一种降解纤维素的副干酪乳杆菌重组菌及其构建方法和应用

本发明涉及生物工程，特别是涉及一种降解纤维素的副干酪乳杆菌重组菌及其构建方法和应用。

背景技术：

1、青贮是可靠、便捷的饲料保存方法，对现代畜牧业具有重要意义。随着畜牧业的快速发展，青贮饲料被各国所重视，青贮饲料相关的应用与研究也越来越被关注。副干酪乳杆菌是一种重要的益生菌。作为青贮饲料中的重要发酵菌种，副干酪乳杆菌具有优质的产乳酸能力，但其纤维素降解能力非常欠缺。因此，构建一株具有强纤维素降解能力的菌株在青贮饲料以及纤维素生物利用方面具有重要意义。为此，本发明构建一株具有优良纤维素降解性能的副干酪乳杆菌，应用于青贮发酵，具有重要的理论意义和实际应用价值，有助于提高饲料利用率、降低饲料成本、减少环境污染、促进生物质能源开发以及拓展微生物技术的应用范围。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种降解纤维素的副干酪乳杆菌重组菌及其构建方法和应用，以解决上述现有技术存在的问题，本发明构建的副干酪乳杆菌重组菌的纤维素降解能力显著增强，在青贮发酵中有巨大的应用潜力，为副干酪乳杆菌应用于青贮发酵提供了重要参考。

2、为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

3、本发明提供一种降解纤维素的副干酪乳杆菌重组菌的构建方法，包括在副干酪乳杆菌中导入纤维素降解酶基因bgl的步骤。

4、进一步地，所述纤维素降解酶基因bgl的核苷酸序列如seq id no：1所示。

5、进一步地，将所述纤维素降解酶基因bgl连接表达载体，获得重组载体；重组载体导入副干酪乳杆菌中，得到副干酪乳杆菌重组菌。

6、本发明还提供上述的构建方法获得的副干酪乳杆菌重组菌。

7、本发明还提供上述的副干酪乳杆菌重组菌在生产纤维素降解酶中的应用。

8、本发明还提供上述的副干酪乳杆菌重组菌在青贮饲料发酵中的应用。

9、本发明还提供一种提高副干酪乳杆菌纤维素降解能力的方法，以副干酪乳杆菌为出发菌株，导入编码纤维素降解酶的bgl基因。

10、进一步地，所述bgl基因的核苷酸序列如seq id no：1所示。

11、本发明公开了以下技术效果：

12、本发明以副干酪乳杆菌和纤维素降解酶基因bgl为材料，通过基因工程技术，基于聚合酶链式反应、琼脂糖凝胶电泳、电转化、同源重组技术构建了一株具有强纤维素降解能力的副干酪乳杆菌重组菌，并探究了其在青贮发酵和纤维素降解方面的应用潜力。通过刚果红染色法，观察透明分解圈证实，改造后的副干酪乳杆菌重组菌的纤维素降解能力显著增强，可在纤维素降解相关领域进行应用。在青贮发酵过程中，既需要菌株具有乳酸菌的发酵特性，又需要具备纤维素降解能力，因此本发明所构建的重组菌株在青贮发酵中有巨大的应用潜力，为副干酪乳杆菌应用于青贮发酵提供了重要参考。

技术特征：

1.一种降解纤维素的副干酪乳杆菌重组菌的构建方法，其特征在于，包括在副干酪乳杆菌中导入纤维素降解酶基因bgl的步骤。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述纤维素降解酶基因bgl的核苷酸序列如seq id no：1所示。

3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，将所述纤维素降解酶基因bgl连接表达载体，获得重组载体；重组载体导入副干酪乳杆菌中，得到副干酪乳杆菌重组菌。

4.如权利要求1-3任一项所述的构建方法获得的副干酪乳杆菌重组菌。

5.如权利要求4所述的副干酪乳杆菌重组菌在生产纤维素降解酶中的应用。

6.如权利要求4所述的副干酪乳杆菌重组菌在青贮饲料发酵中的应用。

7.一种提高副干酪乳杆菌纤维素降解能力的方法，其特征在于，以副干酪乳杆菌为出发菌株，导入编码纤维素降解酶的bgl基因。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述bgl基因的核苷酸序列如seq id no：1所示。

技术总结
本发明公开了一种降解纤维素的副干酪乳杆菌重组菌及其构建方法和应用，属于生物工程技术领域，该构建方法包括在副干酪乳杆菌中导入纤维素降解酶基因bgl的步骤；所述纤维素降解酶基因bgl的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明以副干酪乳杆菌和纤维素降解酶基因bgl为材料，构建了一株具有强纤维素降解能力的副干酪乳杆菌重组菌，实验证实，改造后的副干酪乳杆菌重组菌的纤维素降解能力显著增强，可在纤维素降解相关领域进行应用。在青贮发酵过程中，既需要菌株具有乳酸菌的发酵特性，又需要具备纤维素降解能力，因此本发明所构建的重组菌株在青贮发酵中有巨大的应用潜力，为副干酪乳杆菌应用于青贮发酵提供了重要参考。

技术研发人员：隋欣,蔡瑞涛,徐会连,王文波,何文兴,刘玉泉,王磊磊,韩超,王瑞祥,常锦绣,马爱君
受保护的技术使用者：济南大学
技术研发日：
技术公布日：2024/5/16