一种缓解牙龈炎的复合益生菌、益生菌剂及其在牙膏中的应用的制作方法

本发明属于益生菌，涉及一种缓解牙龈炎的复合益生菌、益生菌剂及其在牙膏中的应用。

背景技术：

1、慢性牙龈炎是一种由牙齿表面牙菌斑引起的牙龈软组织非特异性口腔疾病，通常表现为牙龈颜色鲜红，龈乳头和龈缘局部轻微肿胀、质地松软、不紧贴牙面。洁牙是针对慢性牙龈炎治疗的主要措施，然而改变口腔环境状态比治疗更为关键，口腔健康及口腔微环境的日常维护是降低慢性牙龈炎发病率的主要手段，这其中包括益生菌制剂的使用，益生菌可调控宿主口腔生态环境，进而预防、缓解或治疗口腔相关疾病。

2、活体益生菌的摄入会扰动宿主原有菌群结构，在对宿主产生益生作用的同时，也可能会带来潜在风险。灭活益生菌能在保证发挥益生功效的同时并不具备在宿主体内长期定植进而影响宿主微生物的特点，这对于宿主免疫稳态与生态稳态的维护具有重要意义。因此，开发出一种既能对宿主牙周健康产生积极作用，又能减少对宿主原有微生态环境及原住菌群影响的新菌株配方是很有必要的。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种缓解牙龈炎的复合益生菌、益生菌剂及其在牙膏中的应用。

2、为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：

3、第一方面，本发明提供一种缓解牙龈炎的复合益生菌，所述缓解牙龈炎的复合益生菌包括如下灭活益生菌菌株：保藏编号为cgmcc no.20496的植物乳杆菌lactobacillusplantarum n13菌株、保藏编号为cgmcc no.1.12735的嗜酸乳杆菌lactobacillusacidophilus la85菌株、保藏编号为cgmcc no.1.12731的副干酪乳杆菌lactobacillusparacasei lc86菌株。

4、本发明开发了一种全新的益生菌复配方式，将植物乳杆菌lactobacillusplantarum n13菌株、嗜酸乳杆菌lactobacillus acidophilus la85菌株和副干酪乳杆菌lactobacillus paracasei lc86菌株进行复配，发现三者存在潜在的相互作用，能够相互配合，在改善牙龈炎的功效上协同增效，具体体现在：（1）显著下调牙龈红肿指数；（2）显著下调龈沟深度。在使用菌量一致的情况下，若缺少上述三种菌株的任意一种时，在改善牙龈炎的功效上会显著减弱。该复合益生菌及其制得的益生菌剂为预防或改善牙龈炎提供了新的策略。由于植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和副干酪乳杆菌均为益生菌，因此其在用于制备相关功效产品时，安全性高，且不易产生抗性。

5、优选地，所述n13菌株、la85菌株与lc86菌株的菌数比为1:(1-10):(1-10)，其中(1-10)中的具体点值可以选择为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。

6、第二方面，本发明提供一种缓解牙龈炎的益生菌剂，所述益生菌剂中的菌株为第一方面所述的缓解牙龈炎的复合益生菌。

7、优选地，所述益生菌剂的剂型包括冻干粉剂、胶囊剂、片剂或颗粒剂。

8、本发明所涉及的益生菌剂的剂型不受限制，包括最常用的冻干粉剂，或进一步制得的胶囊剂、片剂或颗粒剂。

9、所述益生菌剂中菌总数不低于1×109 cfu/ml或1×109 cfu/g，例如5×109 cfu/ml（cfu/g）、1×1010 cfu/ml（cfu/g）、5×1010 cfu/ml（cfu/g）、1×1011 cfu/ml（cfu/g）、1×1012 cfu/ml（cfu/g）、1×1013 cfu/ml（cfu/g）等；该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。

10、优选地，所述益生菌剂的剂型为冻干粉剂，其由如下的制备方法制得：

11、将n13菌株、la85菌株和lc86菌株分别接种于培养基中依次进行活化和发酵培养，得到发酵液；发酵液分别离心后与保护剂混合乳化，进行灭活处理，然后冷冻干燥，得到n13菌粉、la85菌粉和lc86菌粉；将n13菌粉、la85菌粉和lc86菌粉按照菌数配比进行混合，得到所述缓解牙龈炎的益生菌剂。

12、优选地，所述保护剂包括甘油、脱脂乳、明胶、糊精、阿拉伯胶、右旋糖酐、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、乳糖、海藻糖、山梨醇或木糖醇中的任意一种或至少两种的组合。

13、第三方面，本发明提供一种减轻牙龈炎症状的牙膏，所述牙膏的组分包括：第二方面所述的益生菌剂、辅助功能性添加剂、摩擦剂、保湿剂、增稠剂、乳化剂、发泡剂和水。

14、优选地，所述辅助功能性添加剂选自甘草酸二钾、柠檬酸锌、苯甲酸钠、焦磷酸四钠、糖精钠、凝血酸或植酸钠中的任意一种或至少两种的组合。

15、优选地，所述摩擦剂选自水合硅石和/或二氧化钛。

16、所述保湿剂选自甘油。

17、所述增稠剂选自黄原胶、纤维素胶或邹波角叉菜提取物中的任意一种或至少两种的组合。

18、所述乳化剂选自月桂醇硫酸酯钠。

19、所述发泡剂选自椰油酰胺丙基甜菜碱。

20、优选地，所述牙膏的组分以质量份数计包括：第一方面所述的益生菌剂5-15份、辅助功能性添加剂30-100份、摩擦剂30-50份、保湿剂10-30份、增稠剂30-60份、乳化剂5-15份、发泡剂5-10份、水20-40份。

21、所述益生菌剂的质量份数可以为5份、6份、7份、8份、9份、10份、11份、12份、13份、14份、15份等。

22、所述辅助功能性添加剂的质量份数可以为30份、35份、40份、45份、50份、55份、60份、65份、70份、75份、80份、85份、90份、100份等。

23、所述摩擦剂的质量份数可以为30份、35份、40份、45份、50份等。

24、所述保湿剂的质量份数可以为10份、15份、20份、25份、30份等。

25、所述增稠剂的质量份数可以为30份、33份、35份、40份、42份、45份、50份、52份、55份、58份、60份等。

26、所述乳化剂的质量份数可以为5份、6份、7份、8份、9份、10份、11份、12份、13份、14份、15份等。

27、所述发泡剂的质量份数可以为5份、6份、7份、8份、9份、10份等。

28、所述水的的质量份数可以为20份、25份、30份、35份、40份等。

29、上述数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。

30、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

31、本发明开发了一种全新的益生菌复配方式，将植物乳杆菌lactobacillusplantarum n13菌株、嗜酸乳杆菌lactobacillus acidophilus la85菌株和副干酪乳杆菌lactobacillus paracasei lc86菌株进行复配，发现三者存在潜在的相互作用，能够相互配合，在改善牙龈炎的功效上协同增效，具体体现在：（1）显著下调牙龈红肿指数；（2）显著下调龈沟深度。在使用菌量一致的情况下，若缺少上述三种菌株的任意一种时，在改善牙龈炎的功效上会显著减弱。该复合益生菌及其制得的益生菌剂为预防或改善牙龈炎提供了新的策略。由于植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和副干酪乳杆菌均为益生菌，因此其在用于制备相关功效产品时，安全性高，且不易产生抗性。

32、本发明所涉及的n13菌株的分类命名为植物乳杆菌lactobacillus plantarum，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏时间为2020年8月6日，保藏编号为cgmcc no.20496，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

33、本发明所涉及的la85菌株的分类命名为嗜酸乳杆菌lactobacillusacidophilus，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏时间为2020年7月20日，保藏编号为cgmcc no.1.12735，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

34、本发明所涉及的lc86菌株的分类命名为副干酪乳杆菌lactobacillusparacasei，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏时间为2020年7月20日，保藏编号为cgmcc no.1.12731，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。