本发明涉及生物,具体涉及一株牛源假小链双歧杆菌xu001及其应用。
背景技术:
1、我国是畜牧业大国,畜禽的健康发展是养殖业经济发展的关键。腹泻是我国养殖业长期存在并且迫切需要解决的关键问题。许多病原微生物可导致仔猪、羔羊和犊牛等幼畜的腹泻。在大规模养殖场中,解决此类问题的方法是使用抗生素。抗生素药物的使用与对正常菌群的干扰有关,因此,由于微生物群的变化,可能会发生炎症性肠病或过敏等疾病。此外,抗生素相关腹泻减少了碳水化合物的消化和短链脂肪酸的吸收,从而导致诱发渗透性腹泻。由于抗生素在动物生产中的应用受到广泛限制,因此需要满足对替代饲料添加剂和成分的日益增长的需求,以改善健康状况,提高生产性能,并避免细菌耐药性等棘手问题。
2、益生菌是有益的活性微生物,当被宿主作为食物来源的一部分以足够数量食用时,可以给动物健康状况带来许多好处,并作为某些疾病预防和治疗的潜在战略。大量研究表明,双歧杆菌是人类和动物广泛使用的菌种,以其改善肠道健康和促进生长性能的能力而闻名。这种改善可以通过防止其他致病细菌附着在肠道,缓解现有的肠道损伤,恢复受损的肠道屏障和增强免疫系统不足来实现。双歧杆菌能够通过黏附作用产生乳酸、醋酸等有机酸或为产生scfa的细菌提供更适宜的环境来直接促进肠道scfa,来防治动物腹泻。益生菌双歧杆菌在胃肠道产生醋酸盐可以降低肠病原性大肠杆菌感染的风险。益生菌在原位代谢和产生有机酸(例如乳酸和乙酸)可以降低管腔ph值和氧气水平,并为胃肠道中的其他细菌居民提供用于丁酸盐和丙酸盐合成的底物。此外,益生菌在肠道中的生长可能导致未消化碳水化合物的浓度降低,从而降低渗透梯度中断引起的腹泻风险。
3、由此可见,双歧杆菌具有调控肠道健康的作用。此外,益生菌是专门选择的,不会促进抗生素耐药性的传播,也不会携带可转移的抗生素耐药性。因此,益生菌是安全、绿色、无公害的替抗产品,开发益生菌菌株对我国养殖业具有重要意义。
技术实现思路
1、本发明的目的在于克服现有技术的不足,提供了一株牛源假小链双歧杆菌xu001及其应用。
2、为实现上述目的,本发明所设计的技术方案如下:
3、本发明提供了一株牛源假小链双歧杆菌(bifidobacterium pseudocatenulatum)xu001,其保藏编号为cctcc no:m20232150。
4、上述牛源假小链双歧杆菌(bifidobacterium pseudocatenulatum)xu001分离自犊牛直肠内容物,已于2023年11月08日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏地址为湖北省武汉市武汉大学,保藏编号为cctcc no:m20232150。
5、本发明还提供了一种上述牛源假小链双歧杆菌xu001在制备预防或治疗鼠伤寒沙门氏菌型肠道损伤的药物中的应用。
6、进一步地,所述肠道损伤是鼠伤寒沙门氏菌引起的。
7、本发明还提供了一种上述牛源假小链双歧杆菌xu001在制备治疗仔猪、羔羊或犊牛腹泻的药物中的应用。
8、本发明还提供了一种上述牛源假小链双歧杆菌xu001在制备仔猪、羔羊或犊牛的饲料中的应用。
9、本发明还提供了一种牛源假小链双歧杆菌xu001菌悬液的制备方法,包括以下步骤:
10、(1)从甘油管中蘸取牛源假小链双歧杆菌xu001的菌液在mrs固体培养基上划线,厌氧环境下37℃培养48h,得到单菌落;挑取单菌落接种于mrs液体培养基中,厌氧环境下37℃培养48h进行活化培养;
11、(2)将步骤(1)得到的活化后的菌液按照按体积比2%的接种量接种至mrs液体培养基中,37℃培养18-24h后得到发酵液,离心,弃上清,pbs重悬菌体,并调整活菌数等于1×109cfu/ml,制成牛源假小链双歧杆菌xu001菌悬液。
12、进一步地,所述步骤1)中,mrs固体培养基,其配方为蛋白胨10.0g、牛肉浸粉8.0g、酵母浸粉4.0g、葡萄糖20.0g、磷酸氢二钾2.0g、柠檬酸氢二钾2.0g、乙酸钠5.0g、硫酸镁0.2g、硫酸锰0.04g、吐温-80 1.0g、l-半胱氨酸盐酸盐0.5g、琼脂15.0g,将上述成分加入蒸馏水中,定容至1000ml,调节ph为6.3,于121℃高压灭菌20min。
13、本发明还提供了一种上述方法制备的菌悬液在制备预防或治疗大肠杆菌型腹泻的药物中的应用。
14、本发明还提供了一种上述方法制备的菌悬液在制备治疗仔猪、羔羊或犊牛腹泻的药物中的应用。
15、进一步地,所述药物为牛源假小链双歧杆菌xu001菌悬液,且悬液活菌数为1×109cfu/ml。
16、本发明的有益效果:
17、(1)本发明所提供的牛源假小链双歧杆菌xu001对动物无毒副作用,和用于治疗肠道的传统药物相比具有优势。
18、(2)采用本发明所提供的牛源假小链双歧杆菌xu001,能够显著降低沙门氏菌感染期间小鼠的体重下降,减轻结肠的缩短。
19、(3)采用本发明所提供的牛源假小链双歧杆菌xu001,能够缓解沙门氏菌感染导致的小鼠结肠组织明显损伤,包括杯状细胞数量轻微减少。
20、(4)与模型组小鼠相比,牛源假小链双歧杆菌xu001干预组小鼠的结肠组织中紧密连接蛋白zo-1的mrna相对表达量升高,抗炎细胞因子il-10的mrna相对表达量显著提高。
1.一株牛源假小链双歧杆菌(bifidobacterium pseudocatenulatum)xu001,其保藏编号为cctcc no:m20232150。
2.一种权利要求1所述牛源假小链双歧杆菌xu001在制备预防或治疗鼠伤寒沙门氏菌型肠道损伤的药物中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述肠道损伤是由鼠伤寒沙门氏菌引起的。
4.一种权利要求1所述牛源假小链双歧杆菌xu001在制备治疗仔猪、羔羊或犊牛腹泻的药物中的应用。
5.一种权利要求1所述牛源假小链双歧杆菌xu001在制备仔猪、羔羊或犊牛的饲料中的应用。
6.一种牛源假小链双歧杆菌xu001菌悬液的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
7.根据权利要求6所述制备方法,其特征在于:所述步骤(1)中,mrs固体培养基的配方为蛋白胨10.0g、牛肉浸粉8.0g、酵母浸粉4.0g、葡萄糖20.0g、磷酸氢二钾2.0g、柠檬酸氢二钾2.0g、乙酸钠5.0g、硫酸镁0.2g、硫酸锰0.04g、吐温-80 1.0g、l-半胱氨酸盐酸盐0.5g、琼脂15.0g,将上述成分加入蒸馏水中,定容至1000ml,调节ph为6.3,于121℃高压灭菌20min。
8.一种权利要求6所述方法制备的菌悬液在制备预防或治疗大肠杆菌型腹泻的药物中的应用。
9.一种权利要求6所述方法制备的菌悬液在制备治疗仔猪、羔羊或犊牛腹泻的药物中的应用。
10.根据权利要求8或9所述的应用,其特征在于:所述药物含有牛源假小链双歧杆菌xu001菌悬液,且菌悬液活菌数为1×109cfu/ml。