一株人胰腺癌细胞系PDAC-X3及其应用

本发明属微生物动物细胞系领域，具体是涉及一株人胰腺癌细胞系pdac-x3及其应用。

背景技术：

1、胰腺癌是一类预后极差的恶性实体肿瘤，其发病率在国内外均呈现逐年上升态势。从1990年到2017年，胰腺癌导致的死亡人数和病例数增加一倍多，而且随着人口老龄化，胰腺癌的发病率可能会继续上升。预计2030年，胰腺癌将成为全球癌症相关死亡的第二大原因。胰腺癌发病隐匿、恶性度高、极具侵袭性等临床特点致使大多数患者就诊时已处晚期，并伴随邻近或远处器官的转移，无法手术治疗。以吉西他滨为代表的化疗目前仍然是胰腺癌患者主要治疗方案，但耐药性问题突出使得药物治疗效果有限，患者预后仍然较差。围绕胰腺癌发病机制，当前已经开展许多具有开创性的基础研究，但是相关发病机制中关键靶点的临床转化研究，包括治疗策略研究，仍然相对发展缓慢。胰腺癌需要更多转化研究以推动实际临床诊治，延长胰腺癌患者的生存期。

2、人类肿瘤细胞系，特别是那些具有完整数据和随访的细胞系，是肿瘤生物学研究的重要工具。20世纪80年代以来，以美、日、韩三国科学家为代表，建立并鉴定了多株胰腺癌细胞系，但中国人源胰腺癌细胞系报道的不多。

3、来自胰腺原发肿瘤的细胞系对于探索生物学和胆管肿瘤生成、检测药物敏感性、开发分子治疗靶点和耐药性研究耐药机制作用巨大。一个完善的肿瘤细胞系库应该反映出肿瘤表型的多样性并能够提供不同肿瘤异质性的细胞系；考虑到胰腺肿瘤的不同病因及其与病因相关的遗传变异，使用反映这些特征的适当的临床前模型是很重要的。

4、1986年，国内建成首例胰腺癌细胞系。为国人胰腺癌的基础和临床研究提供重要的细胞实验模型。但是，随着体外传代次数增多,细胞系一些特有的生物学特征会逐渐改变或消失，甚至会产生起源细胞本不具备的特征。另外很多细胞系被检测到细胞交叉污染的现象，最常见的污染细胞源是hela,t-24和m14，使用这些细胞进行研究也会出现错误的结果。国家实验细胞资源共享服务平台在对收集、整理、质控、保藏细胞过程中进行身份鉴定时，发现多株国内学者建立的肿瘤细胞系是被交叉污染了的。通过对从不同地区、不同实验室共收集到37株系的细胞共计46个样品，分别进行种属确认及str谱分析。发现细胞交叉污染现象严重，错误率达62.6％。而我国每年基于这些污染细胞的论文有几千篇之多。错误识别、污染、遗传漂变和克隆进化的细胞系是很多研究不可复制的重要原因，并影响到每个从事细胞研究的人。

5、新建立的细胞系可以最大程度上保持与原发肿瘤相似的特性，使用这种细胞系进行研究得出的结果最接近人体实际情况。因遗传背景不同，为更好地研究中国人的疾病，建立中国人特有的疾病模型非常必要。基于以上原因，不断建立新的细胞系并淘汰陈旧的细胞系，已经成为研究胰腺癌发病机理和治疗方法等的重要环节。

技术实现思路

1、本发明的目的是针对现有技术存在的上述问题，提供一种人胰腺癌细胞系pdac-x3及其应用。

2、本发明提供的胰腺癌细胞系为人胰腺癌细胞系pdac-x3，保藏编号：cctcc no：c2023381。

3、人胰腺癌细胞系pdac-x3可作为胰腺癌发生、发展或转移机制研究的细胞模型。人胰腺癌细胞系pdac-x3也可以用于建立胰腺癌动物模型。

4、本发明采用取自一73岁男性胰腺癌手术切除标本，经ⅱ型胶原酶/中性蛋白酶两者混合消化后作原代培养，经细胞培养技术建立一个胰腺癌细胞系，命名为pdac-x3。已于2023年11月27日保藏，保藏单位：中国典型培养物保藏中心(简称cctcc)，保藏中心地址：中国武汉武汉大学，邮编430072，保藏编号：cctcc no：c2023381。

5、本细胞株具有以下生物学特性：

6、1、细胞贴壁生长，无接触抑制，可出现叠加生长现象。

7、2、细胞倍增时间接近50h。

8、3、细胞str结果显示：pdac-x3细胞和同一患者的肿瘤组织的str结果一致，细胞来源于同一肿瘤样品，并且在培养过程中没有被其它细胞污染。

9、4、染色体分析提示：本株细胞系75％为亚2倍体核型，25％为亚四倍体核型，有较多的染色体缺失、异位及衍生现象。

10、5、balb/c裸小鼠皮下接种本细胞后成瘤率33％，移植瘤组织学特性与原发瘤相似。

11、6、药敏结果：pdac-x3对奥沙利铂耐药，ic50＝18.86μmol/l；对氟尿嘧啶敏感，ic50＝7.109μmol/l；对吉西他滨敏感，ic50＝0.029μmol/l；对紫杉醇敏感，ic50＝0.0046μg/ml。

12、所述一株人胰腺癌细胞系pdac-x3可在制备胰腺癌筛选防治药物中应用。

13、本发明所述的人胰腺癌细胞系pdac-x3可以作为研究胰腺癌的发生、发展机制、细胞形态与功能异常及药物研发等的细胞模型。与现有胰腺癌细胞系的区别、进步性在于新建立的细胞系可以最大程度上保持与原发肿瘤相似的特性，使用这种细胞系进行研究得出的结果最接近人体实际情况，为研究胰腺癌发病机理和治疗方法等提供基础。

技术特征：

1.一株人胰腺癌细胞系pdac-x3，其特征在于其保藏编号为cctcc no：c2023381。

2.如权利要求1所述一株人胰腺癌细胞系pdac-x3在建立胰腺癌发生、发展的细胞模型中的应用。

3.如权利要求1所述一株人胰腺癌细胞系pdac-x3在建立胰腺癌动物模型中的应用。

4.如权利要求1所述一株人胰腺癌细胞系pdac-x3在制备胰腺癌筛选防治药物中的应用。

技术总结
一株人胰腺癌细胞系PDAC‑X3及其应用，属于微生物动物细胞系领域。提供的胰腺癌细胞系为人胰腺癌细胞系PDAC‑X3，保藏编号CCTCC No：C2023381。人胰腺癌细胞系PDAC‑X3可作为胰腺癌发生、发展或转移机制研究的细胞模型。也可以用于建立胰腺癌动物模型。可在制备胰腺癌筛选防治药物中应用。可以作为研究胰腺癌的发生、发展机制、细胞形态与功能异常及药物研发等的细胞模型。新建立的细胞系可以最大程度上保持与原发肿瘤相似的特性，使用这种细胞系进行研究得出的结果最接近人体实际情况，为研究胰腺癌发病机理和治疗方法等提供基础。

技术研发人员：周文策,柴长鹏,徐浩,苗鑫,张辉,易剑锋,王正峰,苗龙
受保护的技术使用者：兰州大学第二医院
技术研发日：
技术公布日：2024/3/24