短肽MFRLP及其在制备动脉重塑相关疾病药物中的应用

本发明属于生物医药，特别是涉及一种短肽mfrlp及其在制备动脉重塑相关疾病药物中的应用。

背景技术：

1、心血管疾病高居全球非感染性致死疾病的首位，而其中92％的致死性心血管疾病与动脉重塑相关。动脉重塑是指动脉血管应对各种因素的刺激，通过改变自身的结构和功能来适应局部环境，表现为管壁增厚、管壁管腔比值增加，血管弹性降低及血管硬化等。动脉重塑是心脑血管疾病的病理基础之一，并且是心血管病死亡率的独立危险因素，如冠状动脉发生动脉重塑导致冠心病、支架再狭窄；脑血管发生动脉重塑导致缺血性卒中；主动脉发生动脉重塑导致动脉瘤、夹层；阻力血管出现动脉重塑则参与高血压的发生发展。

2、动脉血管作为高血压的直接靶器官，在压力、炎症等刺激作用下发生结构和功能的改变，最终出现病理性动脉重塑。目前临床上主要通过降压、降脂等来控制动脉重塑，acei类、arb类及β受体阻滞剂类药物虽然能够起到一定的抑制作用，但是，临床血压、血脂控制达标率低，顽固性高血压患者即使使用三种或三种以上降压药物也无法达到正常血压，重塑的动脉也无法得到有效缓解，缺乏针对动脉重塑治疗的有效手段，因此明确动脉重塑的发病机制，寻找有效的治疗靶点和药物具有迫切的临床需求。

技术实现思路

1、基于此，为解决现有技术中存在的至少一种技术问题，本发明提出一种短肽mfrlp及其在制备动脉重塑相关疾病药物中的应用。

2、为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

3、本发明的第一方面，提供一种短肽mfrlp，所述短肽mfrlp为下述任一种：

4、a1)氨基酸序列是seq id no.1或seq id no.2的短肽；

5、a2)将seq id no.1或seq id no.2的氨基酸序列经过一个以上氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与a1)所示的多肽具有80％以上的同一性且具有与抑制线粒体自噬制vsmc表型转换和/或调节线粒体氧化磷酸化能力的短肽；

6、a3)在a1)或a2)的n端和/或c端连接蛋白标签得到的融合短肽；

7、a4)在a1)或a2)的n端和/或c端和/或氨基酸侧链基团上进行修饰得到的短肽衍生物。

8、上述短肽中，序列1(seq id no.1)和序列2(seq id no.2)均由64个氨基酸残基组成。

9、seq id no：1氨基酸序列为：

10、n端

11、-maypfqlglqdatspiieelinfhdhtliivflisslvlyiislilttklthtstidaqeveti-c端，所述序列为鼠源短肽mfrlp。

12、seq id no：2氨基酸序列为：

13、n端

14、-mahaaqvglqdatspiieelitfhdhaliiiflicflvlyalfltlttkltntnisdaqeietv-c端，所述序列为人源短肽mfrlp。

15、上述短肽中，所述蛋白标签(protein-tag)是指利用dna体外重组技术，与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和/或纯化。所述蛋白标签可为flag标签、his标签、mbp标签、ha标签、myc标签、gst标签和/或sumo标签等。

16、上述蛋白质中，同一性是指氨基酸序列的同一性。可使用国际互联网上的同源性检索站点测定氨基酸序列的同一性，如ncbi主页网站的blast网页。例如，可在高级blast2.1中，通过使用blastp作为程序，将expect值设置为10，将所有filter设置为off，使用blosum62作为matrix，将gap existence cost，per residue gap cost和lambda ratio分别设置为11，1和0.85(缺省值)并进行检索一对氨基酸序列的同一性进行计算，然后即可获得同一性的值(％)。

17、上述短肽中，所述80％以上的同一性可为至少81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、95％、96％、98％、99％或100％的同一性。

18、上述短肽mfrlp可以是人工合成的短肽，也可以是利用基因工程手段在体外表达获得的短肽。

19、本发明所述短肽的一个或多个氨基酸可以用构象为d-型的氨基酸、人工修饰的氨基酸、自然界存在的稀有氨基酸等进行替换，以提高多肽的生物利用度、稳定性。其中d-型氨基酸是指与组成蛋白质的l型氨基酸相对应的氨基酸；人工修饰的氨基酸指经过甲基化、磷酸化等修饰的组成蛋白质的常见l型氨基酸；自然界存在的稀有氨基酸包括组成蛋白质的不常见氨基酸和不组成蛋白质的氨基酸，例如5-羟基赖氨酸、甲基组氨酸、γ氨基丁酸、高丝氨酸等。

20、a4)所述修饰可为氨基化、酰胺化、羟基化、羧基化、羰基化、烷基化、乙酰化、磷酸化、酯化、糖基化、环化、生物素化、荧光基团修饰、聚乙二醇peg修饰或固定化修饰。

21、上述短肽衍生物为下述任一项：

22、c1)上述的多肽的氨基端连接氨基端保护基和/或上述的多肽的羧基端连接羧基端保护基得到的连接物；

23、c2)上述的多肽的羧基端连接寡肽或亲脂性基团或胆固醇得到的连接物；

24、c3)上述的多肽的氨基端连接寡肽或亲脂性基团或胆固醇得到的连接物；

25、c4)上述的多肽的氨基端和羧基端均连接寡肽或亲脂性基团或胆固醇得到的连接物。

26、本发明的第二方面，提供一种lncrna mfrl核酸分子，其编码上述的短肽mfrlp。

27、本发明的第三方面，提供一种载体，包括上述的lncrna mfrl核酸分子。所述载体是本领域技术人员公知的，包括但不限于：质粒、噬菌体或病毒载体等。

28、本发明的第四方面，提供一种细胞，包含所述的载体、或其基因组中整合有上述的lncrna mfrl核酸分子或表达如上述的短肽。

29、本发明的第五方面，提供一种药物组合物，包括上述的短肽mfrlp，以及药学上可接受的载体或赋形剂。所述药学上可接受的载体可为稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、吸附载体、表面活性剂或润滑剂但不限于此。

30、本发明的第六方面是提供上述的短肽mfrlp、核酸分子、载体、细胞、药物组合物在制备动脉重塑相关疾病药物中的应用。

31、本发明的第七方面是提供上述的短肽mfrlp、核酸分子、载体、细胞、药物组合物在制备促进线粒体氧化磷酸化能力的药物中的应用。

32、进一步地，所述药物通过口服、皮下、静脉、鼻内、经皮给药。

33、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

34、本发明的短肽mfrlp定位于线粒体，与线粒体细胞色素b(mt-cytb)结合。过表达短肽mfrlp增强血管平滑肌细胞(vsmc)中电子传递链复合体iii(cox iii)酶活性，减少活性氧(ros)蓄积，抑制线粒体自噬制vsmc表型转换。因此，可通过利用短肽mfrlp抑制vsmc表型由收缩表型向合成表型转换，从而制备与动脉重塑相关疾病治疗的药物；同时，短肽mfrlp可能通过调节线粒体氧化磷酸化能力来影响vsmc表型转换，从而可用于制备促进线粒体氧化磷酸化能力的药物。