技术特征：
1.mir-30a-5p及 mir-30a-5p mimics作为血管损伤修复分子靶点的应用。2.mir-30a-5p及 mir-30a-5p mimics用于制备促进血管再生和修复神经血管损伤的药物的应用。3.根据权利要求2所述的mir-30a-5p及 mir-30a-5p mimics用于制备促进血管再生和修复神经血管损伤的药物的应用，其特征在于：所述神经血管损伤为周围神经系统坐骨神经血管损伤。4.一种血管损伤修复药物，其特征在于：包括mir-30a-5p及 mir-30a-5p mimics。5.一种mir-30a-5p及 mir-30a-5p mimics作为血管损伤修复分子靶点的验证方法，其特征在于：包括以下步骤：培养huvecs细胞系，观察体外过表达mir-30a-5p提高huvecs活力的情况、促进huvecs迁移的情况及促进huvecs成管的情况。6.根据权利要求5所述的一种mir-30a-5p及 mir-30a-5p mimics作为血管损伤修复分子靶点的验证方法，其特征在于：培养huvecs细胞系包含以下步骤：准备huvecs；在添加5%胎牛血清、1%内皮细胞生长补充剂 100 u/ml青霉素/链霉素的内皮细胞培养基中培养，在5%co2、37℃的增湿培养箱中培养。7.根据权利要求6所述的一种mir-30a-5p及 mir-30a-5p mimics作为血管损伤修复分子靶点的验证方法，其特征在于：培养huvecs细胞系完成后转染huvecs mimics ，包含以下步骤：待细胞贴壁后，用转染试剂混匀mir-30a-5p mimics及阴性对照后加入到培养的huvecs细胞系中，培养8h后更换为内皮细胞完全培养基。8.根据权利要求5所述的一种mir-30a-5p及 mir-30a-5p mimics作为血管损伤修复分子靶点的验证方法，其特征在于：huvecs活力的情况的观察方法包括以下步骤：s1.3.1、huvecs转染48h后加0.25%的胰酶消化；s1.3.2、用含有10%胎牛血清的 dmem 终止消化，离心后弃上清，加入新的内皮细胞完全培养基重悬后，以每孔4千的密度将细胞接种于96孔板；s1.3.3、待细胞贴壁后加入cck8再培养4h；s1.3.4、使用酶标仪在450nm处测量吸光度，细胞活力以相对于对照组的百分比值表示。9.根据权利要求5所述的一种mir-30a-5p及 mir-30a-5p mimics作为血管损伤修复分子靶点的验证方法，其特征在于：huvecs迁移的情况的观察步骤如下：s2.3.1、huvecs转染48h后加0.25%的胰酶消化；s2.3.2、用含有10%胎牛血清的 dmem 终止消化，离心后弃上清，加入fbs浓度降至0.25%的内皮细胞完全培养基重悬后，以每孔1万的密度将huvecs接种到培养插件中培养24h；s2.3.3、取下培养插件，光学显微镜下拍摄图像，12小时后再次拍摄；s2.3.4、使用imagej软件测量图片中无细胞覆盖的区域面积，最后计算迁移率来评估huvec的迁移能力。10.根据权利要求5所述的一种mir-30a-5p及 mir-30a-5p mimics作为血管损伤修复
分子靶点的验证方法，其特征在于：huvecs成管的观察步骤如下：s3.3.1、huvecs转染48h后加适量 0.25%的胰酶消化；s3.3.2、用含有10%胎牛血清的 dmem 终止消化，离心后弃上清，加入新的内皮细胞完全培养基重悬后，以每孔1万的密度将huvecs接种到预先以等体积基质胶和内皮细胞完全培养基混合液包被的96孔板中培养4h；s3.3.3、光学显微镜下拍摄图像；s3.3.4、使用imagej软件中的angiogenesis插件自动分析测量图片中的管状结构。
技术总结
本发明提供一种miR-30a-5p作为血管损伤修复分子靶点的应用，涉及生物制药技术领域，本发明以miR-30a-5p及miR-30a-5p mimics作为分子干预靶点，过表达miR-30a-5p，提高HUVECs的活力、迁移与成管能力。本发明在体外培养HUVECs，转染miR-30a-5p mimic，可以显著提高HUVECs的活力、迁移与成管能力。本发明提供的miR-30a-5p可以通过调节血管内皮细胞的活力、迁移与成管参与血管损伤修复，有助于更好地理解miRNA在血管损伤修复过程中的重要作用，并为血管损伤后的治疗提供新的靶点。为血管损伤后的治疗提供新的靶点。为血管损伤后的治疗提供新的靶点。
技术研发人员：周松林 丁斐 杜明智 张琦 从猛 贺倩茹
受保护的技术使用者：南通大学
技术研发日：2022.04.11
技术公布日：2022/6/7