一种草鱼细菌小肽识别受体及制备方法与应用

文档序号:30584198发布日期:2022-06-29 16:11阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种草鱼细菌小肽识别受体,其特征在于,所述草鱼细菌小肽识别受体为草鱼nod2-lrr蛋白;所述草鱼nod2-lrr蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示。2.一种编码权利要求1所述草鱼细菌小肽识别受体的基因,其特征在于,所述基因的cdna序列如seq id no.2所示。3.一种含有权利要求2所述草鱼细菌小肽识别受体的基因的重组质粒。4.根据权利要求3所述的重组质粒,其特征在于,所述重组质粒为重组质粒pet32a-nod2-lrr。5.一种如权利要求1所述的草鱼细菌小肽识别受体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:s1、克隆草鱼nod2基因;s2、根据草鱼nod2基因cdna序列,构建nod2-lrr功能域表达载体进行密码子优化,得到nod2-lrr基因;s3、采用bamh i和xho i对nod2-lrr基因、pet32a质粒进行双酶切,连接后转化表达,得到重组质粒pet32a-nod2-lrr;s4、将重组质粒pet32a-nod2-lrr进行iptg诱导表达,得到重组蛋白,经纯化、复性后得到草鱼细菌小肽识别受体。6.根据权利要求5所述的草鱼细菌小肽识别受体的制备方法,其特征在于,步骤s1中,以构建好的草鱼cdna文库为模板,以cinod2-f1和cinod2-r1为引物进行pcr反应,得到草鱼nod2基因;所述cinod2-f1的序列如seq id no.3所示;所述cinod2-r1的序列如seq id no.4所示。7.根据权利要求5或6所述的草鱼细菌小肽识别受体的制备方法,其特征在于,步骤s4中,所述iptg诱导表达过程中控制温度为37℃;所述iptg诱导表达过程中控制体系中iptg的浓度为0.05mm。8.一种如权利要求1所述的草鱼细菌小肽识别受体的应用,其特征在于,所述草鱼细菌小肽识别受体用于制备特异性识别鱼类细菌性肠炎的药物。9.一种如权利要求1所述的草鱼细菌小肽识别受体的应用,其特征在于,所述草鱼细菌小肽识别受体用于制备治疗鱼类细菌性肠炎的抗菌药物或免疫增强剂。10.一种如权利要求1所述的草鱼细菌小肽识别受体的应用,其特征在于,所述草鱼细菌小肽识别受体用于制备鱼类保健品或饲料添加剂。

技术总结
本发明公开了一种草鱼细菌小肽识别受体及其制备方法与应用,该草鱼细菌小肽识别受体为草鱼NOD2-LRR蛋白,氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码基因的cDNA序列如SEQ ID NO.2所示。该草鱼细菌小肽识别受体的制备包括克隆草鱼NOD2基因、表达、纯化、复性。本发明中,首次利用分子对接方法建立了草鱼NOD2对细菌MDP的免疫识别模型,利用原核表达系统成功获得了NOD2-LRR蛋白,结果表明NOD2-LRR蛋白具有对细菌MDP的结合活性,可特异性识别细菌MDP,在细菌MDP免疫识别中发挥中重要的作用,在开发新型抗菌药物、免疫增强剂和饲料添加剂等方面具有潜在应用价值。有潜在应用价值。有潜在应用价值。


技术研发人员:瞿符发 刘臻 汤杰 李嘉玲 房佳美 郭美杏 唐建洲 曾璇 佘青 高超然
受保护的技术使用者:长沙学院
技术研发日:2022.01.14
技术公布日:2022/6/28
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