靶向识别白喉毒素的中和单克隆抗体8H6及其应用的制作方法

本发明涉及医疗，具体涉及一种靶向识别白喉毒素的中和单克隆抗体8h6及其应用。

背景技术：

1、白喉(diphtheria)是由一类能分泌白喉毒素(diphtheria toxin，dtx)的白喉棒状杆菌属病原体引起的传染性疾病。dtx是导致疾病发生的主要毒素蛋白。可经物理或化学方式使毒性消失的白喉类毒素(diphtheria toxoid，dtd)是有效预防和控制白喉的生物制品。

2、目前，针对白喉类毒素的质量评价方法中，采用絮状单位测定评价方法的误差较大，采用免疫动物测定血清抗体滴度进行判定的方法需要花费大量人力物力和时间成本。

技术实现思路

1、基于此，有必要提供一种靶向识别白喉毒素的中和单克隆抗体8h6及其应用，可以利用elisa方法针对白喉类毒素进行质量评价，灵敏度高，高效。

2、本发明采用如下技术方案：

3、本发明提供一种靶向识别白喉毒素的中和单克隆抗体8h6，其重链互补决定区1-3的序列分别如seq id no.1、seq id no.2、seq id no.3所示，轻链互补决定区1-3的序列分别如seq id no.4、seq id no.5、seq id no.6所示。

4、在其中一些实施例中，所述单克隆抗体8h6的重链可变区序列如seq id no.7所示。

5、在其中一些实施例中，所述单克隆抗体8h6的轻链可变区序列如seq id no.8所示。

6、在其中一些实施例中，所述单克隆抗体8h6为鼠igg型抗体。

7、在其中一些实施例中，所述单克隆抗体8h6采用白喉类毒素免疫小鼠制备杂交瘤细胞经腹水纯化制备获得。

8、本发明还可以提供一种编码上述所述靶向识别白喉毒素的中和单克隆抗体8h6的核酸片段，以及包含所述核酸片段的表达载体和宿主。

9、本发明还提供上述所述靶向识别白喉毒素的中和单克隆抗体8h6在制备检测白喉毒素、白喉类毒素的试剂中的应用。

10、本发明还提供上述所述靶向识别白喉毒素的中和单克隆抗体8h6在制备预防或治疗因白喉棒状杆菌感染、白喉毒素导致的疾病的药物中的应用。

11、本发明还可以提供一种酶联免疫检测试剂盒，包含上述单克隆抗体8h6。

12、在其中一些实施例中，所述酶联免疫检测试剂盒还包含单克隆抗体9c12标记抗体，单克隆抗体9c12的重链可变区序列如seq id no.11所示，轻链可变区序列如seq idno.11所示。优选地，单克隆抗体9c12标记抗体采用辣根过氧化物酶或生物素标记单克隆抗体9c12制备而成。

13、在其中一些实施例中，所述酶联免疫检测试剂盒还包括显色试剂等。

14、与现有技术相比，本发明的核心优势在于：

15、本发明经过大量试验筛选获得单克隆抗体8h6，可靶向识别白喉毒素的催化结构域。利用单克隆抗体8h6的酶联免疫吸附实验(elisa)方法，具有针对白喉类毒素检测的高灵敏、快速、耐受性强等优点，能够用于白喉类毒素生产过程中的质量控制。

技术特征：

1.一种靶向识别白喉毒素的中和单克隆抗体8h6，其特征在于，所述单克隆抗体8h6的重链互补决定区1-3的序列分别如seq id no.1、seq id no.2、seq id no.3所示，轻链互补决定区1-3的序列分别如seq id no.4、seq id no.5、seq id no.6所示。

2.根据权利要求1所述靶向识别白喉毒素的中和单克隆抗体8h6，其特征在于，所述单克隆抗体8h6的重链可变区序列如seq id no.7所示；和/或

3.根据权利要求1或2所述的单克隆抗体8h6，其特征在于，所述单克隆抗体8h6为鼠igg型抗体。

4.根据权利要求1或2所述的单克隆抗体8h6，其特征在于，采用白喉类毒素免疫小鼠制备杂交瘤细胞经腹水纯化制备获得。

5.一种编码权利要求1至4任一项所述靶向识别白喉毒素的中和单克隆抗体8h6的核酸片段。

6.一种包含权利要求5所述核酸片段的表达载体。

7.权利要求1至4任一项所述靶向识别白喉毒素的中和单克隆抗体8h6在制备检测白喉毒素、白喉类毒素的试剂中的应用。

8.权利要求1至4任一项所述靶向识别白喉毒素的中和单克隆抗体8h6在制备预防或治疗因白喉棒状杆菌感染、白喉毒素导致的疾病的药物中的应用。

9.一种酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，包含权利要求1至4任一项所述的单克隆抗体8h6。

10.根据权利要求9所述的酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，还包含单克隆抗体9c12标记抗体，单克隆抗体9c12的重链可变区序列如seq id no.11所示，轻链可变区序列如seqid no.12所示。

技术总结
本发明提供一种靶向识别白喉毒素的中和单克隆抗体8H6及其应用。本发明单克隆抗体8H6的重链互补决定区1‑3和轻链互补决定区1‑3的序列可靶向识别白喉毒素的催化结构域。利用含单克隆抗体8H6和9C12抗体的酶联免疫(ELISA)试剂盒，针对白喉类毒素检测的灵敏度高，特异性好。

技术研发人员：杨晓明,蔡梦瑶,朱德武,陈雯,付烈,刘宏博,马林,王慧,唐荣兴,杨海艳
受保护的技术使用者：武汉生物制品研究所有限责任公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16