引物组和掺入这些引物组的方法和试剂盒与流程

背景技术：

1、特定核酸的检测可以用于诊断医学和分子生物学研究。在如基因测序、基因分型等多种核酸检测方法和应用中，使用流通池。流通池表面可使用如引物组、聚合酶等特定的表面化学物功能化，具体取决于将要发生的反应。在许多情况下，表面化学物适于一次性使用的检测方法。

技术实现思路

1、本文公开了若干引物组。包括各引物组的流通池的示例是可重复使用的。这些引物组中的一些引物组使得这些流通池能够使用两次，其中在这些使用中的每次使用期间分析不同样品。这些引物组中的一些其它引物组使得这些流通池能够重复使用任何期望的次数，其中在相应的使用期间分析任何期望数量的不同样品。

技术特征：

1.一种引物组，所述引物组包括：

2.根据权利要求1所述的引物组，其中所述第一核酸酶抗性修饰和所述第二核酸酶抗性修饰是相同类型的核酸酶抗性修饰。

3.根据权利要求2所述的引物组，其中：

4.一种可重复使用的流通池，所述可重复使用的流通池包括：

5.根据权利要求4所述的可重复使用的流通池，其中：

6.根据权利要求5所述的可重复使用的流通池，其中：

7.根据权利要求4所述的可重复使用的流通池，其中：

8.根据权利要求7所述的可重复使用的流通池，其中：

9.一种方法，所述方法包括：

10.根据权利要求9所述的方法，其中：

11.一种方法，所述方法包括：

12.根据权利要求11所述的方法，其中：

13.根据权利要求11所述的方法，其中所述沿所述再生寡核苷酸的所述第二部分的聚合酶延伸使至少所述第一核酸酶抗性引物的所述切割位点再生。

14.根据权利要求11所述的方法，所述方法还包括：

15.一种流通池，所述流通池包括：

16.根据权利要求15所述的流通池，其中：

17.根据权利要求15所述的流通池，其中所述第一切割位点和所述第二切割位点各自包括独立地选自由以下组成的组的核碱基：尿嘧啶、8-氧代鸟嘌呤和烯丙基-核苷酸。

18.根据权利要求15所述的流通池，其中所述第一引物和所述第二引物是核酸酶抗性引物。

19.一种方法，所述方法包括：

20.根据权利要求19所述的方法，其中：

21.根据权利要求20所述的方法，所述方法还包括变性以使所述第一引物中的所述至少一些第一引物的所述剩余部分以及所述第二引物中的至少一些第二引物的所述剩余部分成为单链的。

22.根据权利要求21所述的方法，其中：

23.根据权利要求21所述的方法，其中：

24.根据权利要求19所述的方法，其中：

25.根据权利要求24所述的方法，所述方法还包括变性以使所述第一引物中的所述至少一些第一引物的所述剩余部分以及所述第二引物中的至少一些第二引物的所述剩余部分成为单链的。

26.根据权利要求25所述的方法，其中依序使所述第一引物中的所述至少一些第一引物的所述切割部分以及所述第二引物中的所述至少一些第二引物的所述切割部分再生涉及：

27.一种流通池产生试剂盒，所述流通池产生试剂盒包括：

28.根据权利要求27所述的流通池产生试剂盒，其中：

29.根据权利要求27所述的流通池产生试剂盒，其中：

30.根据权利要求27所述的流通池产生试剂盒，其中：

31.根据权利要求27所述的流通池产生试剂盒，其中：

32.根据权利要求27所述的流通池产生试剂盒，其中所述核酸酶抗性锚寡核苷酸中的每个核酸酶抗性锚寡核苷酸包括选自由以下组成的组的3'端核酸酶抗性修饰：硫代磷酸酯键、膦酸甲酯、反向核苷酸、肽核酸、吗啉代、2'-o-甲基、3'端磷酸化核苷酸和包括亚磷酰胺c3间隔子的核苷酸。

33.根据权利要求27所述的流通池产生试剂盒，其中：

34.一种方法，所述方法包括：

35.根据权利要求34所述的方法，其中：

36.根据权利要求34所述的方法，其中：

37.根据权利要求34所述的方法，其中：

38.根据权利要求34所述的方法，其中：

39.根据权利要求34所述的方法，所述方法还包括：

技术总结
本发明公开了示例性引物组，该示例性引物组包括第一核酸酶抗性引物和第二核酸酶抗性引物。该第一核酸酶抗性引物包括：第一序列；第一切割位点，该第一切割位点连接在该第一序列的3'端处；和第一核酸酶抗性修饰，该第一核酸酶抗性修饰掺入该第一序列与该第一切割位点之间。该第二核酸酶抗性引物包括：不同于该第一序列的第二序列；第二核酸酶抗性修饰，该第二核酸酶抗性修饰掺入该第二序列的3'端处；和第二切割位点，该第二切割位点连接在该第二序列与该第二核酸酶抗性修饰之间。该第二切割位点不同于该第一切割位点。

技术研发人员：E·阿米霍,J·M·鲍特尔,J·布罗丹,E·M.卡拉米,M·C·罗格特·巴奇加卢波,R·史密斯,M·莱萨德-瓦伊格,L·文森特
受保护的技术使用者：因美纳有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/4/7