本发明属于玻尿酸技术领域，具体涉及一种小分子玻尿酸原液提取方法。
背景技术：
玻尿酸，又称为透明质酸，是眼玻璃体、皮肤、脐带、关节滑液等组织中广泛存在的天然生物物质。
玻尿酸是是目前全球分子量最小的玻尿酸原料，分子量为3000—5000道尔顿，可直达肌肤真皮层，能吸附自身比重6000倍的水分，增强肌肤的锁水能力。增加真皮层成纤维细胞的数量，促使皮肤的胶原蛋白、透明质酸、弹力纤维等物质生成，起到减少皱纹、增加肌肤弹性、改善皮肤新陈代谢、晒后修复的效果。oligo-ha有“自由基清道夫”之称，能减少皮肤自由基含量，把自由基含量调回均衡值。保证皮肤的健康度。
现有的小分子结构玻尿酸在提取时难度较大，常需要一些生物的特殊部位，从而直接提高了原料成本，同时操作步骤复杂、分离过程繁琐，提取率较低，难以使得玻尿酸的提取市场化，使得成品造价高昂，带来了工作难度，为此我们提出一种小分子玻尿酸原液提取方法。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种小分子玻尿酸原液提取方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种小分子玻尿酸原液提取方法，包括以下步骤，
a.清洗谷物与加工设备，并将加工设备进行高温杀菌；
b.将谷物进行搅碎后在2～8℃进行匀浆，用丙酮或乙醇将原料脱脂、脱水后，得到粉末；
c.向粉末中加入透明质酸酶酶解，每1g粉末中加入1×104～1.5×104iu的透明质酸酶，酶解的温度为30～35℃，ph值为6～7，酶解时间为4～6小时，在95～98℃下，静置5～7min，灭酶，过滤得到透明质酸酶解液；
d.将透明质酸酶解液放置于真空锅中，接着加入氯化钠水溶液和氯仿溶液混合搅拌，接着将锅升温至45～68℃，等至22～36min，收集上清液；
e.将上述清洗通过截留分子量为9000da的超滤膜进行过滤、分离，取过滤后的液体；将过滤后的液体加入过滤液体体积一点五倍的乙醇，得到混合液体，接着将混合液体收集沉淀，冷冻3～6h，纯化得到小分子玻尿酸。
优选的，所述谷物在3℃下进行匀浆。
优选的，所述步骤c中酶解的温度为33℃，酶解时间为5.5小时。
优选的，所述步骤d中需将真空锅进行转动，所述真空锅转动的转速为30r/min。
优选的，所述步骤d中锅升温至60℃，等至时间为30min。
优选的，所述步骤e中冷冻时间为5h。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
通过本方法提取的小分子玻尿酸不仅简单便捷，且采用的原材料都是一些常见的谷物，价格相对较低，且操作步骤简单、便捷，提取率较高，提取工艺相对简单，可推向市场，从而提高提取点，加大生产量。
通过向液体中加入乙醇冷冻沉淀后得到的小分子玻尿酸，使得提取的玻尿酸相对精制，可应用于化妆品中涂抹于皮肤表面，且制作工艺简单，降低了提取玻尿酸的整体成本，间接的降低了玻尿酸的价格。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
本发明提供一种技术方案：一种小分子玻尿酸原液提取方法，包括以下步骤，
a.清洗谷物与加工设备，并将加工设备进行高温杀菌；
b.将谷物进行搅碎后在2～8℃进行匀浆，用丙酮或乙醇将原料脱脂、脱水后，得到粉末；
c.向粉末中加入透明质酸酶酶解，每1g粉末中加入1×104～1.5×104iu的透明质酸酶，酶解的温度为30～35℃，ph值为6～7，酶解时间为4～6小时，在95～98℃下，静置5～7min，灭酶，过滤得到透明质酸酶解液；
d.将透明质酸酶解液放置于真空锅中，接着加入氯化钠水溶液和氯仿溶液混合搅拌，接着将锅升温至45～68℃，等至22～36min，收集上清液；
e.将上述清洗通过截留分子量为9000da的超滤膜进行过滤、分离，取过滤后的液体；将过滤后的液体加入过滤液体体积一点五倍的乙醇，得到混合液体，接着将混合液体收集沉淀，冷冻3～6h，纯化得到小分子玻尿酸。
本实施例中，优选的，谷物在3℃下进行匀浆。
本实施例中，优选的，步骤c中酶解的温度为33℃，酶解时间为5.5小时。
本实施例中，优选的，步骤d中需将真空锅进行转动，真空锅转动的转速为30r/min。
本实施例中，优选的，步骤d中锅升温至60℃，等至时间为30min。
本实施例中，优选的，步骤e中冷冻时间为5h。
实施例2
本发明提供一种技术方案：一种小分子玻尿酸原液提取方法，包括以下步骤，
a.清洗谷物与加工设备，并将加工设备进行高温杀菌；
b.将谷物进行搅碎后在2～8℃进行匀浆，用丙酮或乙醇将原料脱脂、脱水后，得到粉末；
c.向粉末中加入透明质酸酶酶解，每1g粉末中加入1×104～1.5×104iu的透明质酸酶，酶解的温度为30～35℃，ph值为6～7，酶解时间为4～6小时，在95～98℃下，静置5～7min，灭酶，过滤得到透明质酸酶解液；
d.将透明质酸酶解液放置于真空锅中，接着加入氯化钠水溶液和氯仿溶液混合搅拌，接着将锅升温至45～68℃，等至22～36min，收集上清液；
e.将上述清洗通过截留分子量为9000da的超滤膜进行过滤、分离，取过滤后的液体；将过滤后的液体加入过滤液体体积一点五倍的乙醇，得到混合液体，接着将混合液体收集沉淀，冷冻3～6h，纯化得到小分子玻尿酸。
本实施例中，优选的，谷物在7℃下进行匀浆。
本实施例中，优选的，步骤c中酶解的温度为34℃，酶解时间为4.5小时。
本实施例中，优选的，步骤d中需将真空锅进行转动，真空锅转动的转速为60r/min。
本实施例中，优选的，步骤d中锅升温至51℃，等至时间为24min。
本实施例中，优选的，步骤e中冷冻时间为3.5h。
通过表格可以看出，当提取方案采用实施例1中的各项数据进行提取时，小分子玻尿酸的锁水效果最好，在五个小时内，可以锁住83％的水分，提高了实用性。
需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素。
以上所述，仅用以说明本发明的技术方案而非限制，本领域普通技术人员对本发明的技术方案所做的其它修改或者等同替换，只要不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。