一种刺五加多糖的工业化生产方法及其应用_2

文档序号:9410334阅读:来源:国知局
温度65°C、萃取时间3h,分 离压力llMPa、分离温度37°C、分离时间3h。
[0030] (3)提取:所述刺五加萃余物用等质量的水30°C浸泡2. 5h,水中添加原料质量 0. 01-0. 05%的混合酶;混合酶中各组分比例为蛋白酶:纤维素酶:果胶酶4:1:0. 5 ; 然后用pH值为5. 6的水进行连续逆流萃取,料液质量比为1:20,萃取温度68°C,萃取 时间4h。
[0031] (4)吸附:所述萃取液粗过滤除杂后,经D101树脂吸附,然后依次用2BV的水和 1BV浓度10wt%的乙醇溶液洗脱,得到水洗液以及低度醇洗脱液两部分;所述水洗液通过 0. 22ym的滤膜过滤得到透过液,将透过液通过0. 01ym的滤膜,得到截留液;所述截留液、 低度醇洗脱液分别浓缩至固含量30%,得截留浓缩液、刺五加低度醇浓缩液; 粗过滤是指萃取液降温后加入萃取液重量3%的珍珠岩,搅拌均匀后,将萃取液通过 500目的板式过滤机过滤,得到澄清透明的萃取液。
[0032] (5)干燥:所述刺五加低度醇浓缩液冷冻干燥,得到刺五加苷E;所述截留浓缩液 喷雾干燥,得到刺五加多糖。
[0033] 本方法所述刺五加苷E得率为92. 4%,刺五加多糖得率为97. 5%,平均分子量为 18KD;阿拉伯糖:木糖:葡萄糖:甘露糖=7. 5: 24: 8: 1.5。
[0034] 实施例3 本刺五加多糖的工业化生产方法采用下述具体工艺。
[0035] (1)预处理:选取刺五加的根及根茎部分,含水量在12wt%,粉碎至20目筛通过率 90%以上、80目筛通过率10%以下,得到刺五加粉料,备用。
[0036] (2)除杂:所述刺五加粉料通过超临界萃取,去除小分子杂质,得到刺五加萃余 物; 超临界萃取条件为C(V流量1250L/h、萃取压力22MPa、萃取温度47°C、萃取时间2h,分 离压力8MPa、分离温度28°C、分离时间1. 5h。
[0037] (3)提取:所述刺五加萃余物用等质量的水28°C浸泡3. 5h,水中添加原料质量 0. 05%的混合酶;混合酶中各组分比例为蛋白酶:纤维素酶:果胶酶3: 2:0. 2 ; 然后用pH值为4的水进行连续逆流萃取,料液质量比1:18,萃取温度72°C,萃取时间 2h〇
[0038] (4)吸附:所述萃取液粗过滤除杂后,经AB-8树脂吸附,然后依次用1. 5BV的水和 2. 5BV浓度8wt%的乙醇溶液洗脱,得到水洗液以及低度醇洗脱液两部分;所述水洗液通过 0. 22ym的滤膜过滤得到透过液,将透过液通过0. 01ym的滤膜,得到截留液;所述截留液、 低度醇洗脱液分别浓缩至固含量24%,得截留浓缩液、刺五加低度醇浓缩液; 粗过滤是指萃取液降温后加入萃取液重量1. 5%的珍珠岩,搅拌均匀后,将萃取液通过 300目的板式过滤机过滤,得到澄清透明的萃取液。
[0039] (5)干燥:所述刺五加低度醇浓缩液冷冻干燥,得到刺五加苷E;所述截留浓缩液 冷冻干燥,得到刺五加多糖。
[0040] 本方法所述刺五加苷E得率为93. 1%;刺五加多糖得率为96. 7%,平均分子量为 10KD;阿拉伯糖:木糖:葡萄糖:甘露糖=6: 20: 6: 2。
[0041] 实施例4 本刺五加多糖的工业化生产方法采用下述具体工艺。
[0042] (1)预处理:选取刺五加的根及根茎部分,含水量在15wt%,粉碎至20目筛通过率 90%以上、80目筛通过率10%以下,得到刺五加粉料,备用。
[0043] (2)除杂:所述刺五加粉料通过超临界萃取,去除小分子杂质,得到刺五加萃余 物; 超临界萃取条件为C(V流量1370L/h、萃取压力27MPa、萃取温度54°C、萃取时间2. 5h, 分尚压力9MPa、分尚温度26°C、分尚时间lh。
[0044] (3)提取:所述刺五加萃余物用等质量的水20°C浸泡4h,水中添加原料质量0. 01% 的混合酶;混合酶中各组分比例为蛋白酶:纤维素酶=4:2。
[0045] 然后用pH值为7的水进行连续逆流萃取,料液质量比为1:20,萃取温度81°C,萃 取时间4h。
[0046] (4)吸附:所述萃取液粗过滤除杂后,经D101树脂吸附,然后依次用1的水和 3BV浓度9wt%的乙醇溶液洗脱,得到水洗液以及低度醇洗脱液两部分;所述水洗液通过 0? 22ym的过滤得至_过液,将透过液通过0? 01ym的滤膜,得至IJ截留液;所述截留液、低度 醇洗脱液分别浓缩至固含量15-30%,得截留浓缩液、刺五加低度醇浓缩液; 粗过滤是指萃取液降温后加入萃取液重量1. 5%的硅藻土,搅拌均匀后,将萃取液通过 500目的板式过滤机过滤,得到澄清透明的萃取液。
[0047] (5)干燥:所述刺五加低度醇浓缩液喷雾干燥,得到刺五加苷E;所述截留浓缩液 喷雾干燥,得到刺五加多糖。
[0048] 本方法所述刺五加苷E得率为92. 8%,刺五加多糖得率为95. 2%,平均分子量为 30KD;阿拉伯糖:木糖:葡萄糖:甘露糖=9: 25: 9: 1。
[0049] 实施例5 本刺五加多糖的工业化生产方法采用下述具体工艺。
[0050] (1)预处理:选取刺五加的根及根茎部分,含水量在9wt%,粉碎至20目筛通过率 90%以上、80目筛通过率10%以下,得到刺五加粉料,备用。
[0051] (2)除杂:所述刺五加粉料通过超临界萃取,去除小分子杂质,得到刺五加萃余 物; 超临界萃取条件为C(V流量1280L/h、萃取压力27MPa、萃取温度60°C、萃取时间2. 5h, 分离压力lOMPa、分离温度33°C、分离时间1. 5h。
[0052] (3)提取:所述刺五加萃余物用等质量的水25°C浸泡3h,水中添加原料质量0. 03% 的混合酶;混合酶中各组分比例为蛋白酶:纤维素酶:果胶酶2:1: 0. 5 ;然后用pH值为6. 8 的水进行连续逆流萃取,料液质量比为1:16,萃取温度86°C,萃取时间3. 5h。
[0053] (4)吸附:所述萃取液粗过滤除杂后,经D101树脂吸附,然后依次用2BV的水和 3BV浓度9wt%的乙醇溶液洗脱,得到水洗液以及低度醇洗脱液两部分;所述水洗液通过 0? 22ym的过滤得至_过液,将透过液通过0? 01ym的滤膜,得至IJ截留液;所述截留液、低度 醇洗脱液分别浓缩至固含量24%,得截留浓缩液、刺五加低度醇浓缩液; 粗过滤是指萃取液降温后加入萃取液重量2%的珍珠岩,搅拌均匀后,将萃取液通过 500目的板式过滤机过滤,得到澄清透明的萃取液。
[0054] (5)干燥:所述刺五加低度醇浓缩液喷雾干燥,得到刺五加苷E;所述截留浓缩液 冷冻干燥,得到刺五加多糖。
[0055] 本方法所述刺五加苷E得率为94. 0%;刺五加多糖得率为97. 6%,平均分子量为 22KD;阿拉伯糖:木糖:葡萄糖:甘露糖=8: 22: 7: 0.5。
[0056] 实施例6 取实施例1制得的刺五加多糖500g,加入制备片剂的常规辅料500g,混匀,制成1000 片。
[0057] 实施例7 去实施例1制得的刺五加多糖500g,加入淀粉500g,混匀,用乙醇制粒,干燥,装胶囊, 制成1000粒。
[0058] 实施例8 本实施例选用上述实施例1中的刺五加多糖,进行如下实验,旨在证明刺五加多糖在 结核病肝损伤方面的应用。
[0059] 1?研究方法 1. 1实验材料 1. 1. 1实验动物:选择5-6周,体重20±2. 0g昆明种小鼠70只,雌雄各半。
[0060] 1. 1. 2实验药物:刺五加多糖,利福平胶囊,异烟肼片 1. 2分组与处理 随机分为六组,包括空白组,模型组,抗结核药物组,多糖高剂量组,多糖中剂量组,多 糖低剂量组,抗结核药+多糖组,每组10只。将小鼠适应性饲养1周后,除空白组外,其余 六组经尾静脉注射0. 2ml浓度为1X107CFU/ml的标准结核菌液。抗结核药物组小鼠给予 利福平和异烟肼各75mg/kg。将刺五加多糖配制成50mg/kg, 100mg/kg,200mg/kg的低剂量、 中剂量及高剂量溶液,分别灌胃给予多糖低剂量组、多糖中剂量组及多糖高剂量组小鼠。抗 结核药+多糖组小鼠在给予等剂量抗结核药的同时,还给予刺五加多糖l〇〇kg/mg。模型组 小鼠给予等体积的生理盐水。各组小鼠灌胃体积为20ml/kg,连续给药10d。
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