0mL三颈瓶中，之后移入冰水浴，在4°C下用恒压滴液漏斗逐滴加入9mL质量浓度为90%的氯磺酸，启动搅拌器，以300r/min的转速搅拌均匀，制得混酸；将制得的混酸按体积比为1:1的比例加入到扇贝内脏多糖溶液中，常温下用磁力搅拌机搅拌反应5h，搅拌转速为500r/min，之后向反应液中加入其体积2倍的质量浓度为90%的乙醇溶液，进行醇沉12h ;将醇沉用高速离心机在7000r/min的转速下离心处理1min后，分离去除沉淀物得到上清液，将上清液装入透析袋，用流动蒸馏水透析3天后，将透析物移入浓缩罐，减压至SOOPa进行浓缩处理，浓缩液用真空冷冻干燥机干燥后，经气流粉碎机粉碎并过50目标准筛，即得一种淡黄色扇贝内脏低聚糖。
[0010]本发明的应用方法:将本发明制备出的低聚糖可以应用在食品、保健品等领域，它是替代蔗糖的新型功能性糖源，可以起到减缓衰老、通便、抑菌、防癌、抗癌、减轻肝脏负担、提高营养吸收率的作用。
[0011]实例2
13.首先收集新鲜的扇贝，开壳后取扇贝内脏，之后放入组织捣碎机，加入扇贝内脏总质量8倍的蒸馏水，进行捣碎、打浆处理，制得扇贝内脏组织浆液；将扇贝内脏组织浆液放入浓缩罐，减压至1150Pa，浓缩处理13min，之后过滤去除杂质得到扇贝内脏过滤液，再将扇贝内脏过滤液移入酶解罐中，用质量浓度为20%的氢氧化钠溶液调节pH至7.5，加入扇贝内脏过滤液总质量0.25%的木瓜蛋白酶，温度控制在45°C，放在磁力搅拌机上以350r/min的转速搅拌ISmin后，密封酶解3.5h，得扇贝内脏酶解液；将制得的扇贝内脏酶解液水浴加热至93°C，保温15min，对其进行灭酶处理，待灭酶后的扇贝内脏酶解液冷却至室温后，移入卧式离心机，设置转速为4500r/min，离心处理12min，分离去除沉淀得到上清液；将得到的上清液倒入锥形瓶，加入上清液3倍体积的质量浓度为95%的乙醇溶液，用薄膜密封瓶口，置于冷冻装置中在5°C下醇沉15h，醇沉液用高速离心机在5500r/min的转速下离心处理13min后，分离去除上清液得到沉淀物，将沉淀物放入烘箱在108°C下烘干，得到扇贝内脏粗多糖；称取150g上述制得的扇贝内脏粗多糖倒入500mL烧杯中，加入250mL蒸馏水，用玻璃棒搅拌均匀，之后逐滴加入质量浓度为4%的三氯乙酸，直至多糖溶液中沉淀不再产生为止，过滤去除沉淀，得脱蛋白后的扇贝内脏多糖溶液；量取SmL质量浓度为80%的甲酰胺加入附有冷凝管和搅拌器的250mL三颈瓶中，之后移入冰水浴，在4°C下用恒压滴液漏斗逐滴加入9.5mL质量浓度为90%的氯磺酸，启动搅拌器，以350r/min的转速搅拌均匀，制得混酸；将制得的混酸按体积比为1:1的比例加入到扇贝内脏多糖溶液中，常温下用磁力搅拌机搅拌反应5.5h，搅拌转速为550r/min，之后向反应液中加入其体积2.5倍的质量浓度为90%的乙醇溶液，进行醇沉15h ;将醇沉用高速离心机在7500r/min的转速下离心处理13min后，分离去除沉淀物得到上清液，将上清液装入透析袋，用流动蒸馏水透析4天后，将透析物移入浓缩罐，减压至850Pa进行浓缩处理，浓缩液用真空冷冻干燥机干燥后，经气流粉碎机粉碎并过55目标准筛，即得一种淡黄色扇贝内脏低聚糖。
[0012]本发明的应用方法:将本发明制备出的低聚糖可以应用在食品、保健品等领域，它是替代蔗糖的新型功能性糖源，可以起到减缓衰老、通便、抑菌、防癌、抗癌、减轻肝脏负担、提高营养吸收率的作用。
[0013]实例3
14.首先收集新鲜的扇贝，开壳后取扇贝内脏，之后放入组织捣碎机，加入扇贝内脏总质量10倍的蒸馏水，进行捣碎、打浆处理，制得扇贝内脏组织浆液；将扇贝内脏组织浆液放入浓缩罐，减压至1200Pa，浓缩处理15min，之后过滤去除杂质得到扇贝内脏过滤液，再将扇贝内脏过滤液移入酶解罐中，用质量浓度为20%的氢氧化钠溶液调节pH至8，加入扇贝内脏过滤液总质量0.3%的木瓜蛋白酶，温度控制在50 °C，放在磁力搅拌机上以400r/min的转速搅拌20min后，密封酶解4h，得扇贝内脏酶解液；将制得的扇贝内脏酶解液水浴加热至950C，保温20min，对其进行灭酶处理，待灭酶后的扇贝内脏酶解液冷却至室温后，移入卧式离心机，设置转速为5000r/min，离心处理15min，分离去除沉淀得到上清液；将得到的上清液倒入锥形瓶，加入上清液3倍体积的质量浓度为95%的乙醇溶液，用薄膜密封瓶口，置于冷冻装置中在6°C下醇沉18h，醇沉液用高速离心机在6000r/min的转速下离心处理15min后，分离去除上清液得到沉淀物，将沉淀物放入烘箱在110°c下烘干，得到扇贝内脏粗多糖；称取100?200g上述制得的扇贝内脏粗多糖倒入500mL烧杯中，加入300mL蒸馏水，用玻璃棒搅拌均匀，之后逐滴加入质量浓度为5%的三氯乙酸，直至多糖溶液中沉淀不再产生为止，过滤去除沉淀，得脱蛋白后的扇贝内脏多糖溶液；量取1mL质量浓度为80%的甲酰胺加入附有冷凝管和搅拌器的250mL三颈瓶中，之后移入冰水浴，在5°C下用恒压滴液漏斗逐滴加入1mL质量浓度为90%的氯磺酸，启动搅拌器，以400r/min的转速搅拌均匀，制得混酸；将制得的混酸按体积比为1:1的比例加入到扇贝内脏多糖溶液中，常温下用磁力搅拌机搅拌反应6h，搅拌转速为600r/min，之后向反应液中加入其体积3倍的质量浓度为90%的乙醇溶液，进行醇沉18h ;将醇沉用高速离心机在8000r/min的转速下离心处理15min后，分离去除沉淀物得到上清液，将上清液装入透析袋，用流动蒸馏水透析5天后，将透析物移入浓缩罐，减压至900Pa进行浓缩处理，浓缩液用真空冷冻干燥机干燥后，经气流粉碎机粉碎并过60目标准筛，即得一种淡黄色扇贝内脏低聚糖。
[0014]本发明的应用方法:将本发明制备出的低聚糖可以应用在食品、保健品等领域，它是替代蔗糖的新型功能性糖源，可以起到减缓衰老、通便、抑菌、防癌、抗癌、减轻肝脏负担、提高营养吸收率的作用。
【主权项】
1.一种扇贝内脏低聚糖的制备方法，其特征在于具体制备步骤为: (1)收集新鲜的扇贝，开壳后取扇贝内脏，之后放入组织捣碎机，加入扇贝内脏总质量5?10倍的蒸馏水，进行捣碎、打浆处理，制得扇贝内脏组织浆液； (2)将上述扇贝内脏组织浆液放入浓缩罐，减压至1100?1200Pa，浓缩处理10?15min，之后过滤去除杂质得到扇贝内脏过滤液，再将扇贝内脏过滤液移入酶解罐中，用质量浓度为20%的氢氧化钠溶液调节pH至7?8，加入扇贝内脏过滤液总质量0.2?0.3%的木瓜蛋白酶，温度控制在40?50°C，放在磁力搅拌机上以300?400r/min的转速搅拌15?20min后，密封酶解3?4h，得扇贝内脏酶解液； (3)将上述制得的扇贝内脏酶解液水浴加热至90?95°C，保温10?20min，对其进行灭酶处理，待灭酶后的扇贝内脏酶解液冷却至室温后，移入卧式离心机，设置转速为4000?5000r/min，离心处理10?15min，分离去除沉淀得到上清液； (4)将得到的上清液倒入锥形瓶，加入上清液3倍体积的质量浓度为95%的乙醇溶液，用薄膜密封瓶口，置于冷冻装置中在4?6°C下醇沉12?18h，醇沉液用高速离心机在5000?6000r/min的转速下离心处理10?15min后，分离去除上清液得到沉淀物，将沉淀物放入烘箱在105?110°C下烘干，得到扇贝内脏粗多糖； (5)称取100?200g上述制得的扇贝内脏粗多糖倒入500mL烧杯中，加入200?300mL蒸馏水，用玻璃棒搅拌均匀，之后逐滴加入质量浓度为3?5%的三氯乙酸，直至多糖溶液中沉淀不再产生为止，过滤去除沉淀，得脱蛋白后的扇贝内脏多糖溶液； (6)量取6?1mL质量浓度为80%的甲酰胺加入附有冷凝管和搅拌器的250mL三颈瓶中，之后移入冰水浴，在4?5°C下用恒压滴液漏斗逐滴加入9?1mL质量浓度为90%的氯磺酸，启动搅拌器，以300?400r/min的转速搅拌均匀，制得混酸； (7)将上述制得的混酸按体积比为1:1的比例加入到扇贝内脏多糖溶液中，常温下用磁力搅拌机搅拌反应5?6h，搅拌转速为500?600r/min，之后向反应液中加入其体积2?3倍的质量浓度为90%的乙醇溶液，进行醇沉12?18h ; (8)将上述醇沉用高速离心机在7000?8000r/min的转速下离心处理10?15min后，分离去除沉淀物得到上清液，将上清液装入透析袋，用流动蒸馏水透析3?5天后，将透析物移入浓缩罐，减压至800?900Pa进行浓缩处理，浓缩液用真空冷冻干燥机干燥后，经气流粉碎机粉碎并过50?60目标准筛，即得一种淡黄色扇贝内脏低聚糖。
【专利摘要】本发明公开了一种扇贝内脏低聚糖的制备方法，属于低聚糖制备领域。本发明先用扇贝内脏中制成内脏酶解液，再从酶解液中提取出扇贝内脏粗多糖，对多糖进行脱蛋白质后，向其中加入甲酰胺和氯磺酸制成的混酸，进行搅拌反应，反应后加入乙醇进行，最后将醇沉进行分离得上清液，再进行透析、浓缩、干燥、粉碎即得一种淡黄色扇贝内脏低聚糖，本发明将扇贝内脏采用酶法提取多糖，再用甲酰胺-氯磺酸法转化成低聚糖，该反应条件温和，低聚糖得率高，而且还可以提高废弃扇贝内脏的综合利用率，变废为宝，对环境友好。
【IPC分类】C07H3/06, C07H1/08, C08B37/00
【公开号】CN105131143
【申请号】CN201510630358
【发明人】李锦宇, 王志慧, 林大伟
【申请人】江苏锦宇环境工程有限公司
【公开日】2015年12月9日
【申请日】2015年9月29日