一种用于秸秆腐熟的微生物菌剂及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种微生物菌剂及其制备方法，尤其指一种用于腐秸杆熟的微生物菌剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002]我国的农作物秸杆资源十分丰富，据统计，我国可收集的秸杆达到6.8亿多吨，是必须处理掉的废弃物。长年以来，总有大量的小麦、玉米等秸杆在田间焚烧，产生了大量浓重的烟雾，不仅成为农村环境保护的瓶颈问题，甚至成为殃及城市环境。秸杆中含有大量的纤维素，半纤维素、木质素及小量的蛋白质，直接焚烧或者丢弃秸杆，既浪费资源又造成环境严重污染。
【发明内容】
[0003]本发明的目的在于提供一种以消耗农作物秸杆的微生物菌剂，通过将微生物菌剂直接喷洒在秸杆上让其直接还田，既避免了焚烧秸杆带来的环境污染，又能利用秸杆做肥料，节约了资源。
[0004]为实现以上目的，本发明的技术解决方案是:一种用于秸杆腐熟的微生物菌剂，其特征在于该微生物菌剂由枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、哈茨木霉菌(Trichodermaharzianum)和固体培养基组成，枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌在每克菌剂中的菌数范围比为30-60:30-60 ο
[0005]所述微生物菌剂在秸杆腐熟过程中与秸杆的重量比例在1:110至1:90之间。
[0006]所述固体培养基由可湿性淀粉和蛋白胨组成，两者的重量百分数范围依次为80-95%，5-20%ο
[0007]本发明还涉及一种用于秸杆腐熟的微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤:
A:将枯草芽孢杆菌做菌株筛选、一级斜面培养、二级液体振荡培养；
B:将固体培养基的水分含量提至50-60%，在125-150摄氏度的温度下灭菌30-50分钟，冷却至室温备用；
C:将步骤A中得到的菌种投放到步骤B中得到的固体培养基中做三级固体发酵培养，至每克固体培养基中的菌数达到3-8亿个；
D:将哈茨木霉菌做菌株筛选、一级斜面培养、二级固体堆积培养；
E:将固体培养基的水分含量提至50-60%，在125-150摄氏度的温度下灭菌30-50分钟，冷却至室温备用；
F:将步骤D中得到的菌种投放到步骤E中得到的固体培养基中做三级固体发酵培养，至每克固体培养基中的菌数达到15-25亿个；
G:将步骤C和步骤F中得到的枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌按照菌数范围比为30-60:30-60混合，搅拌均匀，得到该微生物菌剂。
[0008]与现有技术相比，本发明的有益效果为: 1、通过施用两种不同菌制作的微生物菌剂，可加速秸杆中纤维素和半纤维素的分解，从而达到快速腐解秸杆的目的，秸杆腐解后增加了土壤中的多糖类物质，它们与土粒结合促进土壤团聚体的形成，从而改善土壤物理性状，提高土壤肥力。
[0009]2、将改微生物菌剂直接投放在秸杆上，将秸杆直接还田，既解决了焚烧秸杆带来的环境污染的问题，又能有效利用资源。
【具体实施方式】
[0010]以下对本发明作进一步详细的说明:
一种用于秸杆腐熟的微生物菌剂，其特征在于该微生物菌剂由枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、哈茨木霉菌(Trichoderma harzianum)和固体培养基组成，枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌在每克菌剂中的菌数范围比为30-60:30-60。
[0011]所述微生物菌剂在秸杆腐熟过程中与秸杆的重量比例在1:110至1:90之间。
[0012]所述固体培养基由可湿性淀粉和蛋白胨组成，两者的重量百分数范围依次为80-95%，5-20%ο
[0013]—种如权利要求1所述的用于秸杆腐熟的微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤:
A:将枯草芽孢杆菌做菌株筛选、一级斜面培养、二级液体振荡培养；
B:将固体培养基的水分含量提至50-60%，在125-150摄氏度的温度下灭菌30-50分钟，冷却至室温备用；
C:将步骤A中得到的菌种投放到步骤B中得到的固体培养基中做三级固体发酵培养，至每克固体培养基中的菌数达到3-8亿个；
D:将哈茨木霉菌做菌株筛选、一级斜面培养、二级固体堆积培养；
E:将固体培养基的水分含量提至50-60%，在125-150摄氏度的温度下灭菌30-50分钟，冷却至室温备用；
F:将步骤D中得到的菌种投放到步骤E中得到的固体培养基中做三级固体发酵培养，至每克固体培养基中的菌数达到15-25亿个；
G:将步骤C和步骤F中得到的枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌按照菌数范围比为30-60:30-60混合，搅拌均匀，得到该微生物菌剂。
[0014]枯草芽胞杆菌，是芽胞杆菌属的一种。单个细胞0.7-0.8X2-3微米，着色均匀。无荚膜，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性菌，芽孢0.6-0.9X1.0~1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，在液体培养基中生长时，常形成皱醭。需氧菌。可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚。在遗传学研究中应用广泛，对此菌的嘌呤核苷酸的合成途径与其调节机制研究较清楚。广泛分布在土壤及腐败的有机物中，易在枯草浸汁中繁殖，故名。
[0015]哈茨木霉菌，其菌丝纤细无色，具分隔，多分枝。分生孢子梗从菌丝的侧枝上生出，对生或互生，一般有2-3次分枝，着生分生孢子的小梗瓶形或锥形。分生孢子多为球形，孢壁具小疣突，蓝绿色。在PDA培养基上菌落初为白絮状，后为暗绿色。
[0016]实施例1:
枯草芽胞杆菌菌株的培养:将固体培养基的水分含量提至50-60%，在125-150摄氏度的温度下灭菌30-50分钟，冷却至室温备用；将枯草芽孢杆菌依次做菌株筛选、一级斜面培养、二级液体振荡培养；将二级液体振荡培养得到的菌种投放到固体培养基中做三级固体发酵培养，至每克固体培养基中的菌数达到5亿个。
[0017]哈茨木霉菌菌株的培养:将固体培养基的水分含量提至50-60%，在125-150摄氏度的温度下灭菌30-50分钟，冷却至室温备用；将哈茨木霉菌做菌株筛选、一级斜面培养、二级固体堆积培养；将二级固体堆积培养得到的菌种投放到固体培养基中做三级固体发酵培养，至每克固体培养基中的菌数达到20亿个。
[0018]固体培养基的制备:由可湿性淀粉和蛋白胨组成，两者的重量百分数依次取:90%，10%ο
[0019]菌株的混合:将枯草芽胞杆菌菌株培养物与哈茨木霉菌菌株培养物以重量比4:1混合，这样混合后，每克菌剂中两种菌株的菌数比为1: 1，符合了之前所述枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌在每克菌剂中的菌数范围比为30-60:30-60的要求。
[0020]将该微生物菌剂按照重量比1:100投放到秸杆上，并将秸杆之间还田即可。
[0021]实施例2:
枯草芽胞杆菌菌株的培养:将固体培养基的水分含量提至50-60%，在125-150摄氏度的温度下灭菌30-50分钟，冷却至室温备用；将枯草芽孢杆菌依次做菌株筛选、一级斜面培养、二级液体振荡培养；将二级液体振荡培养得到的菌种投放到固体培养基中做三级固体发酵培养，至每克固体培养基中的菌数达到6亿个。
[0022]哈茨木霉菌菌株的培养:将固体培养基的水分含量提至50-60%，在125-150摄氏度的温度下灭菌30-50分钟，冷却至室温备用；将哈茨木霉菌做菌株筛选、一级斜面培养、二级固体堆积培养；将二级固体堆积培养得到的菌种投放到固体培养基中做三级固体发酵培养，至每克固体培养基中的菌数达到18亿个。
[0023]固体培养基的制备:由可湿性淀粉和蛋白胨组成，两者的重量百分数依次取:90%，10%ο
[0024]菌株的混合:将枯草芽胞杆菌菌株培养物与哈茨木霉菌菌株培养物以重量比3:2混合，这样混合后，每克菌剂中两种菌株的菌数比也为1:2，符合了之前所述枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌在每克菌剂中的菌数范围比为30-60:30-60的要求。
[0025]将该微生物菌剂按照重量比1:105投放到秸杆上，并将秸杆直接还田即可。
[0026]本发明通过施用两种不同菌制作的微生物菌剂，可加速秸杆中纤维素和半纤维素的分解，从而达到快速腐解秸杆的目的，秸杆腐解后增加了土壤中的多糖类物质，它们与土粒结合促进土壤团聚体的形成，从而改善土壤物理性状，提高土壤肥力。将改微生物菌剂直接投放在秸杆上，将秸杆直接还田，既解决了焚烧秸杆带来的环境污染的问题，又能有效利用资源。
【主权项】
1.一种用于秸杆腐熟的微生物菌剂，其特征在于该微生物菌剂由枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、哈茨木霉菌(Trichoderma harzianum)和固体培养基组成，枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌在每克菌剂中的菌数范围比为30-60:30-60。2.根据权利要求1所述的一种用于秸杆腐熟的微生物菌剂，其特征在于:所述微生物菌剂在秸杆腐熟过程中与秸杆的重量比例在1:110至1:90之间。3.根据权利要求1所述的一种用于秸杆腐熟的微生物菌剂，其特征在于:所述固体培养基由可湿性淀粉和蛋白胨组成，两者的重量百分数范围依次为80-95%，5-20%ο4.一种如权利要求1所述的用于秸杆腐熟的微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤: A:将枯草芽孢杆菌做菌株筛选、一级斜面培养、二级液体振荡培养； B:将固体培养基的水分含量提至50-60%，在125-150摄氏度的温度下灭菌30-50分钟，冷却至室温备用； C:将步骤A中得到的菌种投放到步骤B中得到的固体培养基中做三级固体发酵培养，至每克固体培养基中的菌数达到3-8亿个； D:将哈茨木霉菌做菌株筛选、一级斜面培养、二级固体堆积培养； E:将固体培养基的水分含量提至50-60%，在125-150摄氏度的温度下灭菌30-50分钟，冷却至室温备用； F:将步骤D中得到的菌种投放到步骤E中得到的固体培养基中做三级固体发酵培养，至每克固体培养基中的菌数达到15-25亿个； G:将步骤C和步骤F中得到的枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌按照菌数范围比为30-60:30-60混合，搅拌均匀，得到该微生物菌剂。
【专利摘要】一种用于秸秆腐熟的微生物菌剂，该微生物菌剂由枯草芽孢杆菌、哈茨木霉菌和固体培养基组成，枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌在每克菌剂中的菌数范围比为30-60:30-60。本发明还提供了一种用于秸秆腐熟的微生物菌剂的制备方法。
【IPC分类】C05F11/08, C12N1/20, C12R1/885, C12R1/125, C12N1/14
【公开号】CN105331563
【申请号】CN201510898642
【发明人】秦万芳
【申请人】湖北正佳微生物工程股份有限公司
【公开日】2016年2月17日
【申请日】2015年12月8日