一种干酪乳杆菌及其发酵蔬菜尾菜制备高膳食纤维的方法与流程

本技术属于生物，具体是一种干酪乳杆菌及其发酵蔬菜尾菜制备高膳食纤维的方法。

背景技术：

1、我国是农业大国，蔬菜作物的种植面积和产量位居世界前列。随着人们物质生活水平的不断提高，人们对蔬菜质量的要求也在不断上升，这就意味着蔬菜废弃物即尾菜的产生量也在逐年增长。尾菜水分含量高，极易滋生细菌且会造成严重的环境污染。由于当前我国农村大部分地区仍然采取倾倒、填埋、堆积等非常不科学的方式处理尾菜，已经引发农业生态环境污染，造成病虫害传播，影响蔬菜安全以及标准化生产。但是尾菜中含有丰富的有机质及矿质微量元素，同时富含类胡萝卜素、维生素和纤维素的尾菜具有抗氧化、抗糖尿病的特性。因此，若采用微生物发酵技术对尾菜进行合理加工生产高膳食纤维饲料产品，将会大大提高尾菜的资源利用率，增加其饲用价值。

技术实现思路

1、本发明研究的目的在于通过利用复合微生物发酵技术处理蔬菜尾菜，解决当前农村蔬菜尾菜处理方式的局限性和不科学性，充分地将蔬菜尾菜转变成可利用的物质，提高蔬菜尾菜的饲用价值，避免废弃蔬菜尾菜对环境造成污染，旨在提供一种工艺简单、操作方便、废物再利用、高效环保的一种干酪乳杆菌及其制备发酵蔬菜尾菜高膳食纤维反刍饲料的方法及其应用。

2、本发明提供了一种干酪乳杆菌(lactobacillus casei)bfec2002g3，保藏编号为cgmcc no.20432。

3、本发明还提供的一种干酪乳杆菌(lactobacillus casei)bfec2002g3在抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、副伤寒沙门菌或鸡白痢沙门菌中的应用。

4、本发明还提供的一种发酵蔬菜尾菜制备高膳食纤维的方法，包括以下步骤：

5、步骤1制备发酵底物，所述发酵底物包括蔬菜尾菜；所述蔬菜尾菜包括白菜、菠菜、小白菜或娃娃菜；

6、步骤2制备复合微生物菌液，混合均匀，备用，其中，复合微生物菌液配比为植物乳杆菌bfc190204、干酪乳杆菌bfec2002g3的菌种份数比为：植物乳杆菌：干酪乳杆菌＝(1-6)：(6-10)。

7、步骤3接种发酵，按发酵底物的1-1.2％的量加入复合微生物菌液(w/w)，混合均匀；发酵温度为28-30℃，水分含量15-30％，发酵时间为3-5天，得到发酵蔬菜尾菜高膳食纤维。

8、本发明还提供的一种利用蔬菜尾菜制备高膳食纤维发酵反刍饲料的制备方法，包括以下步骤：

9、步骤1制备发酵底物，所述发酵底物包括蔬菜尾菜；所述蔬菜尾菜包括白菜、菠菜、小白菜或娃娃菜；

10、步骤2制备复合微生物菌液，混合均匀，备用，其中，复合微生物菌液配比为植物乳杆菌、干酪乳杆菌的菌种份数比为：植物乳杆菌：干酪乳杆菌＝(1-6)：(6-10)，优选为(3-5)：(6-8)；

11、其中，所述植物乳杆菌，命名为植物乳杆菌(lactobacillus plantarum)bfc190204，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc)，保藏编号为cgmcc no.18915，保藏日期为2019年11月7日。

12、所述干酪乳杆菌，命名为干酪乳杆菌(lactobacillus casei)bfec2002g3，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc)，保藏编号为cgmcc no.20432，保藏日期为2020年8月17日。

13、所述植物乳杆菌(lactobacillus plantarum)bfc190204的活菌数≥2.0×109cfu/g，优选为≥4.0×109cfu/g。

14、所述干酪乳杆菌(lactobacillus casei)bfec2002g3的活菌数≥1×109cfu/g，优选为≥3.0×109cfu/g。

15、步骤3接种发酵，按发酵底物的1-1.2％的量加入复合微生物菌液(w/w)，混合均匀；发酵温度为28-30℃，水分含量15-30％，发酵时间为3-5天，得到发酵蔬菜尾菜高膳食纤维反刍饲料。

16、本技术还提供一种高膳食纤维发酵反刍饲料的使用方法，包括以下步骤：

17、步骤1制备发酵底物，将发酵底物的各原料按质量百分比混合均匀，备用，其中，蔬菜尾菜35-50％，玉米25-40％，豆粕5-10％，麸皮5-15％，玉米蛋白粉0.5-1.5％，食盐0.5-1.5％，磷酸氢钙0.5-1％，预混料0.5-1％；各组份百分比为100％。

18、所述蔬菜尾菜包括有白菜、菠菜、小白菜、娃娃菜等。

19、步骤2制备复合微生物菌液，混合均匀，备用，其中，复合微生物菌液配比为植物乳杆菌、干酪乳杆菌的菌种份数比为：植物乳杆菌：干酪乳杆菌＝(1-6)：(6-10)，优选为(3-5)：(6-8)；

20、其中，所述植物乳杆菌，命名为植物乳杆菌(lactobacillus plantarum)bfc190204，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc)，保藏编号为cgmcc no.18915，保藏日期为2019年11月7日。

21、所述干酪乳杆菌，命名为干酪乳杆菌(lactobacillus casei)bfec2002g3，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc)，保藏编号为cgmcc no.20432，保藏日期为2020年8月17日。

22、所述植物乳杆菌(lactobacillus plantarum)bfc190204的活菌数≥2.0×109cfu/g，优选为≥4.0×109cfu/g。

23、所述干酪乳杆菌(lactobacillus casei)bfec2002g3的活菌数≥1×109cfu/g，优选为≥3.0×109cfu/g。

24、步骤3接种发酵，按发酵底物的1-1.2％的量加入复合微生物菌液(w/w)，混合均匀；发酵温度为28-30℃，水分含量15-30％，发酵时间为3-5天，得到发酵蔬菜尾菜高膳食纤维反刍饲料。

25、步骤4按普通配合饲料总质量的10-50％替换为步骤3的发酵蔬菜尾菜高膳食纤维反刍饲料，优选用量是30％，直接进行投喂。

26、本技术的有益效果是：

27、1.本技术提供一种干酪乳杆菌(lactobacillus casei)bfec2002g3，以及发现了它的利用价值，尤其是该干酪乳杆菌(lactobacillus casei)bfec2002g3在抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、副伤寒沙门菌和鸡白痢沙门菌中的应用。

28、2.本技术提供了一种发酵蔬菜尾菜高膳食纤维反刍饲料产品，能够提高反刍动物的生长性能、屠宰性能及肉品质，可以提高反刍动物机体的抗氧化性能和免疫性能，降低生产成本，提高养殖效益，同时可以提高蔬菜尾菜的资源化利用率，提高蔬菜种植的经济效益，提高尾菜的营养价值。

29、3.与已有技术相比，现技术具有如下优点，通过利用复合微生物发酵技术处理蔬菜尾菜，解决当前农村蔬菜尾菜处理方式的局限性和不科学性，充分地将蔬菜尾菜转变成可利用的物质，提高蔬菜尾菜的饲用价值，避免废弃蔬菜尾菜对环境造成污染，旨在提供一种工艺简单、操作方便、废物再利用、高效环保的一种干酪乳杆菌及其制备发酵蔬菜尾菜高膳食纤维反刍饲料的方法及其应用。

30、4.本技术的发酵工艺可使得发酵蔬菜尾菜高膳食纤维反刍饲料中粗蛋白中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量提高。发酵前后氨基酸营养水平均有不同程度升高。本技术试验得出，随着发酵蔬菜尾菜高膳食纤维反刍饲料替代水平的增加，在30％替代水平时获得最佳料重比。

31、5.通过不同发酵菌的配比试验，得出本技术的干酪乳杆菌菌液bfec2002g3和植物乳杆菌菌液bfc190204组合配比4：6可获得最佳终末体重、平均日增重和料重比，通过该复合菌制备的发蔬菜尾菜高膳食纤维反刍饲料a能够促进湖羊机体蛋白质合成；促进机体尿素循环，降低bun含量，改善羊体内的氮素营养，增加体内的蛋白质储备；还可以提高湖羊机体的抗氧化能力，减少机体损伤，提高湖羊的屠宰性能，降低湖羊的肌肉嫩度、蒸煮损失，可以改善湖羊肉色，改善湖羊的食用品质。通过对比单一使用干酪乳杆菌菌液bfec2002g3和植物乳杆菌菌液bfc190204任一种菌株发酵时，得出本技术的两种菌组合效果最好。

32、保藏说明

33、中文名：干酪乳杆菌

34、拉丁名：lactobacillus casei

35、菌株编号：bfec2002g3

36、保藏机构：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心

37、保藏机构简称：cgmcc

38、地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号

39、保藏日期：2020年8月17日

40、保藏中心登记入册编号：cgmcc no.20432。

41、中文名：植物乳杆菌

42、拉丁名：lactobacillus plantarum

43、菌株编号：bfc190204

44、保藏机构：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心

45、保藏机构简称：cgmcc

46、地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号

47、保藏日期：2019年11月7日

48、保藏中心登记入册编号：cgmcc no.18915。