一种经皮镇痛肽及其制备方法和应用

本发明涉及生物医药领域，尤其涉及多肽。

背景技术：

1、炎性疼痛是由于各种刺激因素引起肥大细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和神经末梢等释放炎症因子，引起局部组织炎症反应。由于疼痛常与自主神经活动、心理和情绪反应交织在一起，有极大的变异性，因此较其他感觉更难研究。

2、以吗啡为代表的麻醉性镇痛药和以阿司匹林为代表的解热镇痛抗炎药是临床常用的镇痛药物。阿片类镇痛药虽镇痛作用强大，但成瘾问题大大限制了其临床应用，且对慢性疼痛的疗效不够理想，通常仅用于晚期癌症患者。非甾体类抗炎镇痛药是炎性疼痛的首选治疗药物，虽无成瘾问题，但其镇痛作用较弱，易出现严重的胃肠道反应，且大剂量或长期使用易造成肝损害、肾损害，并影响凝血功能。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种经皮镇痛肽，以解决上述技术问题。

2、本发明的目的还在于提供经皮镇痛肽的制备方法，用于制备经皮镇痛肽。

3、本发明的目的还在于提供经皮镇痛肽的应用。

4、本发明所解决的技术问题可以采用以下技术方案来实现：

5、经皮镇痛肽，其特征在于，其氨基酸序列是：

6、mrqikiwfqnrrmkwkkwykqstgpsyysvgrasgllsgirrspdi。

7、经皮镇痛肽的制备方法，其特征在于，通过基因重组技术将神经肽b基因与透皮肽antp基因结合，诱导表达得到经皮镇痛肽。

8、具体的，包括步骤一、制备bl21(de3)/pet32a-trxd-antp-bgnpb，bl21(de3)/pet32a-trxd-antp-bgnpb含ecor i和hind iii限制性内切酶位点；步骤二、对bl21(de3)/pet32a-trxd-antp-bgnpb中的融合蛋白trxd-antp-bgnpb进行诱导表达，步骤三、对融合蛋白trxd-antp-bgnpb进行条件优化，步骤四、对融合蛋白trxd-antp-bgnpb进行分离纯化后获得成熟融合蛋白antp-bgnpb溶液，成熟融合蛋白antp-bgnpb溶液中含有经皮镇痛肽。

9、经皮镇痛肽的应用，其特征在于，用于制备外用镇痛剂。

10、经皮镇痛肽的应用，其特征在于，用于制备具有抗炎性疼痛作用的化妆品。

11、本发明创造性的将穿膜肽与神经肽b融合，所得到的经皮镇痛肽具有良好的穿膜效果和镇痛效果，克服市售镇痛药成瘾性强、副作用大等缺陷。具有以下优势：

12、1、安全性高，毒副作用小；

13、2、经皮给药形式方便、患者顺应性佳；

14、3、靶向治疗，特异性强。

15、4、经皮镇痛活性强。

技术特征：

1.经皮镇痛肽，其特征在于，其氨基酸序列为

2.根据权利要求1所述的经皮镇痛肽，其特征在于，呈冻干粉末状。

3.经皮镇痛肽的制备方法，其特征在于，通过基因重组技术将神经肽b基因与透皮肽antp基因结合，诱导表达得到经皮镇痛肽。

4.根据权利要求3所述的经皮镇痛肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

5.根据权利要求4所述的经皮镇痛肽的制备方法，其特征在于，步骤一中，先在基因片段中插入pet28a(+)质粒的ecor i和hind iii限制性内切酶位点，获得pet28a-antp-bgnpb质粒，然后使用pcr法从pet28a-antp-bgnpb质粒上扩增目的基因，得到含ecor i和hindiii限制性内切酶位点的antp-bgnpb片段；然后通过琼脂糖凝胶电泳和胶回收获得antp-bgnpb片段，再然后，ecor i和hind iii双酶切后获取具有粘性末端的目的antp-bgnpb片段和载体pet32a片段，再然后，使用pcr/酶切产物纯化试剂盒纯化antp-bgnpb片段和pet32a片段，最后，通过t4连接酶构建载体pet32a-trxd-antp-bgnpb。

6.根据权利要求4所述的经皮镇痛肽的制备方法，其特征在于，步骤二中，原核诱导表达。

7.根据权利要求4所述的经皮镇痛肽的制备方法，其特征在于，步骤三中，进行浓度优化、温度优化和时间优化。

8.根据权利要求4所述的经皮镇痛肽的制备方法，其特征在于，在步骤四中，将分离获得的成熟融合蛋白antp-bgnpb溶液通过冷冻干燥机，冻干成粉末于-80℃保存。

9.经皮镇痛肽的应用，其特征在于，用于制备外用镇痛剂。

10.经皮镇痛肽的应用，其特征在于，用于制备具有抗炎性疼痛作用的化妆品。

技术总结
一种经皮镇痛肽及其制备方法和应用涉及生物医药领域。经皮镇痛肽，其氨基酸序列是：MRQIKIWFQNRRMKWKKWYKQSTGPSYYSVGRASGLLSGIRRSPDI。经皮镇痛肽的制备方法，通过基因重组技术将神经肽B基因与透皮肽ANTP基因结合，诱导表达得到经皮镇痛肽。本发明创造性的将穿膜肽与神经肽B融合，所得到的经皮镇痛肽具有良好的穿膜效果和镇痛效果，克服市售镇痛药成瘾性强、副作用大等缺陷。

技术研发人员：高飞,郇伟伟,彭鑫萌,蔡鹏,李洁
受保护的技术使用者：浙江农林大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/14