编码在植物中提供观赏性开花表型的突变蛋白的基因的制作方法_2

文档序号:8454056阅读:来源:国知局
3] 因此,本发明的目的是,满足本领域的上述需求,即为观赏性开花表型提供遗传方 面的起因,W及其他目的。
[0014] 根据本发明,通过提供如所附权利要求书中概述的蛋白、核酸序列(cDNA或编码 序列)和基因来满足本目的,W及其他目的。
[0015]具体地,根据本发明的第一个方面,通过包含在伽蓝菜属植物的甲基转移酶蛋白 位置136处的氨基酸组氨酸和位置338处的氨基酸丙氨酸的氨基酸取代的蛋白,藉W本氨 基酸取代提供本伽蓝菜属植物中的观赏性开花表型来满足本目的。
[0016]具体地,根据本发明的第一个方面,通过包含在伽蓝菜属植物的甲基转移酶蛋白 位置136处的氨基酸组氨酸的氨基酸取代的蛋白,藉W本氨基酸取代提供本伽蓝菜属植物 中的观赏性开花表型来满足本目的。
[0017]具体地,根据本发明的第一个方面,通过包含在伽蓝菜属植物的甲基转移酶蛋白 位置338处的氨基酸丙氨酸的氨基酸取代的蛋白,藉W本氨基酸取代提供本伽蓝菜属植物 中的观赏性开花表型来满足本目的。
[0018] 根据该第一个方面的优选的实施方案,本发明涉及包含如图7中所述的具有位置 136处的氨基酸组氨酸和位置338处的氨基酸丙氨酸的氨基酸取代的氨基酸序列的蛋白, 和在蛋白具有甲基转移酶活性的条件下与其具有至少70%、优选地至少85%、更优选地至 少90 %、甚至更优选地至少95 %W及最优选地99 %序列同一性的蛋白。
[0019] 根据该第一个方面的优选的实施方案,本发明涉及包含如图7中所述的具有位 置136处的氨基酸组氨酸的氨基酸取代的氨基酸序列的蛋白,和在蛋白具有甲基转移酶活 性的条件下与其具有至少70%、优选地至少85%、更优选地至少90%、甚至更优选地至少 95%W及最优选地99 %序列同一性的蛋白。
[0020] 根据该第一个方面的优选的实施方案,本发明涉及包含如图7中所述的具有位 置338处的氨基酸丙氨酸的氨基酸取代的氨基酸序列的蛋白,和在蛋白具有甲基转移酶活 性的条件下与其具有至少70%、优选地至少85%、更优选地至少90%、甚至更优选地至少 95%W及最优选地99 %序列同一性的蛋白。
[0021] 在本发明的上下文中,在如图7中所示蛋白序列的整个长度上,该些蛋白展示至 少70 %、优选地至少85 %、更优选地至少90 %、甚至更优选地至少95 %W及最优选地99 % 序列同一性的条件下,W及在突变了相应于图7中所示的蛋白序列的位置136或338的至 少一个位置的条件下考虑同源蛋白。
[0022] 图1和图7中显示的氨基酸序列是不提供观赏性开花表型的蛋白的氨基酸序列, 且图3和图8中显示的氨基酸序列是通过突变,即在本情形中氨基酸取代提供观赏性开花 表型的蛋白的氨基酸序列。在图3和8中,显示了氨基酸取代、或突变,并且缺失、截短和氨 基酸插入被包括在本发明的上下文中。
[0023] 可通过导致突变的蛋白的编码序列中的单一基因突变,即在位置136或338处的 氨基酸取代或在位置136和338处的氨基酸取代,提供本观赏性开花表型。遗传实验表明, 该突变是显性的,即突变纯合子和杂合子伽蓝菜属植物两者均显示观赏性开花表型,然而 优选杂合子伽蓝菜属植物。
[0024] 根据本发明的该第一个方面的更优选的实施方案,本蛋白包括在位置338处的丙 氨酸(A或Ala)向丝氨酸(S或Ser)氨基酸取代,W及在位置136处的组氨酸化或化S) 向精氨酸巧或Arg)氨基酸取代,然而W其他氨基酸的代替被包括在本发明的上下文中,诸 如W半脫氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、亮氨酸、甲 硫氨酸、天冬醜胺、脯氨酸、谷氨醜胺、精氨酸、苏氨酸、额氨酸、色氨酸和酪氨酸的代替。
[0025] 根据本发明的该第一个方面的更优选的实施方案,本蛋白包括在位置338处的丙 氨酸(A或Ala)向丝氨酸(S或Ser)氨基酸取代,然而W其他氨基酸的代替被包括在本发 明的上下文中,诸如W半脫氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、 赖氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、天冬醜胺、脯氨酸、谷氨醜胺、精氨酸、苏氨酸、额氨酸、色氨酸和 酪氨酸的代替。
[0026] 根据本发明的该第一个方面的更优选的实施方案,本蛋白包括在位置136处的组 氨酸化或化S)向精氨酸巧或Arg)氨基酸取代,然而W其他氨基酸的代替包括在本发明 的上下文中,诸如W半脫氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、赖 氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、天冬醜胺、脯氨酸、谷氨醜胺、精氨酸、苏氨酸、额氨酸、色氨酸和酪 氨酸的代替。
[0027] 根据本发明的该第一个方面的甚至更优选的实施方案,本蛋白包括如图3或8中 显示的氨基酸序列。尽管不同地表示,本蛋白基本上具有如图3或8中显示的氨基酸序列。
[0028] 根据本发明的第二个方面,该蛋白包括如图1中显示的氨基酸序列中的至少一个 突变,其中至少一个突变提供伽蓝菜属植物中的观赏性开花表型。具有图1中显示的蛋白 是观赏性开花表型的起因的知识,使用标准的手段和方法,例如通过EMS或定点诱变,随后 适当的选择,例如通过测序或PCR,本领域技术人员能够容易地突变该蛋白,由此提供显示 观赏性开花表型的伽蓝菜属植物。作为替代,本基因可通过常规育种引入育种种质中。
[0029] 根据本发明的该些第一和第二方面的特别优选的实施方案,所公开的蛋白获自、 或起源自观赏性开花Kalanchoeblossfeldiana植物。
[0030] 根据第H方面,本发明涉及编码本蛋白的核酸序列,优选地基本上如图4中显示 的核酸序列。
[0031] 根据第四个方面,本发明涉及能够被转录为本核酸序列的基因。尽管不同地表示, 本发明包含能够在适当的条件下作为转录mRNA模板的基因,该mRNA随后被翻译为本发明 的蛋白序列。
[0032] 根据第五个方面,本发明涉及本蛋白、本核酸序列或本基因用于选择观赏性开花 伽蓝菜属植物的用途。此类选择可包括优选地通过例如杂交、PCR、ELISA、限制酶切分析或 Nodhern/Southern印迹鉴定观赏性开花伽蓝菜属植物,优选地在发育的早期阶段鉴定,由 此促进现有的和新的伽蓝菜属植物的育种进程。
[0033] 本用途优选地用于选择选自由W下组成的组的观赏性开花伽蓝菜属植物: Kalanchoeadelae、Kalanchoearborescens、Kalanchoebeauverdii、Kalanchoe beharensis、Kalanchoebentii、Kalanchoeblossfeldiana、Kalanchoebouvetii、 Kalanchoebracteata、Kalanchoecampanulata、Kalanchoecrenata、Kalanchoe crundal1ii、Kalanchoedaigremontiana、Kalanchoedelagoensis、Kalanchoe dinklagei、Kalanchoeeriophylla、Kalanchoefarinacea、Kalanchoefedtschenkoi、 Kalanchoefiguereidoi、Kalanchoeflammea、Kalanchoegastonis、Kalanchoe glaucescens、Kalanchoegracilipes、Kalanchoegrandidieri、Kalanchoegrandiflora、 Kalanchoehildebrantii、Kalanchoejongmansii、Kalanchoekewensis、伽 蓝 莱、Kalanchoelaetivirens、Kalanchoelateritia、Kalanchoelaxiflora、Kalanchoe 1inearifolia、Kalanchoelongiflora、Kalanchoeluciae、Kalanchoemacrochlamys、 Kalanchoemanginii、Kalanchoemarnieriana、Kalanchoemarmorata、Kalanchoe millottii、Kalanchoeminiata、Kalanchoenyikae、Kalanchoeobtusa、Kalanchoe orgyalis、Kalanchoepeltata、Kalanchoepetitiana、Kalanchoepinnata、Kalanchoe porphyrocalyx、Kalanchoeprolifera、Kalanchoepubescens、Kalanchoepumila、 Kalanchoequartiniana、Kalanchoerhombopilosa、Kalanchoerobusta、Kalanchoe rolandi、Kalanchoerosei、Kalanchoerotundifolia、Kalanchoeschizophylla、 Kalanchoeserrata、Kalanchoesexangularis、Kalanchoestreptantha、Kalanchoe suarezensis、Kalanchoesynsepala、Kalanchoesynsepalaf.dissecta、Kalanchoe thyrsiflora、
当前第2页1 2 3 4 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1