急性酒精性肝损伤的保护作用的人参肽的制备方法与流程

本发明涉及人参肽制备，具体为急性酒精性肝损伤的保护作用的人参肽的制备方法。

背景技术：

1、酒精性肝损伤发生的机制并不十分明确，但越来越多的证据表明，氧化应激和炎症在酒精性肝损伤的发生中起着关键的病因学作用，包括肝细胞功能障碍、凋亡和纤维化等。过量的乙醇消耗诱导肝脏中多种自由基、活性氧(ros)和活性氮(rns)的积累，包括超氧化物、过氧化氢、脂质过氧化物、一氧化氮和过氧亚硝酸盐。反过来，大量产生的自由基超过肝脏氧化代谢能力，破坏肝脏氧化还原平衡，增加抗氧化物质消耗，抑制超氧化物歧化酶(sod)活性，降低抗氧化酶水平，尤其是谷胱甘肽(gsh)水平。从而引起肝脏一系列病理损伤，引起细胞膜脂质过氧化、蛋白质和dna氧化，导致肝细胞损伤、炎症、缺血、纤维化、坏死和凋亡。

2、人参被誉为“百草之王”，其功效有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津安神等，其富含的生物活性物质主要包括人参总多糖、人参皂苷、人参蛋白。通过水解人参获得的小分子人参寡肽具有很强的抗氧化及免疫调节活性，能够显著改善受损肝细胞的氧化应激，调节因酒精摄入引起的肠道脂多糖水平升高，从而进入肝组织通过nf-κb通路引起的炎症细胞因子水平异常，进而抑制大量摄入酒精引起的肝脏氧化还原失衡，炎症反应等。但由于稳定性、胃肠道生理障碍以及理化性质的限制,导致人参低聚肽难以被完好地靶向递送至肝部并发挥功效。另一方面，虾青素(3,3’-二羟基-4,4’-二酮基-β,β’-胡萝卜素)，分布在海洋藻类、菌类和甲壳类动物中，其中雨生红球藻是最理想的天然虾青素来源。多项研究证实虾青素作为一种天然强抗氧化剂，能够调节肝细胞氧化应激反应，在缓解肝脏胰岛素抵抗及非酒精性脂肪肝等方面具有重要作用。但同样虾青素存在水溶性低、稳定性差等问题，严重影响其在肝损伤治疗中的应用。

3、公开号为cn117343136a的中国发明申请公开了一种人参低聚肽及其制备方法、纤维素载体复合物及其制备方法和应用，特别是用于运载人参低聚肽和虾青素的肝靶向微粒(载体)及其复合物的制备方法及其在酒精性肝损伤改善方面作用，一方面人参低聚肽与接枝在细菌纤维素上的半乳糖通过美拉德反应连接，另一方面人参低聚肽与虾青素通过乳化作用进行包裹，并且人参低聚肽与虾青素同时被细菌纤维素独特的三维网状结构包被，能够延长人参低聚肽与虾青素的释放时间，具有极高的生物相容性、生物可降解性，大量羟基团的存在也很好地对抗极端ph值环境的变化对于芯材的结构影响。

4、然而现有技术存在不便在制备人参肽的过程中进行质量分析、纯化和稳定性测试来保证产品的质量的问题。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本发明提供了急性酒精性肝损伤的保护作用的人参肽的制备方法，解决了现有技术不便在制备人参肽的过程中进行质量分析、纯化和稳定性测试来保证产品的质量的问题。

2、为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：急性酒精性肝损伤的保护作用的人参肽的制备方法，包括以下步骤：将待提取液注入顶部具有开口的制备箱中，向制备箱中逐步注入酶解液，同时利用设置在制备箱上的泵吸式循环部件对待提取液和酶解液进行混合；在混合达到设定的酶解时间后，通过安装在制备箱上的抽样部件将达到酶解时间的人参肽输送至质量分析仪中进行质量分析，判断酶解后的人参肽质量是否达到设定的对急性酒精性肝损伤的具有保护作用的酶解标准，若没有达到设定的酶解标准则根据质量分析结果重新确定酶解时间；若达到设定的酶解标准则进行纯化，泵吸式循环部件将酶解达到设定的标准的人参肽输送至外接的纯化设备中，纯化结束后回流至制备箱中；抽样部件将纯化后的人参肽输送至质量分析仪中进行二次质量分析，判断纯化后的人参肽质量是否达到设定的对急性酒精性肝损伤的具有保护作用的纯化标准，若没有达到设定的纯化标准则重新进行纯化；若达到设定的纯化标准，则通过抽样部件将达到纯化标准的人参肽输送至稳定性测试部件中进行稳定性测试，将达到设定的稳定性标准的人参肽从制备箱中输出。

3、进一步地，所述泵吸式循环部件设置有两个且对称设置在制备箱的顶部，每个所述泵吸式循环部件均包括循环泵、吸液管和回液管，所述循环泵固定安装在制备箱的顶部边沿位置，所述吸液管一端安装在循环泵的进液口，所述吸液管的另一端设置在制备箱的内部；所述回液管通过第一电磁阀安装在循环泵的出液口处，所述回液管布置在制备箱顶部，当需要对待提取液和酶解液进行混合时，所述第一电磁阀使回液管与循环泵的出液口连通，所述循环泵通过吸液管将待提取液抽出，再通过回液管排放至制备箱中，实现待提取液的循环流动，以使待提取液与酶解液进行混合。

4、进一步地，所述制备箱的顶部对称安装有连接板，所述连接板的表面安装有输液管网，所述输液管网的进液口与外设的酶解液输送设备连接，两个所述连接板的相对侧分别与上滤件的两侧连接，所述上滤件内凹且底部具有滤水缝，所述上滤件倾斜面上阵列设置有挡水件，所述挡水件用于对流动的待提取液和酶解液进行阻挡，以使待提取液和酶解液进行混合；所述制备箱的内部还设置有内滤板，所述吸液管的吸液端贯穿内滤板并延伸至内滤板的底部。

5、进一步地，所述连接板的顶部固定安装有调节电机，所述调节电机的输出轴上安装有调节螺纹杆，所述调节螺纹杆的一端活动贯穿连接板并延伸至制备箱的内部，所述调节螺纹杆的一端还活动贯穿内滤板并与设置在制备箱内部的升降板螺纹连接，所述调节螺纹杆远离调节电机的一端与制备箱内侧壁的底部活动连接；所述升降板的顶部通过连接块与内滤板的底部固定连接，所述升降板的表面和内滤板的表面均与橡胶环的内侧壁固定连接，所述橡胶环的表面与制备箱的内侧壁活动连接，所述吸液管的吸液端位于内滤板和升降板之间。

6、进一步地，所述第一电磁阀还与外接管连接，所述外接管用于与外设的纯化设备连接，以使达到设定的对急性酒精性肝损伤的具有保护作用的酶解标准人参肽通过外接管输送至外设的纯化设备中进行纯化；所述制备箱的表面固定连接有回流管，所述回流管用于与外设的纯化设备的出液口连接，所述制备箱对应回流管的位置设置有纯化液回流通道，所述纯化液回流通道的出液口位于升降板的底部。

7、进一步地，所述抽样部件设置有多个且阵列设置在制备箱的外侧壁上，所述抽样部件包括抽样管件、抽样电机和封堵件，所述抽样管件固定连接在制备箱的表面，所述封堵件设置在抽样管件的内部，所述封堵件的表面设置有环形缺口，所述封堵件的顶部还开设有与环形缺口连通的抽液孔，所述抽样电机固定连接在抽样管件的表面；所述抽样电机的进液口通过抽样电磁阀与抽样管件的内部连通，所述抽样管件通过调整组件对封堵件的位置进行调节，所述抽样管件上设置有与制备箱内部连通的进液开口，当需要进行抽样时，所述调整组件调整封堵件在抽样管件中的位置，以使封堵件的环形缺口与抽样管件上设置的进液开口对接，通过抽样电机将制备箱中的达到设定的酶解时间后的人参肽抽出，通过连接在抽样电机出液口处的送液管将人参肽送入至与送液管端部连接的质量分析仪中；获取每个质量分析仪的分析结果，并对多个质量分析仪的分析结果进行综合分析，判断酶解后的人参肽质量是否达到设定的对急性酒精性肝损伤的具有保护作用的酶解标准。

8、进一步地，所述调整组件包括调整电机、调整螺纹杆和连接弹簧，所述调整电机固定连接在抽样管件的顶部，所述调整螺纹杆的一端与调整电机的输出轴固定连接，所述调整螺纹杆的另一端贯穿抽样管件并与挤压件螺纹连接，所述挤压件与抽样管件的内侧壁活动连接，所述调整螺纹杆远离调整电机的一端活动贯穿封堵件并与抽样管件内侧壁的底部活动连接；所述挤压件的表面开设有穿孔，所述挤压件的底部与封堵件的顶部活动连接，所述抽样管件的内壁上设置有对封堵件进行限位的限位凸环，所述连接弹簧的一端与抽样管件内侧壁的底部固定连接，所述连接弹簧的另一端与封堵件的底部固定连接。

9、进一步地，所述穿孔的内部固定连接有单向进液阀，所述抽样管件的表面固定连接有样品出液阀，所述样品出液阀的出液口固定连接有返液管。

10、进一步地，所述抽样部件还包括竖直管，所述竖直管通过换向阀与送液管固定连接，所述竖直管的底部通过选择阀分别连接有废液管和结晶输出管，当需要将达到纯化标准的人参肽输送至稳定性测试部件中进行稳定性测试时，选择阀和换向阀使结晶输出管、竖直管和送液管连通，使达到设定的纯化标准的人参肽送入至稳定性测试部件进行稳定性测试；所述稳定性测试部件包括结晶罐、测试组件和搅拌组件，所述结晶罐通过支撑板与制备箱连接，所述结晶罐的底部设置有结晶tec，所述结晶tec用于对进入结晶罐中的人参肽进行结晶操作时，对结晶罐进行降温，所述搅拌组件用于对结晶罐中的人参肽进行搅拌，以加快结晶，所述搅拌组件包括搅拌电机和安装在搅拌电机输出轴上的搅拌杆，所述搅拌杆上设置有搅拌叶；所述测试组件用于在人参肽结晶完成后，根据设定的测试条件对结晶后的固态人参肽进行稳定性测试，所述测试组件包括支撑护板，所述支撑护板的内部固定连接有测试tec和led灯条，所述测试tec用于控制测试温度，所述led灯条用于控制测试亮度。

11、进一步地，所述搅拌杆上固定套接有橡胶卡环，所述搅拌叶活动套接在橡胶卡环的表面。

12、本发明具有以下有益效果：

13、（1）、该急性酒精性肝损伤的保护作用的人参肽的制备方法，通过通过质量分析、纯化和稳定性测试等步骤，可以实现在人参肽制备的过程中进行质量检测和稳定性测试，从而实现对人参肽制备过程的控制，解决了现有技术不便在制备人参肽的过程中进行质量分析、纯化和稳定性测试来保证产品的质量的问题。

14、（2）、该急性酒精性肝损伤的保护作用的人参肽的制备方法，将抽样管件上的样品出液阀打开，挤压件将会使上部的人参肽通过样品出液阀排入到返液管中，进而进入到制备箱中，实现回收。

15、（3）、该急性酒精性肝损伤的保护作用的人参肽的制备方法，先将上滤件与两个连接板安装，可以通过螺钉进行安装，然后将输液管网安装在连接板上，输液管网的进液口与外设的酶解液输送设备连接，之后通过上滤件向制备箱的内部注入待提取液，待提取液是人参肽处理后得到的液体，当制备箱中注入设定量的待提取液后，通过输液管网的出液口向上滤件上注入酶解液，同时泵吸式循环部件启动，使制备箱中的待提取液流动，从而与酶解液进行混合。

16、当然，实施本急性酒精性肝损伤的保护作用的人参肽的制备方法品并不一定需要同时达到以上所述的所有优点。