一种表面展示猪轮状病毒VP7蛋白的重组类干酪乳杆菌的构建及其应用的制作方法

文档序号:18233967发布日期:2019-07-24 08:33阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种表面展示猪轮状病毒VP7蛋白的重组类干酪乳杆菌,其特征在于:是在类干酪乳杆菌的基因组中插入猪轮状病毒VP7蛋白的基因序列。

2.根据权利要求1所述的表面展示NDV F的重组类干酪乳杆菌,其特征在于:猪轮状病毒VP7蛋白的基因序列如SEQ ID No.1所示。

3.一种根据权利要求1所述的表面展示猪轮状病毒VP7蛋白的重组类干酪乳杆菌的构建方法,其特征在于:该方法包括以下步骤:

(1)猪轮状病毒VP7蛋白的基因片段的扩增;

(2)目的片段构建入穿梭质粒PLA,转化大肠杆菌,筛选得阳性重组质粒pLA-VP7;

(3)阳性重组质粒pLA-VP7转化类干酪乳杆菌,筛选得筛选阳性重组类干酪乳杆菌pLA-VP7/L.paracasei。

4.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于:步骤(1)中扩增所用引物序列为:

Forward:5'-ACGCGTCGACGGCTTTAAAAGAGAGAATTT–3(SEQ ID No.2)

Reverse:5'-CCCAAGCTTGGTCACATCATACAACTCTAATC–3(SEQ ID No.3)。

5.权利要求1所述的表面展示猪轮状病毒VP7蛋白的重组类干酪乳杆菌在抗猪轮状病毒中的应用。

6.权利要求1所述的表面展示猪轮状病毒VP7蛋白的重组类干酪乳杆菌的给药方式为黏膜给药。

7.根据权利要求6所述的表面展示猪轮状病毒VP7蛋白的重组类干酪乳杆菌,其特征在于:所述的黏膜给药为口服。

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