抗整联蛋白α11β1抗体的制作方法

背景技术：

1、纤维化是一种瘢痕形成过程，其在体内的许多组织中表现出来，通常是炎症或组织损伤的结果。细胞外基质产生的增加导致器官衰竭，并且常常导致死亡。在工业化国家中，与纤维化相关的疾病占所有死亡的约45％(wynn,t.a.,2008,jpathol.214:199-210)。一种此类疾病是系统性硬化症(ssc)。ssc是一种复杂的自身免疫疾病，其具有慢性渐进性病程和高患者间变异性。其特征在于炎症、血管功能障碍和纤维化。皮肤和内脏器官的纤维化导致不可逆的瘢痕形成并最终导致器官衰竭，从而导致高死亡率。目前没有批准的具有改善疾病潜力的靶向疗法。

技术实现思路

1、本公开提供抗i型胶原蛋白受体整联蛋白α11β1(α11β1)的新型功能阻断抗体。本公开还提供使用此类抗体治疗纤维化病症和/或癌症的用途。

2、在一个方面，本公开提供了抗α11β1抗体或其抗原结合片段，其包含选自seq idno:103-443的氨基酸序列。在另一个方面，本公开提供了抗α11β1抗体或其抗原结合片段，其包含由seq id no:103-207、209、211、213、216、218、220、223、225、228、233、234、236、240、241、245、247、253、255、257、259、261、265、267、269、271、275、277、279、281、283、287、289、291、293、296、300、304、306、308、310、312、314、316、318、320、322、324、325、327、329、334、336、338、340、342、344、348、351、353、355、358、360、361、364、366、368、369、374、376、377、379、380、381、383、384、385、387、389、392、393、396、398、400、402、405、408、411或413-443中的任一者内包含的cdr序列。在另一个方面，本公开提供了抗α11β1抗体或其抗原结合片段，其包含由seq id no:103-206或413-435中的任一者内包含的cdr1、cdr2和cdr3。在一些实施方案中，抗α11β1抗体或其抗原结合片段包含选自seq id no:103-114、207-311和312-443的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗α11β1抗体或其抗原结合片段包含由seq idno:103-114、207、209、211、213、216、218、220、223、225、228、233、234、236、240、241、245、247、253、255、257、259、261、265、267、269、271、275、277、279、281、283、287、289、291、293、296、300、304、306、308、310、312、314、316、318、320、322、324、325、327、329、334、336、338、340、342、344、348、351、353、355、358、360、361、364、366、368、369、374、376、377、379、380、381、383、384、385、387、389、392、393、396、398、400、402、405、408、411或413-443中的任一者内包含的cdr序列。在一些实施方案中，抗α11β1抗体或其抗原结合片段包含由seq idno:103-114或413-434中的任一者内包含的一个或多个cdr序列。在一些实施方案中，抗α11β1抗体或其抗原结合片段包含由seq id no:103-114或413-434中的任一者内包含的cdr1、cdr2和cdr3。

3、在一些实施方案中，抗α11β1抗体或其抗原结合片段是单克隆抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，抗α11β1抗体或其抗原结合片段是人源化抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，抗α11β1抗体或其抗原结合片段减少人α11β1表达细胞中α11β1与胶原蛋白的相互作用。在一些实施方案中，抗α11β1抗体或其抗原结合片段与本文所述的抗体或其抗原结合片段竞争。

4、在另一个方面，本公开提供核酸，其包含编码本文所述的抗体或其抗原结合片段的核酸序列。在一些实施方案中，核酸序列包含选自seq id no:1-102的序列。

5、在另一个方面，本公开提供包含本文所述的核酸的载体。

6、在另一个方面，本公开提供包含本文所述的核酸或本文所述载体的宿主细胞。

7、在另一个方面，本公开提供生产抗体或其抗原结合片段的方法，该方法包括在适于表达抗体或其抗原结合片段的条件下培养本文所述的宿主细胞。

8、在另一个方面，本公开提供治疗患有慢性肾病或处于慢性肾病风险中的受试者的方法，该方法包括向受试者施用本文所述的治疗有效量的抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，慢性肾病为或包括原发性肾小球疾病(包括但不限于iga肾病和局灶节段性肾小球硬化症)、继发性肾小球疾病(包括但不限于狼疮性肾炎)、血栓性微血管病、肾小管间质病(包括但不限于阻塞性尿路病)、糖尿病肾病、高血压肾病、缺血性肾病、ckd中的心肾综合征、遗传性肾小球病症(包括但不限于奥尔波特综合征)、肾囊肿性疾病(包括但不限于多囊肾病)或遗传性肾小管病症。在一些实施方案中，施用治疗有效量的抗体或其抗原结合片段导致所测量的标记物、体征和/或症状相对于对照降低至少约10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％或90％。在一些实施方案中，对照包括在施用抗体之前受试者中所测量的标记物、体征和/或症状的水平。在一些实施方案中，对照包括患有肾脏相关病症的受试者中所测量的标记物、体征和/或症状的水平。在一些实施方案中，对照包括患有肾脏相关病症的一组受试者中所测量的标记物、体征和/或症状的平均水平。在一些实施方案中，所测量的标记物、体征和/或症状为或包括：col1a1、纤连蛋白、pai-1、il-11、cxcl1、mcp-1、il-6、timp-1、透明质酸、tgfβ、ctgf、pdgf、mmp9或它们的组合。

1.一种抗整联蛋白α11β1(α11β1)抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含选自seq id no:103-443的氨基酸序列。

2.一种抗α11β1抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含由seq idno:103-207、209、211、213、216、218、220、223、225、228、233、234、236、240、241、245、247、253、255、257、259、261、265、267、269、271、275、277、279、281、283、287、289、291、293、296、300、304、306、308、310、312、314、316、318、320、322、324、325、327、329、334、336、338、340、342、344、348、351、353、355、358、360、361、364、366、368、369、374、376、377、379、380、381、383、384、385、387、389、392、393、396、398、400、402、405、408、411或413-443中的任一者内包含的cdr序列。

3.一种抗α11β1抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含由seq idno:103-206或413-435中的任一者内包含的cdr1、cdr2和cdr3。

4.根据权利要求1所述的抗α11β1抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含选自seq id no:103-114、207-311和312-443的氨基酸序列。

5.根据权利要求2所述的抗α11β1抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含由seq id no:103-114、207、209、211、213、216、218、220、223、225、228、233、234、236、240、241、245、247、253、255、257、259、261、265、267、269、271、275、277、279、281、283、287、289、291、293、296、300、304、306、308、310、312、314、316、318、320、322、324、325、327、329、334、336、338、340、342、344、348、351、353、355、358、360、361、364、366、368、369、374、376、377、379、380、381、383、384、385、387、389、392、393、396、398、400、402、405、408、411或413-443中的任一者内包含的cdr序列。

6.根据权利要求2所述的抗α11β1抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含由seq id no:103-114或413-434中的任一者内包含的一个或多个cdr序列。

7.根据权利要求3所述的抗α11β1抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含由seq id no:103-114或413-434中的任一者内包含的cdr1、cdr2和cdr3。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的抗α11β1抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段为单克隆抗体或其抗原结合片段。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的抗α11β1抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段为人源化抗体或其抗原结合片段。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的抗α11β1抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段减少人α11β1表达细胞中α11β1与胶原蛋白的相互作用。

11.一种抗α11β1抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段与根据权利要求1至10中任一项所述的抗体或其抗原结合片段竞争。

12.一种核酸，所述核酸包含编码根据权利要求1至11中任一项所述的抗体或其抗原结合片段的核酸序列。

13.根据权利要求11所述的核酸，其中所述核酸序列包含选自seqid no:1-102的序列。

14.一种载体，所述载体包含根据权利要求12或13所述的核酸。

15.一种宿主细胞，所述宿主细胞包含根据权利要求12或13所述的核酸或根据权利要求14所述的载体。

16.一种生产抗体或其抗原结合片段的方法，所述方法包括在适于表达所述抗体或其抗原结合片段的条件下培养根据权利要求14所述的宿主细胞。

17.一种治疗患有慢性肾病或处于慢性肾病风险中的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用根据权利要求1至11中任一项所述的治疗有效量的抗体或其抗原结合片段。

18.根据权利要求17所述的方法，其中所述慢性肾病为或包括原发性肾小球疾病(包括但不限于iga肾病和局灶节段性肾小球硬化症)、继发性肾小球疾病(包括但不限于狼疮性肾炎)、血栓性微血管病、肾小管间质病(包括但不限于阻塞性尿路病)、糖尿病肾病、高血压肾病、缺血性肾病、ckd中的心肾综合征、遗传性肾小球病症(包括但不限于奥尔波特综合征)、肾囊肿性疾病(包括但不限于多囊肾病)或遗传性肾小管病症。

19.根据权利要求17或18所述的方法，其中施用所述治疗有效量的抗体或其抗原结合片段导致所测量的标记物、体征和/或症状相对于对照降低至少约10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％或90％。

20.根据权利要求19所述的方法，其中所述对照包括在施用所述抗体之前所述受试者中所测量的标记物、体征和/或症状的水平。

21.根据权利要求19所述的方法，其中所述对照包括患有所述肾脏相关病症的受试者中所测量的标记物、体征和/或症状的水平。

22.根据权利要求19所述的方法，其中所述对照包括患有所述肾脏相关病症的一组受试者中所测量的标记物、体征和/或症状的平均水平。

23.根据权利要求19至22中任一项所述的方法，其中所述所测量的标记物、体征和/或症状为或包括：col1a1、纤连蛋白、pai-1、il-11、cxcl1、mcp-1、il-6、timp-1、透明质酸、tgfβ、ctgf、pdgf、mmp9或它们的组合。