一种基于QCM生物传感器的检测单基因突变的方法

本发明涉及对qcm生物传感器信号的处理与分析，尤其涉及一种基于qcm生物传感器的检测单基因突变的方法。

背景技术：

1、单基因突变引起的人类疾病非常多，比如：1.遗传性视网膜色素变性(由于视网膜色素上一系列基因突变引起)，2.卡特综合症(由于gla基因突变引起，导致心脏、神经和肾脏等多器官的功能异常)，3.艾尔斯-冯山克综合征(由于fbn1基因突变引起，导致结缔组织的问题，关节、眼睛、心脏和血管等多个系统受累)，4.肌萎缩侧索硬化症(由于sod1、c9orf72等基因突变引起，导致神经元退行性损害，引起运动神经元的死亡，进而导致肌肉无力和肢体肌肉萎缩)，5.多发性软骨发育不全(由于col1a1和col1a2等基因突变引起，导致骨胶原合成异常，进而影响骨骼、牙齿和皮肤等结缔组织的发育)。6.阿尔茨海默病(由于app、psen1、psen2等基因突变引起，导致神经元退行性变化，影响记忆和认知功能),7.先天性肌无力症(由于ache、chrne等基因突变引起，导致神经肌肉连接异常，影响肌肉的收缩和运动功能),8.重症联合免疫缺陷综合征(scid)(主要由于rag1、rag2、il2rg等基因突变引起，导致免疫系统功能异常)等。因此，进行基因突变可能性检测以避免这些疾病的产生对人们的健康具有十分重要的意义。目前，dna传统的检测技术如southern印迹杂交、pt-pcr、微阵列芯片等存在灵敏度低，操作繁琐，样本需求量大，成本高等不足，限制了其在临床中的实际应用，并且传统的核酸检测技术很难检测到单碱基突变的核酸。因此，开发一种高灵敏度、高选择性和低成本的单基因突变检测技术在临床诊断和遗传分析中具有重要意义，而目前检测单基因突变的qcm生物传感器方法尚未出现因此，亟需研发出一种基于qcm生物传感器的检测单基因突变的方法来解决上述问题。

技术实现思路

1、本发明的目的就在于为了解决上述问题设计了一种基于qcm生物传感器的检测单基因突变的方法。

2、本发明通过以下技术方案来实现上述目的：

3、一种基于qcm生物传感器的检测单基因突变的方法，包括以下步骤；

4、第一步，在修饰了半胱氨酸的qcm电极上固定捕获探针；

5、第二步，对qcm电极上其它没有结合捕获探针的位点加入peg封闭剂进行封闭；

6、第三步，在qcm电极表面孵育目的序列；

7、第四步，孵育检测探针；

8、第五步，加入t4dna连接酶孵育；

9、第六步，将qcm检测池移入75℃的烘箱中解开双链dna为单链dna；

10、第七步，将qcm检测池接入检测系统，并且向检测池中加入一定浓度agno3的氢氧化氨溶液和对苯二酚的氨水溶液，结合在dna的ag+被还原成银纳米团簇形成dna-agncs，检测系统计录dna上富集agcns过程中的频率变化；

11、第八步，重复上述第四步到第七步，完成对不同浓度的单基因突变的目的序列检测。

12、本发明的有益效果在于：

13、本发明的基于qcm生物传感器的检测单基因突变的方法，操作步骤简单，设计过程灵巧，使得该方法具备高灵敏度、高选择性和低成本的特征，在临床诊断和遗传分析中具有重要意义。

技术特征：

1.一种基于qcm生物传感器的检测单基因突变的方法，其特征在于，包括以下步骤；

技术总结
本发明公开了一种基于QCM生物传感器的检测单基因突变的方法，包括在修饰了半胱氨酸的QCM电极上固定捕获探针；对QCM电极上其它没有结合捕获探针的位点加入PEG封闭剂进行封闭；在QCM电极表面孵育目的序列；孵育检测探针；加入T4DNA连接酶孵育；将QCM检测池移入75℃的烘箱中解开双链DNA为单链DNA；将QCM检测池接入检测系统，并且向检测池中加入一定浓度AgNO3的氢氧化氨溶液和对苯二酚的氨水溶液，结合在DNA的Ag+被还原成银纳米团簇形成DNA‑AgNCs，检测系统计录DNA上富集AgCNs过程中的频率变化。本发明操作步骤简单，设计过程灵巧，使得该方法具备高灵敏度、高选择性和低成本的特征，在临床诊断和遗传分析中具有重要意义。

技术研发人员：郭佳,曾红娟,方瑞琴
受保护的技术使用者：电子科技大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16