[0027] 本实施例富锶发菜细胞的制备方法，具体操作步骤如下： 1)配制培养基： A :配制基本培养基： I :原料预溶解： a :称取CaCl2 ? 2H20 2. 05g、MgS04 ? 7H20 3. 75g，用蒸馏水溶解，定容至500mL，得到溶 液A，常温保存备用； b:称取 NaMo04.2H20 20mg、ZnS04.7H20 10mg、H3B04 1 43mg、MnCl2.4H20 90mg、EDTA-Na2 50mg、FeS04 ? 7H20 240mg、CuS04 ? 5H20 40mg、CoCl2 ? 6H20 0? 5mg、梓檬酸 30mg，用蒸馈水溶 解后，定容至500mL，得到溶液B，4°C冷藏备用； c :称取K2HP04 ? 3H20 2g，用蒸馏水溶解后，定容至500mL，得到溶液C，常温保存备用； d :称取Na2Si03 ? 9H20 2. 9g，用蒸馏水溶解，定容至500mL，得到溶液D，常温保存备用； II :用移液管准确吸取溶液A 20mL，溶液B 2mL混合，加蒸馏水定容至1000mL，分装到 10个250mL锥形瓶中，每瓶100mL，包扎，121°C湿法灭菌20min，得到溶液E ;用移液管准确 吸取溶液C 20mL，溶液D 20mL混合后，加入NaN032. 5g，加蒸馏水定容至1000mL，分装到10 个250mL锥形瓶中，每瓶100mL，包扎，121°C湿法灭菌20min，得到溶液F ; III :将溶液E和溶液F放在超净工作台无菌条件下冷却至室温，混合均匀后，即得所述 的基本培养基。
[0028] B:配制富锶培养基： 称取SiCl250mg，蒸馏水溶解后，定容至50mL，配制成lmg/mL的母液，采用过滤法对母 液进行除菌，取灭菌后的母液2mL加入到998mL基本培养基中，混合均匀，调整溶液的PH值 为7. 5,得到富锶培养基，该培养基中SiCl2浓度为2mg/L。
[0029] C :配制固体培养基：取100g基本培养基加入1. 7g琼脂，制得固体培养基。
[0030] 2)发菜细胞菌种的分离纯化 A :将干发菜用蒸馏水清洗3次，晾干后用75%的酒精消毒0. 8min，然后用蒸馏水冲洗 干净，得到洁净的干发菜； B :将步骤A制备的洁净的干发菜浸泡于基本培养基中10h，然后用玻璃均浆器均浆，得 到发菜细胞接种液； C :将步骤B制备的发菜细胞接种在固体培养基上划线接种，经5~6次次纯化培养得到 发菜细胞培养物； D:挑取发菜细胞培养物中纯化的单藻落，置于基本培养基中充气扩大培养，收获培养 至对数生长期的细胞，即得发菜细胞。
[0031] 3)富锶发菜细胞的培养 在无菌条件下，将步骤2)制备的发菜细胞接种在富锶培养基中，放入25°C的恒温生化 培养箱箱中培养，培养的光照周期为12h光照12h黑暗，光照强度为2000LUX，培养20天，静 置培养液，过滤分离出发菜细胞，将分离出的发菜细胞用蒸馏水洗涤三次后，倒入平板中， 冷冻干燥，冷冻干燥过程中的捕水仓温度为_53°C，时间为18h，即得富锶发菜细胞。
[0032] 实施例2 本实施例富锶发菜细胞为将发菜细胞在富锶培养基中培养获得，其中富锶培养基为将 SrCl2添加至基本培养基中混合制得，SrCl 2的浓度为4mg/L ;其中每1000mL基本培养基主 要由以下质量的原料配制而成：NaN03 250mg，MgS04 ? 7H20 75mg，CaCl2 ? 2H20 36mg，H3B04 0? 286mg，MnCl2 ? 4H20 0? 18mg，ZnS04 ? 7H20 0? 02mg，CuS04? 5H20 0? 08mg，NaMo04 ? 2H20 0? 04mg，CoC12? 6H20 0? OOlmg，EDTA-Na2 (乙二酸四乙酸二钠）0? lmg，FeS04 ? 7H20 0? 48mg， 梓樣酸 〇? 〇6mg，Na2Si03 58mg，K2HP04 40mg。
[0033] 本实施例富锶发菜细胞的制备方法，具体操作步骤如下： 1)配制培养基： A :配制基本培养基： I :原料预溶解： a :称取CaCl2 ? 2H20 2. 05g、MgS04 ? 7H20 3. 75g，用蒸馏水溶解，定容至500mL，得到溶 液A，常温保存备用； b:称取 NaMo04.2H20 20mg、ZnS04.7H20 10mg、H3B04 1 43mg、MnCl2.4H20 90mg、EDTA-Na2 50mg、FeS04 ? 7H20 240mg、CuS04 ? 5H20 40mg、CoCl2 ? 6H20 0? 5mg、梓檬酸 30mg，用蒸馈水溶 解后，定容至500mL，得到溶液B，4°C冷藏备用； c :称取K2HP04 ? 3H20 2g，用蒸馏水溶解后，定容至500mL，得到溶液C，常温保存备用； d :称取Na2Si03 ? 9H20 2. 9g，用蒸馏水溶解，定容至500mL，得到溶液D，常温保存备用； II :用移液管准确吸取溶液A 20mL，溶液B 2mL混合，加蒸馏水定容至lOOOmL，分装到 10个250mL锥形瓶中，每瓶lOOmL，包扎，121°C湿法灭菌20min，得到溶液E ;用移液管准确 吸取溶液C 20mL，溶液D 20mL混合后，加入NaN032. 5g，加蒸馏水定容至1000mL，分装到10 个250mL锥形瓶中，每瓶100mL，包扎，121°C湿法灭菌20min，得到溶液F ; III :将溶液E和溶液F放在超净工作台无菌条件下冷却至室温，混合均匀后，即得所述 的基本培养基。
[0034] B:配制富锶培养基： 称取SiCl250mg，蒸馏水溶解后，定容至50mL，配制成lmg/mL的母液，采用过滤法对母 液进行除菌，取灭菌后的母液4mL加入到996mL基本培养基中，混合均匀，调整溶液的pH值 为7. 5,得到富锶培养基，该培养基中SiCl2浓度为4mg/L。
[0035] C :配制固体培养基：取100g基本培养基加入1. 7g琼脂，制得固体培养基。
[0036] 2)发菜细胞菌种的分离纯化 A :将干发菜用蒸馏水清洗4次，晾干后用75%的酒精消毒1. Omin，然后用蒸馏水冲洗 干净，得到洁净的干发菜； B :将步骤A制备的洁净的干发菜浸泡于基本培养基中8h，然后用玻璃均浆器均浆，得 到发菜细胞接种液； C :将步骤B制备的发菜细胞接种在固体培养基上划线接种，经5~6次纯化培养得到发 菜细胞培养物； D:挑取发菜细胞培养物中纯化的单藻落，置于基本培养基中充气扩大培养，收获培养 至对数生长期的细胞，即得发菜细胞。
[0037] 3)富锶发菜细胞的培养 在无菌条件下，将步骤2)制备的发菜细胞接种在富锶培养基中，放入25°C的恒温生化 培养箱箱中培养，培养的光照周期为12h光照12h黑暗，光照强度为2000LUX，培养15天，静 置培养液，过滤分离出发菜细胞，将分离出的发菜细胞用蒸馏水洗涤三次后，倒入平板中， 冷冻干燥，冷冻干燥过程中的捕水仓温度为_53°C，时间为18h，即得富锶发菜细胞。
[0038] 实施例3 本实施例富锶发菜细胞为将发菜细胞在富锶培养基中培养获得，其中富锶培养基为将 SrCl2添加至基本培养基中混合制得，SrCl 2的浓度为0. 5mg/L ;其中每1000mL基本培养基 主要由以下质量的原料配制而成：NaN03 250mg，MgS04 ? 7H20 75mg，CaCl2 ? 2H20 36mg，H3B04 0? 286mg，MnCl2 ? 4H20 0? 18mg，ZnS04 ? 7H20 0? 02mg，CuS04 ? 5H20 0? 08mg，NaMo04 ? 2H20 0? 04mg，CoC12 ? 6H20 0? OOlmg，EDTA-Na2 (乙二酸四乙酸二钠）0? lmg，FeS04 ? 7H20 0? 48mg， 梓樣酸 〇? 〇6mg，Na2Si03 58mg，K2HP04 40mg。
[0039] 本实施例富锶发菜细胞的制备方法，具体操作步骤如下： 1)配制培养基： A :配制基本培养基： I :原料预溶解： a :称取CaCl2 ? 2H20 2. 05g、MgS04 ? 7H20 3. 75g，用蒸馏水溶解，定容至500mL，得到溶 液A，常温保存备用； b:称取 NaMo04.2H20 20mg、ZnS04.7H20 10mg、H3B04 1 43mg、MnCl2.4H20 90