本申请属于生物样品处理,尤其涉及一种用于粘性生物样品的液化剂和一种粘性生物样品的液化方法。
背景技术:
1、病人的生物样品,如痰液等,因含有病原微生物信息,常用来进行显微镜检查、细菌培养或核酸检测,以辅助临床诊断。例如,检验痰液中的微生物可以作为呼吸道疾病的辅助诊断。痰液为黏稠状态,既不方便吸取,也容易包裹住病原微生物而导致阳性率降低而漏诊。为此,现有技术中提供了多种液化痰液的方法,用于不同的场景,其中包括:
2、糜蛋白酶法:可保存细胞或细菌活性,液化速度较快,15min-30min可完全液化,适于镜检、培养及核酸检测,但作为生物活性制剂,原材料及生产成本均很高,且效期短。
3、胰酶法:与糜蛋白酶法近似,原材成本较低,但液化时间需要1h-2h,不适于快速检测。
4、n-乙酰-l-半胱氨酸+氢氧化钠法:成本低、液化速度快,5min-10min可完全液化,但对大部分细菌有杀灭作用,仅适于结核杆菌培养或核酸检测。
5、胍盐+二硫苏糖醇法:成本低、液化速度快,5min内可完全液化,但因胍盐几乎灭活所有微生物,故仅适于病原体核酸检测。
6、二硫苏糖醇+蛋白酶k法:与糜蛋白酶法近似,成本较低、液化速度较快,15-30分钟内可完全液化,但需要两个步骤,操作便捷性差。
7、现有的液化剂中,适应范围广的成本高、速度慢,而成本低、速度快的液化剂适用范围窄,即现有技术中还没有同时具有低成本、液化速度快且适用范围广等优点的液化剂,不利于降低患者的医疗费用及时间成本。
技术实现思路
1、本申请提供了一种用于粘性生物样品的液化剂,旨在解决液化时间长的问题。
2、第一方面,本申请提供的用于粘性生物样品的液化剂包括:
3、缓冲组分;
4、二硫苏糖醇;
5、海藻糖;和
6、甜菜碱。
7、可选地,所述液化剂还包括氯化钠,且浓度介于140mml/l至160mmol/l之间。
8、可选地,所述缓冲组分包括4-羟乙基哌嗪乙磺酸,且浓度介于10mml/l至50mmol/l之间,所述缓冲组分能够使所述粘性生物样品的ph值维持在7.2至7.4之间,当所述粘性生物样品的温度每升高或降低10℃时,ph值的变化幅度少于等于0.02。
9、可选地,所述二硫苏糖醇的浓度介于100mml/l至300mmol/l之间。
10、可选地,所述海藻糖的浓度介于100mml/l至300mmol/l之间。
11、可选地,所述甜菜碱的浓度介于100mml/l至300mmol/l之间。
12、第二方面,本申请还提供了一种粘性生物样品的液化方法,包括如下步骤:
13、将粘性生物样品与根据本发明的液化剂混合,摇晃或振荡混匀1min至5min以获得混合物,所述混合物即为液化的粘性生物样品。
14、可选地,所述液化剂的体积为所述粘性生物样品的体积的2至3倍。
15、可选地,在18℃至30℃中摇晃或振荡混匀。
16、可选地,所述粘性生物样品包括痰液。
17、根据本发明的液化剂能够快速液化痰液。此外,根据本发明的液化剂对活菌的活性并无影响,能消除粘液丝对痰液镜检的干扰,提高细菌分离效果,并且不影响病原体核酸的提取与纯化。因此,根据本发明的液化剂可以广泛地用于液化粘性生物样品。
1.一种用于粘性生物样品的液化剂,其特征在于,包括:
2.如权利要求1所述的液化剂,其特征在于,还包括氯化钠,且浓度介于140mml/l至160mmol/l之间。
3.如权利要求1所述的液化剂,其特征在于,所述缓冲组分包括4-羟乙基哌嗪乙磺酸,且浓度介于10mml/l至50mmol/l之间,所述缓冲组分能够使所述粘性生物样品的ph值维持在7.2至7.4之间,当所述粘性生物样品的温度每升高或降低10℃时,ph值的变化幅度少于等于0.02。
4.如权利要求1所述的液化剂,其特征在于,所述二硫苏糖醇的浓度介于100mml/l至300mmol/l之间。
5.如权利要求1所述的液化剂,其特征在于,所述海藻糖的浓度介于100mml/l至300mmol/l之间。
6.如权利要求1所述的液化剂,其特征在于,所述甜菜碱的浓度介于100mml/l至300mmol/l之间。
7.一种粘性生物样品的液化方法,其特征在于,包括如下步骤:
8.如权利要求7所述的液化方法,其特征在于,所述液化剂的体积为所述粘性生物样品的体积的2至3倍。
9.如权利要求7所述的液化方法,其特征在于,在18℃至30℃中摇晃或振荡混匀。
10.如权利要求7所述的液化方法,其特征在于,所述粘性生物样品包括痰液。