一种载体、透明质酸高产菌株及其构建方法与应用

文档序号:37355611发布日期:2024-03-18 18:40阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种含有与群体感应系统相关的基因luxs的过表达载体,其特征在于:所述载体将luxs共531bp基因片段插入初始载体pdl278载体的多克隆位点处,构建了载体pdl278::luxs,其次连接长度为79bp的pr22表达元件,构建过表达质粒pdl278::pr22::luxs;

2.根据权利要求1所述的载体,其特征在于:所述luxs来源于兽疫链球菌(streptococcus zooepidemicus)atcc 39920;所述pr22表达元件来源于兽疫链球菌atcc39920,luxs和pr22表达元件分别以atcc 39920基因组为模板通过pcr技术扩增得到的。

3.利用如权利要求1或2所述载体的透明质酸高产菌株,其特征在于:所述菌株为将基因luxs过表达质粒pdl278::pr22::luxs转入宿主菌,获得过表达luxs基因功能的工程菌。

4.根据权利要求3所述的透明质酸高产菌株,其特征在于:所述宿主菌为兽疫链球菌(streptococcus zooepidemicus)atcc 39920。

5.如权利要求3或4所述的透明质酸高产菌株的构建方法,其特征在于:包括如下步骤:

6.根据权利要求5所述的透明质酸高产菌株的构建方法,其特征在于:所述转入为电转入。

7.如权利要求3或4所述的透明质酸高产菌株在提高透明质酸产量方面的应用。

8.一种利用如权利要求3或4所述的菌株发酵制备透明质酸的方法,其特征在于:包括如下步骤:

9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于:具体步骤如下:

10.根据权利要求8或9所述的方法,其特征在于:发酵获得的透明质酸的产量为0.62g/l。


技术总结
本发明属于基因工程技术领域,公开了一种含有与群体感应系统相关的基因luxS的过表达载体,将luxS共531bp基因片段插入初始载体pDL278载体的多克隆位点处,其次连接长度为79bp的PR22表达元件,构建过表达质粒pDL278::PR22::luxS。本发明将过表达luxS基因的重组菌进行发酵分析,经过37℃,pH7.0,转速150‑300r/min,发酵24小时,得到HA产量为0.62g/L,与野生型兽疫链球菌相比,透明质酸分子量提高了14%左右。为提升透明质酸产量提供了新方法,并获得了一株透明质酸的高产菌株。

技术研发人员:高伟霞,刘浩,李聪
受保护的技术使用者:天津科技大学
技术研发日:
技术公布日:2024/3/17
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