DHX33蛋白作为肾癌诊断标志物的应用的制作方法

本发明涉及医疗诊断，特别是，提供了dhx33蛋白作为肾癌，尤其是乳头状肾细胞癌诊断标志物的应用。

背景技术：

1、肾癌是泌尿系统常见的一种恶性肿瘤，据部分调查数据显示，肾癌发病率占全球恶性肿瘤发病率的2％～3％，男性发病率略高于女性。肾癌是来源于肾小管上皮细胞的腺癌，85％为透明细胞癌，乳头状肾细胞癌(papillary renal cell carcinoma)仅次于肾透明细胞癌，是第二大常见的肾细胞癌，约占肾癌总患者的10-15％。

2、据统计，随着医学影像学的不断发展，晚期肾癌的诊断率已由原先的30％下降到17％。肾癌发生的原因还尚不明确，根据部分资料和调查显示其发病率与环境因素和个人习惯存在很大关系。

3、目前肾癌主要通过临床表现、影像学检查这两种方法进行诊断。临床常见表现有血尿、腰部疼痛、腹部肉眼可见或可触及包块。但由于肾脏位于腹膜后，出现临床表现多为晚期，因此，肾癌早期诊断多依赖于影像学检查。影像学检查包括b超、ct等方法，b超可确诊小肾癌，ct可观测是否发生扩散。

4、肾癌的治疗方法主要包括手术治疗和药物治疗，手术治疗常用于局限性肾癌，药物治疗常用于转移型肾癌。手术治疗又包括开腹手术治疗、普通腹腔镜、机器人腹腔镜等，手术治疗对于局限性肾癌的病人有较好的作用，但会由于麻醉等原因出现并发症，也不适用于中高风险病人。药物治疗主要适用于肾癌晚期的病人，包括靶向治疗药物和免疫联合治疗药物，靶向治疗药物主要是tki(多靶点酪氨酸酶抑制剂)类，主要有舒尼替尼、培唑帕尼、索拉非尼；免疫联合治疗药物主要是ici(免疫检查点抑制剂)类，主要有伊匹单抗联合纳武单抗、帕博利珠单抗联合阿昔替尼、阿维鲁单抗联合阿昔替尼、仓伐替尼联合依维莫司等药物。晚期肾癌常采用tki联合ici或双ici作为最佳治疗方案。

5、由于肾癌早期检查时没有特异性症状，检查时多为晚期，因此对于肾癌的早期诊断是十分重要的，开发和探索临床肾癌早期诊断的标志物，能让肾癌患者大大提高治疗效果，对于肾癌的诊治具有十分重要意义。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供dhx33蛋白的新用途，具体而言，提供了dhx33蛋白在诊断或者辅助诊断肾癌中的应用。该应用具有操作简便、灵敏度高、结果可靠准确的特点。

2、本发明解决其技术问题采用的技术方案是：

3、第一方面，本发明涉及dhx33蛋白在筛查或者辅助诊断肾癌中的应用。

4、本发明采用免疫组织化学技术，利用抗原抗体结合的高度特异性检测dhx33蛋白在乳头状肾细胞癌组织、邻近正常组织及正常组织内dhx33蛋白的表达量是否存在显著性差异，结果发现在乳头状肾细胞癌组织样本中，dhx33蛋白明显存在过量表达的现象。相比之下，乳头状肾细胞癌旁良性组织样本和正常肾组织对照组组织样本中的dhx33蛋白的表达水平较低，提示dhx33可能作为乳头状肾细胞癌早期诊断的标志物。

5、第二方面，本发明涉及dhx33蛋白在制备筛查或辅助诊断肾癌的产品中的应用。

6、第三方面，本发明涉及检测dhx33蛋白含量或活性的系统或检测dhx33基因含量或表达量的系统在制备筛查或辅助诊断肾癌产品中的应用。

7、本发明首次公开了dhx33蛋白在乳头状肾细胞癌中高度表达，并与肿瘤的恶化程度呈正相关。

8、在具体的实施方案中，检测dhx33蛋白含量或活性的系统包括检测dhx33蛋白含量或活性所需的试剂和/或仪器；

9、检测dhx33蛋白基因含量或表达量的系统包含检测dhx33蛋白基因含量或表达量所需的试剂和/或仪器。

10、在具体的实施方案中，检测dhx33蛋白含量或活性所需的试剂为特异性识别dhx33蛋白的蛋白或者多肽及其修饰物。

11、在具体的实施方案中，检测dhx33蛋白含量或活性所需的试剂为特异性识别dhx33蛋白的抗体或抗体片段。

12、在具体的实施方案中，检测dhx33蛋白基因含量或表达量所需的试剂包含扩增dhx33蛋白基因或其片段的引物。

13、在具体的实施方案中，检测所采用的样本可以为来自受试者的组织，包括但不限于疑似肾癌患者的组织，例如石蜡包埋组织、冰冻组织或者组织活检物等。

14、在具体的实施方案中，所述产品包括系统，所述系统包括试剂和/或仪器，所述试剂包括芯片、制剂或试剂盒。

15、在具体的实施方案中，所述试剂盒为elisa试剂盒或免疫组化试剂盒等。

16、第四方面，本发明提供了一种肾癌筛查或辅助诊断产品，包含前文所述的检测dhx33蛋白含量或活性的系统或检测dhx33蛋白基因含量或表达量的系统。

17、其中，检测所采用的样本可以为来自受试者的组织，包括但不限于疑似肾癌患者的组织，例如石蜡包埋组织、冰冻组织或者组织活检物等。

18、以dhx33蛋白作为标志物的系统在制备筛查或辅助诊断肾癌产品中的应用也属于本发明的保护范围。

19、第五方面，本发明还提供了一种筛查或辅助诊断肾癌的方法，包括：通过检测待测样本中dhx33蛋白含量或活性，或dhx33蛋白基因含量或表达量，根据所述含量、活性或表达量进行诊断或辅助诊断。

20、其中，待测样本包括但不限于疑似肾癌患者的组织，例如石蜡包埋组织、冰冻组织或者组织活检物等。

21、在第六方面，本发明提供了dhx33蛋白的抗体在制备筛查或辅助诊断肾癌的产品中的应用。

22、在本发明各方面的实施方案中，肾癌可以为乳头状肾细胞癌。

23、本发明与现有技术相比具有明显的有益效果。借由上述技术方案，本发明至少具有下列有益技术效果：

24、本发明首次公开了dhx33蛋白在乳头状肾细胞癌中高度表达，并与肿瘤的恶化程度呈正相关。

25、本发明申请的肿瘤标志物dhx33蛋白，目前在小规模样本中即可证实适合作为乳头状肾细胞癌的诊断标志物。

26、本发明证明了dhx33蛋白可作为新的乳头状肾细胞癌标志物，为开发诊断或者辅助诊断乳头状肾细胞癌的标志物产品提供新的手段。

技术特征：

1.检测dhx33蛋白含量或活性的系统或检测dhx33蛋白基因含量或表达量的系统在制备筛查或辅助诊断肾癌产品中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测dhx33蛋白含量或活性的系统包括检测dhx33蛋白含量或活性所需的试剂和/或仪器；

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述检测dhx33蛋白含量或活性所需的试剂为特异性识别dhx33蛋白的蛋白质或者多肽或其修饰物。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述检测dhx33蛋白含量或活性所需的试剂为特异性识别dhx33蛋白的抗体或抗体片段或其修饰物。

5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述检测dhx33蛋白基因含量或表达量所需的试剂包含扩增dhx33基因或其片段的引物。

6.根据权利要求1-5任一所述的应用，其特征在于，所述检测所采用的样本为来自受试者的组织，优选石蜡包埋组织、冰冻组织或者组织活检物。

7.根据权利要求1-5任一所述的应用，其特征在于，所述产品包括检测dhx33蛋白的系统，所述系统包括试剂和/或仪器，所述试剂包括芯片、制剂或试剂盒。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述试剂盒为elisa试剂盒或免疫组化试剂盒。

9.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肾癌为乳头状肾细胞癌。

10.dhx33蛋白的抗体在制备筛查或辅助诊断肾癌的产品中的应用。

技术总结
本发明涉及医疗诊断技术领域，提供了DHX33蛋白作为肾癌诊断标志物的应用。本发明公开了检测DHX33蛋白含量或活性的系统或检测DHX33蛋白基因含量或表达量的系统在制备筛查或辅助诊断肾癌产品中的应用。发明人通过试验证明了DHX33蛋白在肾癌组织样本中高表达，可作为肾癌的诊断标志物。

技术研发人员：廖德清,温馥瑜,邓园莲,张严冬
受保护的技术使用者：深圳开悦生命科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15