，提供了一种抑制患有膀胱癌的个体的肿瘤癌细胞转移的方法，所述方法包括向所述个体膀胱内施用溶瘤病毒(诸如cg0070)，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之后无反应或具有疾病复发。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用溶瘤病毒之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，每周施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，施用溶瘤病毒持续约1周至约6周(诸如约3周或约6周)。在一些实施方案中，膀胱癌为cis、cis+ta、cis+t1、ta或t1级膀胱癌。在一些实施方案中，所述方法延长个体的生存期(诸如无疾病生存期、无进展生存期、或无膀胱切除术生存期)。在一些实施方案中，生存期延长至少约2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、12个月、24个月、或更多个月。在一些实施方案中，提供了一种延长患有膀胱癌的个体的生存期(诸如无疾病生存期、无进展生存期、或无膀胱切除术生存期)的方法，所述方法包括向所述个体膀胱内施用溶瘤病毒(诸如cg0070)，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之后无反应或具有疾病复发。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用溶瘤病毒之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，每周施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，施用溶瘤病毒持续约1周至约6周(诸如约3周或约6周)。在一些实施方案中，膀胱癌为cis、cis+ta、cis+t1、ta或t1级膀胱癌。在一些实施方案中，该方法改善了个体的生活质量。在一些实施方案中，个体在接受本申请的病毒疗法持续至少约3个月、6个月、9个月、12个月、18个月、24个月、30个月、36个月、42个月、48个月、54个月、60个月、或更多个月中任一者之后，不需要膀胱切除术(诸如部分膀胱切除术或根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，因为本申请的方法延缓或消除了个体对根治性膀胱切除术的需要，因此与其他膀胱cis患者相比，个体享受改善的生活质量，因为个体不由于根治性膀胱切除术之后的重建手术而遭受不可取的副作用。在一些实施方案中，提供了一种改善患有膀胱cis(诸如纯cis)的个体的生活质量的方法，所述方法包括向所述个体膀胱内施用溶瘤病毒(诸如cg0070)，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之后无反应或具有疾病复发。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用溶瘤病毒之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，每周施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，施用溶瘤病毒持续约1周至约6周(诸如约3周或约6周)。在一些实施方案中，膀胱癌为cis、cis+ta、cis+t1、ta或t1级膀胱癌。在一些实施方案中，提供了一种治疗个体的膀胱癌但不使个体经历膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)的方法，所述方法包括向所述个体膀胱内施用溶瘤病毒(诸如cg0070)，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之后无反应或具有疾病复发。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用溶瘤病毒之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，每周施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，施用溶瘤病毒持续约1周至约6周(诸如约3周或约6周)。在一些实施方案中，膀胱癌为cis、cis+ta、cis+t1、ta或t1级膀胱癌。在一些实施方案中，提供了一种治疗个体的膀胱cis(诸如纯cis)的膀胱保留方法，所述方法包括向所述个体膀胱内施用溶瘤病毒(诸如cg0070)，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之后无反应或具有疾病复发。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用溶瘤病毒之前向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，每周施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，施用溶瘤病毒持续约1周至约6周(诸如约3周或约6周)。在一些实施方案中，膀胱癌为cis、cis+ta、cis+t1、ta或t1级膀胱癌。治疗方案溶瘤病毒的膀胱内施用提供了相对方便但有效的膀胱内肿瘤暴露于溶瘤病毒的独特机会，以及潜在地降低对其他组织的毒性。用于溶瘤病毒的合适的剂量取决于如下因素：诸如溶瘤病毒的性质、被治疗的原位膀胱癌的类型、以及施用途径。如本文所用，与溶瘤病毒相关的“颗粒”意指溶瘤病毒的物理单数单位的集合数。可通过本领域已知的感染性测定法将该数转化为或等同于另一个数，即感染性滴度单位，例如蚀斑形成单位(pfu)或国际单位。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约下列中任一者的剂量施用：1×105个颗粒、1×106个颗粒、1×107个颗粒、1×108个颗粒、1×109个颗粒、1×1010个颗粒、2×1010个颗粒、5×1010个颗粒、1×1011个颗粒、2×1011个颗粒、5×1011个颗粒、1×1012个颗粒、2×1012个颗粒、5×1012个颗粒、1×1013个颗粒、2×1013个颗粒、5×1013个颗粒、1×1014个颗粒、或1×1015个颗粒。在一些实施方案中，溶瘤病毒以下列中任一者的剂量施用：约1×105个颗粒至约1×106个颗粒、约1×106个颗粒至约1×107个颗粒、约1×107个颗粒至约1×108个颗粒、约1×108个颗粒至约1×109个颗粒、约1×109个颗粒至约1×1010个颗粒、约1×1010个颗粒至约1×1011个颗粒、约1×1011个颗粒至约5×1011个颗粒、约5×1011个颗粒至约1×1012个颗粒、约1×1012个颗粒至约2×1012个颗粒、约2×1012个颗粒至约5×1012个颗粒、约5×1012个颗粒至约1×1013个颗粒、约1×1013个颗粒至约1×1014个颗粒、约1×1014个颗粒至约1×1015个颗粒。在一些实施方案中，每天施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，施用溶瘤病毒一周施用至少约1次、2次、3次、4次、5次、6次、或7次(即，每天)中的任一者。在一些实施方案中，每周施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，溶瘤病毒如下施用：每周但不间断；三周中有两周每周；四周中有三周每周；每两周一次；每3周一次；每4周一次；每6周一次；每8周、每月或每两个月至12个月一次。在一些实施方案中，每次施用之间的时间间隔小于约6个月、3个月、1个月、20天、15天、12天、10天、9天、8天、7天、6天、5天、4天、3天、2天或1天中的任一者。在一些实施方案中，每次施用之间的时间间隔超过约1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、8个月或12个月中的任一者。在一些实施方案中，剂量给药时间表没有中断。在一些实施方案中，每次施用之间的时间间隔不超过约一周。所述溶瘤病毒的施用持续延长的时间段，诸如约一个月最多至约七年。在一些实施方案中，溶瘤病毒在至少约1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月、18个月、24个月、30个月、36个月、48个月、60个月、72个月或84个月中的任一者的时间段内施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒在至少4周或6周的时间段内施用。在一些实施方案中，每3个月每周施用溶瘤病毒持续四周。在一些实施方案中，每3个月每周施用溶瘤病毒持续6周。在一些实施方案中，每个治疗疗程包括每周施用溶瘤病毒持续约3周或约6周。在一些实施方案中，每个治疗疗程之间的时间间隔为至少约1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月或更多个月中的任一者。在一些实施方案中，每个治疗疗程之间的时间间隔不超过约6个月、5个月、4个月、3个月、2个月、1个月或更少中的任一者。在一些实施方案中，将治疗疗程重复至少一次，诸如至少约1次、2次、3次、4次、5次、6次或更多次中的任一者。在一些实施方案中，个体利用溶瘤病毒的初始疗程、之后进行维持疗程来治疗。在一些实施方案中，初始疗程和维持疗程具有相同的剂量和时间表。在一些实施方案中，初始疗程和维持疗程具有不同的剂量和/或时间表。在一些实施方案中，溶瘤病毒作为溶液经由导管灌注来施用。在一些实施方案中，用于膀胱内灌注的溶液的总体积约为1ml、10ml、50ml、75ml、100ml、125ml、150ml、200ml、250ml、300ml、400ml或500ml中的任一者。在一些实施方案中，用于膀胱内灌注的溶液的总体积为下列中的任一者：约1ml至约10ml、约10ml至约50ml、约50ml至约75ml、约75ml至约100ml、约100ml至约125ml、约75ml至约125ml、约100ml至约150ml、约150ml至约200ml、约200ml至约300ml、约300ml至约400ml、约400ml至约500ml、约50ml至约500ml、约50ml至约250ml、或约100ml至约250ml。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1015个颗粒(诸如，约1×1011至约1×1014个颗粒，例如约1×1012个颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约50ml至约500ml(诸如约100ml)的体积通过灌注施用。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约50ml中约1×1012的剂量施用。在排空之前，溶瘤病毒的溶液可保留在膀胱中一定量时间，以便实现溶瘤病毒在膀胱肿瘤细胞中的均匀分布或充分暴露。在一些实施方案中，溶液保留在个体的膀胱中持续至少约5分钟、10分钟、15分钟、20分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时或更长中的任一者。在一些实施方案中，溶液保留在个体的膀胱中持续下列中的任一者：约5分钟至约10分钟、约10分钟至约15分钟、约10分钟至约20分钟、约20分钟至约30分钟、约30分钟至约45分钟、约45分钟至约50分钟、约50分钟至约1小时、约5分钟至约15分钟、约10分钟至约30分钟、约30分钟至约1小时、或约1小时至约2小时。在一些实施方案中，溶瘤病毒(例如，cg0070)在个体的膀胱中保留持续约45分钟至约50分钟。在一些实施方案中，通过包括膀胱内施用有效量的转导增强剂(诸如，ddm)的预处理来进一步增强溶瘤病毒的膀胱内施用效率。本文所述的方法还可包括在施用溶瘤病毒之前向个体膀胱内施用预处理组合物的步骤。在一些实施方案中，预处理组合物包含转导增强剂，诸如n-十二烷基-β-d-麦芽糖苷(ddm)。ddm是由单个十二碳链衍生的麦芽糖构成的非离子表面活性剂，并且用作温和洗涤剂和增溶剂。它已被用作食品添加剂，并且已知可增强啮齿动物的粘膜表面渗透，这可能是由于其对膜缔合gag和紧密连接的影响。在一些实施方案中，提供了一种治疗个体的膀胱癌的方法，所述方法包括：(1)向个体膀胱内施用转导增强剂(诸如，ddm)；以及随后(2)向所述个体膀胱内施用溶瘤病毒(诸如cg0070)，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之后无反应或具有疾病复发。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，每周施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，施用溶瘤病毒持续约1周至约6周(诸如约3周或约6周)。在一些实施方案中，膀胱癌为cis、cis+ta、cis+t1、ta或t1级膀胱癌。在一些实施方案中，个体在施用溶瘤病毒之前不接受切除。在一些实施方案中，个体患有ta或t1膀胱癌并且未接受经尿道膀胱肿瘤切除(turbt)。在一些实施方案中，膀胱癌为ta或t1不可切除膀胱癌。在一些实施方案中，在向个体膀胱内施用转导增强剂之前进行盐水洗涤。在一些实施方案中，本文提供了一种治疗膀胱癌(诸如cis膀胱癌或ta级或t1级膀胱癌但不进行turbt)的方法，所述方法包括：(1)施用膀胱内盐水洗涤(2)用转导增强剂(诸如ddm)施用膀胱内洗涤；(3)向个体施用转导增强剂(诸如，ddm)的膀胱内灌注；以及随后(4)向所述个体膀胱内施用溶瘤病毒(诸如cg0070)，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒包含肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒不与免疫检查点调节子联合施用。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒作为单一治疗剂施用。在一些实施方案中，个体在bcg治疗之后无反应或具有疾病复发。在一些实施方案中，个体已拒绝或不适合膀胱切除术(诸如根治性膀胱切除术)。在一些实施方案中，溶瘤病毒以约1×108至约1×1014个病毒颗粒(诸如，约1×1012个病毒颗粒)的剂量施用。在一些实施方案中，每周施用溶瘤病毒。在一些实施方案中，施用溶瘤病毒持续约1周至约6周(诸如约3周或约6周)。在一些实施方案中，膀胱癌为cis、cis+ta、cis+t1、ta或t1级膀胱癌。在一些实施方案中，个体患有ta或t1膀胱癌并且未接受经尿道膀胱肿瘤切除(turbt)。在一些实施方案中，膀胱癌为ta或t1不可切除膀胱癌。在一些实施方案中，个体在施用溶瘤病毒之前不接受切除。在一些实施方案中，转导增强剂在膀胱内灌注期间保留在膀胱中持续12分钟至15分钟。在一些实施方案中，在膀胱内灌注转导增强剂和施用溶瘤病毒之后施用盐水冲洗。在膀胱内施用预处理组合物。在一些实施方案中，预处理组合物包含转导增强剂(诸如ddm)的溶液。预处理组合物(诸如ddm溶液)的合适的浓度包括但不限于约0.01％、0.05％、0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、1％、2％、3％、4％、或5％的转导增强剂(诸如ddm)中的任一者。在一些实施方案中，所述预处理组合物包含下列中的任一者：约0.01％至约0.05％、约0.05％至约0.1％、约0.1％至约0.5％、约0.5％至约1％、约1％至约2％、约2％至约3％、约3％至约4％、约4％至约5％、约0.01％至约1％、约0.05％至约2％、约1％至约5％、或约0.1％至约5％的转导增强剂(诸如ddm)。预处理组合物(诸如ddm)的合适的剂量包括但不限于约0.1mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、1.5mg/kg、2mg/kg、2.5mg/kg、5mg/kg、10mg/kg、25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg、150mg/kg、200mg/kg、250mg/kg、300mg/kg、400mg/kg、500mg/kg、0.1mg/kg至0.5mg/kg、0.5mg/kg至1mg/kg、1mg/kg至2mg/kg、2mg/kg至5mg/kg、5mg/kg至10mg/kg、10mg/kg至25mg/kg、25mg/kg至50mg/kg、50mg/kg至100mg/kg、100mg/kg至150mg/kg、150mg/kg至200mg/kg、200mg/kg至250mg/kg、250mg/kg至500mg/kg、或0.5mg/kg至约5mg/kg中的任一者。在一些实施方案中，预处理组合物的合适的剂量为约0.1g、0.2g、0.5g、0.75g、1g、1.5g、2g、2.5g、5g或10g的转导增强剂(诸如ddm)中的任一者。在一些实施方案中，预处理步骤通过在施用溶瘤病毒之前使个体中的膀胱的腔内表面与预处理组合物接触来进行。例如，预处理组合物可包含约0.01％至约0.5％(诸如0.05％至约0.2％，例如约0.1％)的转导增强剂(诸如ddm)。在一些实施方案中，预处理组合物(诸如ddm)的总体积为约10ml至约1000ml(诸如约10ml至约100ml、约100ml至约500ml、或约500ml至约1000ml)。在一些实施方案中，预处理组合物包含约0.1％ddm。在一些实施方案中，预处理组合物的合适的剂量为约0.1g、0.2g、0.5g、0.75g、1g、1.5g、2g、2.5g、5g或10g的转导增强剂(诸如ddm)中的任一者。在一些实施方案中，预处理组合物的有效量为约1g的ddm(例如，100ml的0.1％ddm溶液)。在一些实施方案中，预处理组合物(诸如，ddm)在施用溶瘤病毒之前立即施用(诸如不超过5分钟)。在一些实施方案中，预处理组合物(诸如ddm)在施用溶瘤病毒之前不超过约5分钟、10分钟、15分钟、20分钟、30分钟、45分钟、1小时、90分钟、2小时、3小时或4小时中的任一者施用。在一些实施方案中，预处理组合物(诸如，ddm)在施用溶瘤病毒之前不超过约2小时施用。在一些实施方案中，预处理组合物(诸如ddm溶液)在膀胱中保留持续至少约5分钟、10分钟、15分钟或20分钟中的任一者。在一些实施方案中，预处理组合物(诸如ddm溶液)在膀胱中保留持续下列中的任一者：约5分钟至约10分钟、约10分钟至约15分钟、约12分钟至约15分钟、约15分钟至约20分钟、或约10分钟至约20分钟。在一些实施方案中，预处理组合物(诸如ddm溶液)在膀胱中保留持续约12分钟至约15分钟。在一些实施方案中，预处理步骤通过在施用溶瘤病毒之前使个体中的膀胱的腔内表面与预处理组合物接触来进行。在一些实施方案中，该方法还包括洗涤膀胱与预处理组合物接触的腔内表面。在一些实施方案中，该方法还包括在施用溶瘤病毒之前，在使膀胱与预处理组合物接触之后洗涤膀胱的腔内表面。在一些实施方案中，预处理步骤包括膀胱内灌注75ml或100ml的预处理组合物(诸如ddm溶液)。在一些实施方案中，所述个体为人类个体。在一些实施方案中，治疗原位膀胱癌的个体已被鉴定为具有本文所述的病症中的一种或多种。由技术精湛的医师鉴定如本文所述的病症在本领域是惯例(例如，经由血液测试、x-射线、超声、ct扫描、pet扫描、pet/ct扫描、mri扫描、pet/mri扫描、核医学放射性同位素扫描、内窥镜检查、活检、血管造影、ct血管造影等)并且也可能被个人或其他人怀疑，例如，由于肿瘤生长、出血、溃疡、疼痛、淋巴结肿大、咳嗽、黄疸、肿胀、体重减轻，恶病质、出汗、贫血、副肿瘤综合征、血栓形成等。在一些实施方案中，基于由本领域技术人员所了解的多种风险因子和/或诊断方案中的任一种或多种(包括但不限于基因特征、家族史、病史(例如，相关病症的出现和病毒感染史)、生活方式或习惯)，选择个体进行本文所述的治疗方法中的任一种。溶瘤病毒本文所述的方法和组合物涉及溶瘤病毒，例如，溶瘤腺病毒。该溶瘤病毒可以是天然存在的病毒，或经基因修饰的病毒(例如，减毒病毒)和/或具有附加有利特征(例如，在癌细胞中优先复制或编码免疫相关分子)的病毒。适用于本发明的示例性病毒包括但不限于腺病毒，例如h101cg-tg-102(ad5/3-d24-gm-csf)和cg0070；单纯疱疹病毒，例如，talimogenelaherparapvec(t-vec)和hsv-1716呼肠孤病毒，例如，牛痘病毒，例如，jx-594；塞尼卡谷病毒，例如，ntx-010和svv-001；新城疫病毒，例如，ndv-ns1和gl-onc1；脊髓灰质炎病毒，例如，pvs-ripo；麻疹病毒，例如，mv-nis；柯萨奇病毒，例如，cavataktm；水疱性口炎病毒；马拉巴病毒和弹状病毒；细小病毒和腮腺炎病毒。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒为野生型溶瘤病毒。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒经基因修饰。在一些实施方案中，溶瘤病毒是减毒的(例如，通过多次传代、灭活或遗传修饰)。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒为能够复制的。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒在癌细胞(诸如在rb途径中有缺陷的癌细胞)中优先复制。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒(诸如溶瘤腺病毒)包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子。在一些实施方案中，肿瘤特异性启动子为e2f-1启动子，诸如人类e2f-1启动子或包含以seqidno:1示出的核苷酸序列的e2f-1启动子，如下文所示。在一些实施方案中，溶瘤病毒复制所必需的病毒基因选自e1a、e1b和e4。在一些实施方案中，溶瘤病毒(诸如溶瘤腺病毒)包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤选择性启动子。在一些实施方案中，肿瘤选择性启动子为e2f-1启动子，诸如人类e2f-1启动子或包含以seqidno:1示出的核苷酸序列的e2f-1启动子，如下文所示。在一些实施方案中，溶瘤病毒复制所必需的病毒基因选自e1a、e1b和e4。seqidno:1(e2f-1启动子)gggcccaaaattagcaagtgaccacgtggttctgaagccagtggcctaaggaccacccttgcagaaccgtggtctccttgtcacagtctaggcagcctctggcttagcctctgtttctttcataacctttctcagcgcctgctctgggccagaccagtgttgggaggagtcgctactgagctcctagattggcaggggaggcagatggagaaaaggagtgtgtgtggtcagcattggagcagaggcagcagtgggcaatagaggaagtgagtaaatccttgggagggctccctagaagtgatgtgttttctttttttgttttagagacaggatctcgctctgtcgcccaggctggtgtgcagtggcatgatcatagctcactgcagcctcgacttctcgggctcaagcaatcctcccacctcagcctcccaagtagctgggactacgggcacacgccaccatgcctggctaatttttgtattttttgtagagatgggtcttcaccatgttgatcaggctggtctcgaactcctgggctcatgcgatccaccccgccagctgattacagggattccggtggtgagccaccgcgcccagacgccacttcatcgtattgtaaacgtctgttacctttctgttcccctgtctactggactgtgagctccttagggccacgaattgaggatggggcacagagcaagctctccaaacgtttgttgaatgagtgagggaatgaatgagttcaagcagatgctatacgttggctgttggagattttggctaaaatgggacttgcaggaaagcccgacgtccccctcgccatttccaggcaccgctcttcagcttgggctctgggtgagcgggatagggctgggtgcaggattaggataatgtcatgggtgaggcaagttgaggatggaagaggtggctgatggctgggctgtggaactgatgatcctgaaaagaagaggggacagtctctggaaatctaagctgaggctgttgggggctacaggttgagggtcacgtgcagaagagaggctctgttctgaacctgcactatagaaaggtcagtgggatgcgggagcgtcggggcggggcggggcctatgttcccgtgtccccacgcctccagcaggggacgcccgggctgggggcggggagtcagaccgcgcctggtaccatccggacaaagcctgcgcgcgccccgccccgccattggccgtaccgccccgcgccgccgccccatcccgcccctcgccgccgggtccggcgcgttaaagccaataggaaccgccgccgttgttcccgtcacggacggggcagccaattgtggcggcgctcggcggctcgtggctctttcgcggcaaaaaggatttggcgcgtaaaagtggccgggactttgcaggcagcggcggccgggggcggagcgggatcgagccctcgccgaggcctgccgccatgggcccgcgccgccgccgccgcctgtcacccgggccgcgcgggccgtgagcgtcatg在一些实施方案中，溶瘤病毒(诸如溶瘤腺病毒)包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码可操作地连接至病毒启动子的免疫相关分子(诸如细胞因子或趋化因子)的核酸。在一些实施方案中，肿瘤特异性启动子为e2f-1启动子，诸如人类e2f-1启动子或包含以seqidno:1示出的核苷酸序列的e2f-1启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒复制所必需的病毒基因选自e1a、e1b和e4。在一些实施方案中，可操作地连接至编码免疫相关分子的核酸的病毒启动子是e3启动子。在一些实施方案中，免疫相关分子是gm-csf。在一些实施方案中，溶瘤病毒(诸如溶瘤腺病毒)包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞选择性启动子和编码可操作地连接至病毒启动子的免疫相关分子(诸如细胞因子或趋化因子)的核酸。在一些实施方案中，肿瘤选择性启动子为e2f-1启动子，诸如人类e2f-1启动子或包含以seqidno:1示出的核苷酸序列的e2f-1启动子。在一些实施方案中，所述溶瘤病毒复制所必需的病毒基因选自e1a、e1b和e4。在一些实施方案中，可操作地连接至编码免疫相关分子的核酸的病毒启动子是e3启动子。在一些实施方案中，免疫相关分子是gm-csf。在一些实施方案中，溶瘤病毒为血清5型腺病毒，其中天然腺病毒的内源性e1a启动子和e319kd编码区被人类e2f-1启动子和编码免疫相关分子的核酸(诸如细胞因子或趋化因子，例如gm-csf)替代。在一些实施方案中，肿瘤特异性启动子为人类e2f-1启动子或包含以seqidno:1示出的核苷酸序列的e2f-1启动子。在一些实施方案中，溶瘤病毒为cg0070，其为在e1a基因处具有e2f启动子并且在e3基因处具有gm-csf表达的血清5型腺病毒。cg0070为条件性复制的溶瘤腺病毒(血清5型)，其被设计为在rb途径中有缺陷的癌细胞中优先复制并杀死该rb途径中有缺陷的癌细胞。这种载体由通过rb途径有缺陷的肿瘤细胞中上调的启动子(例如，e2f-1启动子)转录调节。在所有癌症的大约85％中，rb途径的一个或多个基因(诸如，肿瘤抑制子rb基因)突变。除了其限制性繁殖之外，cg0070还编码人类细胞因子gm-csf，其在感染的肿瘤细胞中选择性表达以刺激针对未感染的远端(诸如癌细胞转移)和局部肿瘤病灶的免疫应答。溶瘤腺病毒载体cg0070的基因组结构示意性地示于图1中。腺病毒早期e1a基因的产物对于腺病毒基因组的其他区域的有效表达是必需的。cg0070已经工程化以在人类e2f-l启动子的控制下表达e1a基因，其提供对e1a基因产物的肿瘤特异性。为了避免转录通读激活e1a表达，在e2f-1启动子的5'插入多腺苷酸化信号(pa)。除了19kd-编码区之外，cg0070还包括整个野生型e3区域。含e3与e3缺失的溶瘤腺病毒载体的直接比较示出含e3的载体在肿瘤扩散和功效方面的优异性。替代19kd基因，cg0070携带在内源性e3启动子(e3p)控制下的人类gm-csf的cdna。因为e3启动子继而被e1a激活，因此病毒复制和gm-csf表达两者最终均在e2f-l启动子的控制下。病毒载体主链的其余部分，包括e2、e4、晚期蛋白区域和反向末端重复序列(itr)，与野生型ad5基因组相同。cg0070在hela-s3细胞中制造，并且通过洗涤剂裂解从感染的hela-s3细胞释放。通过色谱法从裂解物纯化cg0070，并且然后配制成5％蔗糖、10mmtris、0.05％聚山梨酸酯-80、1％甘氨酸、1mm氯化镁，ph7.8。cg0070以无菌的微乳白色冷冻液体形式在带塞玻璃小瓶中提供。颗粒浓度/ml(vp/ml)在每批cg0070的分析证书中说明。cg0070具有附加的潜在抗肿瘤活性，因为其携带人类gm-csf的cdna，其是用于产生持久抗肿瘤免疫的关键细胞因子。因此，cg0070是选择性复制的溶瘤载体，其具有通过两种机制攻击肿瘤的潜力：作为复制载体的直接细胞毒性和诱导宿主免疫应答。已进行了体外和体内研究以表征cg0070的肿瘤选择性和抗肿瘤活性及安全性。参见，例如，美国专利申请公布号us20150190505，该专利全文以引用方式并入本文。iii.药物组合物、药盒和制品在另一方面，提供了可用于本文所述方法中任一种的药盒、单位剂量和制品。在一些实施方案中，提供了一种药物组合物，其包含溶瘤病毒(诸如cg0070)和药学上可接受的载体，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。药物组合物可用于根据本文所述方法中任一种治疗膀胱cis(诸如纯cis)。合适的药物载体包括无菌水；盐水、葡萄糖；葡萄糖的水或盐水溶液；蓖麻油和环氧乙烷的缩合产物，每摩尔蓖麻油结合约30摩尔至约35摩尔环氧乙烷；液体酸；低级链烷醇；油诸如玉米油；花生油、芝麻油等，其具有乳化剂诸如脂肪酸的单甘油酯或二甘油酯、或磷脂，例如卵磷脂等；乙二醇；聚亚烷基二醇；在悬浮剂存在下的含水介质，例如羧甲基纤维素钠；藻酸钠；聚(乙烯基吡咯烷酮)；等，其单独使用，或具有合适的分配剂诸如卵磷脂；聚氧乙烯硬脂酸酯；等。载体还可包含辅助剂，诸如防腐剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂等，以及促渗剂。最终形式可为无菌的，并且还能够轻松地穿过注射装置，诸如中空针。可通过适当选择溶剂或赋形剂来实现和维持适当的粘度。药物载体可包括用于药物递送的主动或被动赋形剂，诸如聚合物和非聚合物体系。其他药学上可接受的载体及其制剂描述于标准制剂论文中，例如e.w.martin的remington'spharmaceuticalsciences。本文所述的药物组合物可包含其他试剂、赋形剂或稳定剂以改善组合物的特性。合适的赋形剂和稀释剂的示例包括但不限于乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯树胶、磷酸钙、藻酸盐、黄蓍胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、水、盐水溶液、糖浆、甲基纤维素、羟基苯甲酸甲酯和羟基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸镁以及矿物油。在一些实施方案中，将药物组合物配制成具有在约4.5至约9.0范围内的ph，包括例如约5.0至约8.0、约6.5至约7.5或者约6.5至约7.0中的任一者的ph范围。在一些实施方案中，还可通过添加合适的张度调节剂(诸如甘油)使药物组合物与血液等渗。在一些实施方案中，提供了一种用于治疗个体的原位膀胱癌(诸如纯cis)的药盒，所述药盒包含溶瘤病毒(诸如cg0070)，其中所述溶瘤病毒包含病毒载体，所述病毒载体包含可操作地连接至溶瘤病毒复制所必需的病毒基因的肿瘤细胞特异性启动子和编码免疫相关分子的异源性基因。在一些实施方案中，药盒还包含预处理组合物，所述预处理组合物包含转导增强剂，诸如n-十二烷基-d-麦芽糖苷(ddm)。在一些实施方案中，药盒还包括用于实施上述方法中任一种的装置、材料、和/或说明书。用于膀胱内递送的医疗装置可包括导管，例如，rusch173430foleycatheter和bardlubri-silfoleycatheter#70516si。涉及使用溶瘤病毒(诸如cg0070)的说明书通常包括关于预期治疗的剂量、剂量给药时间表和施用途径的信息。容器可以是单位剂量、批量包装(例如，多剂量包装)或亚单位剂量。例如，可提供药盒，其包含足够剂量的如本文所公开的溶瘤病毒以提供持续延长的时间段，诸如下列中的任一者的个体有效治疗：一周、2周、3周、4周、6周、8周、3个月、4个月、5个月、7个月、8个月、9个月、12个月或更长。药盒还可包括溶瘤病毒的多个单位剂量和使用说明书，其以足以在药房(例如，医院药房和配混药房)中储存和使用的量包装。本发明的药盒处于合适的包装中。合适的包装包括但不限于小瓶、瓶子、广口瓶、柔性包装(例如，密封的聚酯薄膜或塑料袋)等。药盒可任选地提供附加组分，诸如缓冲剂和解释性信息。因此，本申请还提供了制品，其包括小瓶(诸如密封小瓶)、瓶子、广口瓶、柔性包装等。所述制品还可包括容器以及容器上或与容器相关联的标签或包装说明书。合适的容器包括，例如瓶子、小瓶、注射器等。容器可由各种材料(诸如玻璃或塑料)形成。一般来讲，容器容纳如本文所述有效治疗膀胱cis的组合物，并且可具有无菌进入口。标签或包装说明书指出所述组合物用于治疗个体的具体病症。标签或包装说明书还包含用于将组合物施用于个体的说明。还设想了包括本文所述的组合疗法的制品和药盒。包装说明书是指通常包括在治疗产品的商业包装中的说明书，其包含关于使用此类治疗产品的指示、用途、剂量、施用、禁忌症和/或警告的信息。在一些实施方案中，包装说明书指示该组合物用于治疗原位膀胱癌(诸如纯cis)。另选地，所述制品还可包括第二容器，所述第二容器包含药学上可接受的缓冲剂，诸如抑菌注射用水(bwfi)、磷酸盐缓冲盐水、林格氏溶液和葡萄糖溶液。所述容器还可包含商业和用户角度所需的其它材料，包括其它缓冲剂、稀释剂、过滤器、针和注射器。实施例以下实施例旨在仅对本发明进行举例说明并且因此不应被视为以任何方式限制本发明。以下实施例和详细描述作为说明且不作为限制来提供。实施例1：用于治疗bcg-无反应非肌肉浸润性膀胱癌(nmibc)的cg0070的ii期临床试验该实施例描述了在bg疗法失败并拒绝膀胱切除术的非肌肉浸润性膀胱癌患者中进行膀胱内cg0070单一疗法的安全性和功效的非盲、单臂、ii期、多中心研究。大多数bcg膀胱内疗法(标准治疗)失败的患有nmibc(cis、cis与ta和/或t1，频繁或不受控复发的高级ta或t1)的患者通常不具有其他选择，而是进行膀胱切除术。膀胱切除术是与主要发病率、死亡率和生活质量问题相关联的手术。发病率和长期繁琐的医疗护理与膀胱切除术之后患者寿命的剩余时间相关联。在nmibc期的大多数患者不示出疾病进展到肌层或癌细胞转移的征象，这使得手术成为非常困难的决定。在该患者群体中存在对治疗替代方案的未满足的需求。cg0070是一种复制选择性溶瘤腺病毒，其通过它们的缺陷性视网膜母细胞瘤(rb)途径破坏膀胱肿瘤细胞。先前的膀胱内cg0070报告示出在先前不响应于bcg的高级nmibc患者中的显著作用。然而，有限的自然增长阻碍了对功效的分析，尤其是对病理亚群的功效分析。在从第一次膀胱内施用cg0070的6个月时进行临时分析，以研究cg0070单一疗法在患有原位膀胱癌(cis)的患者(具有或不具有ta期或t1期并发乳头状癌)中的功效。实验设计在该研究中，每位患者每周以1×1012个病毒颗粒的剂量接受膀胱内cg0070持续六周。在第一次膀胱内干预后6个月达到部分反应或完全反应的患者利用每周六次膀胱内灌注cg0070的相同治疗疗程进行维持。每3个月对患者随访持续24个月。在6个月随访时，患者经历膀胱镜检查、尿细胞学检查和活检。如果没有发现可疑的病变，则从患者获得膀胱的随机活检。活检标本由当地和中央病理学家进行检查，并使用两种活检读数确定治疗反应。该研究的主要结果测量自第一次膀胱内施用cg0070之日起的18个月时间点处的持久完整反应比例(dcr)。dcr定义为经历持续至少6个月或更长，自初始确认的完全反应日起至少12个月或更长，以及自第一次膀胱内干预日起至少18个月的持久完全反应的患者比例(第一次临时分析)。次要结果测量包括：第一次膀胱内治疗之后18个月时的无膀胱切除术生存率、第一次膀胱内治疗之后18个月时的完全反应生存率、第一次膀胱内治疗之后18个月时的无进展生存率、第一次膀胱内治疗之后18个月时进展为肌肉浸润性疾病的时间、第一次膀胱内治疗之后18个月和24个月时的总体生存率、膀胱切除术时或活检时直至24个月在干预前和干预后之间的pd-l1状态变化、通过ihc获得的在肿瘤部位处的癌细胞和免疫细胞的pd-l1状态、在膀胱切除术时的器官受限疾病比例、在膀胱切除术时局部淋巴结中没有癌细胞的患者比例、在第一次膀胱内治疗之后24个月时的完全反应比例、具有至少12个月持续时间的完全反应的患者比例、在第一次膀胱内治疗之后24个月时的疾病复发比例、以及具有小于12个月持续时间的部分反应和/或完全反应的患者比例。患者必须满足以下全部条件以适合于研究：1.18岁或以上，包括成人和老年人；2.患者必须具有病理上确认的非肌肉浸润性膀胱癌(nmibc)高级疾病(hg)，如由2004who分类体系所定义的；3.患者必须不具有肌肉浸润性疾病的证据；4.患者必须能够向中央病理学家提供组织病理学上确认的移行细胞(尿道上皮)癌的足够的活检样本。具有混合组织学(但具有<50％变体)的尿道上皮肿瘤是适合的；5.患者必须已根据推荐的时间表接受至少两个或更多个先前的膀胱内疗法疗程。bcg必须是先前施用的疗法中的一个；6.患者可在六个月时间段内bcg诱导疗法失败或已用bcg成功治疗，但随后发现复发。膀胱内bcg疗法的第一个标准疗程必须包括每周至少六次治疗(每个疗程允许的灌注范围是4至9)。bcg疗法的第二个疗程必须包括每周至少两次治疗；7.患者在注册时或在过去患有cis或cis与ta和/或t1疾病。对于那些在注册时仅患有ta或t1疾病且不具有cis史的患者，他们必须具有在任何类型的最近膀胱内疗法的12个月内必须发生的疾病复发，或在bcg维持的18个月内的疾病复发，或在bcg诱导的24个月内的疾病复发；8.t1患者需要在他们的最新活检中包括肌肉证据；并且如果不包括，则必须在注册之前重新进行turbt；9.患者在经签署的知情同意书特别章节中拒绝了根治性膀胱切除术，由此研究者向受试者明确解释了膀胱切除术的延缓可增加他/她的疾病进展机会，其结果可导致严重的和危及生命的后果；10.患者必须能够在他们最近的诊断过程(通常是诊断活检、经尿道膀胱肿瘤切除(turbt)过程或阳性尿细胞学检查)的十周内进入研究；11.东部肿瘤协作组(ecog)性能状态<2；12.未怀孕或哺乳期；13.具有生育潜力的患者必须同意使用适当的避孕措施；14.同意研究特定的知情同意和hipaa授权，以释放个人健康信息；以及15.足够的基线cbc、肾功能和肝功能。参数描述为wbc>3000细胞/mm3，anc>1,000细胞/mm3，血红蛋白>9.5g/dl，并且血小板计数>100,000细胞/mm3；足够的肾功能：血清肌酸酐<2.5mg/dl；胆红素，ast和alt不超过2×正常上限；pt/inr、ptt和纤维蛋白原在机构可接受的范围内；在cg0070的第一次剂量给药之前，绝对淋巴细胞计数≥800/μl。满足以下任何排除标准的患者将被排除在研究之外：1.先前对于膀胱癌的全身化疗或放射。注：先前对于浅表性疾病的免疫疗法或膀胱内(在膀胱内施用)化疗是可接受的；2.暴露于人源化或人类治疗性单克隆抗体后的过敏反应病史、对gm-csf或酵母衍生产物的超敏反应、临床上有意义的过敏反应、或任何已知的超敏反应或先前对研究药物中的制剂赋形剂中任一种的反应；3.已知的hiv、hbv或hcv感染；4.在进行研究时期望使用研究方案中未指定的化疗或放疗；5.研究者认为，将使研究载体的施用有害于患者的任何潜在医疗条件，可使不良事件的解释不清楚，或者不允许进行适当的手术切除；6.在登记之前28天内对任何研究性临床试验进行全身治疗；7.利用免疫抑制剂或免疫调节剂(包括任何全身性类固醇)进行同步治疗(例外：允许吸入或局部施用的类固醇，以及急性和慢性标准剂量nsaid)。使用短疗程(即≤1天)糖皮质素是可接受的，以预防对用于ct扫描的iv对比物的反应；8.在进入研究后3个月内进行免疫抑制疗法，包括：环孢素、抗胸腺细胞球蛋白或他克莫司；9.过去一年内的先前实验性癌症疫苗治疗(例如树突状细胞疗法、热休克疫苗)历史；10.iii期或更高癌症病史，不包括尿道上皮癌。基底或鳞状细胞皮肤癌必须进行适当治疗，并且受试者在注册时必须无疾病。患有i期或ii期癌症病史的受试者，必须已进行充分治疗，并且在注册时已≥2年无疾病；11.进行性或持续性病毒或细菌感染；12.所有感染必须解决，并且患者在进行研究之前必须在没有抗生素的情况下保持7天不发热；13.尿路感染，特别包括膀胱感染，必须在进行研究之前解决；以及14.不愿意或不能遵守方案或与研究者和现场人员充分合作。临时分析结果临时分析1在2016年10月截止日期的临时分析中，在该ii期单臂多中心试验(nct02365818)中，对三十六名患有残留性高级ta、t1或原位癌(cis)+/-ta/t1的患者进行6个月随访。纳入标准要求接受至少2个先前的cis膀胱内疗法疗程，其中至少1个为bcg疗程。患者在6个月内bcg诱导疗法失败，或已经利用bcg成功治疗并且随后复发。6个月时的完全反应(cr)被定义为在细胞学、膀胱镜检查和随机活组织检查中没有疾病。如下图2和表1所示，在该临时分析中的36名患者中，有18名cis、4名cis+ta、3名cis+t1、8名ta和3名t1。总体6个月cr为44％。值得注意的是，患有纯cis的患者的6个月cr为72.2％，cis+/-ta/t152％，cis+ta/t10％，纯ta/t127％。在cis的无应答者中，有4名患者(22％)在6个月具有持续性cis，1名(5.6％)进展到cis+t1。患有纯t1或cis+ta/t1的患者均不具有6个月cr。在患有cis+ta/t1的患者(n＝7)中，5名具有持续性ta/t1+/-cis，然而2名在6个月的活检中具有cis。表1：可评估患者中的6个月cr结果。分期cr数％仅cis(n＝18)1372cis+ta(n＝4)00cis+t1(n＝3)00cis+ta/t1(n＝25)1352ta(n＝8)337t1(n＝3)00ta/t1(n＝11)327总体cr率(n＝36)16446个月时的所有治疗相关的不良事件(ae)均为1至3级，最常见的是泌尿：排尿困难(47％)、膀胱痉挛(44％)、血尿(36％)和尿急(33％)。免疫治疗相关的ae包括疲劳(11％)和发冷(5.6％)。3级治疗相关的不良反应包括排尿困难(5.6％)和低血压(2.7％)。没有4/5级治疗相关的ae。临时分析22017年4月14日截止日期的临时分析的6个月临床反应结果汇总于表2至5中。根据病理学或尿细胞学检查或在最近的病理检查中没有恶性肿瘤证据的患者被取消了研究的资格。为了确定每个患者的基线期，由当地病理学家和中央病理学家评估患者样本。如果当地病理学家和中央病理学家不一致，但两者均发现恶性肿瘤，则将当地病理学家和中央病理学家确定的分期组合。如果当地病理学家和中央病理学家不一致并且仅一人发现恶性肿瘤，则使用由发现恶性肿瘤的病理学家确定的分期，认为患者具有恶性肿瘤。如果患者样本仅由当地病理学家或中央病理学家评估，则使用单个可用读数。如果病理学家都没有发现恶性肿瘤，但尿细胞学检查阳性，则患者的阶段标注为“未知”。如果病理学家都没有发现恶性肿瘤，但尿细胞学检查不存在或阴性，则患者的阶段标注为“阴性”。患有“乳头状”的病理报告以ta+t1形式输入。患有“高级ucc”的病理报告被解释为“ta”，除非鉴定出浸润到固有层(t1)或肌层(t2)。如果尿细胞学检查是唯一的评估方法，并且结果是非典型的或可疑的，并且没有病理报告，则将该分期标注为“阴性”。如果尿细胞学检查是唯一的评估方法，并且第二次尿细胞学检查结果为阴性，则认为时间点为阴性。使用与上述基线期评估相同的分期规则确定患者的临床反应。具有完全反应(cr)的患者包括在cg0070治疗后6个月时被评估为“阴性”的患者。患有进行性疾病(pd)的患者包括先前时间点评估为“阴性”且当前时间点评估不为“阴性”的那些患者，以及进展到t2或更高期的那些患者。表2：基于6个月时意图治疗(itt)群体(n＝67*)中的分期的完全反应(cr)率分期cr数％cis(n＝31)1445.2cis+ta/t1(n＝16)425.0含cis(n＝47)1838.3ta/t1(n＝19)315.8未知(n＝1)00全部(n＝67)2131.3*67名患者中有22名被认为在6个月时不可评估(ne)，并且假设不具有cr。表3：itt群体中6个月时的总体反应(n＝67)反应患者数％cr2131.3非-cr(sd+复发)1217.9pd1217.9ne2232.8表4：基于达到6个月评估的患者(n＝45)的分期的完全反应(cr)分期cr数％cis(n＝24)1458.3cis+ta/t1(n＝12)433.3含cis(n＝36)1850ta/t1(n＝9)333.3全部(n＝45)2146.7表5：达到6个月评估的患者(n＝45)中的总体反应反应患者数％cr2146.7非-cr(sd+复发)1226.7pd1226.7该ii期研究展示出膀胱内cg0070在6个月时产生总体46.7％的完全反应，其具有对患有高风险bcg无反应nmibc患者的可接受的毒性水平。在纯cis患者中具有特别强的反应和受限的进展。在bcg无反应nmibc群体中，该研究的持续随访将是有价值的。最后结果利用膀胱内cg0070治疗总共67名患有cis、cis+ta、cis+t1、ta、或t1期膀胱癌的患者。如上所述，在6个月和12个月评估患者的完全反应。表7示出患有bcg无反应、bcg难治和bcg复发膀胱癌的患者对cg0070的反应率。bcg无反应患者示出在6个月时的49％完全反应率和在12个月时的30％完全反应率。bcg难治患者示出在6个月时的56％完全反应率和在12个月时的44％完全反应率。最后，bcg复发患者示出在6个月时的35％反应率和在12个月时的18％反应率。这展示出cg0070对于治疗bcg无反应、bcg复发和bcg难治患者是有效的。表6：被评估患者的癌症期表7：6个月和12个月之后的反应率bcg无反应膀胱癌患者的反应性还通过癌症亚型进行分析，如表8中所汇总的。如表8中所示，患有乳头状癌的患者示出比患有含cis癌症的患者在一定程度上更高的完全反应率(在6个月时，62％cr相对于46％cr，和在12个月时55％cr相对于26％cr)。表8：bcg无反应亚群中的完全反应率。还评估了复发时间与对cg0700疗法的反应性之间的关联。在达到cr之后复发的14名受试者中，64％(9/14)在3个月时达到cr之后的6个月时复发。如果不在该时间点之后发生复发，则cr在9个月开始可持续。在达到cr之后，ta/t1患者均不复发。概括地说，该cg0700的ii期研究展示出其对于治疗含cis膀胱癌和乳头状膀胱癌两者的有效性。无反应、bcg难治和bcg复发膀胱癌的患者均示出对cg0700的高反应率，从而展示出其在这些医疗服务不足的患者组中的功效。cg0700疗法的高功效水平表明，其可以作为根治性膀胱切除术的一种可行的替代方案，从而允许患有非肌肉浸润性膀胱癌的患者保留他们的膀胱并增加这些患者的生活质量。实施例2：用于治疗膀胱癌患者的cg0070的iii期临床试验该研究示出包括诱导期和维持期的cg0070的治疗方案的效果。在诱导期期间，膀胱癌患者在第0个月，每周一次施用cg0700疗法持续六周。在三个月时，对患者进行重新评估。患有持续性疾病的患者将继续进行诱导疗法，并在三个月时每周接受cg0070持续六周。示出完全反应的患者将开始维持期，并且三个月时每周接受cg0070持续三周。在6个月时，所有患者均将在维持期每周接受cg0070持续三周。在12个月和18个月中，患者将在维持期期间每周接受cg0070持续三周。患者将接受最多21个剂量的cg0700。评估完全反应率。实施例3：未接受turbt的ta或t1非肌肉浸润性膀胱癌患者的治疗该研究示出例如在新辅助环境中，未接受经尿道膀胱肿瘤切除(turbt)的ta或t1非肌肉浸润性膀胱癌患者的治疗效果。对未接受turbt的患者施用cg0070。患者包括不适合turbt的那些患者以及被认为患有不可切除的ta期或t1期膀胱癌的患者。评估完全反应率。当前第1页12