一种解淀粉芽孢杆菌、筛选方法、鉴定方法及应用

文档序号:26013642发布日期:2021-07-23 21:34阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种解淀粉芽孢杆菌,其特征在于,所述解淀粉芽孢杆菌为e312菌株,保藏号为cgmccno:6796。

2.如权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌,其特征在于,所述的16srdna序列seqidno:1所示。

3.一种如权利要求1~2任意一项所述解淀粉芽孢杆菌在改善海水养殖水体环境中的应用,其特征在于,将所述解淀粉芽孢杆菌的发酵液添加到水产动物养殖水体中。

4.一种如权利要求1~2任意一项所述解淀粉芽孢杆菌在喂食南美白对虾中的应用。

5.一种动物饲料添加剂,其特征在于,所述动物饲料添加剂包含权利要求1~2任意一项所述解淀粉芽孢杆菌。

6.一种水体净化剂,其特征在于,所述水体净化剂包含权利要求1~2任意一项所述解淀粉芽孢杆菌。

7.一种海产品保鲜剂,其特征在于,所述海产品保鲜剂包含权利要求1~2任意一项所述解淀粉芽孢杆菌。

8.一种如权利要求1~2任意一项所述解淀粉芽孢杆菌的筛选方法,其特征在于,所述解淀粉芽孢杆菌的筛选方法包括以下步骤:

(1)菌株分离,将水样接种于5ml无菌离心管中,摇匀后于90℃恒温水浴锅中水浴10min,尽可能除去其他微生物,涂布于2216e固体培养基,30℃培养24h,取不同形态的单菌落共15株,分别命名为e301~e315,在培养基上划线纯化,2216e液体培养基培养,加入15%甘油-80℃保存;

(2)菌株筛选,为检测分离菌株是否生产胞外脂肪酶、蛋白酶和纤维素酶,将单菌落分别接种于2216e固体培养基中;30℃培养48小时后,观察和测量菌落周围透明圈大小,筛选分泌胞外酶的细菌。

9.如权利要求8所述的解淀粉芽孢杆菌的筛选方法,其特征在于,所述将单菌落分别接种于含有1%tween80、1%羧甲基纤维素和1%脱脂奶粉的2216e固体培养基中。

10.一种如权利要求1~2任意一项所述解淀粉芽孢杆菌的鉴定方法,其特征在于,所述解淀粉芽孢杆菌的鉴定方法应用细菌16srdna基因通用引物,正向引物为27f,反向引物为1492r,扩增海洋细菌e312的16srdna序列,经过扩增产物测序得到大小为1406bp的基因片段,碱基序列如seqidno:1所示;将测序结果与ncbi及ezbiocloud数据库中的16srdna序列进行同源性比对,结果显示菌株e312与解淀粉芽孢杆菌dsm7t亲缘关系最近,同源性达到99.64%;选取菌株e312及同源性相近菌株的16srdna序列,试用mega4.0、nj算法构建系统进化树,得到进化树结果。


技术总结
本发明属于功能微生物筛选及应用技术领域,公开了一种解淀粉芽孢杆菌、筛选方法、鉴定方法及应用,所述解淀粉芽孢杆菌为E312菌株,保藏号为CGMCC NO:6796。所述16S rDNA序列的16S rDNA序列SEQ ID NO:1所示。本发明的芽孢杆菌菌株能定植在水产动物肠道内,对多种致病弧菌生长有抑制作用,具有病害防治效果;且能大量分泌多种蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶,提高饲料转化率,促进水产动物的生长,降解水体残饵中的蛋白质和淀粉,减少氨氮和COD含量,改善养殖环境。已有研究表明,芽孢杆菌能产生内生芽孢,具有极强的抗逆能力,易于储藏与运输,作为饲料添加剂、水体改良剂和食物保鲜剂都有良好的应用前景。

技术研发人员:王蔚;林镇岳;梁晨;潘长坤;陈建明
受保护的技术使用者:闽江学院
技术研发日:2021.01.06
技术公布日:2021.07.23
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