一种化合物、药物组合物及在制备血管舒张药物中的应用

本发明属于血管舒张活性化合物，涉及一种化合物、药物组合物及在制备血管舒张药物中的应用。

背景技术：

1、公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

2、高血压已成为世界上最常见的心脑血管疾病，是造成人类非正常死亡最危险的因素之一。医学上将静息状态下血管动脉收缩压/舒张压≥140/90mmhg作为评判高血压的标准，大多人在清晨两次以上非同天测得的血压≥140/90mmhg可初步诊断为高血压。高血压并不是单独存在的，患者在患有高血压的同时也常常会伴随血糖、血脂的代谢紊乱甚至心脏、肾脏、大脑等器官的病变，因而高血压是一种极其复杂的全身性疾病。引起高血压的原因十分复杂，有基因遗传、生存环境、不良的生活习惯以及长期用药等因素。全球有大约1/3的人存在血压偏高的问题，我国高血压病人超过3.3亿人，研发新型抗高血压药物迫在眉睫。

3、研究证实，rho相关激酶(rho-associated kinase，rock)高表达可以通过多种方式来收缩血管，抑制其活性可以显著舒张血管，达到降低血压的目的。rock属于丝氨酸/苏氨酸激酶家族成员，是能够与gtp结合的rhoa蛋白的直接和主要下游效应因子，分为rock1和rock2两种亚型。rock1主要在肝、脾、肾、肺和睾丸中高表达，而rock2则在大脑、心脏和血管中高表达。相对于rock1，rock2的激活与心血管系统稳态和血管收缩相关疾病的关系更为密切，被认为是舒张血管和治疗高血压的有效靶标，抑制其高表达可以有效舒张血管，从而达到治疗高血压的目的。rock2抑制剂不仅可以促进内源性血管舒张因子的分泌，还可以直接作用于肌球蛋白轻链，抑制细胞收缩，产生降压作用。目前已经报道了多个具有血管舒张作用的rock抑制剂，如法舒地尔、利帕舒地尔和奈塔舒地尔。为了设计合成血管舒张作用更好、rock2抑制效果更强的小分子化合物，最终发现高效低毒的高血压治疗药物，提出本发明。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种化合物、药物组合物及在制备血管舒张药物中的应用，本发明提供的化合物具有良好的rock2抑制活性和良好血管舒张作用。

2、为了实现上述目的，本发明的技术方案为：

3、一方面，一种化合物，选自如下：

4、n-(1h-吲唑-5-基)-2-(3-甲氧基苯基)乙酰胺(化合物代号wrz-1)；

5、2-(3-氟苯基)-n-(1h-吲唑-5-基)乙酰胺(化合物代号wrz-2)；

6、n-(1h-吲唑-5-基)-2-(间甲苯基)乙酰胺(化合物代号wrz-3)；

7、n-(1h-吲唑-5-基)-2-(3-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(化合物代号wrz-4)；

8、2-(3,4-二甲氧基苯基)-n-(1h-吲唑-5-基)乙酰胺(化合物代号wrz-5)；

9、2-溴-n-(1h-吲唑-5-基)-2-(3-甲氧基苯基)乙酰胺(化合物代号wrz-6)；

10、2-溴-2-(3-氟苯基)-n-(1h-吲唑-5-基)乙酰胺(化合物代号wrz-7)；

11、2-溴-n-(1h-吲唑-5-基)-2-(间甲苯基)乙酰胺(化合物代号wrz-8)；

12、2-溴-2-(3,4-二氯苯基)-n-(1h-吲唑-5-基)乙酰胺(化合物代号wrz-9)；

13、2-(3-氟苯基)-n-(喹啉-6-基)乙酰胺(化合物代号wrz-14)；

14、n-(喹啉-6-基)-2-(间甲苯基)乙酰胺(化合物代号wrz-15)；

15、2-溴-2(3-甲氧基苯基)-n-(喹啉-6-基)乙酰胺(化合物代号wrz-21)；

16、2-溴-2-(3-氟苯基)-n-(喹啉-6-基)乙酰胺(化合物代号wrz-22)；

17、2-溴-2-(3,4-二氯苯基)-n-(喹啉-6-基)乙酰胺(化合物代号wrz-24)；

18、n-羟基-4-(3-(异喹啉-5-基)脲基)苯甲酰胺(化合物代号wrz-28)；

19、4-(3-(异喹啉-5-基)脲)苯甲酰胺(化合物代号wrz-29)。

20、为了获得对rock2具有良好酶抑制活性的化合物，本发明设计了三种主环结构，分别为如下所示：

21、

22、其中，r1为氢原子或者溴原子，r2为3-och3、3-ch3、3-f、3-ci、3-cf3、3,4-2och3、3,4-2cl、3,4-2f，r3为4-conh2、3-ch3。

23、经过研究表明，基于上述三种主环结构的化合物中，取代基对化合物影响rock2酶抑制率有较大影响，其中，本发明提供的上述16种化合物对rock2酶的抑制率均超过了50％，均具有良好的rock2酶抑制活性，而其他合成出的化合物的rock2酶抑制活性较差，例如2-(3-氯苯基)-n-(喹啉-6-基)乙酰胺(化合物代号wrz-18)对rock2酶的抑制率仅为0.3％。

24、在一些实施方式中，选自如下：

25、n-(1h-吲唑-5-基)-2-(3-甲氧基苯基)乙酰胺(化合物代号wrz-1)；

26、2-(3-氟苯基)-n-(1h-吲唑-5-基)乙酰胺(化合物代号wrz-2)；

27、n-(1h-吲唑-5-基)-2-(间甲苯基)乙酰胺(化合物代号wrz-3)；

28、n-(1h-吲唑-5-基)-2-(3-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(化合物代号wrz-4)；

29、2-溴-n-(1h-吲唑-5-基)-2-(3-甲氧基苯基)乙酰胺(化合物代号wrz-6)；

30、2-溴-2-(3-氟苯基)-n-(1h-吲唑-5-基)乙酰胺(化合物代号wrz-7)；

31、2-溴-n-(1h-吲唑-5-基)-2-(间甲苯基)乙酰胺(化合物代号wrz-8)；

32、2-溴-2-(3,4-二氯苯基)-n-(1h-吲唑-5-基)乙酰胺(化合物代号wrz-9)；

33、n-(喹啉-6-基)-2-(间甲苯基)乙酰胺(化合物代号wrz-15)；

34、2-溴-2(3-甲氧基苯基)-n-(喹啉-6-基)乙酰胺(化合物代号wrz-21)；

35、2-溴-2-(3-氟苯基)-n-(喹啉-6-基)乙酰胺(化合物代号wrz-22)；

36、2-溴-2-(3,4-二氯苯基)-n-(喹啉-6-基)乙酰胺(化合物代号wrz-24)；

37、n-羟基-4-(3-(异喹啉-5-基)脲基)苯甲酰胺(化合物代号wrz-28)。

38、经过进一步研究表明，本发明提供的上述化合物对rock2酶的抑制率均超过了80％，均具有更好的rock2酶抑制活性。

39、在一些实施方式中，选自如下：

40、n-(1h-吲唑-5-基)-2-(3-甲氧基苯基)乙酰胺(化合物代号wrz-1)；

41、2-(3-氟苯基)-n-(1h-吲唑-5-基)乙酰胺(化合物代号wrz-2)；

42、n-(1h-吲唑-5-基)-2-(间甲苯基)乙酰胺(化合物代号wrz-3)；

43、n-(1h-吲唑-5-基)-2-(3-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(化合物代号wrz-4)；

44、2-溴-n-(1h-吲唑-5-基)-2-(3-甲氧基苯基)乙酰胺(化合物代号wrz-6)；

45、2-溴-2-(3-氟苯基)-n-(1h-吲唑-5-基)乙酰胺(化合物代号wrz-7)；

46、2-溴-n-(1h-吲唑-5-基)-2-(间甲苯基)乙酰胺(化合物代号wrz-8)；

47、2-溴-2-(3,4-二氯苯基)-n-(1h-吲唑-5-基)乙酰胺(化合物代号wrz-9)；

48、n-(喹啉-6-基)-2-(间甲苯基)乙酰胺(化合物代号wrz-15)；

49、2-溴-2(3-甲氧基苯基)-n-(喹啉-6-基)乙酰胺(化合物代号wrz-21)；

50、2-溴-2-(3-氟苯基)-n-(喹啉-6-基)乙酰胺(化合物代号wrz-22)。

51、经过更进一步研究表明，本发明提供的上述化合物对rock2酶的抑制率均超过了90％，均具有优异的rock2酶抑制活性，与阳性药物fasudil相当。

52、在一些实施方式中，选自如下：

53、n-(1h-吲唑-5-基)-2-(3-甲氧基苯基)乙酰胺(化合物代号wrz-1)；

54、n-(1h-吲唑-5-基)-2-(3-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(化合物代号wrz-4)；

55、2-溴-n-(1h-吲唑-5-基)-2-(3-甲氧基苯基)乙酰胺(化合物代号wrz-6)；

56、2-溴-2-(3-氟苯基)-n-(1h-吲唑-5-基)乙酰胺(化合物代号wrz-7)。

57、与阳性对照药物fasudil相比，本发明提供的上述化合物对rock2酶的抑制率高于阳性药物fasudil对rock2酶的抑制率，显示出了更强的rock2酶抑制活性，其中，2-溴-n-(1h-吲唑-5-基)-2-(3-甲氧基苯基)乙酰胺(化合物代号wrz-6)的rock2的酶抑制活性最佳。

58、另一方面，一种化合物，为2-(3-甲氧基苯基)-n-(喹啉-6-基)乙酰胺(化合物代号wrz-13)。经过研究表明，虽然wrz-13对rock2酶的抑制率较差，但是具有良好的舒张血管收缩的作用。

59、式i所示化合物的合成路线如下：

60、

61、具体合成步骤如下：

62、将含有取代基r2的苯乙酸(1a-1h)通过酰化反应做成中间体酰氯(4a-4h)，然后将其与5-氨基吲唑在四氢呋喃溶液中反应，生成目标化合物wrz-1～wrz-5。含有取代基r2的苯乙酸(1a-1h)在nbs作用下发生自由基取代反应，将苄基上的一个氢原子取代为溴原子得到中间体(2a-2h)，再将苯乙酸通过草酰氯或者氯化亚砜反应生成酰氯(3a-3h),然后将其与5-氨基吲唑在四氢呋喃溶液中反应，生成目标化合物wrz-6～wrz-12。

63、式ii所示化合物的合成路线如下：

64、

65、具体合成步骤如下：

66、将含有取代基r2的苯乙酸(1a-1h)通过酰化反应做成中间体酰氯(4a-4h)，然后将其与6-氨基喹啉在二氯甲烷溶液中反应，生成目标化合物wrz-13～wrz-20。含有取代基r2的苯乙酸(1a-1h)在nbs作用下发生自由基取代反应，将苄基上的一个氢原子取代为溴原子得到中间体(2a-2h)，再将苯乙酸通过草酰氯或者氯化亚砜生成酰氯(3a-3h),然后将其与6-氨基喹啉在二氯甲烷溶液中反应，生成目标化合物。

67、式iii所示化合物的合成路线如下：

68、

69、具体合成步骤如下：

70、将含有取代基r1的苯胺(5a-5h)在三光气的作用下生成异氰酸酯(6a-6b)，然后与5-氨基异喹啉反应生成脲基中间体(7a-7b)。中间体7a在在盐酸羟胺和氢氧化钾的作用下生成异羟肟酸，得到目标化合物wrz-28；中间体7b在30％双氧水作用下生成甲酰胺得到目标化合物wrz-29。

71、由于在本发明提供的化合物中wrz-6的效果最好，因此第三方面提供wrz-6的制备方法，即一种化合物的制备方法，包含按照如下反应路线的步骤；

72、

73、具体地，2-甲氧基苯乙酸在nbs作用下发生自由基取代反应，将苄基上的一个氢原子取代为溴原子得到2-溴-2-(3-甲氧基苯基)乙酸，将2-溴-2-(3-甲氧基苯基)乙酸与草酰氯或者氯化亚砜进行酰氯化反应获得2-溴-2-(3-甲氧基苯基)乙酰氯，将2-溴-2-(3-甲氧基苯基)乙酰氯与5-氨基吲唑进行酰胺化反应，即得。

74、第四方面，一种药物组合物，包括上述化合物、所述化合物的药学上可接受的盐、所述化合物的溶剂化物、所述化合物的水合物或所述化合物的立体异构体。

75、本发明所述的药学上可接受的盐，旨在改善化合物理化性质所进行基团修饰后的衍生物，通常为所述化合物与无机盐如盐酸、硫酸、硝酸或氢溴酸等所形成的盐，以及与有机酸，例如甲磺酸、甲苯磺酸、柠檬酸或三氟乙酸等所形成的盐。

76、本发明所述的溶剂化物，是指与有机溶剂(乙醇、甲醇等)形成晶体物质。

77、第五方面，一种药物制剂，包括活性成分和药用载体，所述活性成分为上述化合物或上述药物组合物。

78、本发明所述的药用载体包括但不限于离子交换剂，氧化铝，硬脂酸铝，卵磷脂，血清蛋白，缓冲物质(如磷酸盐)，甘油，山梨酯，山梨酸钾，饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物，水，盐或电解质(如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐)，胶态氧化硅，三硅酸镁，聚乙烯吡咯烷酮，纤维素物质，聚乙二醇，羧甲基纤维素钠，聚丙烯酸酯，蜂蜡，羊毛酯等；所述药物载体在药物组合物中的含量可以是1重量％-98重量％，通常大约占到80重量％。

79、优选地，所述药物制剂可以通过以下方式施与：口服、喷雾吸入、直肠给药、鼻腔给药、阴道给药、局部给药、非肠道给药如皮下、静脉、肌内、腹膜内、鞘内、心室内、胸骨内或颅内注射或输入，或借助一种外植的储器用药，其中更为优选口服、肌注、腹膜内或静脉内用药方式。

80、优选地，所述药物制剂的剂型可以是液体剂型、固体剂型；其中，液体剂型可以是真溶液类、胶体类、微粒剂型、乳剂剂型、混悬剂型；所述固体剂型包括片剂、胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、乳剂、颗粒剂、栓剂、冻干粉针剂、包合物、填埋剂、贴剂、擦剂等。

81、第六方面，一种上述化合物、药物组合物或药物制剂在制备rock抑制剂的应用。

82、具体地，所述rock抑制剂可以用于制备rock抑制模型的模型药剂，可以用于预防、改善或治疗与rock高表达相关的疾病，还可以用于制备疾病模型，可以为细胞、组织或动物模型。

83、其中，所述模型药剂用于制备疾病模型，可以为细胞、组织或动物模型。所述rock高表达相关疾病表示以rock作为治疗靶点的疾病，或在疾病表征中出现了rock的异常高表达。

84、具体地，所述rock抑制剂为rock2抑制剂。

85、第七方面，一种上述化合物、药物组合物或药物制剂在制备血管舒张药物或降血压药物中的应用。

86、第八方面，一种舒张血管的方法，包括向有需要的个体施用第一方面所述化合物和/或第二方面所述药物组合物。

87、本发明的有益效果为：

88、经过实验表明，在10μm浓度下，本发明提供的wrz-1、wrz-2、wrz-3、wrz-4、wrz-5、wrz-6、wrz-7、wrz-8、wrz-9、wrz-14、wrz-15、wrz-21、wrz-22、wrz-24、wrz-28、wrz-29对rock2酶的抑制率均超过了50％，表明上述化合物具有良好的rock2抑制活性；其中，wrz-1、wrz-2、wrz-3、wrz-4、wrz-6、wrz-7、wrz-8、wrz-9、wrz-15、wrz-21、wrz-22对rock2的抑制率超过了90％，与阳性药物fasudil相当；wrz-1、wrz-4、wrz-6、wrz-7对rock2的抑制率超过了阳性药物fasudil对rock2的抑制率，表现出更强的rock2抑制活性。

89、通过体内血管舒张活性实验表明，本发明提供的wrz-1、wrz-13、wrz-6能够舒张由phe诱导或phe诱导的血管收缩。

90、通过内小鼠高血压模型活性检测表明，本发明提供的wrz-6具有良好的治疗高血压的作用。