可用 于治疗KRAS相关疾病（例如，与KRAS中的突变和/或KRAS表达、水平和/或活性改变相 关的疾病，和/或需要KRAS的疾病，和/或通过调节KRAS的表达、水平和/或活性可治疗 的疾病），例如增殖性疾病，包括但不限于固体或液体癌、腺癌、结肠直肠癌、晚期和/或转 移的结肠直肠癌、结肠癌、肺癌、非小细胞肺癌和肺腺癌、急性髓细胞性肺癌、膀胱癌、脑癌、 乳癌、宫颈癌、子宫内膜癌、胃癌、头颈癌、肾癌、白血病、骨髓增生异常综合症、髓系白血病、 肝癌、黑素瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、睾丸癌、甲状腺癌、心面皮肤（CFC)综合征和努南 综合征，以及类似和相关的疾病。本公开还提供了治疗患有至少部分由KRAS表达或过度表 达或活性过高介导的病理状态的人类个体的方法，所述方法包括向所述个体施用治疗有效 量的针对KRAS的RNAi剂的步骤。
[0024] 本公开的多种实施方案包括：
[0025] 在一个实施方案中，本公开涉及一种组合物，其包含含有有义链和反义链的RNAi 剂，其中反义链包含与例如表1至6中任意一个所提供的针对KRAS特异性的RNAi剂（或 对KRAS特异性的重叠性RNAi剂的任何集合）的反义链差异0、1、2或3个核苷酸的至少15 个连续核苷酸。在另一个实施方案中，本公开涉及一种组合物，其包含含有有义链和反义链 的RNAi剂，其中有义链包含与来自本文提供的任何序列中的RNAi剂的有义链差异0、1、2 或3个核苷酸的至少15个连续核苷酸。在另一个实施方案中，本公开涉及一种组合物，其 包含含有第一链和第二链的RNAi剂，其中第一链包含与本文提供的任何RNAi剂的第一链 的序列差异〇、1、2或3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，并且第二链包含与本文提供的任 何RNAi剂的第二链的序列差异0、1、2或3个核苷酸的至少15个连续核苷酸。
[0026] 特定的双链体包括表1中列出的示例性未修饰的序列（"通用序列（generic) "） 和示例性修饰序列。除所描述的示例性修饰之外，其它修饰的变体也在考虑的范围内并且 可以使用提供的核苷酸序列来制备这些修饰的变体。在多种实施方案中，第一链和/或第 二链是修饰的或未修饰的或是一个是修饰的、另一个是未修饰的组合。
[0027] 包含本文所述的反义链和有义链的RNAi剂
[0028] 在一个实施方案中，本公开涉及一种组合物，其包含含有反义链的RNAi剂，其中 反义链包含与选自本文的表（例如表1至6中的任意一个）中所提供的任何序列（或序列 的重叠组）的针对KRAS的RNAi剂的反义链差异0、1、2或3个核苷酸的至少15个连续核 苷酸。在一个实施方案中，本公开涉及一种组合物，其包含含有有义链和反义链的RNAi剂， 其中反义链包含与选自本文的表（例如表1至6中的任意一个）中所提供的任何序列（或 序列的重叠组）的针对KRAS的RNAi剂的反义链差异0个核苷酸的至少15个连续核苷酸。 在另一个实施方案中，本公开涉及一种组合物，其包含含有有义链和反义链的RNAi剂，其 中反义链的序列包含选自本文提供的任何序列的RNAi剂的反义链序列。在另一个实施方 案中，本公开涉及一种组合物，其包含含有第一链和第二链的RNAi剂，其中第一链的序列 是本文提供的任何RNAi剂的第一链的序列。特定的双链体包括以上提供的以及在表1的 一处或多处所列的那些特定的双链体。各个组合物的其它修饰的序列（例如包含一个或多 个修饰的碱基的序列）也被看作是本公开的一部分。
[0029] 表 L 针对 KRAS 的 RNAi 剂的 SEQ ID NOs
[0030] 在表1中提供的是各种KRAS RNAi双链体的别名；未修饰的（例如"通用的"）有 义序列和反义序列的SEQ ID NOs;示例性修饰的有义序列和反义序列的SEQ ID NOs。
[0031] 下表1提供了针对KRAS的各种RNAi剂的有义链和反义链的未修饰和示例性修饰 的序列的SEQ ID NOs。在表2和表3中更详细地提供了 SEQ ID NO所代表的各序列的碱 基组成。表4显示了这些KRAS RNAi剂的重叠组。表5和6显示了各种KRAS RNAi剂的效 力。
[0032] 表1.针对KRAS的RNAi剂的第一链和第二链（例如有义链和反义链）的未修饰 和示例性修饰的序列的SEQ ID NOs
[0033]
【主权项】
1. 一种组合物，其包含含有有义链和反义链的RNAi剂，其中反义链包含与表1中提供 的针对KRAS特异性的RNAi剂的反义链差异0、1、2或3个核苷酸的至少15个连续核苷酸。
2. 根据权利要求1所述的组合物，其中组合物还包含针对KRAS的第二RNAi剂。
3. 根据权利要求1所述的组合物，其中RNAi剂包含至少一条修饰的主链和/或至少一 个2'修饰的核苷酸。
4. 根据权利要求1所述的组合物，其中RNAi剂连接至选自以下的一种或多种物质：诊 断化合物、报道基团、交联剂、赋予核酸酶抗性的部分、天然或异常核碱基、亲脂分子、胆固 醇、脂质、凝集素、类固醇、熊果醇、龙舌兰皂苷配基、薯蓣皂苷配基、萜、三萜、菝葜皂苷元、 无羁萜、表木栓醇衍生化的石胆酸、维生素、糖、葡聚糖、普鲁兰多糖、壳多糖、脱乙酰壳多 糖、合成糖、低聚乳酸酯15聚物、天然聚合物、低分子量或中分子量聚合物、菊糖、环糊精、 透明质酸、蛋白质、蛋白质结合剂、整联蛋白靶向分子、聚阳离子、肽、多胺、肽模拟物和/或 转铁蛋白。
5. -种组合物，其包含含有第一链和第二链的RNAi剂，其中第一链和第二链包含与表 1中提供的针对KRAS特异性的RNAi剂的第一链和第二链分别差异0、1、2或3个核苷酸的 至少15个连续核苷酸。
6. 根据权利要求1所述的组合物，其中组合物包含针对KRAS的第二RNAi剂。
7. 根据权利要求1所述的组合物，其中RNAi剂包含硫代磷酸酯和/或2' -修饰的核 苷酸。
8. 根据权利要求1所述的组合物，其中RNAi剂连接至一种或多种物质，所述物质选 自：诊断化合物、报道基团、交联剂、赋予核酸酶抗性的部分、天然或异常核碱基、亲脂分子、 胆固醇、脂质、凝集素、类固醇、熊果醇、龙舌兰皂苷配基、薯蓣皂苷配基、萜、三萜、菝葜皂苷 元、无羁萜、表木栓醇衍生化的石胆酸、维生素、糖、葡聚糖、普鲁兰多糖、壳多糖、脱乙酰壳 多糖、合成糖、低聚乳酸酯15聚物、天然聚合物、低分子量或中分子量聚合物、菊糖、环糊 精、透明质酸、蛋白质、蛋白质结合剂、整联蛋白靶向分子、聚阳离子、肽、多胺、肽模拟物和/ 或转铁蛋白。
9. 一种治疗个体中KRAS相关疾病的方法，该方法包括向所述个体施用治疗有效量的 组合物的步骤，所述组合物包含含有有义链和反义链的RNAi剂，其中反义链包含与表1中 提供的针对KRAS特异性的RNAi剂的反义链差异0、1、2或3个核苷酸的至少15个连续核 苷酸。
10. 根据权利要求9所述的方法，其中的KRAS相关疾病是增殖性疾病、心面皮肤（CFC) 综合征或努南综合征。
11. 根据权利要求9所述的方法，其中该方法还包括施用针对增殖性疾病、心面皮肤 (CFC)综合征或努南综合征的额外治疗的步骤。
12. 根据权利要求11所述的方法，其中该方法还包括施用针对KRAS的另外的RNAi剂 的步骤。
13. -种抑制个体中KRAS表达的方法，该方法包括向所述个体施用治疗有效量的组合 物的步骤，所述组合物包含含有有义链和反义链的RNAi剂，其中反义链包含与表1中提供 的针对KRAS特异性的RNAi剂的反义链差异0、1、2或3个核苷酸的至少15个连续核苷酸。
14. 根据权利要求13所述的方法，其中的KRAS相关疾病是增殖性疾病、心面皮肤 (CFC)综合征或努南综合征。
15. -种用于RNAi制剂中的药物，所述RNAi制剂包含含有有义链和反义链的RNAi剂， 其中反义链包含与表1中提供的针对KRAS特异性的RNAi剂的反义链差异0、1、2或3个核 苷酸的至少15个连续核苷酸。
16. 位于药学有效的制剂中的以上的任何组合物。
17. 用于治疗个体中KRAS相关疾病的方法中的权利要求1所述的组合物，所述方法包 括向所述个体施用治疗有效量的权利要求1所述的组合物的步骤。
18. 根据权利要求1所述的组合物用于生产治疗KRAS相关疾病的药物的用途。
19. 根据权利要求1所述的组合物，其中全部嘧啶均是2' 0-甲基修饰的核苷酸。
20. 根据权利要求5所述的组合物，其中全部嘧啶均是2' 0-甲基修饰的核苷酸。
21. 根据权利要求1所述的组合物，其中的RNAi剂在MiaPaca2细胞中的EC50不超过 约 InM。
22. 根据权利要求1所述的组合物，其中的RNAi剂能够以10nM浓度在RK0细胞中体外 抑制KRAS的表达至少约70%。
【专利摘要】本公开涉及RNAi剂，所述RNAi剂可用于使用治疗有效量的针对KRAS的RNAi剂治疗KRAS相关疾病方法中，所述疾病为例如增殖性疾病，包括但不限于固体或液体癌、腺癌、结肠直肠癌、晚期和/或转移的结肠直肠癌、结肠癌、肺癌、非小细胞肺癌和肺腺癌、急性髓细胞性肺癌、膀胱癌、脑癌、乳癌、宫颈癌、子宫内膜癌、胃癌、头颈癌、肾癌、白血病、骨髓增生异常综合症、髓系白血病、肝癌、黑素瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、睾丸癌、甲状腺癌、和心面皮肤(CFC)综合征和努南综合征，以及类似和相关的疾病。
【IPC分类】A61P35-00, C12N15-113, A61K31-713
【公开号】CN104583406
【申请号】CN201380035099
【发明人】B·贝滕科特, S·米尔斯坦, I·图德杰尔斯卡, E·麦克唐纳, M·小司琪拉巴赫, F·P·斯泰格迈尔, M·瓦尔穆特, K·甘姆帕, D·许斯肯, M·斯塔普, J·魏勒, Z·雅加尼
【申请人】诺华股份有限公司
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2013年4月30日
【公告号】CA2872304A1, EP2844757A2, US20150238515, WO2013166004A2, WO2013166004A3