一种定量检测样品中mTORmRNA相对表达量的试剂及检测方法与流程

文档序号:23724840发布日期:2021-01-26 15:10阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种定量检测样品中mtor mrna相对表达量的试剂,包括检测用上/下游引物mtor-f/mtor-r和探针mtor-probe,以及内参用上/下游引物actin-f/actin-r探针actin-probe分别是:mtor-f:gggactacagggagaagaagaamtor-r:gcatcagagtcaagtggtcatagmtor-probe:fam-tccttctcaacatcgagcatcgca-tamraactin-f:tgagcgaggctacagcttactin-r:tccttgatgtcgcgcacgatttactin-probe:fam-accaccacggccgagcgg-tamra。2.如权利要求1所述的试剂,其特征在于,mtor-f:mtor-r:mtor-probe的摩尔比为2:2:1。3.如权利要求1所述的试剂,其特征在于,actin-f:actin-r:actin-probe的摩尔比为2:2:1。4.一种定量检测样品中mtor mrna相对表达量的方法,其步骤如下:(1)提取样品中的组织rna;(2)将(1)中提取出的组织rna逆转录为cdna;(3)加入(2)中所述的cdna到反应管中,利用检测用检测用上/下游引物mtor-f/mtor-r和探针mtor-probe定量检测样本中的mtor融合基因表达量;利用内参基因内参用上/下游引物actin-f/actin-r探针actin-probe定量检测样本中的abl表达量,其中,mtor-f:gggactacagggagaagaagaamtor-r:gcatcagagtcaagtggtcatagmtor-probe:fam-tccttctcaacatcgagcatcgca-tamraactin-f:tgagcgaggctacagcttactin-r:tccttgatgtcgcgcacgatttactin-probe:fam-accaccacggccgagcgg-tamra(4)计算样本中的pcm1-jak2融合基因相对表达量5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,以正常人的mtor相对表达量范围(5.27
±
2.22)*10-4
作为判断依据;当mtor相对表达量<3.05*10-4
时,为低表达;当3.05*10-4
<mtor相对表达量<7.49*10-4
时,为正常表达;当mtor相对表达量>7.49*10-4
时,为高表达。
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