技术特征：
1.一种葡聚寡糖的制备方法，其特征在于，以可得然胶为原料，通过β-葡聚糖酶对其进行酶解制备葡聚寡糖；所述β-葡聚糖酶为氨基酸序列如seq id no.1所示的β-葡聚糖酶及其突变体。2.根据权利要求1所述的一种葡聚寡糖的制备方法，其特征在于，所述的葡聚寡糖为β-1,3-葡聚寡糖，其聚合度为5-7。3.根据权利要求1所述的一种葡聚寡糖的制备方法，其特征在于，所述的β-葡聚糖酶来源于novosphingobium sp. p6w。4.根据权利要求1所述的一种葡聚寡糖的制备方法，其特征在于，所述的β-葡聚糖酶突变体是将seq id no.1所示的β-葡聚糖酶第112位的脯氨酸置换为甘氨酸，第300位的亮氨酸置换为谷氨酸，第415位的异亮氨酸置换为酪氨酸。5.根据权利要求1所述的一种葡聚寡糖的制备方法，其特征在于，所述制备方法中，可得然胶与β-葡聚糖酶的用量比为50-5000:1（w/w）。6.根据权利要求1所述的一种葡聚寡糖的制备方法，其特征在于，所述酶解反应在30-70℃条件下反应1-24 h。7.根据权利要求1所述的一种葡聚寡糖的制备方法，其特征在于，所述可得然胶浓度为1-30 g/l，β-葡聚糖酶溶液浓度为0.1-5 g/l。8.一种β-葡聚糖酶突变体，其特征在于，将seq id no.1所示的β-葡聚糖酶第112位的脯氨酸置换为甘氨酸，第300位的亮氨酸置换为谷氨酸，第415位的异亮氨酸置换为酪氨酸。9.根据权利要求8所述的β-葡聚糖酶突变体，其特征在于，所述β-葡聚糖酶突变体序列如seq id no.2所示。
技术总结
本发明公开了一种葡聚寡糖的制备方法，葡聚寡糖为β-1,3-葡聚寡糖，通过β-葡聚糖酶一步水解可得然胶制备，所述的β-葡聚糖酶序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过易错PCR筛选得到一种提高了活性的β-葡聚糖酶突变体，其序列如SEQ ID NO.2所示。β-葡聚糖酶突变体的水解率高于80%，水解产物聚合度为5-7。本发明的方法具有效率高、反应温和、低能耗、低成本、无污染等有点，可实现β-1,3-葡聚寡糖的产业化制备。制备。制备。
技术研发人员：孙科 沙凤 谭芳美 孙良
受保护的技术使用者：苏州科宁多元醇有限公司
技术研发日：2021.12.29
技术公布日：2022/4/12