缀合物基团、缀合物及其制备方法和应用与流程

本发明属于药物，尤其涉及缀合物基团、缀合物及其制备方法和应用。

背景技术：

1、rna干扰(rnai)是一种强大的基因沉默工具，它利用19-25个核苷酸小干扰rna(sirna)以高度序列特异性的方式降解特定的mrna。sirna被认为是基因治疗的主要参与者，并显示出广泛的潜力治疗多种基因促进疾病，包括病毒感染、心血管疾病和癌症。与小分子化药和抗体相比，是一类以直接靶向mrna为区别的新型药物，可以抑制致病蛋白的表达。

2、尽管sirna有巨大的治疗潜力，其临床应用仍然具有挑战性，主要是由于缺乏有效的传递系统。sirna已经进行了大约二十年的临床开发，从最初只有一种基于sirna药物(patisiran)已被美国食品药品监督管理局(fda)批准为孤儿药状态。

3、到现在，在临床前研究中，sirna递送策略已经摆脱了复杂的脂质或聚合物纳米粒子，其中包含化学功能的多组分定义明确的sirna生物缀合物，具有更均匀、稳定和生物相容的结构。自从sirna成为治疗各种疾病的一类新型基因疗法，sirna生物缀合物，作为主要的递送策略之一，提供了增强和拓宽药理学的潜力sirna的特性，同时最大限度地减少异质性和稳定性相关毒理学。

4、n-乙酰半乳糖胺的缀合物已成为主要的将寡核苷酸递送至肝细胞的临床策略。这种缀合物通过结合有效地内化去唾液酸糖蛋白受体(asgpr)识别并内化含有末端的糖蛋白半乳糖(gal)或n-乙酰半乳糖胺(galnac)部分。与一价和二价的糖簇相比，三价和四价galnac簇具有更高的asgpr的亲和力。

技术实现思路

1、本发明提供了一种缀合物基团、缀合物及其制备方法和应用，缀合基团的组合物当与表达抑制性寡聚核苷酸连接时，能够介导肝脏细胞(如肝细胞)中靶核酸序列的表达，这可用于治疗对细胞、组织或生物体基因表达或活性响应的疾病或病症。

2、本发明提出一种缀合基团，具有式(i)所示结构，

3、其中，

4、l1、l2、l3分别独立选自半乳糖、半乳糖胺、n-甲酰基半乳糖胺、n-乙酰基半乳糖胺、n-丙酰基半乳糖胺、n-正丁酰基半乳糖胺或n-异丁酰基半乳糖胺；

5、a1、a2、a3分别独立选自

6、k1独立选自

7、

8、或具有式(ii)所示结构，

9、

10、其中，l5、l6、l7、l8分别独立选自半乳糖、半乳糖胺、n-甲酰基半乳糖胺、n-乙酰基半乳糖胺、n-丙酰基半乳糖胺、n-正丁酰基半乳糖胺或n-异丁酰基半乳糖胺；

11、a5、a6、a7、a8分别独立选自

12、k2独立选自

13、

14、进一步地，l1、l2、l3分别独立选自n-乙酰半乳糖胺

15、进一步地，l5、l6、l7、l8分别独立选自n-乙酰半乳糖胺

16、进一步地，所述缀合基团具有式kak-1、kak-2、kak-3、kak-4、kak-5、kak-6、eee-1、eee-2或eee-3所示的结构，具体如下：

17、

18、

19、

20、本发明提出一种缀合物，所述缀合物包括上述任一所述的缀合基团和与缀合基团相连接的治疗性分子。

21、进一步地，所述治疗性分子选自功能性寡核苷酸、抗生素或抗体。

22、进一步地，所述功能性寡核苷酸为单链寡核苷酸或双链寡核苷酸。

23、进一步地，所述双链寡核苷酸包含正义链和反义链，缀合物的一端连接到双链寡核苷酸的其中一条链的3’-末端或5’-末端；其中，正义链：agaccugfuufufufgcuuuugsusb；反义链：ascfsaaaafgcaaaacafggfucusasg；

24、优选的，所述双链寡核苷酸为sirna，sirna中的每个核苷酸各自独立地为修饰和未修饰的核苷酸；

25、更优选的，sirna对应的靶点为pcsk9。

26、本发明还提出上述任一所述的缀合物在制备用于治疗和/或预防由肝细胞中特定基因的表达引起的病理状况或疾病的药物中的用途。

27、进一步地，所述特定基因为肝脏中表达的内源性基因，或肝脏中繁殖的病原体基因；

28、优选的，所述特定基因为apob、apoc、angptl3、pcsk9、scd1、timp-1、col1a1、fvii、stat3、p53、hbv或hcv。

29、本发明具有以下优势：

30、本发明提供了一种可与化合物(如治疗剂)连接的新型缀合基团，其可用于将化合物导向体内的靶标。本发明所公开的缀合基团可以将表达抑制性寡聚核苷酸(如rnai试剂)靶向肝脏细胞，以调节基因表达。

技术特征：

1.一种缀合基团，其特征在于，具有式(i)所示结构，

2.根据权利要求1所述的缀合基团，其特征在于，

3.根据权利要求1所述的缀合基团，其特征在于，

4.根据权利要求2或3所述的缀合基团，其特征在于，

5.一种缀合物，其特征在于，所述缀合物包括权利要求1～4任一项所述的缀合基团和与缀合基团相连接的治疗性分子。

6.根据权利要求5所述的缀合物，其特征在于，所述治疗性分子选自功能性寡核苷酸、抗生素或抗体。

7.根据权利要求6所述的缀合物，其特征在于，所述功能性寡核苷酸为单链寡核苷酸或双链寡核苷酸。

8.根据权利要求7所述的缀合物，其特征在于，所述双链寡核苷酸包含正义链和反义链，缀合物的一端连接到双链寡核苷酸的其中一条链的3’-末端或5’-末端；其中，正义链：agaccugfuufufufgcuuuugsusb；反义链：ascfsaaaafgcaaaacafggfucusasg；

9.权利要求5～8任一项所述的缀合物在制备用于治疗和/或预防由肝细胞中特定基因的表达引起的病理状况或疾病的药物中的用途。

10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于，所述特定基因为肝脏中表达的内源性基因，或肝脏中繁殖的病原体基因；

技术总结
本发明提出的缀合物基团、缀合物及其制备方法和应用，属于药物技术领域。所述缀合物基团具有式(I)所示结构，或具有式(II)所示结构，所述缀合物包括缀合基团和与缀合基团相连接的治疗性分子，所述缀合物当与表达抑制性寡聚核苷酸连接时，能够介导肝脏细胞(如肝细胞)中靶核酸序列的表达，这可用于治疗对细胞、组织或生物体基因表达或活性响应的疾病或病症。

技术研发人员：谭青乔,刘新星,周睿,左洪剑
受保护的技术使用者：上海鼎新基因科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15