TOLL样受体8（TLR8）特异性拮抗剂及其制备方法和用途

本发明总体上涉及人类toll样受体(tlr)抑制剂，和用于具有自身免疫性疾病或炎性疾病的个体的方法。

背景技术：

1、先天性免疫反应是抵抗病原微生物的第一道防线，并且也与自身免疫介导的炎性疾病有关。此反应主要由toll样受体(tlr)触发，该受体被外源分子激活，或者在免疫介导的炎性疾病中，被受损宿主细胞释放的分子激活。

2、toll样受体(tlr)是i型跨膜蛋白，可识别细菌，病毒和真菌中各种与病原体相关的分子模式。由于细胞表达的不同和下游信号转导途径的激活，人类tlr可能引起重叠但截然不同的生物学反应。细胞内tlr(包括tlr3，tlr7，tlr8和tlr9)能够检测不同类别的细菌，病毒和内源核酸。tlr3能识别dsrna，tlr7和8由ssrna和咪唑并喹啉衍生物激活，而tlr9被未甲基化的ssdna激活。

3、在人类中，tlr7和tlr8在系统发育上和结构上相关，但是已鉴定出这两种tlr在人类血细胞中的表达模式差异，该两种tlr对ssrna配体中的特定碱基的优先选择，以及配体结合前的二级结构。在灭活状态下，tlr8作为一对预先形成的二聚体存在，该二聚体在配体结合后会改变构象。内体中的自身和外源ssrna均通过募集myd88来启动tlr8介导的信号转导，进而激活下游转录因子nf-kappa-b，从而诱导促炎性细胞因子(如tnf-alpha，il-lbeta和il-6)的产生。尽管tlr8在抗病毒反应中起着重要的作用，但是tlr8的长时间激活会导致有害的自身免疫性疾病的发展。

4、内源性配体对人类tlr8的激活导致的炎性疾病不同于由tlr7激活导致的炎性疾病。基于基因多态性研究，tlr8与人类炎性疾病有关，其包括ra，抗磷脂综合征和ibd。另外，tlr8信号传导在人类tlr8转基因小鼠和人类患者中均促进ra。

5、因此，期望将具有人类tlr8的抑制性基序的小分子用于人类受试者中。

技术实现思路

1、为了鉴定特定的tlr8信号转导抑制剂以用作化学探针，并用于潜在的治疗应用，本发明人开发了基于细胞的高通量筛选。他们使用此筛选鉴定了一系列有效的tlr8抑制剂。最有效的抑制tlr8信号的途径是通过独特的机制：稳定tlr8蛋白预先形成的二聚体。这些抑制剂在几种类型的细胞(hek-blue，thp-1和pbmc)中有效抑制tlr8介导的功能，并且在这些细胞内不显示任何毒性作用。这些抑制剂的鉴定有助于研究tlr8在自身免疫性疾病中发挥的生理作用。另外，这些抑制剂提供了几种自身免疫和炎性疾病的治疗。

2、因此，本文提供了人类toll样受体(tlr)抑制剂和用于患有自身免疫疾病或炎性疾病的个体的方法。本公开的tlr抑制剂是特异性抑制tlr8的分子。本公开还提供了这些化合物在抑制个体中tlr8依赖性免疫反应的用途。此外，本公开提供化合物，以及所述化合物在抑制个体中tlr8依赖性免疫反应的用途，其中，本公开的化合物的化合物公式为：

3、

4、或其药学上可接受的盐，其中：

5、rl为c1-6烷基，c3-8环烷基，c2-4烯基，c2-4炔基，c1-4烷氧基，或

6、c1-6烷基任选地被羟基，巯基，卤化物，c1-6烷基，c1-6烯基，c1-4烷氧基，or5，sr5，nr3r4，co2r5,oc(＝o)r5，杂芳基或其组合取代，或

7、芳基或杂芳基，其任选地被羟基，巯基，硝基，卤化物，c1-6烷基，c1-6烯基，c1-4烷氧基，or5，sr5，nr3r4，co2r5，或其组合取代；

8、r2为nr3r4或or5；

9、r3，r4和r5独立地为h，c1-6烷基,c3-8环烷基，c2-4烯基，芳基，杂芳基，或

10、c1-6烷基，其被羟基，巯基，氨基，磺酸，羧酸，卤化物，c1-6烷基，c1-6烯基，c1-4烷氧基，杂芳基，或其组合取代，或r3和r4一起形成任选地被羟基或卤化物取代的杂环。

11、在本公开的示例性方面，这些化合物包括这种结构的化合物，其中:

12、rl是3-cf3-c6h4-；3-me-c6h4-；3-cf3-c6h4-；3-me-c6h4-；3-cf3-c6h4-；3-me-c6h4-；2-cf3-c6h4-；4-cf3-c6h4-；苯基-；3-no2-c6h4-；3-f-c6h4-；3-cl-c6h4-；3,5-dicf3-c6h3-；2-ome-c6h4-；3-ome-c6h4-；3-吡啶基；3-et-c6h4-；3-cf3-c6h4-；3-cf3-c6h4-；和，

13、r2是-nh2，-nhme，-net2，-oet，或-oh。

14、在一个实施方案中，化合物包括这种结构的化合物，其中r1是3-me-c6h4-而r2是-nh2。

15、在相关方面，本公开提供了包含以下化学式的tlr8抑制剂：

16、

17、或其药学上可接受的盐，其中：

18、每个x独立地为氮或碳；

19、r1，r3，r4和r5独立地为h，卤化物，c1-6烷基，c3-8环烷基，c2-4烯基，c2-4炔基，c1-4烷氧基，or6；或

20、c1-6烷基，其任选地被羟基，巯基，卤化物，c1-6烷基，c1-6烯基，c1-4烷氧基，or6，sr6，nr7r8，co2r6，oc(＝o)r6，杂芳基，或其组合取代；或

21、芳基或杂芳基，其任选地被羟基，巯基，卤化物，c1-6烷基，c1-6烯基，c1-4烷氧基，硝基，or6，sr6，nr7r8，co2r6，或其组合取代；

22、r2为h，nr7r8，或or6；和，

23、r6,r7,和r8独立地为h，c1-6烷基，c3-8环烷基，c2-4烯基，芳基，杂芳基，苄基；或

24、c1-6烷基，其被羟基，巯基，氨基，磺酸，羧酸，卤化物，c1-6烷基，c1-6烯基，c1-4烷氧基，杂芳基，或其组合取代；或

25、r7和r8一起形成任选地被羟基或卤化物取代的杂环；或

26、r1和r5一起形成包含一个或两个选自氮或碳的杂环原子的5或6元未取代的芳族杂环。

27、在一个实施方案中，化合物包括具有该结构的化合物，其中x是氮或碳；r1是-ome；r2是h；r3是h；r4是oh；并且r 5是h。

28、在一个实施方案中，化合物包括具有该结构的化合物，其中x是氮或碳；r1是-oh；r2是h；r3是h；r4是oh；并且r5是h。

29、该式的示例性化合物包括具有化学结构的以下任何一种化合物：

30、

31、在相关方面，本公开提供了包含以下化学式的tlr8抑制剂：

32、

33、或其药学上可接受的盐，其中:

34、r1，r3和r4独立地为h,c1-6烷基，c3-8环烷基，c2-4烯基，c2-4炔基，c1-4烷氧基，或

35、c1-6烷基，其任选地被羟基，巯基，卤化物，c1-6烷基,c1-6烯基,c1-4烷氧基，or5，sr5，nr3r4，c02r5，oc(＝o)r5，杂芳基，或其组合取代，或

36、芳基或杂芳基，其任选地被羟基，巯基，卤化物，c1-6烷基，c1-6烯基，c1-4烷氧基，硝基，or7，sr7，nr5r6，c02r7，或其组合取代；

37、r2为h，nr5r6，或or7；以及，

38、r5，r6和r7独立地为h，c1-6烷基，c3-8环烷基，c2-4烯基，芳基，杂芳基，或

39、c1-6烷基，其被羟基，巯基，氨基，磺酸，羧酸，卤化物，c1-6烷基,c1-6烯基,c1-4烷氧基，杂芳基或其组合取代，或r5和r6一起形成任选地被羟基或卤化物取代的杂环。

40、在本公开的示例性方面，这些化合物包括该结构的化合物，其中:

41、rl是h；

42、r2是h或-oh；

43、r3是h或-ch3。

44、本公开还提供了通过向个体施用包含抑制个体的免疫反应的有效量的本发明的化合物的药物组合物来抑制个体的免疫反应的方法。免疫反应可能与自身免疫疾病有关。抑制免疫反应可以改善自身免疫性疾病的一种或多种症状。自身免疫疾病可以选自包含风湿性关节炎，胰腺炎，混合组织结缔性疾病，系统性红斑狼疮，抗磷脂综合征，肠易激疾病，i型糖尿病和干燥综合征(sjogren's疾病)的组类。自身免疫疾病可能与包含rna的免疫化合物(或来自与肽结合的rna，如阳离子肽，引起的炎症)有关。免疫反应可以与炎性疾病相关，而抑制免疫反应可以改善炎性疾病的一种或多种症状。炎性疾病可能与tlr8表达升高(或tlr8信号异常)有关。抑制免疫反应可以治疗自身免疫性疾病或炎性疾病。替代地或另外地，抑制免疫反应可以预防或延缓自身免疫疾病或炎性疾病的发展。在这些方法中，被治疗的个体可以是人类。

45、本公开还提供了前述任一段落中的化合物，该化合物用于制备治疗或预防自身免疫性疾病或炎性疾病的药物。该药物可以包含用于减轻自身免疫性疾病的一种或多种症状的有效量的化合物。自身免疫疾病可以选自包含风湿性关节炎，胰腺炎，混合组织结缔性疾病，系统性红斑狼疮，抗磷脂综合征，肠易激疾病，i型糖尿病和干燥综合征(sjogren's疾病)的组类。自身免疫疾病可能与包含rna的免疫化合物(或来自与肽结合的rna，如阳离子肽，引起的炎症)有关。免疫反应可以与炎性疾病相关。所述药物可以包含用于减轻自身免疫性疾病的一种或多种症状的有效量的本公开的化合物。炎性疾病可能与tlr8表达升高(或tlr8信号异常)有关。该药物可以治疗自身免疫性疾病或炎性疾病。替代地或另外地，该药物可以预防或延迟自身免疫疾病或炎性疾病的发展。具有自身免疫性疾病或炎性疾病的个体可以是人类。

46、本
技术实现要素：
既无意也不应解释为代表本发明的全部内容和范围。此外，本文中对“本公开”或“该公开”或其各个方面的引用应被理解为表示本公开的某些实施例，并且不必理解为将所有实施例限制为特定的描述。在该概要以及附图和详细说明中以各种详细程度阐述了本发明，并且该概要中的元件、组件等的包括或不包括，无意于限制本发明的范围。从具体描述中，特别是当与附图一起使用时，本发明的其他方面将变得更加显而易见。