减毒鸡沙门氏菌菌株及其用途

【】本发明涉及一种减毒鸡沙门氏菌菌株及其用途。具体地，涉及一种编码鸟苷四磷酸(guanosine teraphosphate,ppgpp)合成酶的基因、诱导iii型分泌系统(type iiisecretion,t3ss)功能的基因(ssra，ssrb或ssrab)，及gifsy 2prophage基因全部缺失的新型鸡沙门氏菌菌株，及利用该菌株的肿瘤治疗或诊断用组合物。

背景技术

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背景技术：

1、2019年共有81,203人死于癌症，占总死亡人数的27.5％。因此，可以说，癌症是最常见的死亡原因之一，据国家癌症信息中心统计显示，自1999年开始统计全国癌症发病率以来，近年来的发病率一直呈上升趋势。

2、大气污染等环境污染物质增加之类的环境因素；及饮食习惯西化导致的高脂肪饮食摄取、饮酒、吸烟之类的个人因素的增加，导致发病率的上升。因此，开发用于早期预防和治疗癌症的材料的重要性变得越发重要。另外，就没有明确治疗方法的难治性癌而言，其发病率虽低，但死亡率高，因此，急需开发一种治疗剂。但，由于基于化合物的抗癌剂常表现出除癌细胞外还作用于全身的非特异性，因而被指出存在产生副作用的问题。

3、一方面，自细菌感染显示出抗癌效果的报道出现之后，抗肿瘤细菌菌株开发的相关研究开始急剧增加。近20年来研究的抗肿瘤细菌包括：双歧杆菌(bifidobacterium)、梭菌(clostridium)、乳球菌(lactococcus)、志贺氏菌(shigella)、弧菌(vibrio)、李斯特菌(listeria)、埃希氏菌(escherichia)、沙门氏菌(salmonella)等。但使用这种菌株的癌症治疗机制尚未完全揭露。

4、在上述各种菌株中，现有已开发的减毒鸡沙门氏菌菌株不仅分布于癌细胞，还分布于各种正常器官，其癌细胞靶向率低，存在菌株本身引发副作用的问题。特别是，对于免疫功能减弱的患者或老年人来说，减毒鸡沙门氏菌菌株也可能导致致命的败血症，即使考虑治疗效果，也需采取改进措施。因此，需要开发一种肿瘤靶向能力和体内稳定性极高，并可有效用于癌症治疗的新菌株。

5、因此，本发明人进行了研究，开发一种体内稳定性高，肿瘤靶向能力、存活率和治疗能力优异，且对正常器官的靶向能力和存活率极低的减毒鸡沙门氏菌菌株，从而完成了本发明。

6、【先行技术文献】

7、【专利文献】

8、(专利文献0001)韩国注册专利第102015573号

技术实现思路

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技术实现要素：

1、【技术问题】

2、本发明提供一种编码鸟苷四磷酸(guanosine teraphosphate,ppgpp)合成酶的基因、诱导iii型分泌系统(type iii secretion，t3ss)功能的基因，及gifsy2prophage基因缺失的新型减毒鸡沙门氏菌菌株。

3、另外，本发明提供一种编码鸟苷四磷酸(guanosine teraphosphate,ppgpp)合成酶的基因、诱导iii型分泌系统(type iii secretion,t3ss)功能的基因、gifsy 2prophage基因和glms基因缺失的新型减毒鸡沙门氏菌菌株。

4、具体地，本发明提供一种抗肿瘤效果优异的鸡沙门氏菌sg4044菌株(微生物保藏编号：kctc14541bp)或sg4048菌株(微生物保藏编号：kctc14542bp)。

5、本发明提供一种用于治疗或诊断肿瘤的组合物，其包含本发明的菌株。

6、本发明提供一种信息提供方法，其包括：向受试体给药本发明的菌株的步骤；检测上述菌株的生物发光(bioluminescence)的步骤；及检测到生物发光时，判定受试体存在肿瘤的步骤。

7、【技术方案】

8、本发明涉及一种减毒鸡沙门氏菌菌株，其特征在于，编码鸟苷四磷酸(guanosineteraphosphate,ppgpp)合成酶的基因、诱导iii型分泌系统(type iii secretion，t3ss)功能的基因，及gifsy 2prophage基因缺失。

9、另外，本发明涉及一种编码鸟苷四磷酸(guanosine teraphosphate,ppgpp)合成酶的基因、诱导iii型分泌系统(type iii secretion,t3ss)功能的基因、gifsy 2prophage基因和glms基因缺失的新型减毒鸡沙门氏菌菌株。

10、本发明的菌株涉及一种用质粒转化的减毒鸡沙门氏菌菌株，上述质粒包含与启动子可操作地连接的glms基因。

11、上述编码鸟苷四磷酸(guanosine teraphosphate,ppgpp)合成酶的基因可以是rela或spot。

12、上述诱导iii型分泌系统(type iii secretion,t3ss)功能的基因是在基因组中按序排列的ssra，ssrb，或ssrab。

13、本发明涉及一种在sg4021菌株(微生物保藏编号：kctc13985bp)中，rela，spot，ssra，ssrb，ssrab和gifsy 2prophage基因缺失的减毒鸡沙门氏菌(salmonellagallinarum)菌株。

14、本发明涉及一种在sg4021菌株(微生物保藏编号：kctc13985bp)中，rela、spot、ssra、ssrb、ssrab、gifsy 2prophage和glms基因缺失的减毒鸡沙门氏菌菌株。

15、在一个实施方式中，本发明的减毒鸡沙氏门菌菌株可以是鸡沙门氏菌sg4044菌株(微生物保藏编号：kctc14541bp)

16、在一个实施方式中，本发明的减毒鸡沙氏门菌菌株可以鸡沙门氏菌sg4048菌株(微生物保藏号：kctc14542bp)。

17、本发明的菌株还可包含发光基因。

18、上述发光基因可以是luxcdabe。

19、本发明涉及一种包含上述菌株的肿瘤诊断或治疗用药学组合物。上述肿瘤可以是实体瘤或腺癌，优选地，可以是大肠癌、胰腺癌、肺癌、皮肤癌或乳腺癌，但不限于此。

20、本发明涉及一种信息提供方法，其包括：向受试体给药上述菌株的步骤；检测上述菌株的的生物发光(bioluminescence)的步骤；及检测到生物发光时，判定受试体存在肿瘤的步骤。

21、【发明的效果】

22、本发明的减毒鸡沙门氏菌菌株，通过使鸟苷四磷酸(guanosine teraphosphate,ppgpp)生成能力缺乏，使iii型分泌系统(type iii secretion system,t3ss)功能丧失，以及使gifsy 2prophage基因缺失制成，其能够特异性靶向肿瘤，具有优异的肿瘤增殖抑制活性，同时还能最小化对肿瘤以外的正常组织的损伤，因此，可应用于改善或治疗肿瘤及成像。

技术特征：

1.减毒鸡沙门氏菌(salmonella gallinarum)菌株，其中编码鸟苷四磷酸(guanosineteraphosphate,ppgpp)合成酶的基因、诱导iii型分泌系统(type iii secretion，t3ss)功能的基因，及gifsy 2prophage基因缺失。

2.根据权利要求1所述的减毒鸡沙门氏菌菌株，其中glms基因缺失。

3.根据权利要求1所述的减毒鸡沙门氏菌菌株，其中所述编码鸟苷四磷酸(guanosineteraphosphate,ppgpp)合成酶的基因是rela或spot。

4.根据权利要求1所述的减毒鸡沙门氏菌菌株，其中所述诱导iii型分泌系统(typeiii secretion,t3ss)功能的基因是ssra、ssrb或ssrab。

5.根据权利要求1所述的减毒鸡沙门氏菌(salmonella gallinarum)菌株，其中所述菌株是在鸡沙门氏菌sg4021菌株(微生物保藏编号：kctc13985bp)中rela、spot、ssrab和gifsy 2prophage基因缺失的菌株。

6.根据权利要求1所述的减毒鸡沙门氏菌菌株，其中所述菌株是在鸡沙门氏菌sg4021菌株(微生物保藏编号：kctc13985bp)rela、spot、ssrab、gifsy 2prophage和glms基因缺失的菌株。

7.根据权利要求1所述的减毒鸡沙门氏菌菌株，其中所述菌株是鸡沙门氏菌sg4044菌株(微生物保藏编号：kctc14541bp)。

8.根据权利要求1所述的减毒鸡沙门氏菌菌株，其中所述菌株是鸡沙门氏菌sg4048菌株(微生物保藏编号：kctc14542bp)。

9.根据权利要求2所述的减毒鸡沙门氏菌菌株，其中所述菌株是用质粒转化的菌株，所述质粒包含与启动子可操作地连接的glms基因。

10.根据权利要求1所述的减毒鸡沙门氏菌菌株，其中所述菌株还包含发光基因。

11.根据权利要求9所述的减毒鸡沙门氏菌菌株，其中所述发光基因是luxcdabe。

12.肿瘤诊断或治疗用药学组合物，其包含权利要求1～11中任一项所述的菌株。

13.根据权利要求12所述的肿瘤诊断或治疗用药学组合物，其中所述肿瘤是实体瘤。

14.根据权利要求12所述的肿瘤诊断或治疗用药学组合物，其中所述肿瘤是腺癌。

15.根据权利要求12所述的肿瘤诊断或治疗用药学组合物，其中所述肿瘤是选自由大肠癌、胰腺癌、肺癌、皮肤癌和乳腺癌组成的组中的任一种癌症。

16.信息提供方法，其包括：

技术总结
本发明涉及一种减毒鸡沙门氏菌菌株及其用途。具体地，涉及一种编码鸟苷四磷酸(Guanosine teraphosphate,ppGpp)合成酶的基因、诱导III型分泌系统(type III secretion,T3SS)功能的基因(ssrAB)，及Gifsy 2 prophage基因全部缺失的新型鸡沙门氏菌菌株，及利用该菌株的肿瘤治疗或诊断用组合物。

技术研发人员：崔贤一,金光洙,郑在瑚,林大进,T·杜萨克,Q·T·特朗尚
受保护的技术使用者：全南大学校产学协力团
技术研发日：
技术公布日：2024/2/1