一种富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽的制备方法与流程

本发明涉及蛋白肽提取领域，具体涉及一种富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽的制备方法。

背景技术：

1、金枪鱼生鱼片的加工过程中，需将从冷冻鱼体上刨割下鱼皮，其附带的鱼肉、脂肪、结缔组织约占总量的25％。这些附着物的存在严重影响了金枪鱼皮的高值化综合利用，金枪鱼皮约占鱼体总量的5％。金枪鱼体大皮厚且无药物残留之虑，是一种很好的胶原蛋白资源，但与罗非鱼、鳕鱼等易得纯净鱼皮的鱼种相比，金枪鱼皮的肉、脂肪的结合状态是其至今未被有效开发的重要原因。鱼皮原料的优劣将直接关系到胶原蛋白的质量与得率，其皮背附多层鱼鳞和鱼肉，油脂含量较高，难以去除。鱼鳞影响胶原提取率和胶原纯度、油脂影响产品口感。目前富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽的规模产业化较少，想要做出品质较好的金枪鱼皮肽，前处理工艺是关键所在，但前处理往往需要进多次清洗、除肉、除鳞、去油去脂等复杂工艺，且每个工艺都需采用相应的设备，投入较大。

2、现有研究金枪鱼皮的前处理多采用强碱氢氧化钠浸泡去油去脂，未将油脂利用起来，而金枪鱼油富含dha和epa，也是很好的深海鱼油补充剂原料。铲肉机去除鱼肉等复杂工序，会造成生产效率低下，同时也将鱼肉中富含的微量元素去除，使产品营养成分单一，降低产品的商品价值。

技术实现思路

1、本发明针对现有技术存在的问题，提供一种提取工艺简单的富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽的制备方法，本发明采用清洗、熬胶、酶解一体式工艺制备得到富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽，其具有无色无味、回味甘甜，羟脯氨酸含量和蛋白质含量高，产品营养成分多元，含有多种营养物质的牛磺酸、硒等具有抗氧化、抗疲劳功效的氨基酸和微量元素。

2、一方面，本发明提供了一种富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽的制备方法包括清洗、熬胶、酶解、分离、浓缩、脱色、浓缩和干燥的步骤。

3、作为优选地，本发明提供的一种富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽的制备方法，包括：

4、(1)清洗：对金枪鱼鱼皮进行包括使用清洗剂进行清洗和漂洗的步骤；

5、(2)熬胶：将步骤(1)处理后的鱼皮加水并加热熬胶，得到熬胶液；

6、(3)酶解：向熬胶液加入酶进行酶解，灭酶处理，得到酶解液；

7、(4)分离：将酶解液静置、分离，得到精提胶原蛋白液；

8、(5)脱色：在精提胶原蛋白液中加入脱色剂进行脱色处理，然后除去脱色剂，得到物料1；

9、(6)浓缩和干燥：将物料1进行浓缩以及干燥处理，得到所述金枪鱼蛋白肽。

10、作为优选地，所述步骤1)中所述的清洗液由小苏打、氢氧化钠、氯化钠和水组成。

11、作为优选地，所述清洗液中氯化钠和小苏打的质量比为(1-2)：1，更优选为(1.2-1.8)：1、(1.3-1.6)：1或(1.4-1.5)：1。

12、作为优选地，所述清洗液中氯化钠和小苏打的总质量浓度为1-10％，更优选为2-9％、3-8％、4-8％、5-8％、6-7％。

13、作为优选地，所述清洗液中氢氧化钠的质量浓度为1-5％，更优选为1.5-4.5％、2-4.5％、2.5-4.5％、3-4.5％、3-4％。

14、作为优选地，所述步骤1)中对鱼皮的清洗进行包括使用清洗剂进行清洗时采用搅拌的方式进行清洗，所述搅拌转速为150-300r/min，更优选为160-290r/min、180-280r/min、200-250r/min。

15、作为优选地，所述步骤1)中包括：在金枪鱼鱼皮中，以鱼皮质量比为1:2-1:15的比例添加清洗剂对鱼皮进行浸泡，浸泡时间为30-150min；然后开启搅拌进行搅拌清洗，搅拌速度为150-300r/min，搅拌时间为10-30min；搅拌清洗结束后，排掉清洗液；然后，使用水将鱼皮漂洗至漂洗后的水的ph为6.8-8.2；

16、作为优选地，所述步骤2)中熬胶温度为85-99℃，更优选为86-99℃、88-99℃、90-99℃、92-98℃、93-98℃、95-98℃；熬胶时间2-10h，更优选为3-9h、4-9h、5-8h、6-8h。

17、作为优选地，所述步骤2)中在熬胶后进行降温得到熬胶液。所述降温温度为30-50℃、32-48℃、35-47℃或35-45℃。

18、作为优选地，所述步骤2)中包括：将漂洗后的鱼皮加5-10倍质量的水在温度85-99℃下熬胶3-10小时；降温至30-50℃，即得熬胶液。

19、作为优选地，所述步骤3)中酶为碱性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶组成的复合酶。

20、所述复合酶为熬胶液质量用量的1.2-2.6％，更优选为1.3-2.6％、1.5-2.6％、1.8-2.5％、2.0-2.5％。

21、作为优选地，以熬胶液的质量计，碱性蛋白酶的添加量为0.5-1.3％，更优选为0.6-1.3％、0.7-1.2％、0.8-1.1％、0.9-1.0％；中性蛋白酶的添加量为0.5-1.1％，更优选为0.6-1.05％、0.6-1.0％、0.65-0.95％、0.7-0.9％；木瓜蛋白酶的添加量为0.3-0.8％，更优选为0.35-0.75％、0.4-0.7％、0.45-0.65％、0.5-0.6％。

22、作为优选地，所述碱性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶质量比为1：(0.8-1.0)：(0.4-0.7)，更优选为1：(0.85-1.0)：(0.45-0.7)、1：(0.85-0.95)：(0.45-0.65)、1：(0.9-0.95)：(0.5-0.6)。

23、作为优选地，所述酶解的温度为30-58℃，更优选为35-58℃、40-58℃、45-58℃、50-57℃、53-57℃。

24、作为优选地，所述酶解的时间为1-3h，更优选为1.5-3h、2-3h、2-2.8h、2-2.5h.

25、作为优选地，所述酶解的ph为7.0-8.0，更优选为7.0-7.8、7.2-7.8、7.2-7.6、7.2-7.5。

26、作为优选地，所述酶解的搅拌转速为150-300r/min，更优选为160-290r/min、180-280r/min、200-250r/min。

27、作为优选地，所述步骤3)中包括：向步骤2)熬胶液中加入熬胶液质量百分比为1.2-2.6％酶进行酶解；酶解条件为：搅拌转速为150-300r/min，温度为30-58℃，ph为7.0-8.0、时间为1-3h；酶解结束通入蒸汽，升温至95-100℃，保温10-60min灭酶处理，得到酶解液。

28、作为优选地，所述步骤4)中包括：将步骤3)酶解液静置至少4h，得到上层为油成分、中间层和下层为含有骨、鳞的固相的静置物料；然后将表层油脂和下层固相除去以实现分离并选择中间层，即可得到精提胶原蛋白液。

29、作为优选地，所述脱色剂为活性炭。

30、作为优选地，所述脱色剂为精提胶原蛋白液质量百分比的1-5％，更优选为1.5-5％、2-5％、2-4.5％、2-4％。

31、作为优选地，所述脱色温度为70-80℃，更优选为72-80℃、74-78℃、74-77℃、75-77℃。

32、作为优选地，所述脱色时保温时间为20-60min，更优选为25-60min、30-55min、30-50min。

33、作为优选地，所述步骤5)中包括：向步骤4)的精提胶原蛋白液中添加以精提胶原蛋白液质量百分比为1-5％脱色剂活性炭进行脱色；脱色条件为：温度70-80℃，保温时间20-60min；保温结束除去脱色剂活性炭，得到物料1。

34、作为优选地，所述步骤6)中浓缩程度为将物料1浓缩至质量为物料1的10-20％，更优选为12-20％、13-20％、14-19％、15-18％。

35、作为优选地，所述步骤6)中喷雾干燥至含水质量浓度为小于5.0％，更优选为小于4.5％、4％、3.5％。

36、作为优选地，所述步骤6)中包括：将步骤5)中物料1浓缩至质量为物料1的10-20％，喷雾干燥至含水量小于5％，得到富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽粉体。

37、作为优选地，可将富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽粉体进行粉体真空包装、阴凉干燥储藏。

38、作为优选地，本发明提供的一种富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽的制备方法，包括：

39、1)在金枪鱼鱼皮中，以鱼皮质量比为1:2-1:15的比例添加清洗剂对鱼皮进行浸泡，浸泡时间为30-150min；然后开启搅拌进行搅拌清洗，搅拌速度为150-300r/min，搅拌时间为10-30min；搅拌清洗结束后，排掉清洗液；然后，使用水将鱼皮漂洗至漂洗后的水的ph为6.8-8.2；

40、2)将漂洗后的鱼皮加5-10倍质量的水在温度85-99℃下熬胶3-10小时；降温至30-50℃，即得熬胶液；

41、3)向步骤2)熬胶液中加入熬胶液质量百分比为1.2-2.6％酶进行酶解；酶解条件为：搅拌转速为150-300r/min，温度为30-58℃，ph为7.0-8.0、时间为1-3h；酶解结束通入蒸汽，升温至95-100℃，保温10-60min灭酶处理，得到酶解液；

42、4)将步骤3)酶解液静置至少4h，得到上层为油成分、中间层和下层为含有骨、鳞的固相的静置物料；然后将表层油脂和下层固相除去并选择中间层，即可得到精提胶原蛋白液；

43、5)向步骤4)的精提胶原蛋白液中添加以精提胶原蛋白液质量百分比为1-5％脱色剂活性炭进行脱色；脱色条件为：温度70-80℃，保温时间20-60min；保温结束除去脱色剂活性炭，得到物料1；

44、6)将步骤5)中物料1浓缩至质量为物料1的10-20％，喷雾干燥至含水量小于5％，得到富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽粉体；

45、7)将粉体真空包装、阴凉干燥储藏。

46、另一方面，本发明提供一种由上述制备方法得到的富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽。

47、另一方面本发明提供一种将本发明富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽的应用。

48、有益效果：

49、本发明工艺集清洗、熬胶、酶解于一体，生产效率高，废水处理集中，所生产的富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽无色无味，回味甘甜，且羟脯氨酸含量和蛋白质含量高，产品营养成分多元，含有多种营养物质的牛磺酸、硒等具有抗氧化、抗疲劳功效的氨基酸和微量元素，极大程度地提高了富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽产品的价值。

50、本发明制备的富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽色泽较好、气味适宜、口感较好，牛磺酸浓度可达到47.25mg/100g，富含硒，硒含量高达205.76ug/100g，羟脯氨酸含量可高达8.78％。

51、本发明使用清洗剂清洗鱼皮时，搅拌转速对富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽质量影响较大；在低于本发明100r/min的低速搅拌条件下，富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽色泽、气味和口感较差，牛磺酸、硒、羟脯氨酸成分含量适宜。在高于本发明300r/min的高速搅拌条件下，富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽色泽、气味和口感较佳，但是牛磺酸、硒、羟脯氨酸成分含量下降。本发明在使用清洗剂进行清洗时，100-300r/min的转速使得本发明富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽感官性能佳和营养成分丰富。

52、清洗剂中省略氢氧化钠或者氢氧化钠含量较高时，富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽色泽、气味和口感较差，牛磺酸、硒、羟脯氨酸成分含量下降。本发明使用1-5％的氢氧化钠使得本发明富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽具有优异的性能。

53、清洗剂中在保持总量不变的情况下，省略氯化钠和小苏打时，富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽色泽、气味和口感变差，牛磺酸、硒、羟脯氨酸成分含量微弱下降。本发明使用氯化钠和小苏打的质量比为(1-2)：1的复配产生协同效果，两者协同增加富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽的感官性能以及营养成分含量。

54、本发明由碱性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶组成的复合酶进行酶解使得本发明富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽具有优异的感官性能和高营养成分含量。本发明使用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶复配，在提高口感等感官性能和提高羟脯氨酸产率上产生复配增效效果。

55、本发明碱性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶质量比为1：(0.8-1.0)：(0.4-0.7)进行组合的酶解过程，能提供富硒金枪鱼皮胶原蛋白肽更好的综合性能。