蛋白Fobut在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用

本发明属于植物基因工程。更具体地，涉及蛋白fobut在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用。

背景技术：

1、香蕉枯萎病(banana fusarium wilt)是一种由香蕉枯萎病菌(fusariumoxysporum f.sp.cubense，foc)引起的土传维管束真菌病害，该病会导致香蕉减产甚至绝收，严重制约香蕉产业的发展。目前尚未有可有效防治香蕉枯萎病的方法。

2、开展香蕉枯萎病菌致病因子及其致病机制的研究，寻找其中可作为香蕉枯萎病防治的靶点，是有效防治香蕉枯萎病的关键。因此，需不断挖掘与香蕉枯萎病菌致病力相关的基因或蛋白，以期实现对香蕉枯萎病的有效防治。

技术实现思路

1、本发明提供了蛋白fobut在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用，丰富了与香蕉枯萎病菌致病力相关的蛋白数据库，有助于香蕉枯萎病的防治。

2、本发明的第一个目的是提供蛋白fobut在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用。

3、本发明的第二个目的是提供抑制蛋白fobut表达的制剂或用于敲除编码蛋白fobut的基因的制剂在防治香蕉枯萎病中的应用。

4、本发明的第三个目的是提供抑制蛋白fobut表达的制剂或用于敲除编码蛋白fobut的基因的制剂在制备防治香蕉枯萎病的产品中的应用。

5、本发明的第四个目的是提供抑制蛋白fobut表达的制剂或用于敲除编码蛋白fobut的基因的制剂在降低香蕉枯萎病菌致病力中的应用。

6、本发明的第五个目的是提供抑制蛋白fobut表达的制剂或用于敲除编码蛋白fobut的基因的制剂在制备降低香蕉枯萎病菌致病力的产品中的应用。

7、本发明的第六个目的是提供一种降低香蕉枯萎病菌致病力的方法。

8、本发明的第七个目的是提供一种防治香蕉枯萎病的方法。

9、本发明上述目的通过以下技术方案实现：

10、本发明在研究foc4分泌蛋白质组学的过程中，发现了一个在进化上具有高度保守性的未知蛋白(uncharacterized protein)，命名为蛋白fobut。通过构建编码蛋白fobut的基因(fobut)的敲除质粒并转入香蕉枯萎病菌原生质体，观察获得的fobut敲除突变体的表型并进行致病力分析发现，敲除基因fobut明显降低了香蕉枯萎病菌的致病力，而将fobut回补之后，所得回补突变体的致病力恢复，表明蛋白fobut为香蕉枯萎病菌致病力相关蛋白，调控香蕉枯萎病菌的致病力。因此，本发明请求保护以下应用：

11、本发明请求保护蛋白fobut在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用。

12、具体地，本发明所述蛋白fobut的氨基酸序列如seq id no.2所示。

13、具体地，所述应用为蛋白fobut在降低香蕉枯萎病菌致病力中的应用。

14、更具体地，所述应用是通过抑制蛋白fobut的表达或敲除编码蛋白fobut的基因实现的。

15、作为其中的一种选择，所述编码香蕉枯萎病菌蛋白fobut的基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。

16、鉴于香蕉枯萎病是由香蕉枯萎病菌引起的病害，降低香蕉枯萎病的致病力可以预防香蕉枯萎病的发生，减轻香蕉枯萎病的危害。而敲除香蕉枯萎病菌基因fobut或抑制基因fobut表达均可以使蛋白fobut的表达受影响，进而降低香蕉枯萎病菌的致病力。因此，本发明还请求保护抑制蛋白fobut表达的制剂或用于敲除编码蛋白fobut的基因的制剂在防治香蕉枯萎病中的应用。

17、可选地，所述抑制蛋白fobut表达的试剂为靶向基因fobut的sirna。

18、本发明还请求保护抑制蛋白fobut表达的制剂或用于敲除编码蛋白fobut的基因的制剂在制备防治香蕉枯萎病的产品中的应用。

19、本发明还请求保护抑制蛋白fobut表达的制剂或用于敲除编码蛋白fobut的基因的制剂在降低香蕉枯萎病菌致病力中的应用。

20、本发明还请求保护抑制蛋白fobut表达的制剂或用于敲除编码蛋白fobut的基因的制剂在制备降低香蕉枯萎病菌致病力的产品中的应用。

21、具体地，所述蛋白fobut的氨基酸序列如seq id no.2所示。

22、具体地，所述用于敲除编码蛋白fobut的基因的制剂包括其敲除质粒，所述敲除质粒是基于丝状真菌表达载体pct74构建得到。

23、本发明还提供了一种降低香蕉枯萎病菌致病力的方法，所述方法为：阻断或抑制香蕉枯萎病菌蛋白fobut的表达。

24、本发明还提供了一种防治香蕉枯萎病的方法，所述方法为：阻断或抑制香蕉枯萎病菌蛋白fobut的表达。

25、具体地，所述香蕉枯萎病由香蕉枯萎病菌引起，通过阻断或抑制香蕉枯萎病菌蛋白fobut的表达，降低香蕉枯萎病菌的致病力来防治香蕉枯萎病。

26、更具体地，所述香蕉枯萎病菌为香蕉枯萎病菌4号小种。

27、本发明具有以下有益效果：

28、本发明通过构建编码香蕉枯萎病菌蛋白fobut的基因(fobut)的敲除质粒和回补质粒并分别转化相应原生质体，获得了fobut的缺失突变体和回补突变体。通过观察缺失突变体和回补突变体的表型并进行致病力分析发现，敲除基因fobut可以明显降低香蕉枯萎病菌的致病力，而回补后其致病力得以恢复，表明蛋白fobut与香蕉枯萎病菌的致病力相关，可将其作为靶点用于香蕉枯萎病的防治。本发明丰富了香蕉枯萎病菌致病力相关的蛋白数据库，有利于香蕉枯萎病的防治。

技术特征：

1.蛋白fobut在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。

2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述应用为蛋白fobut在降低香蕉枯萎病菌致病力中的应用。

3.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述应用是通过抑制蛋白fobut的表达或敲除编码蛋白fobut的基因实现的。

4.抑制蛋白fobut表达的制剂或用于敲除编码蛋白fobut的基因的制剂在防治香蕉枯萎病中的应用，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。

5.抑制蛋白fobut表达的制剂或用于敲除编码蛋白fobut的基因的制剂在制备防治香蕉枯萎病的产品中的应用，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。

6.抑制蛋白fobut表达的制剂或用于敲除编码蛋白fobut的基因的制剂在降低香蕉枯萎病菌致病力中的应用，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。

7.抑制蛋白fobut表达的制剂或用于敲除编码蛋白fobut的基因的制剂在制备降低香蕉枯萎病菌致病力的产品中的应用，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。

8.一种降低香蕉枯萎病菌致病力的方法，其特征在于，阻断或抑制香蕉枯萎病菌蛋白fobut的表达；所述蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。

9.一种防治香蕉枯萎病的方法，其特征在于，阻断或抑制香蕉枯萎病菌蛋白fobut的表达。

10.根据权利要求9所述方法，其特征在于，所述香蕉枯萎病由香蕉枯萎病菌引起，通过阻断或抑制香蕉枯萎病菌蛋白fobut的表达，降低香蕉枯萎病菌的致病力来防治香蕉枯萎病。

技术总结
本发明公开了蛋白Fobut在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用。本发明通过构建编码香蕉枯萎病菌蛋白Fobut的基因(Fobut)的敲除质粒和回补质粒并分别转化相应原生质体，获得了Fobut的缺失突变体和回补突变体。通过观察缺失突变体和回补突变体的表型并进行致病力分析发现，敲除基因Fobut可以明显降低香蕉枯萎病菌的致病力，而回补后其致病力得以恢复，表明蛋白Fobut与香蕉枯萎病菌的致病力相关，可将其作为靶点用于香蕉枯萎病的防治。本发明丰富了香蕉枯萎病菌致病力相关的蛋白数据库，有利于香蕉枯萎病的防治。

技术研发人员：李云锋,周晓姝,聂燕芳,李华平
受保护的技术使用者：华南农业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/3/21