本申请涉及免疫检测,具体涉及分泌抗人副流感病毒(hpiv)2型n蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株、单克隆抗体、及应用、及试剂盒。
背景技术:
1、人副流感病毒(hpiv)发现于1950年,是副病毒科的单链、包膜rna病毒,病毒粒子具有多形性,直径在150nm到200nm之间。人副流感病毒rna以保守的顺序编码六种必需蛋白质:核衣壳蛋白(n)、磷酸蛋白(p)、基质蛋白(m)、融合糖蛋白(f)、血凝素神经氨酸酶糖蛋白(hn)和rna聚合酶(l)。副流感病毒有4种血清型,分别为副流感1、2、3、4型,n蛋白是副流感病毒保守蛋白,也是4种血清型的特意蛋白。副流感病毒主要引起儿童和成人的呼吸系统疾病,尤其可造成儿童多种严重的呼吸系统疾病,目前尚无有效的预防或治疗方法。季节性hpiv流行导致儿童呼吸道疾病占儿童下呼吸道疾病住院病例40%以上,hpiv感染占成人呼吸系统疾病的15%以上。副流感病毒与一系列疾病有关,包括常见的中耳炎、咽炎、结膜炎、咽炎、气管支气管炎和肺炎,hpiv还会造成老年人和免疫功能低下成年人的严重疾病和致命肺炎。
2、人副流感病毒的诊断主要包括:病毒核酸检测、病毒抗原检测、病毒培养分离以及血清学检测等方式。其中,病毒抗原检测主要是采用酶免疫法、胶体金法和免疫荧光法等方法检测呼吸道标本中hpiv抗原,是目前发展快速、实时性较强的诊断方法。但目前的病毒抗原检测缺乏高灵敏性和高特异性的抗体,而且抗体的原料价格较高,提高了检测成本。
技术实现思路
1、鉴于此,为了解决以上缺陷中的至少之一,本申请实施例提供了一种分泌抗人副流感病毒(hpiv)2型n蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株、单克隆抗体、及应用、及试剂盒。
2、第一方面,本申请实施例提供了一种分泌抗人副流感病毒(hpiv)2型n蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,所述杂交瘤细胞株为杂交瘤细胞株piv2-1g1和/或杂交瘤细胞株piv2-3e2,所述杂交瘤细胞株piv2-1g1的保藏编号为cctcc no:c2023200,所述杂交瘤细胞株piv2-3e2的保藏编号为cctcc no:c2023201。
3、第二方面,本申请实施例提供了一种如上第一方面所述的杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体,所述单克隆抗体包括:由如上所述的杂交瘤细胞株piv2-1g1分泌的单克隆抗体;和/或,由如上所述的杂交瘤细胞株piv2-3e2分泌的单克隆抗体。
4、在一些可能的实施例中,所述单克隆抗体可结合标记物,所述标记物包括荧光材料、生物素、放射性同位素、金属和酶中的至少一种。
5、在一些可能的实施例中,本申请实施例还提供了如上第一方面所述的杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体或如上第二方面所述的单克隆抗体在制备产品中的应用,所述产品可以用于实现检测副流感病毒2型的n蛋白、检测副流感病毒、检测待测样本中是否含有副流感病毒这几种功能中的至少一种。例如,该产品可以用于检测或诊断人副流感病毒感染。
6、在一些可能的实施例中,所述产品为试剂或试剂盒。
7、第三方面,本申请实施例提供了一种试剂盒,所述试剂盒包含如上第一方面所述的杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体或如上第二方面所述的单克隆抗体。
8、在一些可能的实施例中,所述试剂盒可以用于实现检测副流感病毒的n蛋白、检测副流感病毒、以及检测待测样本中是否含有副流感病毒这几种功能中的至少一种。
9、在一些可能的实施例中,所述试剂盒包括试剂条,所述单克隆抗体位于所述试剂条上。
10、在一些可能的实施例中,所述试剂条包括样品垫和检测垫,所述样品垫上包被标记的检测抗体,所述检测垫的检测线(t线)上包被捕获抗体,所述检测垫的质控线(c线)上包被抗鼠igg抗体,所述检测抗体为如上所述的杂交瘤细胞株piv2-3e2分泌的单克隆抗体;和/或,所述捕获抗体为如上所述的杂交瘤细胞株piv2-1g1分泌的单克隆抗体。
11、在一些可能的实施例中,所述试剂条为胶体金试纸条或荧光试纸条,
12、在所述胶体金试纸条上,所述检测抗体上标记胶体金;在所述荧光试纸条上,所述检测抗体上标记荧光材料。
13、进一步,所述胶体金试纸条按照连接顺序依次包括胶体金垫,检测垫,吸水垫及位于下方的作为组装平台使用的底板,所述胶体金垫与检测垫之间有搭接,所述检测垫与吸水垫之间有搭接,所述胶体金垫是由吸附有胶体金标记的piv2-3e2抗体的玻璃纤维纸组成,所述检测垫上具有羊抗鼠igg抗体包被的质控线(即c线),以及piv2-1g1抗体包被的检测线(即t线)。
14、进一步,所述荧光试纸条按照连接顺序依次包括荧光垫,检测垫,吸水垫及位于下方的作为组装平台使用的底板,所述荧光垫与检测垫之间有搭接,所述检测垫与吸水垫之间有搭接,所述荧光垫是由吸附有荧光微球标记的piv2-3e2抗体的玻璃纤维纸组成,所述检测垫上具有羊抗鼠igg抗体包被的质控线(即c线),以及piv2-1g1抗体包被的检测线(即t线)。
15、本申请实施例基于单克隆抗体技术获得了抗hpiv 2型的n蛋白的高特异性及高灵敏性的单克隆抗体,该单克隆抗体具有纯度高、效价高、制备成本低廉的特点,可用于生产各种基于抗原-抗体反应的原理的高灵敏度检测hpiv的检测试剂盒,采用这两种不同的免疫层析试剂盒进行生物样品中的hpiv的检测/诊断。两种试剂盒均可实现hpiv感染的快速检测及辅助诊断等,具有更高的灵敏性与特异性,同时兼顾了操作简单、快速、稳定以及制造成本低等优势,适用于临床标本的检查,而且由于可以进行大批量的快速检查,也适合于流行病学调查,实现hpiv的快速监测和预防。因此,本申请所述的抗hpiv 2型的n蛋白的抗体、及相应的检测试剂盒均具有广泛的应用前景和实用价值。
1.分泌抗人副流感病毒(hpiv)2型n蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其特征在于,所述杂交瘤细胞株为杂交瘤细胞株piv2-1g1和/或杂交瘤细胞株piv2-3e2,所述杂交瘤细胞株piv2-1g1的保藏编号为cctcc no:c2023200,所述杂交瘤细胞株piv2-3e2的保藏编号为cctcc no:c2023201。
2.由如权利要求1所述的杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体包括:
3.如权利要求2所述的单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体可结合标记物,所述标记物包括荧光材料、生物素、放射性同位素、金属纳米材料和酶中的至少一种。
4.由如权利要求1所述的杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体或如权利要求2所述的单克隆抗体在制备产品中的应用,其特征在于,所述产品用于检测副流感病毒2型的n蛋白、检测副流感病毒、以及检测待测样本中是否含有副流感病毒中的至少一种。
5.如权利要求4所述的应用,其特征在于,所述产品为试剂或试剂盒。
6.一种试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含如权利要求1所述的杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体或如权利要求2所述的单克隆抗体。
7.如权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒用于检测副流感病毒2型的n蛋白、检测副流感病毒、以及检测待测样本中是否含有副流感病毒中的至少一种。
8.如权利要求6或7所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括试剂条,所述单克隆抗体位于所述试剂条上。
9.如权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂条包括样品垫和检测垫,所述样品垫上包被标记的检测抗体,所述检测垫的检测线上包被捕获抗体,所述检测垫的质控线上包被羊抗鼠igg抗体,
10.如权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂条为胶体金试纸条或荧光试纸条,