稳定性得到提高的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或其抗原结合片段的制作方法

文档序号:26002119发布日期:2021-07-23 21:19阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,包含:

(a)免疫球蛋白重链可变域,包括重链骨架区1-重链互补决定区1-重链骨架区2-重链互补决定区2-重链骨架区3-重链互补决定区3-重链骨架区4的结构;以及

(b)免疫球蛋白轻链可变域,包括轻链骨架区1-轻链互补决定区1-轻链骨架区2-轻链互补决定区2-轻链骨架区3-轻链互补决定区3-轻链骨架区4的结构,

上述重链互补决定区1、重链互补决定区2及重链互补决定区3分别由seqidno:1、seqidno:2、seqidno:3的氨基酸序列组成,上述轻链互补决定区1、轻链互补决定区2及轻链互补决定区3由seqidno:4、seqidno:5、seqidno:6的氨基酸序列组成。

2.根据权利要求1所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,

上述(a)的重链骨架区1由下述i)的氨基酸序列组成:

i)x1vqlvqsgaevkkpgx16sx18x19x20scx23x24sgx27x28fx30,

在上述序列中,各自独立地,

x1为q或e;

x16为e或s;

x18为l或v;

x19为r或k;

x20为i或v;

x23为q或k;

x24为g或a;

x27为y;

x28为s;以及

x30为p。

3.根据权利要求2所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,

上述i)的序列包含选自以下的特定氨基酸残基:

x1为q;x16为e;x18为l;x19为r;x20为i;x23为q;x24为g;x27为y;x28为s;以及x30为p。

4.根据权利要求3所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,

上述i)的序列被下述氨基酸残基取代:

-x1为e,x19为k,x23为k,x30为p;

-x16为s,x18为v,x19为k,x20为v;或者

-x16为s,x18为v,x19为k,x20为v,x23为k,x24为a。

5.根据权利要求1所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,

上述(a)的重链骨架区2由下述ii)的氨基酸序列组成:

ii)wvrqx40pgx43glewmg

在上述序列中,各自独立地,

x40为m或a;以及

x43为k或q。

6.根据权利要求5所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,

上述ii)的序列包含选自以下的特定氨基酸残基:

x40为m;以及x43为k。

7.根据权利要求6所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,

上述ii)的序列被下述氨基酸残基取代:

x40为a,x43为q。

8.根据权利要求1所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,

上述(a)的重链骨架区3由下述iii)的氨基酸序列组成:

iii)x67vtix71adx74sx76stayx81x82x83sslx87x88x89dtax93yycar

在上述序列中,各自独立地,

x67为h、q或r;

x71为s或t;

x74为s或k;

x76为s、i或t;

x81为l或m;

x82为q或e;

x83为w或l;

x87为k或r;

x88为a或s;

x89为s或e;以及

x93为m或v。

9.根据权利要求8所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,

上述iii)的序列包含选自以下的特定氨基酸残基:

x67为h;x71为s;x74为s;x76为s;x81为l;x82为q;x83为w;x87为k;x88为a;x89为s;以及x93为m。

10.根据权利要求9所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,

上述iii)的序列被下述氨基酸残基取代:

-x67为q,x74为k,x78为i;

-x67为r,x71为t,x76为t;

-x67为r,x71为t,x76为t,x81为m,x82为e,x83为l,x87为r,x88为s,x89为e;

-x66为r,x71为t,x76为t,x81为m,x82为e,x83为l,x87为r,x88为s,x89为e,x93为v;或者

-x67为r,x71为t,x74为k,x76为t,x81为m,x82为e,x83为l,x87为r,x88为s,x89为e,x93为v。

11.根据权利要求1所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,

上述(a)的重链骨架区4由下述iv)的氨基酸序列组成:

iv)wgqgtlvtvss。

12.根据权利要求1所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,

上述(b)的轻链骨架区1由下述v)的氨基酸序列组成:

v)x1ix3x4tqspx9x10lsx13sx15gx17rx19tx21x22c

在上述序列中,各自独立地,

x1为d或e;

x3为q或v;

x4为m或l;

x9为s或g;

x10为f、s或t;

x13为a或l;

x15为v或p;

x17为d或e;

x19为v或a;

x21为i或l;以及

x22为t或s。

13.根据权利要求12所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,

上述v)的序列包含选自以下的特定氨基酸残基:

x1为d;x3为q;x4为m;x9为s;x10为f;x13为a;x15为v;x17为d;x19为v;x21为i;以及x22为t。

14.根据权利要求13所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,

上述v)的序列被下述氨基酸残基取代:

-x10为s;

-x9为g,x13为l,x15为p,x17为e,x19为a,x21为l,x22为s;

-x1为e,x9为g,x10为t,x13为l,x15为p,x17为e,x19为a,x21为l,x22为s;或者

-x1为e,x3为v,x4为l,x9为g,x10为t,x13为l,x15为p,x17为e,x19为a,x21为l,x22为s。

15.根据权利要求1所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,

上述(b)的轻链骨架区2由下述vi)的氨基酸序列组成:

vi)wyqqkpgx42apx45lliy

在上述序列中,各自独立地,

x42为t、k或q;以及

x45为k或r。

16.根据权利要求15所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,

上述vi)的序列包含选自以下的特定氨基酸残基:

x42为t;以及x45为k。

17.根据权利要求16所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,

上述vi)的序列被下述氨基酸残基取代:

-x42为k;或者

-x42为q,x45为r。

18.根据权利要求1所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,

上述(b)的轻链骨架区3由下述vii)的氨基酸序列组成:

vii)gx58px60rfsgsgsgtdftltisx77lx79pedx83atyyc

在上述序列中,各自独立地,

x58为v或i;

x60为s或d;

x77为s或r;

x79为q或e;以及

x83为s或f。

19.根据权利要求18所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,

上述vii)的序列包含选自以下的特定氨基酸残基:

x58为v;x60为s;x77为s;x79为q;以及x83为s。

20.根据权利要求19所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,

上述vii)的序列被下述氨基酸残基取代:

-x83为f;

-x60为d,x77为r,x79为e,x83为f;或者

-x58为i,x60为d,x77为r,x79为e,x83为f。

21.根据权利要求1所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,

上述(b)的轻链骨架区4由下述viii)的氨基酸序列组成:

viii)fgggtkveik。

22.根据权利要求1所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,包含:

选自seqidno:11至seqidno:16及seqidno:34至seqidno:39中的一个氨基酸序列;以及

选自seqidno:17至seqidno:21及seqidno:41至seqidno:45中的一个氨基酸序列。

23.根据权利要求1所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或抗原结合片段,其特征在于,上述抗原结合片段为fab、fab'、f(ab')2、fv、scfv或化学连接的f(ab')2。

24.一种抗c-肝细胞生长因子受体抗体或其抗原结合片段,其特征在于,包含:

(a)免疫球蛋白重链可变域,包含seqidno:1的重链互补决定区1、seqidno:2的重链互补决定区2以及seqidno:3的重链互补决定区3;

(b)免疫球蛋白重链恒定区结构域,包含seqidno:7的ch1;

(c)免疫球蛋白轻链可变域,包含seqidno:4的轻链互补决定区1、seqidno:5的轻链互补决定区2、seqidno:6的轻链互补决定区3;以及

(d)免疫球蛋白轻链恒定区结构域,包含seqidno:8的ck,

其中,上述seqidno:7的ch1的第97位氨基酸残基及seqidno:8的ck的第2位氨基酸残基中的至少一个分别被精氨酸、苏氨酸取代并变异。

25.根据权利要求24所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或其抗原结合片段,其特征在于,上述seqidno:7的ch1的第97位氨基酸残基被精氨酸取代并变异,上述seqidno:8的ck的第2位氨基酸残基被苏氨酸取代并变异。

26.根据权利要求24所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或其抗原结合片段,其特征在于,上述(a)的免疫球蛋白重链可变域包含seqidno:11至seqidno:16中的一个氨基酸序列。

27.根据权利要求24所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或其抗原结合片段,其特征在于,上述(a)的免疫球蛋白重链可变域包含seqidno:11及seqidno:14至seqidno:16中的一个氨基酸序列。

28.根据权利要求24所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或其抗原结合片段,其特征在于,上述(a)的免疫球蛋白重链可变域包含seqidno:14至seqidno:16中的一个氨基酸序列。

29.根据权利要求24所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或其抗原结合片段,其特征在于,上述(c)的免疫球蛋白轻链可变域包含seqidno:17至seqidno:21中的一个氨基酸序列。

30.根据权利要求24所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或其抗原结合片段,其特征在于,上述(c)的免疫球蛋白轻链可变域包含seqidno:17或seqidno:18的氨基酸序列。

31.根据权利要求24所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或其抗原结合片段,其特征在于,

上述(a)的免疫球蛋白重链可变域包含seqidno:14至seqidno:16中的一个氨基酸序列;以及

上述(c)的免疫球蛋白轻链可变域包含seqidno:17或seqidno:18的氨基酸序列。

32.根据权利要求24所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或其抗原结合片段,其特征在于,

上述(a)的免疫球蛋白重链可变域包含seqidno:14的氨基酸序列;以及

上述(c)的免疫球蛋白轻链可变域包含seqidno:18的氨基酸序列。

33.一种核酸分子,其特征在于,对权利要求1至32中任一项所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或其抗原结合片段进行编码。

34.一种重组载体,其特征在于,包含权利要求33所述的核酸分子。

35.一种宿主细胞,其特征在于,由权利要求34所述的重组载体转化。

36.一种药剂学组合物,用于治疗缺血性疾病、脑卒中、肾脏损害或疾病、视网膜新生血管形成障碍、神经障碍或疾病或者伤口,其特征在于,包含:

(a)权利要求1至32中任一项所述的抗c-肝细胞生长因子受体抗体或其抗原结合片段的药剂学有效量;以及

(b)药剂学上接受的载体。


技术总结
本发明涉及稳定性得到提高的抗c‑肝细胞生长因子受体(Met)抗体或其抗原结合片段以及其的用途。相比于作为母源抗体的1E4,本发明的上述稳定性得到提高的抗c‑肝细胞生长因子受体抗体或其抗原结合片段具有优秀的生产率和生物活性,并且,改善稳定性、减少免疫原性。因此,对于抗c‑肝细胞生长因子受体抗体的研发,本发明的抗c‑肝细胞生长因子受体抗体或其抗原结合片段示出生产成本的节减、功效减少的抑制以及副作用减少等的优秀特性。

技术研发人员:郑在均;李政勳;权桑浩
受保护的技术使用者:赫利世弥斯株式会社
技术研发日:2019.11.13
技术公布日:2021.07.23
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