本发明属于真菌提取物,具体涉及一种羊肚菌的制备方法。
背景技术:
1、羊肚菌(morchella deliciosa fr.)是一种野生名贵食药用真菌,中医认为其性平,味甘寒,无毒,具有益肠胃、消化助食、化痰理气、补肾、壮阳、补脑、提神之功能。现代研究发现,羊肚菌具有很高的营养和药用价值,特别是羊肚菌多糖具有降血脂、调节免疫功能、抗疲劳、抗辐射、抗肿瘤等作用,并能减轻癌症患者放化疗引起的毒副作用。
技术实现思路
1、针对上述技术问题,本发明提供了一种羊肚菌多糖的制备方法,以解决现有方法提取效率低、费时、程序繁琐、易降低多糖生物活性的问题。
2、为了实现上述目的,本发明采用如下技术方案予以实现:
3、本发明首先提供了一种羊肚菌多糖的制备方法,包括以下步骤:
4、(1)将羊肚菌粉碎,水提,料液比为1:20-1:40,过滤,得浸提液,浓缩至液体总体积的25%;
5、(2)将浓缩后的羊肚菌浸提液与复合菌剂混合发酵;其中,复合菌剂包括酵母菌和能够分泌几丁质酶的枯草芽孢杆菌;
6、(3) 将(2)中得到的发酵液与复合酶制混合,获得酶解液;其中,复合酶制剂包括几丁质酶与酸性蛋白酶;
7、(4) 将酶解液离心,在上清液中加入氯仿-正丁醇混合液,充分震荡15min除蛋白,静置3-6h后收集水溶液部分,透析后离心、洗脱,透析后的溶液于-80℃冻实后进行真空冷冻干燥,得到羊肚菌多糖粉末;
8、(5)然后将羊肚菌多糖粉末溶解于反渗透水中,终浓度为10mg/ml,采用分子筛柱梯度洗脱,收集最大洗脱峰的洗脱液,经过-80℃冻实后冷冻干燥,得到最终的羊肚菌多糖样品。
9、进一步的,其特征在于,骤(1)满足以下至少一项:
10、a.将羊肚菌粉碎成超微粉;
11、b.水提所用的水为反渗透水;
12、c.水提的次数≥2;
13、d.水提时的温度为90-100℃。
14、进一步的,步骤(2)中,所述复合菌剂的添加质量为羊肚菌质量的1%~5%。
15、进一步的,所述的步骤2中酶解过程温度为38~42℃,ph值为3.2~4.3,作用时间为9~15小时。
16、进一步的,(4)中上清液与氯仿-正丁醇混合液的体积比为4:1,其中氯仿与正丁醇的体积比为5:1。
17、本发明还提供了上述制备方法制备的羊肚菌多糖;进一步的,所述羊肚菌多糖的重均分子量为28.7 - 47.738kda。
18、与现有技术相比,本发明的有益效果为:本发明的提取工艺简单,工艺条件温和,所得的羊肚菌多糖含量高、生物活性强,本发明的羊肚菌多糖对慢性肝损伤有明显的治疗作用,同时还可以调节肠道菌群;为羊肚菌多糖的进一步开发作出了显著的贡献。
1.一种羊肚菌的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种羊肚菌的制备方法,其特征在于,步骤(1)满足以下至少一项:
3.根据权利要求1所述的一种羊肚菌的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,所述复合菌剂的添加质量为羊肚菌质量的1%~5%。
4.根据权利要求1所述的一种羊肚菌的制备方法,其特征在于:所述的步骤2中酶解过程温度为38~42℃,ph值为3.2~4.3,作用时间为9~15小时。
5.根据权利要求1所述的一种羊肚菌的制备方法,其特征在于:(4)中上清液与氯仿-正丁醇混合液的体积比为4:1,其中氯仿与正丁醇的体积比为5:1。
6.权利要求1-5任一项所述制备方法制备的羊肚菌。
7.根据权利要求6所述的羊肚菌,其特征在于:所述羊肚菌多糖的重均分子量为28.7 -47.738kda。