截短侧耳素-替唑尼特杂合药物及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种截短侧耳素?替唑尼特杂合药物及其制备方法，该方法首先以截短侧耳素和丁二酸酐为原料，以重量比1:0.26?0.46的比例在乙醇和三乙胺存在的条件下仅通过一步酯化反应合成出了截短侧耳素衍生物中间体，该衍生物中间体与替唑尼特以1:0.56?0.76的重量比进行一步酯化反应得到粗品，粗品采用二氯甲烷提纯后即可得到截短侧耳素?替唑尼特杂合抗结核药物。本发明操作简单、污染小、成本低、原材料易于取得、收率高、制备出的杂合药物纯度较高，适合企业生产。
【专利说明】
截短侧耳素-替唑尼特杂合药物及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明属于合成医药技术领域，具体涉及一种截短侧耳素-替唑尼特杂合药物及 其制备方法。
【背景技术】
[0002] 截短侧耳素是由侧耳菌产生的一类广谱的二萜烯类抗生素，是截短侧耳素类半合 成衍生物的前体。尽管截短侧耳素有一定的抗菌活性，但由于其在水中微溶和体内吸收率 较低，很难开发为有效的抗菌药物。因此，自截短侧耳素发现以来，研究人员一直对其进行 构效关系研究和结构修饰，尝试引入各种极性基团以期找到抗菌活性高、水溶性较好和生 物利用度较高的截短侧耳素类衍生物。早在上世纪70年代，Franz和Michel等分别通过对截 短侧耳素产生菌Clitoilus passeckerianus和Clitopilus pseudo pinsitus的发酵条件 研究发现:在不同发酵条件下，培养物中除了截短侧耳素外，还分离出侧链含有双键的长链 烷基(化合物9-12)和糖苷结构的衍生物(化合物13 )，并发现这些衍生物的生物活性要比截 短侧耳素高。这一发现在当时启发了人们通过对侧链上的R进行化学修饰寻找活性更高的 衍生物。
[0004] 替唑尼特（Tizoxanide)是硝唑尼特口服后主要的活性代谢物产物，硝唑尼特 (Nitazoxanide)由美国Romark Laboratories公司研制开发，与其体内代谢的活性成分替 唑尼特(Tizoxanide)均为2-苯甲酰胺基-5-硝基噻唑的衍生物。这类化合物一般具有广谱 抗原生动物，蠕虫和细菌的特性，常用于治疗乙肝、丙肝以及痢疾、腹泻等肠胃的病毒感 染，尤其用于治疗AIDS病人的隐孢子虫病感染。替唑尼特结构式如下：
[0006] 根据"鸡尾酒疗法"将几种不同单一靶点药物联用或选择使用作用于多个分子靶 标的"多靶点"药物治疗复杂疾病时则会有较佳疗效。通过化学合成的方法将不同配体分子 的药效团连接起来以形成多靶点药物，是目前多靶点药物设计的主要方法，由于两个药效 团分子缺少共性，所以在体内可各自保留原来分子的全部或部分结构特征;而对于连接基 团则可根据设计的需要选择在体内发生或不发生裂解的基团。可裂解的连接基团大多数含 酯基，在血液中可被血浆酯酶水解，两个药效团分子由此断裂成两个独立的药物，然后分别 作用于各自的靶点而发挥作用。根据此发现，筛选出了目标化合物(替唑尼特)对侧链上的R 修饰后得到一种杂合抗生素。
【发明内容】
[0007] 本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供两种截短侧耳素杂合药物及其制备 方法，该制备方法无任何催化剂加入、产品收率高、原材料易于取得，适合企业推广生产。
[0008] 本发明的技术方案如下：
[0009] 截短侧耳素-替唑尼特杂合药物，分子式为C36H43N30HS，其分子结构如下：
[0011] 上述截短侧耳素-替唑尼特杂合药物的制备方法，包括以下步骤：
[0012] a)向反应器中加入重量比为1:0.26-0.46的截短侧耳素和丁二酸酐，再加入一定 量的乙醇和三乙胺，混合均匀得溶液，将溶液加热至40-70 °C反应2-10h后转入分液漏斗中， 加入碱水进行萃取，下层萃取液经洗涤、干燥后得截短侧耳素衍生物中间体；
[0013] b)向反应器中加入重量比为1:0.56-0.76:0.2-0.3:0.2-0.3的截短侧耳素衍生物 中间体、替唑尼特、二环己基碳二亚胺和B0C-甘氨酸，再加入一定量的四氢呋喃，在24-30°C 下搅拌反应2_4h后过滤，将滤液减压蒸干，加入氯化氢的乙醇溶液后再次减压蒸干得截短 侧耳素-替唑尼特粗品；
[0014] c)向截短侧耳素-替唑尼特粗品中加入一定量二氯甲烷，搅拌后经减压过滤、洗涤 即得截短侧耳素-替唑尼特纯品。
[0015] 步骤a)中每mol截短侧耳素加入1.5-2L的乙醇和0.15-0.2L的三乙胺，下层萃取液 依次用乙醚、饱和食盐水洗涤，接着减压蒸干。
[0016] 步骤b)中每mol截短侧耳素衍生物中间体加入5-7L四氢呋喃。
[0017] 本发明的有益效果为：（1)以截短侧耳素和丁二酸酐为原料，仅通过一步酯化反应 合成截短侧耳素衍生物中间体，不加入任何催化剂；（2)截短侧耳素衍生物中间体与替唑尼 特通过一步酯化反应合成杂合抗生素分子；（3)本发明方法简单、污染小、原材料易于获得、 成本低、收率高，最终产品纯度在90%以上。（4)本发明采用计算机辅助药物分子设计，通过 打分函数，筛选出新的杂合抗生素化合物，获取药效较好、安全可靠的截短侧耳素-替唑尼 特杂合抗生素分子。
【附图说明】
[0018] 图1为本发明实施例1制备的截短侧耳素-替唑尼特的红外光谱图；
[0019] 图2为本发明实施例1制备的截短侧耳素-替唑尼特1Η核磁共振谱图。
【具体实施方式】
[0020] 为使本领域普通技术人员充分理解本发明的技术方案和有益效果，下面结合附图 及具体实施例进行进一步说明。
[0021] 本发明制备截短侧耳素-替唑尼特杂合药物的反应原理如下：
[0022]
[0023] 实施例1
[0024]在100ml三口烧瓶上依次安装温度计、回流冷凝管，向三口烧瓶中加入截短侧耳素 3.78g(0.01mol)、丁二酸酐lg(O.Olmol)、甲苯15mL和三乙胺1.5mL，加入磁力搅拌子塞上玻 璃塞后将其置于集热式恒温加热磁力搅拌器上水浴加热至40°C，2小时后停止反应。将反应 后的溶液转入分液漏斗中，加入50mL碱水洗涤进行萃取分层，下层溶液先用50mL乙醚洗，接 着用饱和食盐水洗，最后将洗涤后的下层溶液置于减压旋转蒸发器上减压蒸干乙醚，在60 °C烘干得到截短侧耳素衍生物中间体5.2g。
[0025] 取截短侧耳素衍生物中间体4.8g(0.01mol)、替唑尼特2.7(0.01mol)、四氢呋喃 50mL、二环己基碳二亚胺(DCC) 1.0g和B0C-甘氨酸1.0g置于三口烧瓶中水浴加热，24°C室温 搅拌2小时。反应完成后将溶液减压过滤并收集滤液，将滤液置于减压旋转蒸发器上减压蒸 干四氢呋喃，接着加入氯化氢的乙醇溶液(用于脱B0C保护基)再次减压蒸干得截短侧耳素-替唑尼特粗品5.8g。
[0026] 向截短侧耳素-替唑尼特粗品中加入100mL二氯甲烷，室温搅拌10分钟。将溶液减 压过滤，滤饼用二氯甲烷洗涤后抽干得到截短侧耳素-替唑尼特纯品4.6g。
[0027] 实施例2
[0028]在100ml三口烧瓶上依次安装温度计、回流冷凝管，向三口烧瓶中加入截短侧耳素 3 · 78g(0 · Olmol)、丁二酸酐1 · 7g、甲苯20mL和三乙胺2 · OmL，加入磁力搅拌子塞上玻璃塞后 将其置于集热式恒温加热磁力搅拌器上水浴加热至70°C，10小时后停止反应。将反应后的 溶液转入分液漏斗中，加入碱水洗涤进行萃取分层，下层溶液先用乙醚洗，接着用饱和食 盐水洗，最后将洗涤后的下层溶液置于减压旋转蒸发器上减压蒸干乙醚，在60°C烘干得到 截短侧耳素衍生物中间体5.26g。
[0029] 取截短侧耳素衍生物中间体4.8g(0.0 lmol)、替唑尼特3.6g、四氢呋喃70mL、二环 己基碳二亚胺(DCC) 1.5g和B0C-甘氨酸1.5g置于三口烧瓶中水浴加热，30°C室温搅拌4小 时。反应完成后将溶液减压过滤并收集滤液，将滤液置于减压旋转蒸发器上减压蒸干四氢 呋喃，接着加入氯化氢的乙醇溶液(用于脱B0C保护基)再次减压蒸干得截短侧耳素-替唑尼 特粗品5.96g。
[0030] 向截短侧耳素-替唑尼特粗品中加入100mL二氯甲烷，室温搅拌10分钟。将溶液减 压过滤，滤饼用二氯甲烷洗涤后抽干得到截短侧耳素-替唑尼特纯品5. lg。
[0031] 实施例3
[0032]在100ml三口烧瓶上依次安装温度计、回流冷凝管，向三口烧瓶中加入截短侧耳素 3.788(0.01111〇1)、丁二酸酐1.368、甲苯17.51^和三乙胺1.751^，加入磁力搅拌子塞上玻璃 塞后将其置于集热式恒温加热磁力搅拌器上水浴加热至45°C，6小时后停止反应。将反应后 的溶液转入分液漏斗中，加入碱水洗涤进行萃取分层，下层溶液先用乙醚洗，接着用饱和食 盐水洗，最后将洗涤后的下层溶液置于减压旋转蒸发器上减压蒸干乙醚，在60°C烘干得到 截短侧耳素衍生物中间体5.4g。
[0033] 取截短侧耳素衍生物中间体4.88(0.01111〇1)、替唑尼特3.658、四氢咲喃6〇1111^、二环 己基碳二亚胺(DCC) 1.25g和B0C-甘氨酸1.25g置于三口烧瓶中水浴加热，27°C室温搅拌3小 时。反应完成后将溶液减压过滤并收集滤液，将滤液置于减压旋转蒸发器上减压蒸干四氢 呋喃，接着加入氯化氢的乙醇溶液(用于脱B0C保护基)再次减压蒸干得截短侧耳素-替唑尼 特粗品6. lg。
[0034] 向截短侧耳素-替唑尼特粗品中加入100mL二氯甲烷，室温搅拌10分钟。将溶液减 压过滤，滤饼用二氯甲烷洗涤后抽干得到截短侧耳素-替唑尼特纯品5.8g。
[0035] 对实施例1制得的截短侧耳素-替唑尼特纯品分别进行了高效液相色谱、红外光谱 IR、咕核磁共振分析，结果如图1-2。高效液相色谱条件为：C18色谱柱（4.6nm X 250nm，填料 SinoChrom,粒度5μηι)，以甲醇：甲酸水溶液（10mmol/L) =80 : 20的流动相在吸收波长为 252nm下进行分析测定。测定得到的截短侧耳素-替唑尼特纯品纯度为92%，计算得到的转 化率为63.4 %，其红外光谱分析结果如图1所示，主要数据如下：
[0037]截短侧耳素-替唑尼特纯品的1Η核磁共振分析结果如图2所示，主要数据如下：
【主权项】
1. 一种截短侧耳素-替唑尼特杂合药物，分子式为C36H43N 30nS，其特征在于其分子结构 为：2. 权利要求1所述的截短侧耳素-替唑尼特杂合药物的制备方法，其特征在于包括以下 步骤： a) 向反应器中加入重量比为1:0.26-0.46的截短侧耳素和丁二酸酐，再加入一定量的 乙醇和三乙胺，混合均匀得溶液，将溶液加热至40-70°C反应2-10h后转入分液漏斗中，加入 碱水进行萃取，下层萃取液经洗涤、干燥后得截短侧耳素衍生物中间体； b) 向反应器中加入重量比为1:0.56-0.76:0.2-0.3:0.2-0.3的截短侧耳素衍生物中间 体、替唑尼特、二环己基碳二亚胺和BOC-甘氨酸，再加入一定量的四氢呋喃，在24-30Γ下搅 拌反应2-4h后过滤，将滤液减压蒸干，加入氯化氢的乙醇溶液后再次减压蒸干得截短侧耳 素-替唑尼特粗品； c) 向截短侧耳素-替唑尼特粗品中加入一定量二氯甲烷，搅拌后经减压过滤、洗涤即得 截短侧耳素-替唑尼特纯品。3. 如权利要求2所述的截短侧耳素-替唑尼特杂合药物的制备方法，其特征在于:步骤 a) 中每mol截短侧耳素加入1.5-2L的乙醇和0.15-0.2L的三乙胺，下层萃取液依次用乙醚、 饱和食盐水洗涤，接着减压蒸干。4. 如权利要求2所述的截短侧耳素-替唑尼特杂合药物的制备方法，其特征在于:步骤 b) 中每mo 1截短侧耳素衍生物中间体加入5-7L四氢呋喃。
【文档编号】C07D277/58GK105949146SQ201610297178
【公开日】2016年9月21日
【申请日】2016年5月6日
【发明人】祝宏, 彭薇, 张俊, 吴云龙
【申请人】武汉工程大学