从孕妇宫颈黏液样本中获得胎儿滋养层细胞的装置及方法与流程

文档序号:39601336发布日期:2024-10-11 13:08阅读:81来源:国知局

本发明涉及体外诊断领域,具体为从孕妇宫颈黏液样本中获得胎儿滋养层细胞的装置及方法。


背景技术:

1、在最近的三十年中,人们逐渐开始能够从宫颈黏液样本大量的母体背景细胞中,分离纯化这些来自胚胎的微量细胞,进而分析检测其携带的生物信息。2002年bussani等人等通过细胞形态学的方法从宫颈黏液样本中识别鉴定滋养层细胞,通过单细胞显微操纵,分离获得滋养层细胞。2005年katz-jaffe等人使用荧光免疫组化和显微操作技术,从孕妇宫颈黏液样本中分离出胎儿细胞。同期,bulmer等多名研究者采用滋养层细胞的相对特异性抗体,通过免疫细胞化学染色技术识别滋养层细胞,利用激光纤维切割捕获仪,捕获滋养层细胞,成功地用pcr方法对胎儿dna进行了基因分型。这种方法有一定的局限性,一般一次pap宫颈采样最少包含100万个细胞,由于来自母体的背景细胞数量非常大,滋养层细胞绝对数量和相对数量都非常少,通常每2000个细胞有一个滋养层细胞,一次采样中通常仅有500-1500个滋养层细胞。最终能收集到的滋养层细胞数量取决于待测细胞总量,传统的细胞显微操纵需要先制成细胞涂片进行染色,受制于载玻片面积,一般只能取一次宫颈采样量的二十分之一,大约含25个滋养层细胞,数量非常少,临床样本的质量稍有波动就会导致细胞涂片中的滋养层细胞含量极低甚至没有。而且这种分离捕获方法主要靠人工阅片,病理医生在光学显微镜下几万个细胞中找出几个阳性染色细胞非常困难,易疲劳,漏诊率高;手动操作捕获目标细胞,操作难度大,过程繁琐费时,很难标准化、规范化,限制了其在临床上的应用。

2、近十年来,免疫磁珠技术的发展给tric带来了希望。免疫磁珠技术是在纳米级磁性球体表面用滋养体细胞特异性抗体进行修饰,能够特异性地识别并结合滋养体细胞表面的抗原,从而达到识别和捕获细胞的目的。这一方法具有一定的规范化、程式化的特点,并取得了一定的成功,但人工操作过程还是比较复杂。近两年也有人做了一些重复验证实验,认为tric太少且不稳定,重复性差,无法通过标准免疫磁珠分离捕获技术稳定可靠地得到滋养层细胞,因此无法取代目前的有创伤性的产前筛查和诊断方法。


技术实现思路

1、本发明的技术问题在于提供从孕妇宫颈黏液样本中获得胎儿滋养层细胞的装置及方法,以提供一种自动向混合细胞悬液和免疫磁珠的设备,避免人工进行混合的麻烦,提高投入效率,另外确保免疫磁珠和细胞悬液投入量的精准,使得细胞悬液与免疫磁珠混合接触更加充分,提升捕获成功率和提取量。

2、为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:从孕妇宫颈黏液样本中获得胎儿滋养层细胞的装置,包括防护罩,所述防护罩的底部固定安装有下固定板,所述下固定板中间位置设置有圆环槽且其内转动安装有上齿环,所述上齿环内卡接有卡接架,所述卡接架的下表面转动安装有多组连接环,所述连接环内均卡接有定位管,所述下固定板的两端均设置有限位杆,所述限位杆上滑动连接有多个活动架,所述活动架的上端固定安装有定位板,所述定位板上设置有多组投料管,所述活动架之间设置有多组注入管,所述注入管与所述投料管之间设置有传动组件,所述传动组件能够驱动注入管在投料管和定位管之间移动且移动过程中自动调整角度。

3、作为本发明的进一步方案,所述传动组件包括侧固定架,所述侧固定架固定安装在所述活动架的一侧,所述侧固定架上固定安装有螺纹杆,所述螺纹杆上设置有活动件,所述活动件上均转动安装有连接轴,所述连接轴远离所述活动架的一端卡接有移动座,所述注入管固定安装在所述移动座上,所述注入管与所述投料管位置一一对应,所述注入管的上端固定安装有导入件,所述活动架内侧中间位置均固定安装有连接板,所述连接板上固定安装有齿牙,所述连接轴靠近所述活动架的一端固定安装有侧齿轮,所述侧齿轮能够与所述齿牙啮合。

4、作为本发明的进一步方案,所述活动件上对应所述螺纹杆的位置均转动安装有螺纹件,所述螺纹件的上端均固定安装有传动轮,所述传动轮外套接有传动带,一侧所述传动轮的上表面固定安装有限位齿轮,所述活动件的上表面转动安装有驱动齿轮,所述驱动齿轮与所述限位齿轮啮合。

5、作为本发明的进一步方案,所述上齿环转动安装在所述下固定板的上表面,所述上齿环内侧对称安装有限位板,所述限位板的下表面均固定安装有限位件,所述卡接架的两端对应所述限位件的位置开设有限位槽,所述防护罩的一侧固定安装有侧安装板,所述侧安装板上转动安装有主动齿轮,所述主动齿轮与所述上齿环啮合。

6、作为本发明的进一步方案,所述连接环的下表面均固定安装有卡接齿,所述卡接齿外套接有传动链,所述下固定板的下表面固定安装有固定齿环,边缘所述卡接齿的下表面固定安装有移动齿轮,所述移动齿轮与所述固定齿环啮合。

7、作为本发明的进一步方案,所述投料管的上端固定安装有导料件,所述投料管的下端固定安装有下连接件,所述下连接件内固定安装有多个弹性件,所述弹性件的上端固定安装有密封板,所述密封板能够将下连接件下端密封,所述注入管的上端固定安装有导入件,所述导入件的上端能够导入到所述下连接件内,所述导入件外侧开设有多个溢入槽。

8、作为本发明的进一步方案,所述防护罩的上表面固定安装有上固定盖,所述上固定盖上对应所述投料管的位置均开设有滑槽,所述侧安装板上固定安装有驱动电机,所述驱动电机的输出端与所述主动齿轮固定连接。

9、作为本发明的进一步方案,所述下固定板内部设置有制冷设备,所述注入管的下端设置有弹簧阀,所述弹簧阀的弹性杆自然状态下从注入管的下端导出。

10、作为本发明的进一步方案,所述活动件上固定安装有转动电机,所述转动电机的输出端与所述驱动齿轮固定连接,所述活动架与所述限位杆为阻尼连接。

11、一种从孕妇宫颈黏液样本中获得胎儿滋养层细胞的方法,该从孕妇宫颈黏液样本中获得胎儿滋养层细胞的方法的具体步骤如下:

12、步骤一:将制备的细胞悬液注入到所述投料管内;

13、步骤二:移动一组所述活动架带动注入管移动到投料管下方;

14、步骤三:驱动所述注入管上移使得导入件进入到下连接件内,使得细胞悬液进入到注入管内;

15、步骤四:移动所述活动架将带有细胞悬液的注入管移动到所述定位管上方;

16、步骤五:驱动所述注入管下移,注入管下移后自动倾斜后导入到定位管内,并使得注入管下端抵触在定位管内壁上;

17、步骤六:所述定位管挤压注入管底部弹簧阀使得细胞悬液注入到定位管内;

18、步骤七:然后再向所述定位管内加入免疫磁珠;

19、步骤八:然后驱动所述上齿环转动使得免疫磁珠与细胞悬液充分接触混合;

20、步骤九:然后从所述上齿环之间取下卡接架,将卡接架置入到细胞分选仪内进行分选。

21、与现有技术相比,本发明的有益效果是:

22、1、本发明中通过注入管依次投入细胞悬液和免疫磁珠等,弹簧阀使得挤压上移使得注入管下端打开,从而使得细胞悬液可以从注入管下端流出,然后沿着定位管内壁流入到定位管底部,确保注入细胞悬液等可以缓慢注入到定位管内部,维持细胞悬液的稳定性,注入细胞悬液后再次通过上述步骤向定位管内注入免疫磁珠,使得免疫磁珠和细胞悬液均无需人工注入定位管,通过控制弹簧阀打开视角可以精准控制注入定位管内细胞悬液和免疫细胞的量,确保投入定位管内各组分投量更加精准,避免人工手动注入容易误差较大的问题,可以多组定位管实验组同时进行操作,提高提取效率。

23、2、本发明中上齿环转动带动卡接架转动,卡接架转动带动定位管转动,卡接架转动带动移动齿轮转动,移动齿轮与固定齿环相互作用从而驱动移动齿轮转动,移动齿轮转动带动边缘卡接齿转动,卡接齿与传动链相互作用从而驱动多组连接环同时转动,连接环转动带动多组定位管在卡接架内自传,使得定位管在随着上齿环转动的同时也自传,从而使得定位管内的细胞悬液和免疫磁珠充分接触,提升捕获成功率和提取量。

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