环肽及其制备方法、包括其的复合物、及其用途与流程

本技术涉及药物领域，更具体涉及一种环肽及其制备方法、包括其的复合物、及其用途。

背景技术：

1、长期以来，治疗诊断学一直是核医学领域的主要发展方向，同时放射治疗诊断也是治疗诊断学领域最成熟和广泛的临床应用。放射治疗诊断学的一个显著优势是治疗部位即为患者病灶的诊断图像，影像学和治疗干预密切相关，因此开发具有高亲和力和特异性、低非特异性摄取、足够的滞留和有效渗透性的特异性成像示踪剂成为了核医学领域的重点研究方向。

2、氨肽酶n

3、氨肽酶n(apn，也被称为cd13)是一种zn2+依赖的膜结合金属蛋白水解酶，能够切割蛋白或多肽n末端的中性氨基酸。cd13于1963年首次纯化，后来发现在肿瘤、肿瘤血管新生和心脏血管新生中过表达。

4、cd13在一系列不同的人类细胞中表达，如巨噬细胞、基质细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞。由于参与肽切割、病毒感染、内吞作用和细胞信号转导。异常高水平的cd13表达发生于各种癌症中，包括乳腺癌、卵巢癌、甲状腺癌、胰腺癌、结直肠癌和非小细胞肺癌。在胃癌中，cd13和tgf-β1表达水平与肿瘤大小、淋巴结转移、肿瘤分化相关。同样，在胰腺癌中，血清cd13水平与肿瘤大小、淋巴结转移和转移分期相关。它是早期胰腺癌诊断和预后的生物标志物，能够预测胰腺癌患者的死亡率和总生存期。在结直肠癌中，患者血浆中cd13活性越高，总生存率越低。此外，有研究表明cd13的表达与骨肉瘤具有相关关系，其中免疫组化显示77％的骨肉瘤患者cd13表达阳性，且较高的cd13表达与较差的总生存率相关。综上所述，cd13能够作为癌症的生物标志物，用于肿瘤的临床检测和评估。

5、ngr配体

6、研究表明，cd13不表达于正常血管的表面，但通常在肿瘤血管等发生血管新生的血管中高表达，而且某些肽结构可以与cd13活性位点结合，但不被其切割降解。而其中最著名的肽序列为含天冬酰胺-甘氨酸-精氨酸(ngr)的多肽，其能够通过与cd13的相互作用靶向肿瘤血管组织。ngr多肽于1998年通过噬菌体呈现肽库筛选得到，实验表明，含ngr结构的多肽可以结合至肿瘤组织中cd13受体阳性的血管，但不能结合其他富含cd13受体的组织。这些结果进一步表明了利用含ngr的多肽作为一种潜在的肿瘤靶向诊断和治疗药物的可行性。

7、目前，已有很多研究将包含ngr片段序列的多肽作为向肿瘤传递化疗药物、纳米颗粒和放射性同位素的载体，临床前实验和临床试验均显示放射性标记的ngr肽在肿瘤血管诊断成像和靶向放射性核素或离子治疗方面具有巨大的潜力。

8、环肽

9、环肽类化合物是一类结构特殊、生物活性广泛、作用机理独特的环状化合物，是肽类分子中构象稳定和均一的一类，对受体具有高的选择性亲和能力、代谢稳定性强。环肽类化合物作为药物分子，具有抗癌、抗病毒、抗菌、抗真菌、酶抑制剂等广泛的生物活性。因此，针对环肽类药物的研究正在受到人们越来越多的关注。

10、由于环状结构导致的构象变化限制，环肽类化合物一般具有较大的表面积，从而使其与靶点蛋白间具有高度亲和力及识别特异性。大环结构构象灵活性的限制也降低了药物与靶点结合的熵值，提高了结合的稳定性。其次，氨基酸组成特点决定了环肽类化合物往往具有极低的、甚至没有细胞毒性。并且，环肽类化合物很容易通过自动化的化学合成流程实现生产，并且便于进行各项修饰、处理及监控，这些特点都非常有利于药物开发过程。

11、目前，在靶向ngr的肿瘤放射显影示踪剂研究当中，使用最多的环肽是cyclo(cngrc)环肽，前期研究已利用该环肽进行99mtc、68ga、64cu等放射性核素的标记，用于肿瘤新生血管的分子显像。但值得注意的是，cyclo(cngrc)环肽结构中的二硫键易受生物降解或化学修饰的影响，其生物稳定性和体内滞留时间仍需要进一步优化，这在一定程度上限制了其使用。

技术实现思路

1、在一些实施方式中，提供了一种环肽，其序列为cyclo(x1x2x3x4x5x6)，其中，

2、所述x1是天冬酰胺，特别是l-天冬酰胺或d-天冬酰胺，特别是l-天冬酰胺；

3、所述x2是甘氨酸或肌氨酸；

4、所述x3是精氨酸，特别是l-精氨酸或d-精氨酸，特别是l-精氨酸；

5、所述x4选自由苏氨酸、酪氨酸、和苯丙氨酸所組成的組，特别是选自由l-苏氨酸、d-苏氨酸、l-酪氨酸、d-酪氨酸、l-苯丙氨酸、和d-苯丙氨酸所組成的組，特別是苏氨酸，更特別是l-苏氨酸或d-苏氨酸，更特別是l-苏氨酸；

6、所述x5是赖氨酸，特别是l-赖氨酸或d-赖氨酸，特别是l-赖氨酸；且

7、所述x6选自由酪氨酸、缬氨酸、和谷氨酸所組成的組，特别是选自选自由l-酪氨酸、d-酪氨酸、l-缬氨酸、d-缬氨酸、l-谷氨酸、和d-谷氨酸所組成的組，特別是酪氨酸，更特別是l-酪氨酸或d-酪氨酸，更特別是l-酪氨酸。

8、在一些实施方式中，提供了一种环肽的制备方法，包括：所述x5的c端与所述x6的n端偶合；所述x4的c端与所述x5的n端偶合；所述x3的c端与所述x4的n端偶合；所述x2的c端与所述x3的n端偶合；所述x1的c端与所述x2的n端偶合；以及所述x6的c端与所述x1的n端偶合。

9、在一些实施方式中，所述方法包括n端保护的所述x5的c端、与c端保护或偶联固相材质的所述x6的n端，进行缩合反应。在一些实施方式中，所述方法包括n端保护的所述x4的c端、与c端保护或偶联固相材质的所述x5的n端，进行缩合反应。在一些实施方式中，所述方法包括n端保护的所述x3的c端、与c端保护或偶联固相材质的所述x4的n端，进行缩合反应。在一些实施方式中，所述方法包括n端保护的所述x2的c端、与c端保护或偶联固相材质的所述x3的n端，进行缩合反应。在一些实施方式中，所述方法包括n端保护的所述x1的c端、与c端保护或偶联固相材质的所述x2的n端，进行缩合反应。在一些实施方式中，所述方法包括n端保护的所述x6的c端、与c端保护或偶联固相材质的所述x1的n端，进行缩合反应。

10、在一些实施方式中，提供了一种复合物，包括所述环肽、连接子、以及螯合剂。在一些实施方式中，提供了一种放射性核素制剂，包括所述复合物以及与所述复合物的螯合剂螯合的放射性核素。

11、在一些实施方式中，提供了本技术的环肽或复合物在放射性核素标记中的用途。在一些实施方式中，提供了本技术的环肽或复合物在制备放射性核素标记的靶向分子的用途。在一些实施方式中，提供了本技术的环肽或复合物在制备放射性核素标记试剂中的用途。在一些实施方式中，提供了本技术的环肽或复合物在制备药物载体中的用途。在一些实施方式中，提供了本技术的环肽或复合物作为药物载体的用途。在一些实施方式中，提供了本技术的环肽、复合物或放射性核素制剂在制备检测癌症、诊断癌症、监控癌症进展、监控癌症治疗或治疗癌症的药物中的用途。在一些实施方式中，提供了本技术的环肽、复合物或放射性核素制剂在检测癌症、诊断癌症、监控癌症进展、监控癌症治疗或治疗癌症的用途。

12、在一些实施方式中，提供了用于放射性核素标记的本技术的环肽或复合物。在一些实施方式中，提供了放射性核素标记的靶向分子，包括本技术的环肽或复合物，或由其组成。在一些实施方式中，提供了放射性核素标记试剂，包括本技术的环肽或复合物，或由其组成。在一些实施方式中，提供了药物载体，包括本技术的环肽或复合物，或由其组成。在一些实施方式中，提供了检测癌症、诊断癌症、监控癌症进展、监控癌症治疗或治疗癌症的制剂，包括本技术的环肽、复合物或放射性核素制剂，或由其组成。在一些实施方式中，提供了用于检测癌症、诊断癌症、监控癌症进展、监控癌症治疗或治疗癌症的，本技术的环肽、复合物或放射性核素制剂。

13、在一些实施方式中，提供了一种放射性核素标记的方法，包括使螯合放射性核素的所述复合物，或所述放射性核素制剂，接触放射性核素所要标记的对象。在一些实施方式中，提供了一种检测癌症、诊断癌症、监控癌症进展、监控癌症治疗的方法，包括：施用螯合放射性核素的所述复合物、或所述放射性核素制剂，到检测癌症、诊断癌症、监控癌症进展或监控癌症治疗的受试者；检测放射性核素和确定放射性核素在所述受试受治疗者体内的水平和位置；以及将所述水平和位置与来自未受影响的受治疗者的其他方面相同的位置或所述受试受治疗者的未受影响的区域的所述放射性核素的水平和位置进行对比，其中与所述放射性核素在来自未受影响的受治疗者或来自所述受试受治疗者的未受影响的区域的所述样品中的水平和位置相比，所述放射性核素在所述受试受治疗者体内的更高水平或不同位置表明所述受试受治疗者患有癌症，从而检测癌症、诊断癌症、监控癌症进展或监控癌症治疗。