专利名称：新型环保高效微生物水质净化混合剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种新型环保高效微生物水质净化混合剂及其制备方法，可用于水产养殖、净化水质、环保等方面，属于水产养殖水体改良技术领域。
背景技术：
20世纪以来，我国水产养殖业得到了长足发展，但随着水产养殖规模的不断扩大，集约化养殖程度的不断提高，水产养殖池的富营养化程度越来越高。由于养殖水体自净与调节能力已经不能满足清除残饵、鱼虾排泄物的需要，导致养殖水体中氨氮、硝酸盐、亚硝酸盐、硫化物等严重超标，水质恶化，鱼虾病害频频发生，全国每年给水产养殖业造成了 100亿元以上的严重经济损失。因此如何高效去除养殖水体中的有害物质和防治水产养殖动物的疾病是保证我国水产养殖业可持续发展的关键。 利用高效微生物菌种改善和恢复养殖水体的良好生态环境，已经被越来越多的人们所接受并投入到实际应用。枯草芽孢杆菌作为一种安全有效的益生菌种，由于能产生许多胞外酶迅速分解水体中有机物，促进硫化物和亚硝酸盐的氧化，具有快速生长繁殖和适应环境的能力，因此在水产养殖行业得到了广泛的应用。随着水产养殖规模不断扩大和养殖密度不断提高，我国水产养殖水体自净与调节能力已经不能满足清除残饵和鱼虾排泄物的需要，导致养殖水体中氨氮、硝酸盐、亚硝酸盐、硫化物等严重超标，水质恶化，鱼虾病害频频发生。同时抗生素的大量频繁使用也给水产养殖动物的品质和出口带来很大影响。目前而言，单一的益生菌种应用在水产养殖产业中仍不能有效改善水体质量和鱼虾病害的发生。
发明内容
为了解决现有技术的问题，本发明的目的在于提供一种新型环保高效微生物水质净化混合剂，其将枯草芽孢杆菌净化水质和嗜菌蛭弧菌防治疾病的优势集合于一体，同时具备净化水质和防病治病及取代抗生素的功能，可以改良水产养殖水体。本发明的另一目的在于提供一种上述新型环保高效微生物水质净化混合剂的制备方法。为实现上述目的，本发明的技术方案提供一种新型环保高效微生物水质净化混合齐U，主要是由高浓度枯草芽孢杆菌液与高浓度噬菌蛭弧菌液组成的混合微生物菌剂，该微生物水质净化混合剂由下述体积百分比的原料配制而成
枯草芽孢杆菌液 10 % -50 % ；
噬菌蛭弧菌液20%-60%;
生理盐水5%-30%;
微量元素溶液 0.5%-15%。
进一步而言，本发明的各原料最佳体积配比为
枯草芽孢杆菌液 40%;
噬菌蛭弧菌液40%;
生理盐水15%;
微量元素溶液5%。本发明所述的新型环保高效微生物水质净化混合剂的菌种为枯草芽孢杆菌与噬菌蛭弧菌混合物；所述枯草芽孢杆菌液为芽孢杆菌属，其浓度为大于200亿/ml ;所述噬菌蛭弧菌液，其浓度为大于200亿/ml。 所述微量元素溶液包含硫酸铜、硫酸锌、硫酸锰、氯化钙的混合溶液。另外，本发明还提供了一种新型环保高效微生物水质净化混合剂的制作方法，采用的所有菌种都是从水产养殖的水体和底泥中筛选出的；采用菌种液体培养方法，使所有菌种在不同培养基中培养；然后两种菌液再按比例混合；它包括下列骤(I)从水产养殖的水体和底泥中筛选出枯草芽孢杆菌与噬菌蛭弧菌菌种；(2)将枯草芽孢杆菌菌种在培养基成分为酵母膏、糖蜜、蛋白胨、氯化钠、硫酸铁、硫酸镁、微量元素溶液之一或它们的混合物中培养，Ph值调节至6. 8-7. 2 ;培养温度为35-38°C、时间为16-48小时，得到枯草芽孢杆菌液；(3)将大肠杆菌菌种在培养基成分为酵母膏、糖蜜、蛋白胨、氯化钠、硫酸铁、安硫酸镁、微量元素溶液之一或它们的混合物中培养，Ph值调节至6. 8-7. 2 ;培养温度为35-38°C、时间为16-48小时，得到大肠杆菌液；然后加入噬菌蛭弧菌菌种，ph值调节至6. 8-7. 2 ;培养温度为30-35°C、继续培养36-48小时，得噬菌蛭弧菌液。(4)将制得的高浓度枯草芽孢杆菌液与高浓度噬菌蛭弧菌液加生理盐水、微量元素液均匀混合搅拌，即得新型环保高效微生物水质净化混合剂。借由上述技术方案，本发明具有的优点和有益效果如下I)噬菌蛭弧菌能寄生于其它细菌中，并在有害细菌中继续繁殖，能使水体中的有害菌破裂死亡，从而达到预防疾病的效果；2)枯草芽孢杆菌能分解养殖水体中的残饵和水生动物的排泄物等有机污染物，中和亚硝酸盐，降解水中锰、铜、汞等物质的毒性，控制有害水体的形成和促进浑混浊水体中有益浮游动植物的生长繁殖，从而将水质稳定在适合水产养殖物健康成长的良性状态；3)增加水产养殖物的采食量，显著提高成活率和饲料利用率，从而降低饲养成本，提闻养殖效率；4)有效预防水产养殖物疾病发生，增强水产养殖物胃肠道消化吸收功能；5)可去除异味并有增氧的作用，对鱼虾类无不良应激反应；6)有效控制淡、海水鱼类的烂鳃病及虾、蟹、鳖、龟、蛙、贝等水产养殖物的细菌性疾病和病毒的发生和蔓延、对蟹抖病、白浊病、桃拉病等有明显疗效；7)确保水产养殖安全、高效、无毒副作用、无残留、无污染。
具体实施方式
以下通过具体实施例及效果实验例分别对本发明的新型环保高效微生物水质净化混合剂及其制备方法作进一步详细表述，但本发明并不仅限于以下的实施例。本发明的新型环保高效微生物水质净化混合剂，是从水产养殖的水体和底泥中筛选出的枯草芽孢杆菌与噬菌蛭弧菌菌种菌种培养成的混合菌液，它富含单体蛋白、氨基酸、活性酶、抗氧化物、维生素及其它各种生理活性物质，具有氧化、氨化、硝化、解磷、硫化和固氨作用，能将有害物质分解为二氧化硫、硝酸盐等，不仅净化水质，而且能为单细胞藻类的繁殖提供营养。且可以按照枯草芽孢杆菌液10%-50%;噬菌蛭弧菌液20%-60%中两者任一比例混合即可制得水质净化混合剂。实施例I本发明新型环保高效微生物水质净化混合剂的制备 A、称取酵母膏10g、糖蜜15g、蛋白胨10g、氯化钠5g、硫酸铁0. 5g、硫酸镁lg、微量元素溶液5ml、水500ml。将以上原料加入IOOOml发酵罐中，ph值调节至6. 8-7. 2，加热至121°C灭菌30分钟，冷却至37°C时加入枯草芽孢杆菌菌种，培养温度为36-38°C、时间为32小时，得到枯草芽孢杆菌液。B、称取酵母膏10g、糖蜜15g、蛋白胨10g、氯化钠5g、硫酸铁0. 5g、硫酸镁lg、微量元素溶液5ml、水500ml。将以上原料加入IOOOml发酵罐中，ph值调节至6. 8-7. 2，加热至121°C灭菌30分钟，冷却至37°C时加入肠杆菌菌种，培养温度为36-38°C、时间为24小时，然后加入噬菌蛭弧菌菌种，Ph值调节至6. 8-7. 2 ;培养温度为30-35°C、继续培养36小时，得噬菌蛭弧菌液。按以下较佳配比称取
枯草芽孢杆菌液 40 k ；
噬菌蛭弧菌液40% ；
生理盐水15%
微量元素溶液5% o搅拌均匀得新型环保高效微生物水质净化混合剂。实施例2本发明新型环保高效微生物水质净化混合剂的制备A、称取酵母膏10g、糖蜜15g、蛋白胨10g、氯化钠5g、硫酸铁0. 5g、硫酸镁lg、微量元素溶液5ml、水500ml。将以上原料加入1000ml发酵罐中，ph值调节至6. 8-7. 2，加热至121 °C度灭菌30分钟，冷却至37°C时加入枯草芽孢杆菌菌种，培养温度为36-38°C、时间为32小时，得到枯草芽孢杆菌液。B、称取酵母膏10g、糖蜜15g、蛋白胨10g、氯化钠5g、硫酸铁0. 5g、硫酸镁lg、微量元素溶液5ml、水500ml。将以上原料加入1000ml发酵罐中，ph值调节至6. 8-7. 2，加热至121 °C度灭菌30分钟，冷却至37°C度时加入肠杆菌菌种，培养温度为36-38°C、时间为24小时，然后加入噬菌蛭弧菌菌种，ph值调节至6. 8-7. 2 ;培养温度为30-35°C、继续培养36小时，得噬菌蛭弧菌液。按以下较佳配比称取
枯草芽孢杆菌液 50% ；
噬菌蛭弧菌液30% ;
生理盐水15% ；
微量元素溶液5%。搅拌均匀得新型环保高效微生物水质净化混合剂。效果实验例I本发明的安全性在三个鱼池中进行安全性试验，每个鱼池放养草鱼50尾。在第一个鱼池中每天加入5ml本发明的新型环保高效微生物水质净化混合剂；在第二个鱼池中每天加入IOml本发明的新型环保高效微生物水质净化混合剂；在第三个鱼池中每天加入20ml本发明的新型环保高效微生物水质净化混合剂。观察30天。30天中，三个鱼池中的鱼均无异常，无精神不振或死亡现象，生长良好。说明本发明的新型环保高效微生物水质净化混合剂安全性能良好。效果实验例2本发明对水产养殖细菌性疾病的预防作用在四个鱼池中进行细菌性病害预防作用试验。每个鱼池放草鱼30尾，每尾体重约100 150g。第一个鱼池每天正常喂养；第二个鱼池每天用中药2克拌料投喂；第三个鱼池加入5%恩诺沙星可溶性粉I克拌料投喂；第四个池加入本发明的新型环保高效微生物水质净化混合剂2ml ；饲养一周后，分别在四个鱼池中各放入一条患有弧菌感染的草鱼，观察各个鱼池中鱼的生长情况。结果见表I。表I本发明新型环保高效微生物水质净化混合剂对草鱼细菌性疾病的预防作用
_ 7天__继续养殖30天_总感染
死亡数感染数死亡率饲养数死亡数健康数死亡率及死亡(条) (条)％(条) (条)％ 率％
1号池 5__10 17 25 11 3__44 90_
2号池 3__4__10 27 6__13 22 57_
3号池 I__2__3__29 4__19 14 37_
4号池 0__I__0__30 2__26 7__13_表I结果表明本发明的新型环保高效微生物水质净化混合剂对草鱼细菌性疾病有明显的预防和治疗作用。
效果实验例3本发明对水产养殖细菌性疾病的治疗作用用患有细菌感染病的草鱼200条，随机均分成四组，每组50条，第一组每天正常喂养；第二组加入中药粉4克，拌料投喂；第三组用5%恩诺沙星可溶性粉2克，拌料投喂；第四组用本发明的新型环保高效微生物水质净化混合剂4克；饲养一周后，观察所有草鱼的生长情况。结果见表2。表2本发明的新型环保高效微生物水质净化混合剂对草鱼细菌性疾病的治疗作用
权利要求
1.ー种新型环保高效微生物水质净化混合剂，其特征在于其主要是由高浓度枯草芽孢杆菌液与高浓度噬菌蛭弧菌液配制而成。
2.根据权利要求I所述的新型环保高效微生物水质净化混合剂，其特征在于由以下体积百分比的各原料配制而成枯草芽孢杆菌液 10%-50%;噬菌蛭弧菌液 20%-60%;生理盐水0.5%-6.0%;微量元素溶液 0.5%-15%。
3.根据权利要求I所述的新型环保高效微生物水质净化混合剂，其特征在干由以下体积百分比的各原料配制而成枯草芽孢杆菌液 40%:噬菌蛭弧菌液40%;生理盐水15%;微量元素溶液5 %。
4.根据权利要求I或2所述的微生物水质净化混合剂，其特征在于所述枯草芽孢杆菌液为芽孢杆菌属，其浓度为大于200亿/ml。
5.根据权利要求I或2所述的微生物水质净化混合剂，其特征在于所述噬菌蛭弧菌液，其浓度为大于200亿/ml。
6.根据权利要求I或2所述的微生物水质净化混合剂，其特征在于所述微量元素溶液包含硫酸铜、硫酸锌、硫酸锰、氯化钙的混合溶液。
7.ー种新型环保高效微生物水质净化混合剂的制备方法，其特征在于采用菌种液体培养方法，使所有菌种在不同培养基中培养；然后两种菌液再按比例混合；该制作方法包括下列骤 (O从水产养殖的水体和底泥中筛选出枯草芽孢杆菌与高浓度噬菌蛭弧菌菌种； (2)将枯草芽孢杆菌菌种在培养基成分为酵母膏、糖蜜、蛋白胨、氯化钠、硫酸铁、安硫酸镁、微量元素溶液之一或它们的混合物中培养，得到枯草芽孢杆菌液； (3)将大肠杆菌菌种在培养基成分为酵母膏、糖蜜、蛋白胨、氯化钠、硫酸铁、安硫酸镁、微量元素溶液之一或它们的混合物中培养，得到大肠杆菌液；然后加入噬菌蛭弧菌菌种继续培养，得噬菌蛭弧菌液。
(4)将制得的高浓度枯草芽孢杆菌液与高浓度噬菌蛭弧菌液加生理盐水、微量元素溶液均匀混合搅拌，即得新型环保高效微生物水质净化混合剂。
8.根据权利要求7所述的微生物水质净化混合剂的制备方法，其特征在于步骤(2)中，培养的Ph值调节至6. 8-7. 2 ;培养温度为35-38°C、时间为16-48小时。
9.根据权利要求7所述的微生物水质净化混合剂的制备方法，其特征在于步骤(3)中，培养大肠杆菌液的Ph值调节至6. 8-7. 2，培养温度为35-38°C，时间为16-48小时；培养噬菌蛭弧菌液的ph值调节至6. 8-7. 2，培养温度为30-35°C，时间为36-48小时。
10.根据权利要求7所述的微生物水质净化混合剂的制备方法，其特征在于步骤(4)中，所述生理盐水其浓度为O. 9% ;所述微量 元素溶液包含硫酸铜、硫酸锌、硫酸锰、氯化钙的混合溶液，其浓度为O. 5%。
全文摘要
本发明公开了一种新型环保高效微生物水质净化混合剂及其制备方法。该微生物水质净化混合剂主要是由高浓度枯草芽孢杆菌液与高浓度噬菌蛭弧菌液组成的混合微生物菌剂它由下述体积百分比的原料配制而成枯草芽孢杆菌液10％-50％；噬菌蛭弧菌液20％-60％；生理盐水0.5％-6.0％；微量元素溶液0.5％-15％。本发明的新型环保高效微生物水质净化混合剂，其将枯草芽孢杆菌净化水质和噬菌蛭弧菌防治疾病的优势集合于一体，同时具备净化水质和防病治病及取代抗生素的功能，并起到改良水产养殖水体的作用。
文档编号C02F3/34GK102674563SQ20121018161
公开日2012年9月19日 申请日期2012年6月4日 优先权日2012年6月4日
发明者伍东岳, 陈永斌 申请人:广东金海润生物科技有限公司