一种米尔贝霉素肟粗品的纯化方法
【专利摘要】本发明涉及一种米尔贝霉素肟粗品的纯化方法，其工艺步骤为：首先将米尔贝霉素肟粗品在pH 8?9条件下水洗，然后将过滤所得到的米尔贝霉素肟湿品溶于乙酸丁酯或乙酸异丁酯中，再经大孔树脂脱色处理，加水混合，静置分层并过滤，所得滤液用无水氯化钙干燥，过滤后收集滤液，再次加水混合，升温结晶后过滤、干燥即可得到米尔贝霉素肟纯品。本发明实现了米尔贝霉素肟粗品中杂质地有效分离，提高了成品质量，有利于增强产品的国内外市场竞争力。
【专利说明】
一种米尔贝霉素肟粗品的纯化方法
技术领域
[0001]本发明属于抗生素提取技术领域，特别是涉及一种米尔贝霉素肟粗品的纯化方法。
【背景技术】
[0002]米尔贝霉素肟是新型的半合成大环内酯类驱虫药物，是米尔贝霉素A3和A4的肟衍生物，对控制和预防大部分常见寄生虫疾病都有很好的效果。通常用来预防恶丝虫病，控制线虫、钩虫引发的犬、猫疾病及犬的鞭虫病。由于米尔贝肟对体内外寄生虫均有很好的驱杀作用，并对阿维菌素类药物敏感的犬毒性较小，其应用和研究越来越受到重视。
[0003]目前，国内相关文献报道了采用活性炭脱色、层析技术纯化米尔贝霉素；专利“一种制备高纯度米尔贝肟的方法”(CN201410429785.4)采用树脂层析米尔贝霉素肟的方法，该方法存在的主要问题是:
I使用活性炭脱色，提取收率下降了3%左右。
[0004]2经验证，专利“一种制备高纯度米尔贝肟的方法”仅采用树脂层析技术，不能有效地去除合成过程中引入的杂质，有效含量低于95%。
[0005]3该专利中阐述了采用常规的冷却结晶法，其容易导致米尔贝霉素肟晶体纯度不高，晶形不完整，晶体粒度分布过宽，易出现晶体粘结现象。不易长期储存、运输和使用。
[0006]4米尔贝霉素肟的产品性状不符合美国药典标准。
【发明内容】
[0007]本发明的目的在于克服上述现有技术中的缺陷，提供一种保证收率，纯化工艺简单，所生产的产品晶形完整、纯度高，产品质量符合美国药典的米尔贝霉素肟粗品的纯化方法。
[0008]为实现上述目的所采取的技术方案为:
一种米尔贝霉素肟粗品的纯化方法，其特征在于其工艺步骤为:首先将米尔贝霉素肟粗品在pH 8-9条件下水洗，然后将过滤所得到的米尔贝霉素肟湿品溶于乙酸丁酯或乙酸异丁酯中，再经大孔树脂脱色处理，加水混合，静置分层并过滤，所得滤液用无水氯化钙干燥，过滤后收集滤液，再次加水混合，升温结晶后过滤、干燥即可得到米尔贝霉素肟纯品。
[0009]所述水洗过程为:首先将米尔贝霉素肟粗品投入纯化水中，加入体积浓度为30-40%的氨水溶液，调节pH至8-9，搅拌40-60min，经过滤后得到米尔贝霉素肟湿品，继续加入纯化水，搅拌20-40min，过滤得到米尔贝霉素肟湿品。
[0010]所述水洗中，第一次加入纯化水的用量:M米尔贝霉素H亏粗品:V纯化水=Ikg:13-17L;第二次加入纯化水的用量:M米尔贝霉素肟粗品:V纯化水=Ikg: 6-1OL。
[0011]所述米尔贝霉素肟湿品溶于乙酸丁酯或乙酸异丁酯中的溶解浓度控制在16-20%。
[0012]所述脱色处理过程中，控制树脂柱经高比为1:4_6，进料速度控制在2_3BV/h，出料速度控制在1.1-1.5BV/h。
[0013]所述脱色处理中使用的大孔树脂是Amberlite IRA-400。
[0014]所述加水混合过程中，第一次加入纯化水的用量为:V米尔贝霉素肟:V纯化水=IL:3-5L，第二次加入纯化水的用量为:V米尔贝霉素肟溶液:V纯化水=IL: 1-2L。
[0015]所述污水氯化钙干燥过程中，无水氯化钙用量:V米尔贝霉素肟:M无水氯化钙=IL:4-8g0
[0016]所述升温结晶过程为:将混合溶液升温至60-80°C，流加纯化水，出现结晶后停止加入纯化水，结晶结束后，降至常温，继续搅拌60-80min，后过滤，期间控制搅拌转速30-50r/mino
[0017]所述流加纯化水时，控制纯化水流速13_17L/min。
[0018]所述干燥是采用双锥回转真空干燥机实现，控制干燥温度50?70°C，真空度-0.02?-0.08 MPa，运行频率为8?15HZ，干燥1?12h。
[0019]本发明的技术优势:
I本发明提供了一种有效纯化米尔贝霉素肟的方法。
[0020]2本发明避免了常规提纯工艺中的有机溶媒的污染问题，降低了环保压力。
[0021]3本发明生产成本低，有利于增强产品的国内外市场的竞争力。
[0022]4本发明可提高了成品质量，米尔贝霉素肟杂质含量低于1.5%。
[0023]5米尔贝霉素肟晶体粒度大部分集中在50μπι，总量达到87%以上，不会出现晶体粘结现象。
【具体实施方式】
[0024]下面用实例予以说明本发明，应该理解的是，实例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。本发明的范围与核心内容依据权利要求书加以确定。
[0025]下述实施例中:
米尔贝霉素发酵液来源:以冰城链霉菌为生产菌种，培养基中的碳源是淀粉、葡萄糖；氮源是黄豆饼粉、花生饼粉、酵母粉。采用二级发酵模式，发酵周期是320?340小时;发酵单位:800-1000u/ml0
[0026]米尔贝霉素肟粗品来源:将含有米尔贝霉素A3和米尔贝霉素A4组份的发酵液进行固液分离，经提取纯化后得到含有米尔贝霉素A3和米尔贝霉素A4固体;该固体溶解后进行氧化反应，得到含有米尔贝霉素A3酮和米尔贝霉素A4酮的溶液。采用结晶工艺，得到其晶体;进行肟化反应，得到粗品米尔贝霉素肟。
[0027]所述脱色处理中使用的大孔树脂是Amberlite IRA-400，树脂柱经高比为1:4_6。
[0028]实施例1
米尔贝霉素肟粗品10kg，加入纯化水1300L，加入30%的氨水溶液，调节pH至8，搅拌40min，经过滤后得到米尔贝霉素肟湿品，继续加入纯化水600L，搅拌20min，过滤得到米尔贝霉素肟湿品。
[0029]米尔贝霉素肟湿品溶于乙酸丁酯，浓度控制在16%，体积为625L。
[0030]米尔贝霉素肟溶液经大孔树脂脱色处理，进料速度控制在2BV/h，出料速度控制在1.18￥/11。收集滤液624匕
[0031]米尔贝霉素肟溶液加入纯化水1875L，搅拌30min，静置分层并过滤，得到米尔贝霉素肟有机溶液678L。
[0032]米尔贝霉素肟溶液中加入无水氯化钙2.71kg，过滤后收集滤液625L。
[0033]米尔贝霉素肟溶液加入纯化水625L，搅拌30min，静置。
[0034]搅拌转速控制在30r/min，压力控制在-0.1MPa;混合溶液温度升温至60°C，加入纯化水，流速控制在13L/min。结晶结束，继续搅拌60min。搅拌结束后过滤得到米尔贝霉素肟湿固体。
[0035]湿固体米尔贝霉素肟投入双锥回转真空干燥机，温度升至50?70°C，控制真空度为-0.02?-0.08 MPa，调整运行频率为8?15HZ，干燥1h。干燥结束得到米尔贝霉素肟纯品94.1kg,经检测，杂质含量为1.3%;87.6%米尔贝霉素肟晶体粒度集中在50μπι。
[0036]实施例2
米尔贝霉素肟粗品10kg，加入纯化水1400L，加入33%的氨水溶液，调节pH至8.2，搅拌45min，经过滤后得到米尔贝霉素肟湿品，继续加入纯化水700L，搅拌25min，过滤得到米尔贝霉素肟湿品。
[0037]米尔贝霉素肟湿品溶于乙酸异丁酯，浓度控制在17%，体积为590L。
[0038]米尔贝霉素肟溶液经大孔树脂脱色处理，进料速度控制在2.3BV/h，出料速度控制在1.2BV/h。收集滤液589L。
[0039]米尔贝霉素肟溶液加入纯化水2061L，搅拌35min，静置分层并过滤，得到米尔贝霉素月亏有机溶液640L。
[0040]米尔贝霉素肟溶液中加入无水氯化钙3.2kg，过滤后收集滤液590L。
[0041 ]米尔贝霉素肟溶液加入纯化水767L，搅拌30min，静置。
[0042]搅拌转速控制在35r/min，压力控制在-0.09MPa ；混合溶液温度升温至65°C，加入纯化水，流速控制在14L/min。结晶结束，继续搅拌65min。搅拌结束后过滤得到米尔贝霉素肟湿固体。
[0043]湿固体米尔贝霉素肟投入双锥回转真空干燥机，温度升至50?70°C，控制真空度为-0.02?-0.08 MPa，调整运行频率为8?15HZ，干燥10.5h。干燥结束得到米尔贝霉素肟纯品94.4kg，经检测，杂质含量为1.2%;87.9%米尔贝霉素肟晶体粒度集中在50μπι。
[0044]实施例3
米尔贝霉素肟粗品10kg，加入纯化水1500L，加入35%的氨水溶液，调节pH至8.5，搅拌50min，经过滤后得到米尔贝霉素肟湿品，继续加入纯化水800L，搅拌30min，过滤得到米尔贝霉素肟湿品。
[0045]米尔贝霉素肟湿品溶于乙酸丁酯，浓度控制在18%，体积为556L。
[0046]米尔贝霉素肟溶液经大孔树脂脱色处理，进料速度控制在2.5BV/h，出料速度控制在1.5BV/h。收集滤液555L。
[0047]米尔贝霉素肟溶液加入纯化水2220L，搅拌40min，静置分层并过滤，得到米尔贝霉素肟有机溶液602L。
[0048]米尔贝霉素肟溶液中加入无水氯化钙3.6kg，过滤后收集滤液601L。
[0049]米尔贝霉素肟溶液加入纯化水902L，搅拌35min，静置。
[0050]搅拌转速控制在40r/min，压力控制在-0.08MPa ；混合溶液温度升温至70 °C，加入纯化水，流速控制在15L/min。结晶结束，继续搅拌70min。搅拌结束后过滤得到米尔贝霉素肟湿固体。
[0051]湿固体米尔贝霉素肟投入双锥回转真空干燥机，温度升至50?70°C，控制真空度为-0.02?-0.08 MPa，调整运行频率为8?15HZ，干燥I Ih。干燥结束得到米尔贝霉素肟纯品94.8kg，经检测，杂质含量为1.0%;88.3%米尔贝霉素肟晶体粒度集中在50μπι。
[0052]实施例4
米尔贝霉素肟粗品10kg，加入纯化水1600L，加入37%的氨水溶液，调节pH至8.7，搅拌55min，经过滤后得到米尔贝霉素肟湿品，继续加入纯化水900L，搅拌35min，过滤得到米尔贝霉素肟湿品。
[0053]米尔贝霉素肟湿品溶于乙酸异丁酯，浓度控制在19%，体积为526L。
[0054]米尔贝霉素肟溶液经大孔树脂脱色处理，进料速度控制在2.7BV/h，出料速度控制在1.8BV/h。收集滤液525L。
[0055]米尔贝霉素肟溶液加入纯化水3675L，搅拌45min，静置分层并过滤，得到米尔贝霉素月亏有机溶液569L。
[0056]米尔贝霉素肟溶液中加入无水氯化钙3.98kg，过滤后收集滤液524L。
[°°57] 米尔贝霉素H亏溶液加入纯化水891L，搅拌40min，静置。
[0058]搅拌转速控制在45r/min，压力控制在-0.08MPa ；混合溶液温度升温至75 °C，加入纯化水，流速控制在16L/min。结晶结束，继续搅拌75min。搅拌结束后过滤得到米尔贝霉素肟湿固体。
[0059]湿固体米尔贝霉素肟投入双锥回转真空干燥机，温度升至50?70°C，控制真空度为-0.02?-0.08 MPa，调整运行频率为8?15HZ，干燥I Ih。干燥结束得到米尔贝霉素肟纯品94.6kg，经检测，杂质含量为1.1%;88.1%米尔贝霉素肟晶体粒度集中在50μπι。
[0060]实施例5
米尔贝霉素肟粗品10kg，加入纯化水1700L，加入40%的氨水溶液，调节pH至9，搅拌60min，经过滤后得到米尔贝霉素肟湿品，继续加入纯化水1000L，搅拌40min，过滤得到米尔贝霉素肟湿品。
[0061 ] 米尔贝霉素肟湿品溶于乙酸丁酯，浓度控制在20%，体积为500L。
[0062]米尔贝霉素肟溶液经大孔树脂脱色处理，进料速度控制在3BV/h，出料速度控制在2BV/h。收集滤液499L。
[0063]米尔贝霉素肟溶液加入纯化水2495L，搅拌50min，静置分层并过滤，得到米尔贝霉素肟有机溶液541L。
[0064]米尔贝霉素肟溶液中加入无水氯化钙4.3kg，过滤后收集滤液498L。
[0065]米尔贝霉素H亏溶液加入纯化水996L，搅拌40min，静置。
[0066]搅拌转速控制在50r/min，压力控制在-0.05MPa ；混合溶液温度升温至80 °C，加入纯化水，流速控制在17L/min。结晶结束，继续搅拌80min。搅拌结束后过滤得到米尔贝霉素肟湿固体。
[0067]湿固体米尔贝霉素肟投入双锥回转真空干燥机，温度升至50?70°C，控制真空度为-0.02?-0.08 MPa，调整运行频率为8?15HZ，干燥I Ih。干燥结束得到米尔贝霉素肟纯品94.4kg，经检测，杂质含量为1.2%;88.0%米尔贝霉素肟晶体粒度集中在50μπι。
【主权项】
1.一种米尔贝霉素肟粗品的纯化方法，其特征在于其工艺步骤为:首先将米尔贝霉素肟粗品在PH 8-9条件下水洗，然后将过滤所得到的米尔贝霉素肟湿品溶于乙酸丁酯或乙酸异丁酯中，再经大孔树脂脱色处理，加水混合，静置分层并过滤，所得滤液用无水氯化钙干燥，过滤后收集滤液，再次加水混合，升温结晶后过滤、干燥即可得到米尔贝霉素肟纯品。2.按照权利要求1所述的米尔贝霉素肟粗品的纯化方法，其特征在于所述水洗过程为:首先将米尔贝霉素肟粗品投入纯化水中，加入体积浓度为30-40%的氨水溶液，调节pH至8-9，搅拌40-60min，经过滤后得到米尔贝霉素肟湿品，继续加入纯化水，搅拌20-40min，过滤得到米尔贝霉素肟湿品。3.按照权利要求2所述的米尔贝霉素肟粗品的纯化方法，其特征在于所述水洗中，第一次加入纯化水的用量:M米尔贝霉素H亏粗品:V纯化水=Ikg: 13-17L；第二次加入纯化水的用量:M米尔贝霉素肟粗品:V纯化水=Ikg: 6-1OL。4.按照权利要求1所述的米尔贝霉素肟粗品的纯化方法，其特征在于所述米尔贝霉素肟湿品溶于乙酸丁酯或乙酸异丁酯中的溶解浓度控制在16-20%。5.按照权利要求1所述的米尔贝霉素肟粗品的纯化方法，其特征在于所述脱色处理过程中，控制树脂柱经高比为1:4-6，进料速度控制在2-3BV/h，出料速度控制在1.l-1.5BV/h06.按照权利要求1或4所述的米尔贝霉素肟粗品的纯化方法，其特征在于所述脱色处理中使用的大孔树脂是Amberlite IRA-400。7.按照权利要求1所述的米尔贝霉素肟粗品的纯化方法，其特征在于所述加水混合过程中，第一次加入纯化水的用量为:V米尔贝霉素H亏:V纯化水=IL: 3-5L，第二次加入纯化水的用量为:V米尔贝霉素肟溶液:V纯化水=1L: 1-2L。8.按照权利要求1所述的米尔贝霉素肟粗品的纯化方法，其特征在于所述污水氯化钙干燥过程中，无水氯化钙用量:V米尔贝霉素肟:M无水氯化钙=1L: 4-8g。9.按照权利要求1所述的米尔贝霉素肟粗品的纯化方法，其特征在于所述升温结晶过程为:将混合溶液升温至60-80°C，流加纯化水，出现结晶后停止加入纯化水，结晶结束后，降至常温，继续搅拌60_80min，后过滤，期间控制搅拌转速30_50r/min。10.按照权利要求9所述的米尔贝霉素肟粗品的纯化方法，其特征在于所述流加纯化水时，控制纯化水流速13-17L/min。11.按照权利要求1所述的米尔贝霉素肟粗品的纯化方法，其特征在于所述干燥是采用双锥回转真空干燥机实现，控制干燥温度50?70°C，真空度-0.02?一0.08 MPa，运行频率为8?15HZ，干燥10?12h。
【文档编号】C07D493/22GK106083883SQ201610504593
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年7月1日
【发明人】任勇
【申请人】宁夏泰瑞制药股份有限公司